CC BY
813
Для корреспонденции
Синявский Юрий Александрович - доктор биологических
наук, профессор, руководитель лаборатории пищевых
биотехнологий и специализированных продуктов питания
Казахской академии питания
Адрес: 050008, Республика Казахстан, г. Алматы,
ул. Клочкова, д. 66
Телефон: (727) 375-89-50
E-mail: sinyavskiy@list.ru
https://orcid.org/0000-0002-8006-9942
Синявский Ю.А.1, Сарсембаев Х.С.2
Разработка и экспериментальная оценка эффективности нового специализированного пищевого продукта на основе сухого кобыльего молока при физической нагрузке
1 Товарищество с ограниченной ответственностью «ОО Казахская академия питания», 050008, г. Алматы, Республика Казахстан
2 Алматинский технологический университет, 050012, г. Алматы, Республика Казахстан
1 Kazakh Academy of Nutrition, 050008, Almaty, Republic of Kazakhstan
2 Almaty Technological University, 050012, Almaty, Republic of Kazakhstan
Разработка и внедрение эффективных средств, способствующих повышению работоспособности, выносливости, быстрому восстановлению организма после физической нагрузки и в конечном итоге улучшению спортивных достижений, по-прежнему актуальны.
Цели работы - разработка нового специализированного продукта на основе сухого кобыльего молока, а также экспериментальная оценка его эффективности на экспериментальной модели физической нагрузки.
Материал и методы. Разработан специализированный продукт, включающий сухие кобылье молоко, обезжиренное коровье молоко, растительные сливки, измельченные плоды облепихи, зародыши пшеницы, витамины А, Е, С, РР, фолиевую кислоту, макро- и микроэлементы (селен, магний, цинк, железо), инулин, сухую бактериальную закваску (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Bifidobacterium bifidum в соотношении 1:1:1) и фукоидан. Экспериментальные исследования были выполнены на 70 белых крысах-самцах линии Вистар с исходной массой тела 207-226 г. Животных содержали на полусинтетическом рационе на основе казеина (20%) со свободным доступом к пище и воде. Крысы опытной
Финансирование. Исследование выполнено при финансировании Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан (грант «Разработка технологии получения сухого кобыльего молока для широкого его использования при производстве продуктов массового потребления и лечебно-профилактического назначения»).
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Для цитирования: Синявский Ю.А., Сарсембаев Х.С. Разработка и экспериментальная оценка эффективности нового специализированного пищевого продукта на основе сухого кобыльего молока при физической нагрузке // Вопросы питания. 2020. Т. 89, № 6. С. 91-103. DOI: 10.24411/0042-8833-2020-10082
Статья поступила в редакцию 25.08.2020. Принята в печать 20.11.2020.
Funding. The study was carried out within the framework of the Grant of the Ministry of Agriculture of the Republic of Kazakhstan "Development of technology for obtaining dry mare's milk for its wide use in the production of mass consumption products and products for medical and prophylactic purposes". Conflict of interest. The authors declare no conflicts of interest.
For citation: Sinyavskiy Yu.A., Sarsembayev Kh.S. The development and experimental evaluation of the effectiveness of a new specialized food based on dried mare's milk during exercise. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2020; 89 (6): 91-103. DOI: 10.24411/0042-8833-2020-10082 (in Russian) Received 25.08.2020. Accepted 20.11.2020.
The development
and experimental evaluation
of the effectiveness
of a new specialized food based
on dried mare's milk during
exercise
Sinyavskiy Yu.A.1, Sarsembayev Kh.S.2
группы дополнительно ежедневно получали по 10 г специализированного продукта, животные контрольной группы - глюкозу в количестве, соответствующем калорийности 10 г специализированного продукта (45 ккал). Животных подвергали физической нагрузке - принудительному плаванию до полного утомления. Плавательный тест проводили каждые 7 дней на протяжении 21-дневного экспериментального периода с грузом, составляющим 10% массы тела животного. В гемоли-затах эритроцитов, микросомах печени и в митохондриальной фракции бедренной мышцы оценивали активность ката-лазы и супероксиддисмутазы с помощью наборов, концентрацию малонового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов -спектрофотометрически. В сыворотке крови и гомогенатах бедренной мышцы определяли молочную и пировиноградную кислоты спектрофотометрически. Печень и сердце были подвергнуты гистологическим исследованиям. Результаты. Кормление животных специализированным продуктом в течение 21 дня привело к статистически значимому повышению выносливости, о чем свидетельствовали данные по времени плавания с грузом. Так, в опытной группе по сравнению с исходными данными время плавания увеличилось на 223%. В контрольной группе время плавания с грузом возросло по сравнению с исходными данными только на 71,4%, что в 3,1 раза ниже значений в опытной группе. Время плавания с грузом животных из обеих групп (n=15) статистически значимо не изменилось и в последующие 7 сут содержания исключительно на полусинтетическом рационе. Потребление крысами специализированного продукта сопровождалось положительной динамикой в изменении показателей антиоксидантного статуса. Так, в мембранах эритроцитов статистически значимо снижалась концентрация МДА на 55,2% и повышалась активность каталазы и супероксиддисмутазы - на 19,6 и 37,9% соответственно по сравнению с данными в контрольной группе. В микросо-мальной фракции печени уровень МДА снизился на 40,0%, а активность каталазы повысилась на 59,6%. В митохондриальной фракции бедренной мышцы крыс отмечено снижение уровня МДА и диеновых конъюгатов соответственно на 46,8 и 40,8%. У крыс опытной группы концентрация молочной кислоты в сыворотке крови была на 40,6%, а в бедренной мышце - на 24,7% ниже по сравнению с показателями животных контрольной группы, а гистологические исследования печеночной и сердечной ткани подтвердили положительные сдвиги в структуре исследуемых органов. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о благоприятном влиянии специализированного продукта на состояние антиоксидантной системы, общее физиологическое состояние крыс, их выносливость по отношению к физической нагрузке, что в значительной степени связано с набором пищевых ингредиентов, входящих в состав, и в первую очередь полноценного белка, витаминов-антиоксидантов (А, Е, С), а также энергетических источников, пре-и пробиотиков, макро- и микроэлементов, факторов иммунной защиты, благоприятно влияющих на состояние мембран эритроцитов, миоцитов и гепатоцитов и повышающих не только выносливость организма, но и его метаболические функции, что подтверждено данными биохимических и морфологических исследований.
Ключевые слова: спортивное питание, белковая смесь, кобылье молоко, показатели выносливости, антиоксидантная активность, продукты перекисного окисления липидов, морфологические изменения
The development and implementation of effective means to improve performance, endurance, rapid recovery of the body after physical exertion and, ultimately, improve athletic performance are still relevant.
The aim of the work was to develop a new specialized product based on dry mare's milk, as well as to evaluate its effectiveness on an experimental model of physical activity.
