CC BY
81
нести к 1У-Й группе «вещества малотоксичные» [3].
Сухой экстракт рододендрона Адамса с вероятностью более 99% в эксперименте увеличивает работоспособность и выносливость лабораторных животных в сравнении с контролем (водой очищенной) и не уступает жидкому экстракту элеутерококка (табл. 4).
При изучении антимикробной активности установ-
лено, что сухой экстракт подавляет рост Staphylococcus aureus, Sarcina и Bacilla anthracoides.
Таким образом, нами разработана технологическая схема получения сухого экстракта из побегов рододендрона Адамса, который мало токсичен и обладает актопротекторной и антимикробной активностью.
ELEBORATION OF THE METHOD OF RECEIPT OF THE DRY EXTRACT FROM SPROUTS OF RHODODENDRON ADAMSII, HAVING ACTOPROTECTIVE AND
ANTIMICROBIC ACTIVITY
V.M. Mirovich, G.M. Fedoseeva, T.P. Zjubr, A.P. Fedoseev, O.I. Paisova, L.B. Kuklina
(Irkutsk State Medical University)
The method of receipt of the dry extract from the Siberian plant of rhododendron Adamsii is elaborated at extraction of sprouts of this plant by 60% ethil spirit. Efficiency of extraction on flavonoids amounts to 77%, on extractive substances — 82,9%. Critical toxicity of a dry extract of rhododendron Adamsii in intraabdominal introduction is 2700 mg/kg. The dry extract has actoprotective activity, it in swimming test on white mice raises efficiency and endurance of laboratory animals, and also shows antimicrobic activity.
Опубл. Бюл. № 24. — 27.08.98.
Мирович B.M., Федосеева Г.М., Левента А.И., Макаренко С.П. Определение суммарного содержания флаво-ноидов в надземной части Rhododendron adamsii (Ericaceae) спектрофотометрическим методом // Растительные ресурсы. — 2005. — Т.41, вып.4. — С.67-73. Самылина Й.А., Блинова О.А., Кумышева Л.А. и др. Перспективы создания сухих экстрактов // Фармация. — 2006. — № 2. — С.43-47.
Растительные ресурсы СССР. Paeoniaceae — Thymelaeaceae. — Л.: Наука, 1986. — С. 148-155.
Усов Л.А., Мирович В.М., Кичигина Е.Л., Левента А.И. К противовоспалительному действию рододендронов Прибайкалья // Сиб. мед. журнал. — 1997. — Т. 10, № 3.
— С.31-32.
2.
3.
4.
ЛИТЕРАТУРА
Государственная Фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа / М3 СССР. — 11-е изд., доп. — М.: Медицина, 1987. — 336 с.
Куркин В.А., Дубищев А.В., Ежкова В.Н. и др. Сравнительная актопротекторная активность фенилпропано-идов и растительных препаратов // Фармация. — 2005. — № 5. — С.32-34.
Лойт А. О., Савченков М.Ф. Практическая токсикология. Руководство для токсикологов. — Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1996. — 228 с.
Мирович В.М., Усов Л.А., Кичигина Е.Л. и др. Патент на изобретение № 2118165 «Средство, обладающее тонизирующим и иммуностимулирующим действием».
© ПАИСОВА О.И., МИРОВИЧ В.М., ФЕДОСЕЕВА Г.М., МАКАРЕНКОС.П., ПЕТРОВАИ.Г. - 2006
РАЗРАБОТКА МЕТОДА СТАНДАРТИЗАЦИИ СУХОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ПОБЕГОВ РОДОДЕНДРОНА АДАМСА
О.И. Паисова, В.М. Мирович, Г.М. Федосеева, С.П. Макаренко, И.Г. Петрова
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармакогнозии с курсом ботаники, зав. — д.ф.н., проф. Г.М. Федосеева; Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО
РАН, директор — д.б.н., проф. В.К. Войников)
Резюме. Разработан УФ-спектрофотометрический метод количественного определения суммы флавоноидов в сухом экстракте из побегов рододендрона Адамса, который предложен для его стандартизации. Методика опробована на 5 сериях экстракта. Рекомендуется содержание суммы флавоноидов в сухом экстракте не менее 6,0%.
Ключевые слова: лекарственные растения, рододендрон Адамса, сухой экстракт.
