CC BY
435
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТИ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ
Для корреспонденции
Суханова Анна Михайловна - лаборант-исследователь
лаборатории метаболомного и протеомного анализа
ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», ассистент кафедры
фармацевтической и токсикологической химии
им. А.П. Арзамасцева ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова
Минздрава России (Сеченовский Университет)
Адрес: 109240, Российская Федерация, г. Москва,
Устьинский проезд, д.2/14
Телефон: (495) 698-5360
E-mail: annamsukhanova@gmail.com
https://orcid.org/0000-0002-8687-8521
Суханова А.М.1, 2, Перова И.Б.1, Кошечкина АХ.1, Рылина Е.В.1, Тумольская Е.В.1, Родионова Г.М.2
Разработка и валидация методики количественного определения сибутрамина в биологически активных добавках к пище методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр питания, биотехнологии и безопасности пищи, 109240, г. Москва, Российская Федерация
2 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), 119991, г. Москва, Российская Федерация
1 Federal Research Centre of Nutrition, Biotechnology and Food Safety, 109240, Moscow, Russian Federation
2 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), 119991, Moscow, Russian Federation
Development and validation of methodology of quantitative determination of sibutramine in dietary supplements by high performance liquid chromatography
Sukhanova A.M.1, 2, Perova I.B.1, Koshechkina A.S.1, Rylina E.V.1, Tumolskaya E.V.1, Rodionova G.M.2
Сибутрамин является высокоэффективным средством для лечения ожирения. Недобросовестные производители биологически активных добавок (БАД) к пище, предназначенных для лиц, контролирующих массу тела, могут добавлять сибутрамин - запрещенное к использованию в составе БАД к пище биологически активное синтетическое вещество - для достижения заявленного эффекта. В связи с этим разработка и валидация методов количественного определения сибутрамина в БАД к пище для контроля качества, выявления
Финансирование. Научно-исследовательская работа по подготовке рукописи проведена за счет средств госбюджета на выполнение государственного задания по НИР.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие конфликта интересов.
Для цитирования: Суханова А.М., Перова И.Б., Кошечкина А.С., Рылина Е.В., Тумольская Е.В., Родионова Г.М. Разработка и валидация методики количественного определения сибутрамина в биологически активных добавках к пище методом высокоэффективной жидкостной хроматографии // Вопросы питания. 2020. Т. 89, № 6. С. 123-129. DOI: 10.24411/0042-8833-2020-10085 Статья поступила в редакцию 27.08.2020. Принята в печать 20.11.2020.
Funding. The research was carried out at the expense of the subsidy for the implementation of the state task. Conflict of interests. The authors declare no conflict of interests.
For citation: Sukhanova A.M., Perova I.B., Koshechkina A.S., Rylina E.V., Tumolskaya E.V., Rodionova G.M. Development and validation of methodology of quantitative determination of sibutramine in dietary supplements by high performance liquid chromatography. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2020; 89 (6): 123-9. DOI: 10.24411/0042-8833-2020-10085 (in Russian) Received 27.08.2020. Accepted 20.11.2020.
недоброкачественных БАД к пище и предотвращения незаконного оборота таких БАД к пище является особенно актуальной, учитывая масштабы реализации данной продукции.
Цель исследования - разработать методику количественного определения сибутрамина в БАД к пище, предназначенных для снижения массы тела, методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и провести ее валидацию.
Материал и методы. Количество сибутрамина в БАД к пище определяли методом обращенно-фазовой ВЭЖХ в режиме изократического элюирования, использовали высокоэффективный жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым (УФ) детектором, в качестве неподвижной фазы использовали хроматографическую колонку С18 NUCLEOSIL размером 4,6x150 мм, размер частиц сорбента 5 мкм. Подвижная фаза содержит 0,05 М формиатный буфер pH 4,0 и ацетони-трил в соотношении 40:60 (по объему).