Material and methods. A specialized product has been developed, including powdered mare's milk, skimmed cow's milk, vegetable cream, crushed sea buckthorn fruits, wheat germ, vitamins A, E, C, PP, folic acid, mineral substances (selenium, magnesium, zinc, iron), inulin, dry bacterial starter culture (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Bifidobacterium bifidum in a 1:1:1 ratio) and fucoidan. Experimental studies were carried out on 70 white male Wistar rats with an initial body weight of207-226 g. Animals were fed complete semi-synthetic diet with free access to food and water. Animals of the experimental group additionally received 10 g of a specialized product daily. The control group of animals additionally received glucose in an amount corresponding to the calorie content of 10 g of the specialized product (45 kcal). The animals were subjected to physical exertion - forced swimming until they were completely tired. The swimming test was carried out every seven days during the 21-day experimental period with a load of 10% of the animal's body weight. In hemolysates of erythrocytes, liver microsomes, and in the mitochondrial fraction of the femoral muscle, the activity of catalase and superoxide dismutase was assessed using kits, the concentration of malondialdehyde (MDA) and diene conjugates was determined by spectrophotometry. The level of lactic and pyruvic acids in the blood serum and femoral muscle of rats was assessed by spectrophotometry. The liver and heart were histologically examined.
Results. Feeding animals the specialized protein product for 21 days resulted in a statistically significant increase in endurance, as evidenced by data on the time of swimming with a load. So, in the experimental group, in comparison with the initial data, the swimming time increased by 223%. In the control group, the time of swimming with a load increased in comparison with the initial data by only 71.4%, which was 3.1 fold lower than the values in the experimental group. The time of swimming with a load of animals from both groups did not change statistically significantly in the next 7 days offeeding exclusively semi-synthetic diet. The consumption of the specialized product was accompanied by a positive trend in the change in the antioxidant status indicators. Thus, in the membranes of erythrocytes, there was a decrease in the concentration of malondialdehyde by 55.2% and an increase in the activity of catalase and superoxide dismutase by 19.6 and 37.9%, respectively, compared with data in the control group. In the microsomal fraction of the liver, the level of MDA decreased by 40.0% and catalase activity increased by 59.6%. In the mitochondrial fraction of the femoral muscle, a decrease in the level of MDA and diene conjugates was noted, respectively, by 46.8 and 40.8%. In rats of the experimental group, the concentration of lactic acid in the blood serum was reduced by 40.6%, and in the femoral muscle - by 24.7% compared with animals of the control group. Histological studies of the hepatic and cardiac tissues confirmed positive changes in the structure of the studied organs.
Conclusion. The results obtained indicate a favorable effect of the protein mixture on the state of the antioxidant system, the general physiological state of rats, their endurance in relation to physical activity, which is largely associated with the set of food ingredients included in the composition, and, first of all, complete protein, vitamins-antioxidants (A, E, C), as well as energy sources, pre- and probiotics, minerals and trace elements, immune defense factors that favorably affect the state of the membranes of erythrocytes, myocytes and hepatocytes and increase not only the body's endurance, but also its metabolic functions, which is confirmed by the data of biochemical and morphological studies.
Keywords: sports' nutrition, protein mixture, mare's milk, endurance indicators, antioxidant activity, lipid peroxidation products, morphological changes
Согласно данным литературы, роль и режим питания являются неоспоримыми и ведущими факторами в повышении работоспособности, выносливости и в достижении высоких спортивных результатов у спортсменов [1-4].
Современный спорт и подготовка спортсменов высшей квалификации требуют не только использования научно обоснованных физических и психологических нагрузок, но и применения средств, повышающих адаптационные возможности и работоспособность спортсменов в период как соревнований, так и интенсивных тренировок [4, 5].
На данный момент одной из распространенных стратегий для оптимизации периода восстановления является использование специализированного спортивного питания [4, 6].
Новые подходы и принципы организации специализированного питания у спортсменов должны быть ориентированы не только на общее количество поступающих в организм белка, жира и углеводов, но и на качественное соотношение белковых, жировых и углеводных компонентов в суточном рационе, достаточное поступление с пищей витаминов, макро- и микроэлементов, а также факторов, повышающих защитные механизмы организма и усиливающих его энергетический статус [6, 7].
Учитывая вышеизложенное на сегодняшний день в спортивной медицине весьма актуальной представляется разработка отечественных средств алиментарной поддержки в виде специализированных пищевых продуктов, способствующих повышению работоспособности, выносливости, быстрому восстановлению организма спортсменов после физической нагрузки и в конечном итоге приводящих к высоким спортивным результатам [8, 9].
Благодаря введению в состав рациона питания спортсменов специализированных продуктов гораздо легче откорректировать питание, обеспечить организм необходимыми нутриентами с учетом энерготрат и метаболической потребности организма, снизив негативное влияние повышенных физических и психоэмоциональных нагрузок [10, 11].
Немаловажным фактором при создании продуктов спортивного питания являются национальные и этнические особенности питания спортсменов, использование традиционного сырья или продуктов, исторически известных своими лечебными и профилактическими характеристиками и традиционно применяемых в рационе питания того или иного народа [12].
Цель данной работы - разработка нового специализированного пищевого продукта на основе сухого кобыльего молока, а также оценка его эффективности на экспериментальной модели физической нагрузки.
В связи с этим задачи исследования включали научное обоснование разработки рецептуры продукта, оценку его влияния на показатели физической активности и выносливости крыс, а также состояние системы антиоксидантной защиты и процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ).
Материал и методы
В работе использовали физико-химические методы оценки как сырья, так и специализированного пищевого продукта на основе сухого кобыльего молока. Жирнокислотный состав продукта определяли согласно ГОСТ 32915-2014 «Молоко и молочная продукция. Определение жирнокислотного состава жировой фазы методом газовой хроматографии», аминокислотный состав -по ГОСТ 34132-2017 «Метод определения аминокислотного состава животного белка» и МВИ.МН-1363-200 «Метод определения аминокислот в продуктах питания с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии», витаминов - по ГОСТ EN 14122-2013 «Продукты пищевые. Определение витамина В1 с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии», ГОСТ EN 14663-2014 «Продукция пищевая. Определение витамина В6 (включая гликозилированные формы) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии», ГОСТ EN 15652-2015 «Продукты пищевые. Определение ниацина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии», минеральных веществ - по ГОСТ ISO 12081-2013 «Определение содержания кальция. Титри-метрический метод», ГОСТ 30178-96 «Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсичных элементов (железо, медь, цинк)».
Экспериментальные исследования были выполнены на белых крысах-самцах линии Вистар с исходной массой тела 207-226 г. Животных содержали при естественном световом режиме в стандартных условиях вивария Казахской академии питания по 5-6 особей в клетке размером 45x60 см и высотой 25 см. Площадь дна клеток составляла 2700 см2, что, согласно Санитарным правилам по устройству оборудования и содержания экспериментально-биологических клиник (вивариев) от 06.04.1973 № 1045-73 [ч. 3 (оборудование вивария и условия размещения животных), п. 3.3 - на 1 животное (крысу) при размещении в клетке необходима минимальная площадь дна 150 см2], позволило разместить максимально допустимое количество животных в клетке - 10. В помещении вивария поддерживали относительную влажность 50-65%, а также температуру воздуха 20-25 °С. Эксперименты проводили в летний период (июнь-июль).