Растение Восточной Сибири рододендрон Адамса Rhododendron adamsii) семейства вересковых Ericaceae) обладает адаптогенным, противовоспалительным, иммуномодулирующим действием [4,5].
Растительные адаптогенные средства повышают устойчивость организма к радиоактивному излучению, холоду, жаре, недостатку кислорода и стрессовым факторам, усиливают способность организма приспосабливаться к повышенной физической и эмоциональной нагрузке, интенсивной умственной работе [1].
Надземные органы рододендрона Адамса содержат эфирное масло, флавоноиды, простые фенольные соединения, урсоловую и олеаноловую кислоты [2]. Из побегов рододендрона Адамса по разработанной нами технологии получен сухой экстракт, который обладает малой токсичностью и проявляет антимикробные и адаптогенные свойства.
При создании высокоэффективных фитопрепаратов важен вопрос их стандартизации, что позволит оценить качество готового продукта, вести контроль технологического процесса, обосновать сроки годности [3].
В задачи наших исследований входила разработка УФ-спектрофотометрического метода количественного определения суммы флавоноидов для стандартизации сухого экстракта из побегов рододендрона Адамса.
Материалы и методы
Исследования проводились на 5 партиях сухого экстракта. Сухие экстракты получали в лабораторных условиях из побегов рододендрона Адамса 60%-ным этиловым спиртом с последующим удалением экстрагента, очисткой и сушкой. Влажность экстрактов не превышала 5 %.
Состав биологически активных веществ определяли качественными реакциями. Флавоноиды сухого экстракта анализировали методом двумерной бумажной хроматографии в системах н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (БУВ) (4:1:2) и методом ВЭЖХ на приборе «Shimadzu CLASS V6.12 SP1». При методе ВЭЖХ использована колонка ЕС 125/3 NUCLEOSIL 120-5 C18, детектор УФ (254 нм), подвижная фаза раствор ацетонитрила в буфернофосфатном растворе (PH 3) (50:50 по объему).
При разработке методики количественного определения использовали ГСО кверцетина. Измерение оптической плотности проводили на спектрофотометре СФ-46.
Результаты и обсуждение
Общепринятыми качественными реакциями в сухом экстракте из побегов рододендрона Адамса обнаружены дубильные вещества конденсированной группы, флавоноиды, кумарины и простые фенольные соединения (арбутин).
Методом двумерной бумажной хроматографией в
системах БУВ (4:1:2) и 15%-ная уксусная кислота в сравнении со свидетелями в сумме флавоноидов идентифицированы: кверцетин, мирицетин, авикулярин, гипе-розид.
мерной колбе вместимостью 100 мл в небольшом количестве подогретого 95%-ного спирта этилового, добавляют 1 каплю концентрированной хлористоводо-
Рис. 1. ВЭЖХ сухого экстракта рододендрона Адамса. Пик 6,383 соответствует по времени удерживания стандарту кверцетина, а
пик 8,225 — гиперозида.
Методом ВЭЖХ на приборе «Shimadzu CLASS V6.12 SP1» в составе сухого экстракта подтверждено наличие кверцетина и гиперозида (рис. 1).
Стандартизацию сухого экстракта предложено проводить УФ-спектрофотометрическим методом по сумме флавоноидов в пересчете на кверцетин. Максимум поглощения продуктов гидролиза сухого экстракта в 96%-ном этаноле, содержащем 1 % хлористоводородной кислоты и максимум ГСО кверцетина, в присутствии алюминия хлорида и хлористоводородной кислоты совпадают в области 430 нм. Данную длину волны можно принять как аналитическую.
Методика: 0,1 г (точная навеска) сухого экстракта помещают в колбу, емкостью 100 мл, добавляют 50 мл 96% этанола, содержащего 1% хлористоводородной кислоты. Затем колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30
минут. После охлаждения пропускают через бумажный фильтр.
В мерную колбу, емкостью 25 мл, помещают 2 мл фильтрата, добавляют 2 мл 1% спиртового раствора AlCl3 и доводят до метки 96% этанолом.
Раствор сравнения состоит 2 мл фильтрата, доведенного 95% этанолом до метки в колбе на 25 мл.