Результаты и обсуждение. Разработана методика определения сибутрамина в составе БАД к пище, позволяющая проводить контроль качества. На основании полученныххроматограмм определена специфичность, при этом показано, что растительные компоненты не влияют на определение сибутрамина в модельных смесях. Определена пригодность хроматографической системы: фактор удерживания соединения - 2,222 (>2,0), N - 5776 теоретических тарелок (>5000), Т пика сибутрамина - 0,939 (¿1,5). В пределах аналитической области методики показана линейность: R2=0,9993 (>0,9950). s=0,46% (<1,5%), доверительный интервал включает значение 100%, расчетное значение критерия Стьюдента Ьрасч (2,47) меньше табличного 1табл (2,80), что доказывает правильность методики. Прецизионность результатов определяют благодаря полученному значению коэффициента вариации (RSD), который составляет 0,91% (не превышает 1%). Пределы обнаружения (LOD) и количественного определения (LOQ) составляют соответственно 0,1 и 1,0%. Диапазон измеряемых концентраций: 0,01-20,0 мг/г.
Заключение. В результате проведенных исследований методика определения сибутрамина в многокомпонентных БАД к пище, предназначенных для лиц, контролирующих массу тела, была валидирована и может применяться при контроле их качества.
Ключевые слова: сибутрамин, высокоэффективная жидкостная хроматография, валидация, биологически активные добавки к пище, контроль качества
Sibutramine is a highly effective drug for the treatment of obesity. In this regard, unscrupulous manufacturers can add sibutramine as a biologically active synthetic substance prohibited for use in the composition of dietary supplements. Thus, the problem associated with the illegal circulation of such dietary supplements is especially actual, given the scale of the sale of these products. The development and validation of methods for the determination of sibutramine in dietary supplements for slimming (anorexigenic action) for the purpose of quality control in order to ensure the quality of dietary supplements when introduced into civil circulation at customs and on the market.
The aim of the study - to develop a method for the quantitative determination of sibutramin in dietary supplements for weight loss by high performance liquid chromatography (HPLC) and to validate it.
Material and methods. For the quantitative determination of sibutramine in dietary supplements, we used an Agilent 1100 high performance liquid chromatograph with a UV-detector. The stationary phase was a chromatographic column C18 NU CLEOSIL 4.6x 150 mm, particle size 5 Ц-m. The mobile phase contained 0.05 M formate buffer pH 4.0 and acetonitrile in a ratio of 40:60 (by volume). Results and discussion. A methodology has been developed for the determination of sibutramine in dietary supplements for weight loss, which makes it possible to control the quality of dietary supplements. Based on the obtained chromatograms, the specificity was determined; the plant components did not influence the determination of sibutramine in model mixtures. The suitability of the chro -matographic system was determined: the retention factor of the compound - 2.222 (more than 2.0), N - 5776 theoretical plates (more than 5000), Tpeak of sibutramine - 0.939 (not more than 1.5). Within the analytical area of the linearity method: R2=0.9993 (over 0.9950). s=0.46% (does not exceed 1.5%), the confidence interval includes the value of 100%, the calculated value of the Student's criterion tcalc (2.47) was less than the tabular ttable (2.80), which proved the correctness of the methodology. The precision of the results was determined by the obtained RSD value, which was 0.91% (less than 1%). Limit of detection (L OD) and limit of quantifica -tion (LOQ) took values of 0.1 and 1.0%, respectively. The range of measured concentrations was 0.01-20.0 mg/g. Conclusion. As a result of the studies, the method for sibutramine determination in dietary supplements with anorexigenic action was tested and can be used in quality control of dietary supplements.
Keywords: sibutramine, high performance liquid chromatography, validation, dietary supplements, quality control
По данным Росстата за 2019 г., избыточная масса тела наблюдалась у 62% взрослого населения, а ожирение - у каждого 5-го российского гражданина [1].
Первой линией терапии ожирения является изменение образа жизни (рациональное питание, включающее снижение энергопотребления, повышение физической активности, поведенческая терапия), однако в силу занятости многие люди прибегают к наиболее простому способу снижения массы тела - приему анорексигенных лекарственных препаратов.