Животных контрольной и опытной групп содержали на полусинтетическом рационе со свободным доступом к пище и воде. Базовый полусинтетический казеиновый рацион, согласно Методическим рекомендациям «Оценка безопасности наноматериалов» (утв. приказом Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 12.10.2007 № 280), из расчета на 100 г диеты включал: казеин - 20,0 г, крахмал - 63,0 г, масло подсолнечное -5,0 г, лярд - 5,0 г, солевую смесь - 4,0 г, смесь водорастворимых витаминов - 0,9 г, смесь жирорастворимых витаминов (масляный раствор витаминов А, Е, D, рыбий жир) - 0,1 мл и целлюлозу - 2,0 г, а также содержал 17,1 г белка, 10,3 г жира, 54,5 г углеводов. Калорийность рациона составляла 379 ккал.
Таблица 1. Рецептура специализированного продукта (из расчета на 100 г)
Таблица 2. Аминокислотный состав специализированного пищевого продукта на основе кобыльего молока
Table 2. Amino acid composition of a specialized sport product based on mare's milk
Животных держали на диете в течение 30 дней в целях адаптации к полусинтетическому рациону. По истечении данного срока крысы были разделены на 2 группы (опытную и контрольную), в каждой по 35 животных, и взяты в эксперимент с массой тела 269,8±25,2 г.
Животные опытной группы на фоне полусинтетического рациона дополнительно ежедневно получали по 10 г специализированного продукта. Крысы контрольной группы на фоне полусинтетического рациона ежедневно дополнительно получали раствор глюкозы в количестве, соответствующем по калорийности 10 г специализированного продукта (45 ккал).
Содержание животных и проведение экспериментов осуществляли в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей.
В течение всего эксперимента наблюдали за поедае-мостью корма и общим состоянием животных, каждые 7 дней взвешивали крыс. Общее состояние крыс было удовлетворительным; по внешнему виду, качеству шерстного покрова, поедаемости, поведению разницы между животными опытной и контрольной групп не выявлено.
Животных контрольной и опытной групп подвергали физической нагрузке - принудительному плаванию. Плавательный тест проводили каждые 7 дней на протяжении 21-дневного экспериментального периода в одно и то же время суток (с 10:00 до 13:00) с грузом, составляющим 10% массы тела животного.
Моделью физической нагрузки была выбрана методика принудительного плавания крыс до полного утомления [13]. Критерием полного утомления служили 3 безуспешные попытки крыс всплыть на поверхность либо отказ от таких попыток и опускание на дно ванны. О работоспособности животных судили по продолжительности плавания (в секундах). Температуру воды поддерживали в пределах 29-30 °С.
Для оценки сохранения эффекта приема специализированного продукта часть животных из опытной и контрольной групп (п=15) после окончания эксперимента в течение 7 дней получала только базовый полусинтетический рацион, что завершалось плаванием на 7-е сутки эксперимента.
После завершения последнего плавательного теста всех животных выводили из эксперимента одномоментной декапитацией под легким эфирным наркозом. У декапитированных животных брали кровь, извлекали внутренние органы, после чего в сыворотке крови, гомо-генатах бедренной мышцы определяли уровень молочной и пировиноградной кислот спектрофотометрически [14]. В крови крыс определяли содержание гемоглобина, эритроцитов и гематокрит в соответствии с общепринятыми лабораторными методами исследования.
Мембраны эритроцитов получали по методу А.М. Ка-зенова и соавт. [15]. Микросомы выделяли по методу T. Omura и R.J. Sato (1964) [16]. Митохондриальную фракцию бедренных мышц получали путем центрифугирования гомогената при 1000g с последующим центрифугированием супернатанта при 10 000g в течение 20 мин.
Аминокислота Amino acid Содержание, мг в 100 г продукта Content, mg per 100 g of product
Незаменимые аминокислоты Essential amino acids 9022,0
Валин/Valine 1059,0
Изолейцин/Isoleucine 1129,0
Лейцин/Leucine 1684,0
Лизин/Lysine 1676,0
Метионин /Methionine 564,0
Треонин/Threonine 980,0
Триптофан/Tryptophan 299,0
Фенилаланин/Phenylalanine 1631,0
Заменимые аминокислоты Non-essential amino acids 11 345,0
Аланин/Alanin 984,0
Аргинин/Arginine 1027,0
Аспарагиновая кислота/Aspartic acid 1536,0
Гистидин/Histidine 539,0
Глицин/Glycine 366,0
Глутаминовая кислота/Glutamic acid 2954,0
Пролин/Proline 1434,0
Серин/Serine 1115,0
Тирозин/Tyrosine 1100,0
Цистин/Cystine 290,0
Итого/Total 20 367,0
Table 1. Recipe for a specialized sport product (per 100 g)
Ингредиен т/Ingredien t Количество Quantity
Сухое молоко кобылье, г/Powdered mare's milk, g 55,0
Сухие сливки растительные, г/Dry vegetable cream, g 30,0
Сухое обезжиренное молоко, г/Skimmed milk powder, g 13,0
Сухие бактериальные культуры (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Bifidobacterium bifidum в соотношении 1:1:1), г Dry bacterial cultures (Lactobaccillus acidophilus, Streptococcus lactis, Bifidobacterium bifidum in a ratio of 1:1:1), g 0,4
Сухие зародыши пшеницы, г/Dry wheat germ, g 0,4
Сухие плоды облепихи, г/Dry fruits of sea buckthorn, g 0,5
Инулин, г/Inulin, g 0,2
Витамины, мг/Vitamins, mg: Е (а-токоферола ацетат)/^ (a-tocopherol acetate) А (ретинола ацетат)/А (retinol acetate) С (аскорбиновая кислота)/С (ascorbic acid) фолиевая кислота/Folic acid РР (никотинамид)/РР (nicotinamide) 10,0 1,5 100,0 0,2 12,0
Макро- и микроэлементы, мг/ Minerals and trace elements, mg: селен (селенит натрия)/Selenium (Sodium selenite) магний (сульфат)/Magnesium (sulfate) цинк (сульфат)//^ (sulfate) железо (лактат)/Iron (lactate) 0,05 40-42 8-9 7-8
Фукоидан, мг/Fucoidan, mg 150
Осадок дважды промывали в среде гомогенизации, центрифугировали при 10 000g в течение 20 мин и использовали в качестве митохондриальной фракции.
