CC BY
15
• Разработка и исследование противоопухолевых свойств пептидных последовательностей - ингибиторов циклиновых киназ
Ключевые слова: ингибиторы циклиновых киназ, интернализуемые пептиды (cell penetrating peptides, CPP), противоопухолевые пептиды, пролиферация
Keywords:
cyclin kinase inhibitors, internalizable peptides (cell penetrating peptides, CPP), antitumor peptides, proliferation
Кулинич Т.М., Боженко В.К., Иванов А.В, Солодкий В.А.
ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России 117997, Российская Федерация, г. Москва, ул. Профсоюзная, д. 86 E-mail: sobral@mail.ru
Development and research of antitumor properties of peptide sequences cycline kinase inhibitors
Kulinich T.M., Bozhenko V.K., Ivanov A.V., Solodkii V.A.
Russian Scientific Center of Roentgenoradiology Ministry of Health of Russia 86 Profsoyuznaya str., Moscow, 117997, Russian Federation E-mail: sobral@mail.ru
Цель. Получение пептидных последовательностей способных ингибировать активность комплекса Ци-клинД/циклин-зависимая киназа 4/6.
Проведено исследование четырех пептидных последовательностей-аналогов ингибирующей последовательности, полученной из белка р16 INK4a (F26K-1, F26K-2, W26K-1, W26K-2). Последовательности рассчитывались с помощью математического анализа трехмерных моделей комплексов цикли/циклин-зависимая киназа 4/6 и анализа энергий взаимодействия пептид-целевой комплекс. Пептиды включали интернализуемый вектор, обеспечивающий внутриклеточное проникновение (Antp).
Материалы и методы. Исследование проведено in vitro на перевивных культурах клеток линий опухолей человека: MCF-7 (рак молочной железы), А549 (аде-нокарцинома легкого), SKOV-3 (рак яичника) и НСТ116 (аденокарцинома толстой кишки). Исследование уровня апоптоза и некроза опухолевых клеток проводилось методом проточной цитометрии (Cytomics FC500, Beckman Coulter, США) с использованием наборов (Apoptosis Detection Kit, Beckman Coulter, Inc, Франция). Динамика пролиферативной активности клеточных популяций оценивалась на приборе RTCA iCELLIgence (ACEA Biosciences).
Результаты. Было показано, что все исследованные пептидные последовательности ^26К-1, F26K-2, W26K-1, W26K-2) обладают способностью индуцировать апоптоз и ингибируют процессы пролиферации в культурах про-лиферирующих клеток. Наибольший проапоптотический эффект, оказывают последовательности F26K-1 и F26K-2. Анализ показателя клеточного индекса ^ТСА iCELLIgence) показал, что все исследуемые последовательности способны снижать пролиферативную активность делящихся клеток и в концентрации 10 мкМ вызывают необратимое угнетение пролиферации и гибель клеток. При сравнении проапоптотических и цитостатических свойств установлено, что W26K-1 является наиболее «слабой» последовательностью, остальные пептиды — F26K-1, F26K-2, W26K-2 по цитотоксическим эффектам превосходят каноническую последовательность из белка р16^К4а.
Заключение. Последовательности, полученные с помощью методов математического моделирования, обладают свойствами исходной биологической последовательности, способны проявлять те же специфические эффекты и имеют 1С50 меньший, чем исходный «естественный» аналог. Противоопухолевая эффективность зависит как от структуры последовательности, так и от типа исследуемой клеточной линии.
168 Proceedings of the First International Forum of Oncology and Radiology, Moscow, September 23-27 2019