На данный момент самым эффективным лекарственным препаратом анорексигенного действия является
сибутрамин - ингибитор обратного захвата норэпинеф-рина и серотонина [2]. Согласно постановлению Правительства РФ от 29.12.2007 № 964 (ред. от 19.12.2018) «Об утверждении списков сильнодействующих и ядовитых веществ для целей статьи 234 и других статей Уголовного кодекса Российской Федерации, а также крупного размера сильнодействующих веществ для целей статьи 234 Уголовного кодекса Российской Федерации» сибутрамин входит в Перечень сильнодействующих и ядовитых веществ, поэтому отпуск данного лекарственного средства осуществляется строго по рецепту врача [3]. В связи с этим недобросовестные произво-
дители биологически активных добавок (БАД) к пище нелегально добавляют сибутрамин для достижения заявленной ими эффективности [3].
В США сибутрамин был запрещен в 2010 г. решением Food and Drug Administration (FDA) по результатам исследования The recent Sibutramine Cardiovascular Outcomes Trial (SCOUT), в котором участвовало 300 медицинских центров из 17 стран мира с привлечением пациентов старше 55 лет, имеющих сердечно-сосудистые заболевания или предрасположенность к ним, а также сахарный диабет [4-6]. Сибутрамин находится под запретом в Европе, Индии, Китае, Гонконге, Новой Зеландии, Таиланде. Кроме того, сибутрамин входит в запрещенный список Всемирного антидопингового кодекса 2020 г.
Эффекты сибутрамина преимущественно обусловлены двумя образующимися под влиянием изофермента CYP3A4 цитохрома P450 фармакологически активными метаболитами (М1 - десметилсибутрамин и М2 - дидес-метилсибутрамин), период полувыведения которых составляет 14 и 16 ч, а сибутрамина - 1,1 ч [2, 7].
Несмотря на свою высокую эффективность сибутрамин способен вызывать множество побочных эффектов [2]. Со стороны сердечно-сосудистой системы наблюдаются тахикардия, повышение артериального давления; со стороны органов желудочно-кишечного тракта - анорексия, тошнота, диспепсия; со стороны опорно-двигательного аппарата - артралгия, миалгия, заболевания суставов; со стороны нервной системы - нервозность, сухость во рту, инсомния, тревога, депрессия. При проведении двойного слепого исследования риск возникновения инсульта значительно выше у пациентов, принимавших сибутрамин, по сравнению с теми, кто употреблял плацебо [2, 8-12].
Высокая терапевтическая активность субстанции сибутрамина побудила недобросовестных производителей БАД к пище для похудения добавлять в свою продукцию активную фармацевтическую субстанцию для достижения заявленного ими эффекта.
Подобные манипуляции были незамедлительно установлены правоохранительными органами, осуществляющими мониторинг биологически активных синтетических веществ, запрещенных к использованию в составе БАД к пище на разных стадиях оборота и распространения указанной продукции (таможня, контрольно-аналитические лаборатории) согласно Техническому регламенту Таможенного союза ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции».
В связи с этим необходимо использовать весь комплекс современных физико-химических методов исследования для контроля качества БАД к пище и проведения их санитарно-эпидемиологической экспертизы. Для создания обоснованных критериев оценки полученных результатов необходимо утверждение валидированных методик идентификации и количественного определения активной фармацевтической субстанции - сибутра-мина в БАД к пище - в качестве нормативной документации для использования в контрольно-аналитических лабораториях.
В современных ведущих фармакопеях для определения подлинности активных фармацевтических субстанций применяют основные физико-химические методы: инфракрасную и ультрафиолетовую (УФ) спектрофо-тометрию, поляриметрию, спектроскопию ядерного магнитного резонанса, хроматографию в тонком слое сорбента, высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), газовую хроматографию с использованием различных детекторов, а также капиллярный электрофорез [13-17].