Об интенсивности процессов ПОЛ в микросомах печени, митохондриях бедренных мышц и мембранах эритроцитов судили по содержанию ТБК-активных продуктов. Концентрацию малонового диальдегида (МДА) определяли по интенсивности развивающейся окраски в результате взаимодействия с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) [17]. Содержание диеновых конъюгатов (ДК) оценивали по методу В.Б. Гаврилова, М.И. Мишкорудной (1983) [18]. Активность антиоксидантных ферментов (каталазы и супероксиддисмутазы) определяли с использованием коммерческих наборов (Sigma, США). Содержание белка в мембранах эритроцитов, митохон-дриальной и микросомальной фракциях определяли по O. Lowry (1954).
Для гистологических исследований кусочки ткани печени, сердца и бедренной мышцы животных фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,2-7,4. Обезвоживание кусочков тканей осуществляли проводкой через ряд растворов изопропанола восходящей крепости с последующей заливкой в парафин. Готовили срезы толщиной 3-5 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином. Просматривали и фотографировали полученные гистологические препараты при помощи светового микроскопа Leica DMLS с цифровой камерой Leica DFS 280 (Leica Biosystems GmbH, ФРГ). Полученные фотографии обрабатывали на компьютере с использованием процессора Pentium 4.
Полученные результаты статистически обрабатывали с использованием программы Microsoft Excel, рассчитывая среднюю арифметическую параметра, среднее квадратическое отклонение и ошибку средней арифметической. Для сравнения использовали f-критерий Стьюдента, различия считали достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение
Медико-биологическое обоснование к разработке продукта спортивного питания на основе кобыльего молока
В спортивном питании особая роль отводится белковому компоненту, который должен иметь хорошую
Таблица 3. Аминокислотный скор специализированного пищевого продукта в сравнении со шкалой идеального белка, предложенного комитетом Продовольственной и сельскохозяйственной организации Организации Объединенных Наций (2007)
Table 3. Amino acid score of the specialized food compared to the ideal protein scale proposed by the Food and Agriculture Organization the World Trade Organization committee (2007)
Незаменимая аминокислота An essential amino acid Аминокислотный скор, % Amino acid score, %
Валин/Valine 103,0
Изолейцин/Isoleucine 147,4
Лейцин/Leucine 117,1
Лизин/Lysine 148,3
Метионин + цистин/ Methionine + Cystine 118,2
Треонин/Threonine 119,2
Триптофан/Tryptophan 145,5
Фенилаланин + тирозин/ Phenylalanine + Tyrosine 221,5
усвояемость и биодоступность, а также высокую метаболическую эффективность. В связи с этим особый интерес представляют низкомолекулярные сывороточные белки, изоляты, пептиды и свободные аминокислоты, в частности аминокислоты с разветвленной цепью, способные обеспечить организм энергией во время тренировок [19].
В последнее время ведется активный поиск новых источников белка, отличающихся не только высокой биологической ценностью и доступностью, но и определенными физиолого-биохимическими характеристиками. К такому виду сырья сегодня можно отнести сухое кобылье молоко, обладающее высокой пищевой и биологической ценностью, а также максимальной усвояемостью [20]. В кобыльем молоке белок на 60% представлен низкомолекулярными белками (лактоальбуминами и лактоглобулинами), свободными аминокислотами и пептидами, в молоке содержится более 40 биологически активных ингредиентов, включая витамины А, С, В1, В2, В6, В12, лизоцим, макро- и микроэлементы, а также биодоступный кальций, до половины которого входит в состав белков и хорошо усваивается организмом. Кроме того, в молоке кобыл содержатся кобальт, медь, марганец и другие макро- и микроэлементы [21-23].
Таблица 4. Относительная масса органов крыс в контрольной и опытной группах, % (М±т)
Table 4. Relative mass of rat organs in the control and experimental groups, % (M±m)
Орган животного/Animal organ Контрольная группа/Control group Опытная группа/Experimental group
Печень/Liver 3,88±0,26 3,99±0,27
Сердце/Heart 0,47±0,05 0,58±0,07
Почка Kidney 0,46±0,06 0,45±0,05
Легкое/Lung 0,55±0,06 0,75±0,06
Бедренная мышца/Femoral muscle 0,98±0,06 1,30±0,09*
П р и м е ч а н и е. * - статистически значимое отличие (р<0,05) от показателя животных контрольной группы.
N o t e. * - statistically significant difference (p<0.05) from the index of control animals.
330 320 310 300 290 280 270 260 250 240
309,7
295,4,---']
280,9
270,5 _ - "*
[269,8
[269,8 270,5 271,2 272 272,4
0
21
28
7 14
День/Day
— Контроль/Control group ---- Опытная группа/Experimental group
Рис. 1. Изменение массы тела крыс в контрольной и опытной группах (M±m)
Fig. 1. Change in body weight of rats in the control and experimental groups (M±m)
В липидах кобыльего молока по сравнению с коровьим найдено больше моно- и полиненасыщенных жирных кислот. Так, содержание полиненасыщенных жирных кислот (линолевая, линоленовая и арахидоновая) в липидах кобыльего молока составляет 11,3%, тогда как в коровьем молоке - только 2,3% [24]. Следовательно, эссенциальных жирных кислот в липидах кобыльего молока содержится почти в 5 раз больше, чем в коровьем.
Одним из главных факторов, обеспечивающих уникальность состава кобыльего молока, является высокий уровень лизоцима и низкомолекулярных пептидов [25].
На основе кобыльего молока с включением ряда пищевых ингредиентов, в том числе витаминов, макро-и микроэлементов, был разработан специализированный продукт для спортивного питания, свойства которого были оценены в эксперименте на животных. Рецептура специализированного пищевого продукта представлена в табл. 1.
В продукте содержится 20,7 г белка, 15,0 г жиров, 58,0 г углеводов; калорийность продукта составляет в среднем 450 ккал/100 г.
Жирнокислотный состав специализированного продукта на 20,9% представлен мононенасыщенными жирными кислотами, на 23,0% - полиненасыщенными и на 56,0% - насыщенными жирными кислотами. Со-
держание ю-3 и ю-6 полиненасыщенных жирных кислот в специализированном продукте - соответственно 66,17 и 70,95 мг%, транс-изомеры жирных кислот отсутствовали. Аминокислотный состав продукта представлен в табл. 2.
Данные об аминокислотном составе специализированного продукта могут свидетельствовать о его благоприятном влиянии на работоспособность и физические возможности организма в процессе физической нагрузки. Так, присутствующие в продукте глицин, серин, цистеин, аланин и аспартат превращаются в пируват, который, окисляясь пируватдегидрогеназой, вступает в реакции цикла Кребса. Лизин и триптофан окисляются до глутарил-коэнзима А и ацетил-коэнзима А, в цитозоле мышечных клеток такие аминокислоты превращаются в сукцинил-коэнзим А, являющийся непосредственным субстратом цикла Кребса [26].
Как известно, наиболее быстро в энергетический обмен вступают аминокислоты с разветвленной цепью (валин, лейцин, изолейцин). Показано, что у спортсменов-единоборцев в течение тренировочного периода разветвленные аминокислоты, получаемые дополнительно к основному рациону, повышали работоспособность и интенсивность обмена, способствовали увеличению мышечной массы, повышению уровня гемоглобина в эритроцитах, что свидетельствовало об их быстром активном участии в энергетическом обмене [27].
