Разработка методики анализа капсаицина, никобоксила и нонивомида при совместном присутствии Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 543.544.5.068.7.06:615.811

РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ АНАЛИЗА КАПСАИЦИНА, НИКОБОКСИЛА И НОНИВОМИДА ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ

© 2006 г. О.Э. Оганесян, С.В. Печинский, А.Г. Курегян

The HPLC method for analysis capsaicin, nicoboxyle, nonivamide of mixed together was worked out and based in the article. The identification method and the method of quantitative determination this substances in medicinal-prophilactical ointments was worked out. The possibility of using the suggested method for determination capsaicin, nicoboxyle, nonivamide mixed together was proved on the base of validaci marking.

Довольно широкое использование в медицинской практике капсаицина и родственных ему соединений объясняется, главным образом, их обезболивающим и противовоспалительным действием. В качестве биологически активной компоненты капсаициноиды, среди которых основной процент занимают капсаицин, дегидрокапсаицин, нордигидрокапсаицин, гомодигидрокапсаицин, ванила-мид каприловой кислоты, входят в состав настойки перца стручкового. Известно, что «природный капсаицин» - сумма более десяти веществ родственных по структуре капса-ицину, а «синтетический капсаицин» - это ваниламид пе-ларгоновой кислоты, т.е. нонивамид. Никобоксил является бутоксиэтиловым эфиром никотиновой кислоты и обладает фармакологическим эффектом, аналогичным «природному» и «синтетическому» капсаицину [1]. В состав разрабатываемой нами лечебно-профилактической мази входят настойка перца стручкового, никобоксил и нонивамид.

Основная задача исследования - разработка методики, позволяющей проводить идентификацию и количественное определение никобоксила, нонивомида и капсаицина при совместном присутствии, а также примеси никотиновой кислоты, образующейся в результате разложения никобоксила.

Действующая фармакопейная статья 42-108-72 «Настойка перца стручкового» регламентирует проведение испытаний на подлинность методом ТСХ с целью идентификации капсаициноидов. Хроматографирование ведется в системе растворителей толуол - этилацетат - муравьиная кислота (10:9:1) с последующим проявление реактивом Гиббса и аммиаком. Количественно капсаициноиды определяются колориметрически в виде продуктов взаимодействия с тем же реактивом Гиббса, т.е. нормирование количественного содержания ведется для суммы веществ [2]. Никобоксил и нонивамид, входящие в мазь финалгон, НД 42-8300-98 рекомендует идентифицировать методом как тонкослойной, так и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Помимо этого, в нормативном документе предписывается определении никотиновой кислоты как продукта разложения никобоксила. Количественное определение компонентов в финалгоне проводится методом ВЭЖХ [3].

Для реализации поставленной цели было предложено использование метода ВЭЖХ, который позволяет совмещать стадии идентификации, количественного определения и обнаружения примесей в одном определении, что является явным преимуществом перед другими методами. Кроме того, совмещение стадий разделения и определения позволяет существенно сократить продолжительность анализа, а также увеличить его точность, что является наиболее актуальным для многокомпонентных лекарственных препаратов [4].

При выборе условий проведения ВЭЖХ анализа лекарственного препарата мы учитывали характер и сложность поставленной задачи. Априорная информация о разделении компонентов [1, 3, 5], входящих в состав исследуемой композиции, на обращенных фазах позволила сделать предположения об условиях проведения хроматографического анализа. На основании предварительных исследований были выбраны следующие параметры хроматографирования: 1) стационарная фаза: силасорб С18 (колонка 75 х 2 мм); 2) подвижная фаза: ацетонитрил - трифторуксусная кислота 0,1 % (50:50); 3) объем пробы - 4 мкл; 4) длина волны детектирования - 254 нм; 5) скорость подвижной фазы - 100 мкл/мин; 6) температура колонки - 37 °С. Исследования проводили на хроматографе «Милихром А-02». Выбранные условия были использованы для анализа модельной смеси никобоксила, нонивомида и капсаицина (рисунок).

;

1

_ ± 4 IL _Л_Л_л

1 2 3 4 5 6 7 8

Заключение о возможности использования методики для разделения можно сделать, только зная значения коэффициентов разделения пиков (Я). При прохождении анализируемых веществ через хроматографическую систему из-за диффузионных процессов в подвижной и неподвижной фазах происходит размытие границ зон адсорбции. Для контроля этого процесса необходимо рассчитывать коэффициент асимметрии (Л3) [6]. Производителем колонки заявлено максимальное значение коэффициента асимметрии не более 1,5.

Результаты обработки полученных данных представлены в табл. 1.

Таким образом, предлагаемая методика позволяет проводить разделение суммы анализируемых компонентов, так как значение коэффициентов разделения больше 1, а значение коэффициентов асимметрии не превышает 1,5.