По номенклатуре ИЮПАК (International Union of Pure and Applied Chemistry), сибутрамин - (±)-1-(4-хлорфенил)-Ы,Ы-диметил-альфа-(2-метилпропил) циклобутанмета-намин (рис. 1). Он представляет собой кристаллический порошок от белого до кремового цвета, растворимый в воде и метаноле, в связи с чем в качестве экстрагента целесообразно использовать данные растворители. Основываясь на физико-химических свойствах сибутра-мина, можно сделать вывод, что ВЭЖХ с использованием УФ-детектора является наиболее специфичным и чувствительным аналитическим методом его контроля [14, 18, 19].
Цель исследования - разработка и валидация аналитической методики определения сибутрамина в БАД к пище методом ВЭЖХ, включающая определение специфичности, линейности, правильности и прецизионности, пределов обнаружения и количественного определения в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи Российской Федерации IV издания (ГФ XIV) с целью проведения контроля качества БАД к пище.
Материал и методы
Объектами исследования были стандарт сибутрамина гидрохлорида (Tocris, Великобритания) и в качестве модели - не содержащая сибутрамин многокомпонентная БАД к пище сложного состава растительного происхождения «Модельформ» (ООО «Промомед Рус», Россия), что было подтверждено отсутствием пика на уровне 5 мин при анализе исследуемых БАД к пище, не содержащих сибутрамин.
Раствор стандартного образца готовили растворением навески стандартного образца сибутрамина массой 0,010 г (точная навеска) в 10 мл метанола с дальнейшим 10-кратным разведением.
Для приготовления модельных смесей в отдельные мерные колбы помещали содержимое одной капсулы БАД к пище и определенное количество сибутра-мина (табл. 1), растворяли в 8 см3 метанола 100% (J.T. Baker, Польша), перемешивали, экстрагировали на ультразвуковой водяной бане. После доведения объема до метки растворителем и перемешивания центрифугировали при 15 000 об/мин с помощью ультрацентрифуги «Eppendorf» 5424 (Eppendorf, Германия). При необходимости проводили разведения (см. табл. 1).
Cl
CHo
H3C
CH,
CHo
Рис. 1. Структурная формула сибутрамина Fig. 1. The structural formula of sibutramine
Таблица 1. Приготовление модельных смесей Table 1. Preparation of model mixtures
Модельная смесь, № Model mixture, No. Добавляемое количество сибутрамина, мг Added quantity of sibutramine, mg V колбы, см3 V flask, ml Кратность разведения Dilution ratio
1 10 10 100
2 5 10 10
3 10 10 10
4 5 10 -
5 10 10 -
Определение проводили методом обращенно-фазовой ВЭЖХ в режиме изократического элюиро-вания. Для хроматографирования использовали высокоэффективный жидкостной хроматограф «Agilent 1100» (Agilent Technologies, США) с УФ-детектором. В качестве неподвижной фазы использовали хро-матографическую колонку из нержавеющей стали С18 NUCLEOSIL (Macherey-Nagel, Германия) размером 4,6x150 мм, размер частиц сорбента - 5 мкм. Подвижная фаза содержит 0,05 М формиатный буфер pH
4,0 (аммония формиат - Honeywell, Германия; муравьиная кислота - Sigma-Aldrich, США) и ацетонитрил (PanReac AppliChem, Германия) в соотношении 40:60 (по объему).
Условия хроматографического разделения: скорость потока - 1 см3/мин; температура термостата колонки -40 °C; длина волны детектирования - 225 нм; объем пробы - 5 мкм3; время анализа - 8 мин. Примерное время удерживания - 5 мин.
Диапазон измеряемых концентраций: 0,01-20,0 мг/г.
mAUq 125 100 75 50 25 0
-25 -50 -75^
0
mAUq 125 100 75 50 25 0
-25 -50 -75-3
0
А (А)
В (С)
mAU;
1000800 600 400 200 0
mAU;
1000800 600 400 200 0
Б (В)
1/1
w
Г (D)
Рис. 2. Хроматограмма, полученная методом высокоэффективной жидкостной хроматографии растворителя (А), биологически активной добавки к пище (Б), стандартного раствора сибутрамина (0,1 мг/см3) (В) и модельной смеси № 3 (Г)
По оси абсцисс - время удерживания, мин; по оси ординат - интенсивность сигнала, мВ.