Для оценки полноценности белка специализированного продукта нами был оценен аминокислотной скор, рассчитываемый путем отношения содержания незаменимых аминокислот в исследуемом белке к его количеству в эталонном белке, предложенном Комитетом ФАО/ВОЗ (табл. 3).
Согласно представленным в табл. 4 данным, можно сделать вывод, что белок специализированного продукта на основе сухого кобыльего молока полноценный, содержит все незаменимые аминокислоты, а также имеет высокий аминокислотный скор.
В 100 г продукта содержится 14-15 мг а-токоферил-ацетата, 1,5-1,7 мг ретинилацетата, 120-130 мг аскорбиновой кислоты, 13-14 мг ниацина, 220 мкг фолиевой кислоты. Кроме того, в продукте присутствует порядка 430-450 мг кальция, около 40,0-42,0 мг магния, 9,010,0 мг цинка; 7,0-8,0 мг железа и 50 мкг селена. Нали-
Таблица 5. Показатели выносливости животных контрольной и опытной групп (время плавания крыс с грузом, с) (M±m) Table 5. Indicators of endurance of animals in the control and experimental groups (swimming time of rats with a load, s) (M±m)
Период эксперимента Experiment period Контрольная группа Control group Опытная группа Experimental group
Исходные данные/Initial data 85,9±7,3 91,8±6,5
21-й день/Day 21 147,3±10,2* 296,7±16,4*, **
28-й день (через 7 сут кормления базовым полусинтетическим рационом) Day 28 (after 7 days of feeding basic semi-synthetic diet) 132,1±11,3* 275,6±16,6*, **
П р и м е ч а н и е. Здесь и в табл. 6-9: * - статистически значимое отличие (р<0,05) от исходных показателей; ** - статистически значимое отличие (р<0,05) от показателя животных контрольной группы.
N o t e. Here and in tables 6-9: * - statistically significant difference (p<0.05) from initial index; ** - statistically significant difference (p<0.05) from the index of control animals.
Таблица 6. Изменение показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности в мембранах эритроцитов у экспериментальных животных на фоне физической нагрузки (M±m)
Table 6. Changes in lipid peroxidation and antioxidant activity in erythrocyte membranes in experimental animals during exercise (M±m)
Показатель Исходные данные Данные на 21-е сутки/ßata on the 21st day
Index Initial data контрольная группа control group опытная группа experimental group
Малоновый диальдегид, нмоль/мл Malonic dialdeyde, nmol/ml 0,76±0,10 2,50±0,30* 1,12±0,18**
Диеновые конъюгаты, нмоль/мг белка Diene conjugates, nmol/mg protein 0,56±0,03 1,26±0,20* 1,05±0,15*
Супероксиддисмутаза, нмоль/мг белка Superoxide dismutase, nmol/mg protein 29,31±1,62 18,35±1,40* 23,51 ±2,20
Каталаза, нмоль/мг белка Catalase, nmol/mg protein 19,52±1,44 11,91±1,30* 15,41 ±1,32
чие вышеуказанных ингредиентов в специализированном продукте связано не только с присутствием их в используемом сырье, но и с дополнительным обогащением специализированного продукта витаминами, макро-и микроэлементами.
Включение в состав продукта сухих культур молочнокислых и бифидобактерий (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus lactis, Bifidobacterium bifidum), взятых в соотношении 1:1:1, было обусловлено целью нормализации функционирования желудочно-кишечного тракта и повышения защитных функций организма.
Облепиха, присутствующая в продукте, богата витаминами С и Е, провитамином А, а также содержит фла-воноиды, серотонин, органические кислоты (яблочная, щавелевая и винная), минеральные вещества (калий, магний, фосфор, железо), дубильные вещества, пектины, сахара (глюкоза и фруктоза - 3-6%) [28].
Инулин, включенный в состав продукта, относится к пребиотикам, стимулирующим активный рост полезных микроорганизмов, обеспечивающим нормальное функционирование желудочно-кишечного тракта и благоприятно влияющим на липидный и углеводный метаболизм [29].
Витамины-антиоксиданты (А, Е, С), а также селен защищают клеточные структуры от разрушения свободными радикалами, способствуют укреплению им-
мунитета, повышают адаптационные возможности организма и устойчивость к стрессам. Фолиевая кислота в комбинации с железом направлена на регуляцию процессов гемопоэза [30].
Важное значение имеет введение в специализированный продукт фукоидана - сульфатированного полисахарида, обладающего противоопухолевыми, радиопротекторными, антитромбиновыми и противовоспалительными свойствами [31].
В сухих зародышах пшеницы высокое содержание белка, включая незаменимые аминокислоты, жиров, моно- и дисахаридов, витамина Е и некоторых витаминов группы В, а также макро- и микроэлементов, включая фосфор, калий, медь, кобальт, селен, а уровень железа составляет 10 мг% [32, 33].
Используемая комбинация витаминов и минеральных веществ в продукте была направлена в первую очередь на нормализацию обменных процессов, в том числе иммунитета, а также на повышение физической активности и работоспособности.
Таким образом, разработан специализированный продукт, включающий сухое кобылье и обезжиренное коровье молоко, растительные сливки, измельченные плоды облепихи, сухие зародыши пшеницы, витамины, макро- и микроэлементы, инулин, сухую бактериальную закваску и фукоидан, который может быть исполь-
Таблица 7. Изменение показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности в микросомах печени у экспериментальных животных (M±m)
Table 7. Change in lipid peroxidation and antioxidant activity in liver microsomes in experimental animals (M±m)
Показатель Исходные данные Данные на 21-е сутки/ßata on the 21st day
Index Initial data контрольная группа/control group опытная группа/experimental group
Малоновый диальдегид, нмоль/мл Malonic dialdehyde, nmol/ml 0,26±0,03 0,40±0,02* 0,24±0,01 **
Диеновые конъюгаты, нмоль/мг белка Diene conjugates, nmol/mg protein 0,68±0,12 1,31 ±0,22 0,90±0,11
Супероксиддисмутаза, нмоль/мг белка Superoxide dismutase, nmol/mg protein 23,45±1,92 20,54±1,55 26,50±2,12
Каталаза, нмоль/мг белка Catalase, nmol/mg protein 12,46±1,13 8,71 ±0,92 15,20±1,43**
Таблица 8. Изменение показателей перекисного окисления липидов и активности антиоксидантных ферментов в митохондриальной фракции бедренной мышцы крыс (M±m)
Table 8. Changes in lipid peroxidation indices and the activity of antioxidant enzymes in the mitochondrial fraction of the femoral muscle of rats (M±m)
Показатель Index Исходные данные Initial data Данные на 21-е сутки/ßata on the 21st day
контрольная группа control group опытная группа experimental group
Малоновый диальдегид, нмоль/мл Malonic dialdehyde, nmol/ml 0,16±0,02 0,47±0,05* 0,25±0,02**
Диеновые конъюгаты, нмоль/мг белка Diene conjugates, nmol/mg protein 0,28±0,04 0,76±0,08* 0,45±0,05**
Супероксиддисмутаза, нмоль/мг белка Superoxide dismutase, nmol/mg protein 18,32±1,50 16,44±1,35 17,00±1,52
Каталаза, нмоль/мг белка Catalase, nmol/mg protein 8,42±1,00 6,82±0,92 7,23±0,81
зован в виде сухой смеси, а также при производстве кисломолочных продуктов, коктейлей, при выпечке хлебобулочных и кондитерских изделий и других продуктов массового потребления и специализированного назначения.