На основании исследований была предложена методика идентификации и количественного определения нонивамида, никобоксила и капсаицина, а также

определения примеси никотиновой кислоты методом ВЭЖХ. Параллельно проводят хроматографирование РСО растворов никобоксила, нонивамида, капсаицина и никотиновой кислоты. Идентификацию компонентов устанавливают по времени удерживания. Отклонение в абсолютных значениях времени удерживания раствора РСО и определяемого компонента не должно превышать

±0,05 мин. Количественное содержание компонентов рассчитывают методом внешнего стандарта. Содержание никотиновой кислоты как продукта деструкции никобоксила в лекарственном препарате не должно превышать 0,15 мкг. Для проведения валидационной оценки разработанной методики было проведено количественное определение компонентов модельной смеси (табл. 2).

Таблица 1

Обработка хроматографических данных модельной смеси

Объект Параметр

t, мин W, мкл Rs W,^ мкл d, мкл А h, А W0 мкл S, А • мкл C, г/мл

Никотиновая кислота 1,60 0,26 - 0,24 0,110 1,09 2,08 0,13 0,270 2,330

Никобоксил 2,61 0,25 3,97 0,24 0,105 1,14 1,44 0,13 0,187 2,821

Нонивомид 4,13 0,32 5,3 0,29 0,130 1,12 0,87 0,16 0,139 0,443

Капсаицин 4,45 0,16 1,3 0,15 0,065 1,15 0,39 0,08 0,031 0,101

Таблица 2

Результаты количественного определения модельной смеси

Объект Взято Найдено Метрологические характеристики

Никобоксил 0,25015 0,25064 0,25018 0,24391 0,24732 0,25047 0,24996 X = 0,04092 S = 0,000899 S = 0,00037 AT = 0,000943 Е = ±2,3 %

Нонивамид 0,04010 0,04081 0,04112 0,03993 0,04089 0,04252 0,04025 X = 0,04092 S = 0,000899 Sx = 0,00037 AT = 0,000943 Е = ±2,3 %

Капсицин 0,00050 0,00051 0,00050 0,00052 0,00049 0,00049 0,00048 X = 4,98 • 10-4 S = 1,47 • 10-5 Sx = 6,01 • 10-6 AT = 1,5 • 10-5 Е = ±3,1 %

Кислота никотиновая 0,00405 0,00014 0,00016 0,00015 0,00014 0,00013 0,00014 X = 1,43 • 10-4 S = 1,03 • 10-5 Sx = 4,22 • 10-6 AT = 1,1 • 10-5 е = ±7,6 %

Установлено, что предлагаемая методика позволяет проводить количественное определение компонентов с относительной погрешностью определения для никобоксила - ±1,1 %; нонивамида - ±2,3; капсаицина - ±3,0 %. Относительная погрешность определения не превышает ±3,0 %. На основе валидационной оценки полученных результатов сделан вывод о том, что для разработанной методики отсутствует отягощение результатов систематической ошибкой, а относительная погрешность определения находится в пределах ошибки метода. Для получения результатов с относительной ошибкой определения, не превышающей ±3 %, достаточно провести только одно измерение.

Пятигорская государственная фармацевтическая академия

Проведенные исследования позволяют сделать заключение о возможности использования разработанной методики для определения никобоксила, нонивомида и капсаицина при совместном присутствии.

Литература

1. Лесин Г.Я. // Хим.-фармац. журн. 1996. Т. 30. № 1. С. 54-60.

2. Настойка перца стручкового ФС 42-1259-93. М., 1993.

3. Финалгон мазь НД 42-8300-98. М., 1998.

4. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / Под ред. В.Л. Багировой, В .А. Северцева. СПб., 2001. С. 110-128.

5. ШостенкоЮ.В. и др. // Хим.-фармац. журн. 1986. Т. 21. № 4. С. 41-44.

6. Государственная Фармакопея СССР. М., 1987. С. 95-113.

9 июня 2006 г.

УДК .615.217.1.014.21'47

ОЦЕНКА СПОСОБОВ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГРАНУЛЯТА ДЛЯ ШИПУЧИХ ТАБЛЕТОК ДРОТАВЕРИНА ГИДРОХЛОРИДА

© 2006 г А.М. Шевченко

The estimation of three ways of reception granulate for sparkling tablets of drotaverine hydrochloride is lead: joint, separate and combined. It fixed, that on set of parameters of rate of loss of mass due to allocation of carboneum dioxide, time of dissolution and quality of solutions the most comprehensible is the combined way. Stability of a substance in the received tablets is proved to method TLC on absence of products of decomposing within 2 years of storage.

В ряде случаев, связанных с оказанием экстренной троте и полноте терапевтического эффекта становятся помощи, шипучие лекарственные формы благодаря быс- незаменимыми. Особенно это относится к болеутоляю-