Fig. 2. High performance liquid chromatography chromatogram of solvent (А); dietary supplements (B); sibutramine standard solution (0.1 mg/ml) (C) and model mixture N 3 (D)
Abscissa axis - retention time in min; ordinate axis - detector response, mAU.
6
4
5
0
2
3
4
5
6
7
4
6
0
2
3
4
6
5
5
7
Результаты и обсуждение
Методика была валидирована на основании полученных результатов и их последующей статистической обработки, которую проводили в соответствии с Общей фармакопейной статьей «Статистическая обработка результатов эксперимента. ОФС.1.1.0013.15» (ГФ XIV) и руководством [20]. Оценивали аналитическую методику по показателям специфичности, линейности, правильности, прецизионности в соответствии с Общей фармакопейной статьей «Валидация аналитических методик. ОФС.1.1.0012.15» (ГФ XIV) [20].
Специфичность метода ВЭЖХ была доказана на основании полученных хроматограмм модельных смесей известного состава (сибутрамина и БАД к пище) и используемого растворителя (рис. 2).
При выбранных условиях время удерживания сибутрамина составляет 5 мин (см. рис. 2В), других компонентов БАД к пище - от 1,2 до 2 мин (см. рис. 2Б). Отсутствует наложение мешающих пиков из матрикса БАД (см. рис. 2Г).
Пригодность хроматографической системы определения сибутрамина методом ВЭЖХ оценивали путем многократного анализа стандартного образца сибутра-мина: фактор удерживания соединения составил 2,222 (>2,0), эффективность колонки (Ы) - 5776 теоретических тарелок (>5000), асимметрия пика (Т) сибутрамина -0,939 (не превышает 1,5). Таким образом, была подтверждена пригодность хроматографической системы.
Линейность методики была исследована на 5 модельных смесях с содержанием исследуемого вещества от 80 до 120% от предполагаемого номинального значения, тем самым определяется аналитическая область методики (рис. 3).
Коэффициент корреляции И2 составил 0,9993 (>0,9950) при у = 9297,2х + 186,08 [х - концентрация (мг/см3), у - площадь пика].
Правильность методики была продемонстрирована определением степени извлечения сибутрамина, введенного в модельные смеси.
Из данных табл. 2 следует, что извлечение сибутра-мина из модельных смесей в условиях эксперимента
C, Mr/CM3/C, mg/ml
Рис. 3. График линейной зависимости площади пика (S) от концентрации (С) сибутрамина в модельных смесях
Fig. 3. The graph of the linear dependence of the peak area (S) on the concentration (C) of sibutramine in model mixtures
проходит полностью, относительная ошибка единичного определения не превышает 1,5% (0,46%). Доверительный интервал X ± АХ (99,55±0,46)% включает 100%, расчетное значение критерия Стьюдента (?расч. = 2,47) меньше табличного (?табл. = 2,8), а следовательно, методика правильна, систематическая ошибка отсутствует.
Для оценки прецизионности (сходимости) результатов был рассчитан коэффициент вариации (ИЗй), не превышающий 1% (0,91%).
Заключение
По результатам, полученным при проведении валида-ции методики количественного определения сибутра-мина в БАД к пище, установлено, что разрабатываемая методика отвечает требованиям специфичности, правильности и прецизионности (сходимости), предъявляемым к методикам количественного определения.
Основываясь на представленных данных, методику количественного определения сибутрамина можно рассматривать как пригодную для контроля качества БАД к пище для снижения массы тела.