Включение вышеуказанных ингредиентов в продукт для спортивного питания на основе кобыльего молока позволило создать специализированный продукт с повышенной пищевой и биологической ценностью, а также направленными профилактическими свойствами, эффективность которой была оценена на модели физической нагрузки в эксперименте.
Экспериментальная оценка свойств специализированного пищевого продукта на модели физической нагрузки
Животных контрольной и опытной групп содержали на полусинтетическом рационе со свободным доступом к пище и воде. Ежедневная поедаемость рациона, дополнительно обогащенного раствором глюкозы, для крыс контрольной группы составляла 25-27 г, а для крыс опытной группы средняя поедаемость корма была несколько выше - в среднем 32-35 г. Животные контрольной и опытной групп ежедневно потребляли в среднем 30-32 мл воды. Начиная с 7-го дня эксперимента на
фоне физической нагрузки отмечалось повышение потребления воды в среднем на 10-12% животными как контрольной, так и в опытной групп
Динамика массы тела крыс контрольной и опытной групп с 1-го по 28-й день эксперимента приведена на рис. 1. По истечении 28-дневного срока эксперимента масса тела крыс в опытной группе по сравнению с показателем животных контрольной группы увеличилась статистически значимо (р<0,05) на 21-е и 28-е сутки эксперимента.
Относительная масса органов животных представлена в табл. 4.
Как видно из представленных в табл. 4 данных, у крыс опытной группы отмечалось увеличение относительной массы сердца, легкого и бедренной мышцы соответственно на 23,4; 36,4 и 32,6% по сравнению с относительной массой органов у животных контрольной группы, однако статистически значимым было только изменение относительной массы бедренной мышцы.
Оценка показателей выносливости крыс в контрольной и опытной группах при проведении плавательного теста приведена в табл. 5.
Как видно из представленных в табл. 5 данных, исходные результаты оценки выносливости у опытных и контрольных крыс были одинаковыми. Кормление животных опытной группы специализированным белковым продуктом в течение 21 дня привело к статистически
Таблица 9. Содержание пировиноградной и молочной кислот в тканях крыс после физической нагрузки Table 9. The content of pyruvic and lactic acid in the tissues of rats after exercise
Показатель Index Исходные данные Initial data Данные на 21-е сутки/ßata on the 21st day
контрольная группа control group опытная группа experimental group
Пировиноградная кислота в сыворотке крови, ммоль/л Serum pyruvic acid, mmol/L 0,23±0,04 0,38±0,04 0,28±0,04
Пировиноградная кислота в бедренной мышце, мкмоль/г ткани Pyruvic acid in the femoral muscle, mcmol/g tissue 0,28±0,03 0,45±0,05* 0,33±0,02
Молочная кислота в сыворотке крови, ммоль/л Serum lactic acid, mmol/L 2,02±0,16 4,21±0,34* 2,50±0,33**
Молочная кислота в бедренной мышце, мкмоль/г ткани Lactic acid in the thigh muscle, mcmol/g tissue 1,26±0,13 1,86±0,14* 1,40±0,08 **
значимому повышению выносливости крыс, на что указывает увеличение времени плавания с грузом. Так, если в опытной группе, по сравнению с исходными данными, время плавания увеличилось на 223%, то у крыс контрольной группы - только на 71,4%, т.е. в 3,1 раза ниже, чем в опытной группе.
Для оценки длительности эффекта приема продукта на выносливость часть животных из опытной и контрольной групп в течение 7 дней получала полусинтетический рацион и подвергалась вынужденному плаванию по той же схеме. Специализированный продукт был исключен из рациона крыс опытной группы, а калорийность рациона контрольных крыс была снижена на 45 ккал. По истечении 7 дней у крыс опытной группы не было выявлено значимых изменений в показателях выносливости, время плавания осталось практически на том же уровне (см. табл. 5). Аналогичная картина отмечена также и для крыс контрольной группы.
Таким образом, потребление специализированного продукта в течение 21 дня положительно сказалось на физической выносливости крыс, которая сохранялась и в последующие 7 дней без получения специализированного продукта, что было подтверждено данными по времени плавания животных с грузом.
Изменение антиоксидантного статуса в мембранах эритроцитов, микросомах печени и митохондриях бедренных мышц крыс на фоне приема специализированного пищевого продукта
Известно, что в ответ на усиление процессов ПОЛ в организме происходит мобилизация эндогенных анти-оксидантных резервов, включая активацию ферментов антиоксидантной системы и использование внутренних антиоксидантных источников, включая витамины, флавоноиды и др. [34].
Как показали результаты проведенных экспериментальных исследований, потребление крысами в течение 21 дня белковой смеси на основе кобыльего молока, обогащенной витаминами-антиоксидантами и другими биологически активными ингредиентами, сопровождалось положительной динамикой в изменении показателей системы антиоксидантной защиты.
Так, по отношению к исходным данным в мембранах эритроцитов контрольной группы крыс отмечено статистически значимое увеличение уровня МДА и ДК на 229 и 125,3%, а также снижение активности супе-роксиддисмутазы и каталазы на 37,4 и 39,0% соответственно (табл. 6). Прием специализированного продукта на основе кобыльего молока, по сравнению с данными в контрольной группе, на фоне физической нагрузки сопровождался снижением в мембранах эритроцитов уровня МДА на 55,2%. Активность супероксиддисму-тазы и каталазы в мембранах эритроцитов у крыс опытной группы статистически значимо не отличалась от исходных показателей.
Рис. 2. Гистологическое строение сердечной ткани крыс контрольной группы на фоне физической нагрузки
Окраска гематоксилином и эозином, х400.
Fig. 2. Histological structure of the myocardium of rats in the control group during exercise.
Coloring hematoxylin and eosin, x400.
Изменение показателей ПОЛ и активности ферментов антиоксидантной защиты в микросомах печени приведено в табл. 7.
Как видно из представленных данных, в микросомаль-ной фракции печени крыс контрольной группы по отношению к исходным данным отмечено статистически значимое увеличение уровня МДА на 53,8% и ДК в 1,9 раза. На фоне приема специализированного продукта по сравнению с контролем отмечено статистически значимое снижение уровня МДА на 40,0%, а также повышение активности каталазы на 59,6%.