Измерение оптической плотности проводят через 30 минут на спектрофотометре при длине волны 430 нм.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора ГСО кверце-тина. Для этого 2 мл 0,02% раствора ГСО кверцетина помещают в мерную колбу, емкостью 25 мл, добавляют 2 мл
1% спиртового раствора AlCl3 и доводят до метки 96% этанолом. Раствор сравнения состоит из 2 мл 0,02% раствора ГСО кверцетина доведенного до 25 мл.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин (Х,%) рассчитывают по формуле:
родной кислоты и доводят объем раствора тем же спиртом до метки.
Статистическая обработка результатов количественного определения показала, что относительная ошибка среднего результата составляет 3,21% (табл. 1).
Таблица 1
Статистической обработка результатов количественного определения суммы флавоноидов в сухом экстракте рододендрона Адамса
f х Sx P,% t(P,f) А х E
8 6,85 0,0930 95 2,36 0,22 3,21
Опыты с добавками ГСО кверцетина показали отсутствие систематической ошибки (табл. 2).
Таблица 2
Результаты количественного определения суммы флавоноидов в сухом экстракте рододендрона Адамса с использованием метода добавок ГСО
кверцетина
Содержание суммы фла-воноидов в 1 г экстракта, мг Добавлено ГСО квер-цетина, мг Суммы флавоноидов Относительная ошибка, %
найдено, мг вычислено, мг
68,59 7,95 77,98 76,54 + 1,87
68,59 9,20 75,37 77,79 -3,11
68,59 14,05 84,75 82,64 +2,55
D
V„, • 100•100
х= -
в0 • т • г2 • г01 • г03 • (100 -Ц9
где Л — оптическая плотность исследуемого раствора; V — общий объем раствора экстракта, равный 50 мл; У2 — объем раствора экстракта, взятый для разведения, равный 2 мл; У3 — объем разведения раствора экстракта, равный 25 мл; Б0 — оптическая плотность ГСО кверцетина; т0 — навеска ГСО кверцетина, г; т — навеска сухого экстракта, г; V — объем раствора ГСО кверцетина, равный 100 мл; У02 — объем раствора ГСО квеЬце-тина, взятый для разведения, равный 2 мл; V — объем разведения ГСО кверцетина, равный 25 мл; \¥— потеря в массе при высушивании сухого экстракта, в %.
Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) кверцетина: около 0,0200 г (точная навеска) ГСО кверцетина, высушенного до постоянной массы при температуре 100-1050С, растворяют в
Количественное содержание суммы флавоноидов в сухом экстракте при анализе 5 партий составляет от 6,11% до 7,32%. Влажность сухих экстрактов не превышает 5%, что соответствует требованиям ГФ XI (табл. 3).
Таблица 3
Количественное содержание суммы флавоноидов и влаги в сухих экстрактах рододендрона Адамса
Серия Содержание суммы флавоноидов, % Влажность, %
1 7,32 3,59
2 6,58 4,51
3 6,22 4,20
4 6,11 4,45
5 6,68 3,71
Рекомендуются для включения в нормативную документацию на сухой экстракт рододендрона Адамса показатели: содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин не менее 6%, влажность не более 5%.
Таким образом, для стандартизации сухого экстракта трофотометрический метод количественного определе -
из побегов рододендрона Адамса разработан УФ-спек- ния суммы флавоноидов.
ELABORATION OF THE METHOD OF STANDARDIZATION OF THE DRY EXTRACT FROM SPROUTS OF RHODODENDRON ADAMSII
O.I. Paisova, V.M. Mirovich, G.M. Fedoseeva, S.P. Makarenko, I.G. Petrova (Irkutsk State Medical University, the Siberian Institute of Physiology and Biochemistry of Plants of the Siberian Branch of the
Russian Academy of Science)
There has been elaborated the method of quantitative definition of the sum of flavonoids in a dry extract from sprouts of rhododendron Adamsii by (with)UV-spectrofotometrie. This method is suggested for standardization of the extract. The method was tested on 5 series of the extract. The contents of the sum of flavonoids in the dry extract not less than 6,0% is recommended.
ЛИТЕРАТУРА
„ ^ спективы создания сухих экстрактов // Фармация. —
1. Евдокимова О.В. Средства ^растительного происхожде- 2006 — № 2 — С43-46
ния в терапии заболевании нервной системы // Новая 4. Усов Л.А.,Мирович В.М., Левента А.И., Кичигина Е.Л. К
аптека. — 2005. — № 9. — С.32-38. сравнительной оценке тонизирующего и стимулирую-
2. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Левента А.И., Макарен- щего действия рододендрона Адамса // Сиб. мед. жур-
ко С.П. Определение суммарного содержания флаво- нал. — 1995. — № 3. — С.37-40.