Таблица 2. Результаты определения правильности методики количественного определения сибутрамина в биологически активных добавках к пище
Table 2. The results of determining the correctness of the methodology for the quantitative determination of sibutramine in dietary supplements
Модельная смесь, № Model mixture, No. Взято, мг/см3 (С1) Taken, mg/ml (C1) Найдено, мг/см3 (С2) Found, mg/ml (CJ Абсолютная ошибка, мг/см3 (d = С2 - С1) Absolute error, mg/ml (d = C2 - C1) Относительная ошибка, % (Y = dxlQQ/С) Relative error, % (Y = dxl00/C1) Найдено, 0/ /0 Found, % Метрологические характеристики (Р=95%, n=5) Metrological characteristics (P=95%, n=5)
1 0,0100 0,0099 -0,0001 -1,00 99,00 n=5 x=99,55 S=0,91 Sx-0,41 Ax-0,46 s-0,46% ^расч-2,47 1табл-2,80 RSD-0,91%
2 0,0496 0,0494 0,0002 -0,40 99,60
3 0,0998 0,0984 -0,0014 -1,40 98,60
4 0,5062 0,5032 -0,003 -0,59 99,41
5 0,9896 1,0000 -0,0104 1,05 101,05
Сведения об авторах
Суханова Анна Михайловна (Anna M. Sukhanova) - лаборант-исследователь лаборатории метаболомного и протеом-ного анализа ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», ассистент кафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) (Москва, Российская Федерация) E-mail: annamsukhanova@gmail.com https://orcid.org/0000-0002-8687-8521
Перова Ирина Борисовна (Irina B. Perova) - кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник лаборатории метаболомного и протеомного анализа ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии» (Москва, Российская Федерация)
E-mail: erin.feather@yandex.ru https://orcid.org/0000-0001-5975-1376
Кошечкина Анна Сергеевна (Anna S. Koshechkina) - кандидат фармацевтических наук, научный сотрудник лаборатории метаболомного и протеомного анализа ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии» (Москва, Российская Федерация)
E-mail: anna6985392@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-3664-6909
Рылина Елена Валерьевна (Elena V. Rylina) - кандидат фармацевтических наук, научный сотрудник лаборатории метаболомного и протеомного анализа ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии» (Москва, Российская Федерация) E-mail: hellch@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-9375-309X
Тумольская Елена Викторовна (Elena V. Tumolskaya) - научный сотрудник лаборатории метаболомного и протеомного анализа ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии» (Москва, Российская Федерация) E-mail: tum.elena@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-3913-0799
Родионова Галина Михайловна (Galina M. Rodionova) - кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) (Москва, Российская Федерация) E-mail: rodionovagalinam@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-0536-9590
Литература
1. Федеральная служба государственной статистики. URL: 11. https://www.gks.ru/ (дата обращения: 17.03.2020)
2. Регистр лекарственных средств России. URL: https://www. rlsnet.ru/ (дата обращения: 17.03.2020)
3. Суханова А.М., Перова И.Б., Родионова Г.М. и др. Использование сибутрамина в лекарственных препаратах и БАД 12. к пище анорексигенного действия // Разработка и регистрация лекарственных средств. 2019. Т. 8, № 1. С. 97—101.
4. Ершова Е.В., Кошмилова К.А., Галиева М.О. Сибутрамин: 13. мифы и реальность // Ожирение и метаболизм. 2014. № 4.
С. 12-17.
5. Longo M., Zatterale F., Naderi J. et al. Adipose tissue dysfunction as determinant of obesity-associated metabolic complications // Int.
J. Mol. Sci. 2019. Vol. 20, N 9. P. 2358. DOI: https://doi.org/10.3390/ 14. ijms20092358
6. Mechcatie E. Abbott pulls weight-loss drug sibutramine from market // Skin Allergy News. 2010. Vol. 41, N 11. P. 10.
7. Руяткина Л.А., Руяткин Д.С. Ожирение: «перекрестки» мне- 15. ний, знаний и возможностей // Другие проблемы эндокринологии. 2020. № 7. P. 108-120. DOI: https://doi.org/10.21518/ 2079-701X-2020-7-108-120
8. Chen K.Y., Brychta R.J., Abdul Sater Z. et al. Opportunities and chal- 16. lenges in the therapeutic activation of human energy expenditure and thermogenesis to manage obesity // J. Biol. Chem. 2020. Vol. 295, N 7.