Изменения показателей антиоксидантного статуса в митохондриальной фракции бедренной мышцы были подобны сдвигам параметров в микросомальной фракции печени и мембран эритроцитов (табл. 8). Так, уровни МДА и ДК увеличились в контрольной группе по срав-
Рис. 3. Гистологическое строение сердечной ткани крыс опытной группы на фоне физической нагрузки. Наблюдается незначительный отек мышечных клеток
Окраска гематоксилином и эозином, х210.
Fig. 3. Histological structure of the myocardium of rats in the experimental group during exercise. There is a slight swelling of the muscle cells
Coloring hematoxylin and eosin, x210.
Рис. 4. Гистологическое строение печеночной ткани крыс контрольной группы на фоне физической нагрузки. Отмечены расширение синусоидов, двуядерные клетки
Окраска гематоксилином и эозином, x400.
Fig. 4. The histological picture of the liver tissue of the control group rats on the background of physical activity. Expansion of sinusoids, binuclear cells are noted
The staining is hematoxylin and eosin, x400.
нению с исходными данными в 2,9 и 2,7 раза соответственно. В опытной группе на фоне приема специализированного продукта и физической нагрузки по сравнению с контрольной группой отмечено снижение уровня МДА и ДК на 46,8 и 40,8% соответственно.
У животных контрольной группы по сравнению с исходными данными в сыворотке крови отмечалось накопление молочной кислоты - увеличение концентрации в 2,1 раза (табл. 9). В бедренных мышцах крыс, также
Рис. 5. Гистологическая картина печеночной ткани крыс опытной группы на фоне физической нагрузки. Между балками расположены синусоидные капилляры
Окраска гематоксилином и эозином, x210.
Fig. 5. Histological picture of the liver tissue of the experimental group during physical activity. Sinusoidal capillaries are located between the beams
Coloring hematoxylin and eosin, x210.
по отношению к исходным результатам, выявлено повышение уровня молочной и пировиноградной кислот соответственно на 47,6 и 60,7%.
Прием специализированного продукта благоприятно сказался на содержании лактата и пирувата как в крови, так и в мышечной ткани (см. табл. 9). Так, по сравнению с контрольной группой, у крыс опытной группы отмечена более низкая концентрация молочной кислоты в сыворотке крови (на 40,6%) и в бедренной мышце (на 24,7%). Содержание пировиноградной кислоты не отличалось от исходных значений.
Известно, что концентрация молочной кислоты в крови отражает интенсивность анаэробных процессов (в основном гликолиза) в наиболее работающих органах, в данном случае - в мышцах экспериментальных животных, и отражает степень тренированности [35]. В нашем эксперименте установлено, что уровень лак-тата в крови крыс с моделью физического переутомления был выше по сравнению с исходными показателями крыс, не получавших физической нагрузки. Потребление специализированного продукта, богатого энергетическими источниками и витаминами, благоприятно сказалось на энергетическом статусе и положительно повлияло на состояние процессов антиоксидантной защиты.
Известно, чем выше тренированность спортсмена, тем ниже уровень лактата при стандартной нагрузке и выше - при максимальной физической нагрузке. Таким образом, уровень молочной кислоты в крови при физической нагрузке помогает определить тренированность спортсменов, т.е. гликолитическую способность их мышц и эффективность выполненных тренировочных программ [36].
На фоне приема специализированного продукта у крыс опытной группы по сравнению с контрольными животными отмечалось повышение в крови содержания гемоглобина, эритроцитов и гематокрита соответственно на 12,9; 7,4 и 3,2%, не достигающее, однако, уровня статистической значимости.
Выявленные биохимические изменения в органах и тканях не могли не сказаться на изменениях в морфологической картине печеночной и сердечной ткани, что представлено на рис. 2-5.
В результате гистологических исследований миокарда крыс контрольной группы выявлены морфологические изменения мышечных волокон, которые были разделены узкими межклеточными пространствами. Просветы кровеносных капилляров были расширены. В результате деструкции эндотелия в участках отека были видны очаговые кровоизлияния. Кровеносные капилляры располагались вдоль мышечных волокон. Эндотелиальные клетки капилляров содержали ядра удлиненной формы. В центральной части мышечных клеток располагались 1-2 базофильных ядра с крупными ядрышками Физическая нагрузка способствовала истощению энергетических запасов в сердечной мышце, отмечались отек гиалоплазмы, частичная фрагментация и лизис миофи-брилл (см. рис. 2).
Морфологические исследования сердечной ткани крыс опытной группы, получавших на фоне полусинтетического рациона и физической нагрузки специализированный продукт на основе кобыльего молока, показали, что на отдельных участках ткани были обнаружены небольшие расширения интерстициального пространства, кровеносные капилляры были местами полнокровны, мышечные волокна были слегка извилисты (см. рис. 3). Отмечалось также повышение компенсаторно-приспособительных процессов и уменьшение деструктивных изменений органелл в кардиомиоцитах сердечной мышцы, менее выраженными были явления межклеточного отека по сравнению с контрольной группой. Оптимальное сочетание 2 факторов: правильного сбалансированного питания и мышечной нагрузки -способствовало повышению выносливости сердечной мышцы, обеспечивая выполнение ею достаточно высокой функциональной нагрузки.
При оценке гистологической картины печеночной ткани крыс контрольной группы отмечено расширение синусоидного пространства, гепатоциты были много-и одноядерные, обнаружены очаги с вакуолизирован-ными гепатоцитами, сморщенной и зернистой цитоплазмой, а также исчезновение или редукция гранул гликогена (см. рис. 4).
Морфологическая оценка печеночной ткани крыс опытной группы свидетельствовала об отсутствии в печени признаков воспалительной инфильтрации и фиброза, дольки были отделены друг от друга прослойками рыхлой соединительной ткани, междольковая соединительная ткань была развита слабо. Паренхима печени была образована классическими печеночными
дольками, состоящими из радиально ориентированных к центральной вене печеночных балок. Желчные канальцы на периферии долек были покрыты однослойным кубическим эпителием, образуя междольковый желчный проток, между балками расположены синусо-идные капилляры, отмечались незначительные изменения в структуре ткани (см. рис. 5).
Заключение
Анализ полученных результатов свидетельствует о благоприятном влиянии специализированного продукта на основе сухого кобыльего молока на состояние анти-оксидантной системы, общее физиологическое состояние крыс, их выносливость по отношению к физической нагрузке, что в значительной степени связано с химическим составом смеси, набором пищевых ингредиентов, входящих в состав, и в первую очередь это касается повышенного в ней уровня не только полноценного белка, но и ви-таминов-антиоксидантов (А, Е, С), а также энергетических источников, пре- и пробиотиков, макро- и микроэлементов, факторов иммунной защиты, благоприятно влияющих на состояние мембран эритроцитов, миоцитов и гепатоцитов и повышающих не только выносливость организма, но и его функциональные возможности, что подтверждено данными биохимических и морфологических исследований. Специализированный продукт на фоне полусинтетического рациона способствовал развитию компенсаторно-приспособительных процессов в организме, а также энергетически обеспечиваемых функциональных возможностей, что не могло не сказаться на повышении выносливости крыс к физическим нагрузкам.