ноидов в надземной части Rhododenaron Adamsii 5. Федосеев А.П., Федосеева Г.М., Мирович В.М. и др. Пер-
(Ericaceae) спектрофотометрическим методом // Рас- спективы внедрения в медицинскую практику некото-
тительные ЯесурЯы. — 20°5., — Т 41, вып. 4 Г С.67-73. рых видов лекарственных растений Прибайкалья //
3. Самылина И.А., Блинова О.А., Кумышева Л.А. и др. Пер- Сиб. мед. журнал. — 2001. — Т. 27, № 3. — С.70-75.
СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ
© БЕЛОНОГОВ А.В., ЛАЛЕТИН В.Г., БАРЫШНИКОВ Е.С. - 2006
ЭНДОХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ ПОЛИПАМИ И РАННИМИ ФОРМАМИ РАКА ЖЕЛУДКА
А.В. Белоногов, В.Г. Лалетин, Е.С. Барышников
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, курс онкологии, зав. — д.м.н., проф. В.Г. Лалетин; Иркутский областной онкологический диспансер, гл. врач - д.м.н. В.В. Дворниченко)
Резюме. Представлены результаты эндохирургического лечения в клиническом медицинском учреждении 951 больного, из которых полипы были удалены у 888 больных, рак желудка — у 49, неэпителиальные опухоли стенки желудка — у 7 и резидуальные полипы — у 7. Разработаны и применены новые медицинские технологии — электрохирургические, лазерные, комбинированные; трансгастральная и лапароскопическая резекции желудка. Приводится клиническое наблюдение.
Ключевые слова: полипы, рак желудка, эндохирургическое лечение.________________________________
3а последнее десятилетие эндоскопические и лапароскопические методы заняли ведущее место не только в диагностике, но и в лечении различных заболеваний желудка [1,2]. Этому способствовало накопление опыта и применение новых инструментов и аппаратуры. В настоящее время хорошо разработаны эндоскопические методики лечения предопухолевых заболеваний тела и антрального отдела желудка, способы остановки ж:елудочных кровотечений [6,7]. В то же время, менее разработанными остаются методы малоинвазивной лечебной эндоскопии при предопухолевых заболеваниях и злокачественных опухолях верхних отделов желудка. Недостаточно освещены в литературе сочетанные эндоскопические операции, направленные на профилактику и устранение различных осложнений. Мало разработанными остаются также методики применения лечебной лапароскопии у онкологических больных с первой стадией рака желудка. Учитывая большую научно-практическую значимость этой проблемы, мы поставили перед собой задачу разработать новые подходы к эндохирургическому лечению предопухолевой, доброкачественной и злокачественной патологии желудка. Для этого освоена новая аппаратура и разработаны специальные инструменты для лечебной эндоскопии.
Материал и методы
В основу работы положен опыт эндохирургического
лечения 951 больного, при этом всего удалено 1045 опухолей. Операции проводились в отделении эндохирургии Иркутского областного онкологического диспансера. Критерием включения в исследование считали установленный диагноз полипов желудка и рака желудка, соответствующего первой стадии заболевания (Т1М0М0).
Средний возраст больных с полипами желудка составил 59,1+0,9 года, при раннем раке желудка — 70,1+0,6, с опухолями стенки желудка — 42,0+0,7 и у больных резидуальными полипами желудка — 65,2+0,4 года (табл. 1).
Во всех анализируемых случаях операции проводились с целью радикального лечения, после проведения стандарта обследования, принятого для этой категории больных: общего и биохимического анализов крови и мочи, коагу-лограммы, ЭКГ, У3И брюшной полости и др.
Для лечения применены следующие методики:
1. Эндоскопические электрохирургические:
- удаление электропетлей;
- удаление полипов точечным электрокоагуляционным зондом или цапкой.
2. Высокоэнергетический лазерный способ в сочетании с гибкой эндоскопией:
- дистанционный;
- контактный;
- комбинированный лазерный (сочетание дистанционного и контактного воздействия).
3. Комбинированный (сочетание дистанционного и