P. 1926-1942. DOI: https://doi.org/10.1074/jbc.REV119.007363
9. 9. Aguilera C., Labbe T., Busquets J. et al. Obesity: risk factor or primary disease? // Rev. Med. Chil. 2019. Vol. 147, N 4. P. 470-474. 17. DOI: https://doi.org/10.4067/S0034-98872019000400470
10. World Health Statistics 2018: Monitoring Health for the SDGs, Sustainable Development Goals. World Health Organization, 2018. P. 18-20.
Logvinova O., Kuznetsova P., Tsvetkova E. Study of the effect of sibutramine on central mechanisms of regulation of eating behavior in patients with obesity by means of fMRI. Preliminary results // Endocrine Abstracts. 2020. Vol. 70. P. 311. DOI: https:// doi.org/10.1530/endoabs.70.AEP311
Smith G.I., Mittendorfer B., Klein S. Metabolically healthy obesity: facts and fantasies // J. Clin. Invest. 2019. Vol. 129, N 10. P. 3978-3989. DOI: https://doi.org/10.1172/JCI129186 Zhong Y., Sun C., Xiong J. et al. Simultaneous determination of eight adulterants in weight management supplements and herbs by HPLC-DAD and LC-MS/MS // J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2017. Vol. 40, N 12. P. 640-648. DOI: https://doi.org/10. 1080/10826076.2017.1343730
Zaharieva Z., Tanev D., Danalev D. Development and validation of HPLC/DAD method for simultaneously determination of six prohibited substances in model matrices // Acta Chromatogr. 2019. Vol. 32, N 4. P. 1-5. DOI: https://doi.org/10.1556/1326.2019.00749 Wang D., Man R., Shu M. et al. Detection of sibutramine and phe-nolphthalein in functional foods using capillary electrophoresis // Anal. Methods. 2016. Vol. 8, N 3. P. 621-626. DOI: https://doi. org/10.1039/C5AY02973B
Strano-Rossi S., Colamonici C., Botre F. Detection of sibutramine administration: a gas chromatography/mass spectrometry study of the main urinary metabolites // Rapid Commun. Mass Spec-trom. 2007. Vol. 21, N 6. P. 79-88. DOI: https://doi.org/10.1002/ rcm.2807
Monakhova Y.B., Kuballa T., Lobell-Behrends S. et al. Standard-less 'H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the Internet // Drug Test. Anal. 2013. Vol. 5, N 6. P. 400-411. DOI: https://doi.org/10.1002/dta.1367
18. Kamardi T., Fidrianny I., Musadad A. Development of analytical method for identification of sibutramine hydrochloride in traditional medicine using solid phase extraction: high-perfomance liquid chromatography // Asian J. Pharm. Clin. Res. 2016. Vol. 9, N 6. P. 201-209. DOI: https://doi.org/10.22159/ajpcr.2016.v9i6. 14174
19. Hammadi R., Amer Almardini M. A fully validated HPLC-UV method for quantitative and qualitative determination of six adulterant drugs in natural slimming dietary supplements // Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res. 2014. Vol. 29, N 1. P. 171-174.
20. Береговых В.В. (ред.). Валидация аналитических методик для производителей лекарств. Москва : Литтерра, 2008. 132 с.
References
10.
11.
Federal State Statistics Service. URL: https://www.gks.ru/ (date 12. of access March 17, 2020) (in Russian)
The register of medicines of Russia. URL: https://www.rlsnet.ru/ (date of access March 17, 2020) (in Russian) 13.
