РАЗРАБОТКА МЕТОДА ИММУНОТЕРАПИИ (CAR-T ТЕРАПИИ) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СОЛИДНЫХ ОПУХОЛЕЙ Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

Российский

онкологический

конгресс

Экспериментальная онкология

■ Экспериментальная онкология

РАЗРАБОТКА МЕТОДА ИММУНОТЕРАПИИ (CAR-T ТЕРАПИИ) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СОЛИДНЫХ ОПУХОЛЕЙ

Авторы: В.К. Боженко, Я.Ю. Киселева, А.М. Шишкин, Е.Л. Джикия, Т.М. Кулинич

Место работы: ФГБУ «Российский научный центр рентгенора-диологии» Минздрава России, Москва Эл. почта: vbojenko@mail.ru

Цель: Разработка технологии получения CAR-T-лим-фоцитов, генетически модифицированных химерными Т-клеточными рецепторами, специфичными к антигенам СА125 и СЕА с применением плазмидного вектора. Проведение комплекса доклинических исследований. Материалы и методы: Мононуклеарные клетки были получены из образцов периферической донорской крови методом лейкофереза, трансфекцию плазмидных конструкций CAR-CA125 или CAR-CEA проводили методом электропора-ции (Amaxa Nucleofector (Lonza)). Исследования эффективности в условиях in vitro проведены на СА125 позитивных культурах клеток рака яичника (OVCAR-3, OVKATE) и на СЕА позитивных культурах рака толстой кишки (НСТ116 и НТ29), в качестве контрольных моделей были использованы НЕК293 (линия не экспрессирующая СЕА) и MCF-7 (не экс-прессирующая СА125). Цитотоксические эффекты оценивали методами МТТ-теста, проточной цитофлуориметрии (Cytomix FC 500 (Beckman Coulter) и с использованием динамической системы мониторинга iCelligence. Контролем специфичности являлись ЛАК-клетки (лимфокинактиви-рованные киллеры). Исследования эффективности in vivo были проведены на моделях опухолей человека (OVCAR-3, НТ29), пассируемых на бестимусных мышах. Оценивались параметры роста опухоли и продолжительность жизни животных при введении генно-модифицированных лимфоцитов в дозах 1 х 105, 5 х 105 и 1 х 106 один раз в неделю. Основные параметры фармакокинетики были исследованы на двух видах животных — мышах и кроликах. Исследования токсичности включали оценку острой, подосторой и специфических видов токсичности. Результаты: Для обеих CAR-Т конструкций в исследованиях in vitro показана эффективность в отношении опухолевых клеток, экспрессирующих специфический антиген. Генно-модифицированные лимфоциты вызывали гибель опухолевых клеток в среднем 72,2 %± 6,1%, преимущественно путем апоптоза (40,2 %± 4,8 %). Исследования эффективности in vivo выявили достоверное торможение роста опухоли и увеличение продолжительности жизни животных при разовых дозах 5 х 105 и 1 х 106 клеток. Исследования фармакокинетики показали, что CAR-T лимфоциты обладают способностью к циркуляции в периферической крови с сохранением в них плазмидной ДНК и продуктов экспрессии (CAR) до 30 суток. Максимальная

концентрация наблюдается в периферической крови. Токсикологические исследования показали, что тестируемые СДк-Т при однократном внутривенном и внутрибрюшин-ном введении в исследуемых эффективных дозах имеют минимальную токсичность.

Заключение: По результатам проведенного комплекса доклинических исследований сделан вывод о безопасности и эффективности разработанной технологии и возможности проведения первой фазы клинических испытаний.

АССОЦИАЦИЯ АМПЛИФИКАЦИЙ 3Q, 5^ 6^ 7Q, 8Q, 9^ 10^ 12^ 16^ ^ СО СМЕРТНОСТЬЮ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ЛОКАЛИЗАЦИЯХ

Авторы: М.К. Ибрагимова, М.М. Цыганов, Н.В. Литвяков Место работы: НИИ онкологии «Томский национальный исследовательский медицинский центр», Томск Российской академии наук

Эл. почта: imk1805@yandex.ru

Цель: Целью настоящего исследования был анализ связи смертности при различных ЗНО и частоты 2-х и более фокальных амплификаций регионов 3q, 5р, 6р, 7q, 8q, 9р, 10р, 12р, "Щ, 16р, 19р по данным проекта ТСвД. Материалы и методы: В работе проанализированы данные ВОЗ по смертности в % от злокачественных новообразований различных локализаций и частота больных с 2 и более изучаемыми амплификациями в опухоли. Опухолевые локализации включали плоскоклеточный рак легкого, аденокар-циному желудка, рак прямой кишки, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак мочевого пузыря, аденокарциному толстой кишки, рак пищевода, рак яичников, меланому, плоскоклеточный рак шейки матки, РМЖ, саркому, рак почки, рак тела матки, аденокарциному простаты и рак щитовидной железы. Определяли частоту(%) встречаемости 2 и более амплификаций вышеуказанных регионов. Общее количество пациентов, включенных в анализ — 8356. В анализ включены данные только по солидным опухолям, из которых исключены опухоли мозга (мультиформная глиобластома, глиомы низкой степени) и уротелиальный рак мочевого пузыря, поскольку по этим конкретным локализациям нет данных по смертности, а также локализации, по которым в базе ТСвД менее 100 больных.

Результаты: Наибольшая частота больных с 2 и более амплификациями идентифицированных регионов наблюдается при плоскоклеточной раке легкого — 72 %, при этой локализации отмечается один из самых высоких уровней смертности — 89 %. Наименьшая частота — при раке щитовидной железы, смертность при этой локализации составила 11%. Отмечается высокий уровень корреляции (к = 0,842 при высоком уровне статистической значимости р = 0,000011) между частотой 2 и более амплификаций идентифицированных регионов в опухоли и смертностью при различных локализациях.

ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии

том / vol. 10 № 3s1 • 2020

MALIGNANT TUMOURS

Russian Society of Clinical Oncology