Sukhanova A.M., Perova I.B., Eller K.I. The use of sibutramine in medicines and dietary supplements to food of anorexigenic action. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv [Drug Development and Registration]. 2019; 8 (1): 97-101. (in Russian) Ershova E.V., Koshmilova K.A., Galieva M.O. Sibutramine: myths 14. and reality. Ozhirenie i metabolism [Obesity and Metabolism]. 2014; (4): 12-7. (in Russian)
Longo M., Zatterale F., Naderi J., et al. Adipose tissue dysfunction as determinant of obesity-associated metabolic complications. 15. Int J Mol Sci. 2019; 20 (9): 2358. DOI: https://doi.org/10.3390/ ijms20092358
Mechcatie E. Abbott pulls weight-loss drug sibutramine from market. Skin Allergy News. 2010; 41 (11): 10. 16. Ruyatkina L.A., Ruyatkin D.S. Obesity: The Crossroads of Opinion, Knowledge, and Opportunity. Meditsinskiy sovet [Medical Council]. 2020; (7): 108-20. DOI: https://doi.org/10.21518/2079-701X-2020-7-108-120 (in Russian) 17. Chen K.Y., Brychta R.J., Abdul Sater Z., et al. Opportunities and challenges in the therapeutic activation of human energy expenditure and thermogenesis to manage obesity. J Biol Chem. 2020; 295. 7: 1926-42. DOI: https://doi.org/10.1074/jbc.REV119.007363 Aguilera C., Labbe T., Busquets J., et al. Obesity: risk factor or 18. primary disease? Rev Med Chil. 2019; 147 (4): 470-4. DOI: https:// doi.org/10.4067/S0034-98872019000400470 World Health Statistics 2018: Monitoring Health for the SDGs, Sustainable Development Goals. World Health Organization, 2018: 18-20. 19. Logvinova O., Kuznetsova P., Tsvetkova E. Study of the effect of sibutramine on central mechanisms of regulation of eating behavior in patients with obesity by means of fMRI. Preliminary results. In: Endocrine Abstracts. 2020; 70: 311. DOI: https://doi. 20. org/10.1530/endoabs.70.AEP311
Smith G.I., Mittendorfer B., Klein S. Metabolically healthy obesity: facts and fantasies. J Clin Invest. 2019; 129 (10): 3978-89. DOI: https://doi.org/10.1172/JCI129186
Zhong Y., Sun C., Xiong J., et al. Simultaneous determination of eight adulterants in weight management supplements and herbs by HPLC-DAD and LC-MS/MS. J Liq Chromatogr Relat Tech-nol. 2017; 40 (12): 640-8. DOI: https://doi.org/10.1080/10826076. 2017.1343730
Zaharieva Z., Tanev D., Danalev D. Development and validation of HPLC/DAD method for simultaneously determination of six prohibited substances in model matrices. Acta Chromatogr. 2019; 32 (4): 1-5. DOI: https://doi.org/10.1556/1326.2019.00749 Wang D., Man R., Shu M., et al. Detection of sibutramine and phenolphthalein in functional foods using capillary electrophoresis. Anal Methods. 2016; 8 (3): 621-6. DOI: https://doi.org/10.1039/ C5AY02973B
Strano-Rossi S., Colamonici C., Botre F. Detection of sibutramine administration: a gas chromatography/mass spectrometry study of the main urinary metabolites. Rapid Commun Mass Spectrom. 2007; 21 (6): 79-88. DOI: https://doi.org/10.1002/rcm.2807 Monakhova Y.B., Kuballa T., Lobell-Behrends S., et al. Standard-less 'H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the Internet. Drug Test Anal. 2013; 5 (6): 400-11. DOI: https://doi.org/10.1002/dta.1367
Kamardi T., Fidrianny I., Musadad A. Development of analytical method for identification of sibutramine hydrochloride in traditional medicine using solid phase extraction: high-perfomance liquid chromatography. Asian J Pharm Clin Res. 2016; 9 (6): 201-9. DOI: https://doi.org/10.22159/ajpcr.2016.v9i6.14174 Hammadi R., Amer Almardini M. A fully validated HPLC-UV method for quantitative and qualitative determination of six adulterant drugs in natural slimming dietary supplements. Int J Pharm Sci Rev Res. 2014; 29 (1): 171-4.
Beregovykh V.V. (ed.) Validation of analytical techniques for drug manufacturers. Moscow: Litterra, 2008: 132 p. (in Russian)
1.
2
4
6.
7
8
9