Сведения об авторах
Синявский Юрий Александрович (Yuriy A. Sinyavskiy) - доктор биологических наук, профессор, руководитель лаборатории пищевых биотехнологий и специализированных продуктов питания Казахской академии питания (Алматы, Республика Казахстан) E-mail: sinyavskiy@list.ru https://orcid.org/0000-0002-8006-9942
Сарсембаев Хусейн Самир (Khussein Samir Sarsembayev) - докторант Алматинского технологического университета (Алматы, Республика Казахстан) E-mail: husein.a14@gmail.com https://orcid.org/0000-0003-0698-3143
Литература
1. Beck K.L., Thomson J.S., Swift R.J., Hurst P.R. Role of nutrition 4. in performance enhancement and postexercise recovery // Open Access J. Sports Med. 2015. Vol. 6. P. 259-267. DOI: https://doi. org/10.2147/OAJSM.S33605
2. Burke L.M., Meyer N.L., Pearce J. National nutritional programs for the 2012 London Olympic Games: a systematic approach by three different countries // Nestle Nutr. Inst. Workshop Ser. 2013. 5. Vol. 76. P. 103-120. DOI: https://doi.org/10.1159/000350263
3. Kreider R.B., Wilborn C.D., Taylor L. et al. ISSN exercise & sport 6. nutrition review: research & recommendations // J. Int. Soc. Sports Nutr. 2010. Vol. 7. P. 7-43. DOI: https://doi.org/10.1186/1550-2783-7-7
Лавриненко С.В., Выборная К.В., Кобелькова И.В., Соколов А.И., Жукова Л.А., Клочкова С.В. и др. Использование специализированных продуктов для питания спортсменов в подготовительном периоде спортивного цикла // Вопросы питания. 2017. Т. 86, № 4. С. 99-103. DOI: https://doi. org/10.24411/0042-8833-2017-00065
Заборова В.А. Энергообеспечение и питание в спорте. Москва : Физическая культура, 2011. 107 с. Shirato M., Tsuchiya Y., Sato T. et al. Effects of combined p-hydroxy-p-methylbutyrate (HMB) and whey protein ingestion on symptoms of eccentric exercise-induced muscle damage // J. Int. Soc. Sports Nutr. 2016. Vol. 13. P. 7-12. DOI: https://doi.org/10.1186/s12970-016-0119-x
7. Burke L., Cox G. The Complete Guide to Food for Sports Performance. Peak Nutrition for Your Sport. Australia : Allen and Unwin,
2010. 545 р.
8. Гаврилова Н.Б., Щетинин М.П., Молибога Е.А. Современное состояние и перспективы развития производства специализированных продуктов для питания спортсменов // Вопросы питания. 2017. Т. 86, № 2. С. 108-114. DOI: https:// doi.org/10.24411/0042-8833-2017-00039
9. Трофимов И.Е. Исследование и разработка технологии бел-ково-углеводного кисломолочного продукта для специализированного питания // Вестник ОмГАУ. Технические науки. 2016. № 1 (21). С. 235-242.
10. Воробьева В.М., Шатнюк Л.Н., Воробьева И.С., Михеева Г.А., Трушина Э.Н., Зорина Е.Е. и др Классификация и характеристика специализированных продуктов для питания спортсменов // Вопросы питания. 2010. Т. 79, № 6. С. 64-68.
11. Valenta R., Dorofeeva Yu.A. Sport nutrition: the role of macronu-trients and minerals in endurance exercises // Foods Raw Mater. 2018. Vol. 6, N 2. Р. 403-412. DOI: https://doi.org/10.21603/2308-4057-2018-2-403-412
12. Зилова И.С., Никитюк Д.Б. Анализ специализированных пищевых продуктов, предназначенных для питания спортсменов (исследования 2007-2010 гг.) // Вопросы питания.
2011. Т. 80, № 2. С. 71-75.
13. Волчегорский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.Л., Цей-ликман В.Э. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. Челябинск : ЧГПУ, 2000. 112 с.
14. Методы биохимических исследований / под ред. М.И. Прохорова. Ленинград, 1982. 272 с.
15. Казенов А.М., Маслова М.Н., Шалабодов А.Д. Исследование активности Na/K-АТФазы в эритроцитах млекопитающих // Биохимия. 1984. Т. 49, № 7. С. 1089-1095.
16. Omura T., Sato R. The carbon monoxide-binding pigment of liver microsomes // J. Biol. Chem. 1964. Vol. 239, N 7. Р. 2370-2378.
17. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью ТБК // Современные методы в биохимии. Москва : Медицина, 1977. С. 66-68.
18. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометри-ческое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лабораторное дело. 1983. № 3. P. 33-36.
19. Gleeson M. Immunological aspects of sport nutrition // Immunol. Cell Biol. 2016. Vol. 94, N 2. P. 117-123. DOI: https://doi. org/10.1038/icb.2015.109
20. JastrzQbska E., Wadas E., Daszkiewicz T., Pietrzak-Fiecko R. Nutritional value and health-promoting properties of mare's milk -a review // Czech J. Anim. Sci. 2017. Vol. 62, N 12. Р. 511-518. DOI: https://doi.org/10.17221/61/2016-CJAS
21. Markiewicz-K^szycka M., Wojtowski J., Czyzak-Runowska G., Kuczynska B., Puppel K., Krzyzewski J. et al. Concentration of selected fatty acids, fat-soluble vitamins and p-carotene in late lactation mares' milk // Int. Dairy J. 2014. Vol. 38. Р. 31-36. DOI: https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2014.04.003
22. Fotschki J., Szyc A.M., Laparra J.M., Markiewicz L.H., Wroblewska B. Immune-modulating properties of horse milk administered to mice sensitized to cow milk // J. Dairy Sci. 2016. Vol. 99, N 12. Р. 9395-9404. DOI: https://doi.org/10.3168/jds.2016-11499
23. Salimei E., Park Y.W. Mare Milk. Handbook of Milk of Non-Bovine Mammals. Hoboken, NJ : Wiley; Blackwell, 2017. Р. 369-375.
24. Sinyavskiy Yu.A., Yakunin A.V., Ibraimov Y.S., Barmak S.M. Perspectives of hydrolysates from mare's milk use in sport nutrition // Sporto Mokslas. 2017. Vol. 1 (87). Р. 38-44. DOI: https://doi. org/10.15823/sm.2017.6
25. Mazhitova A., Kulmyrzaev A. Physiologically functional components of mare's milk // MJEN (Manas Journal of Engineering). 2015. Vol. 3. P. 1-8.
26. Каркищенко Н.Н., Уйба В.В., Каркищенко В.Н., Шустов Е.Б., Котенко К.В., Люблинский С.Л. Очерки спортивной фармакологии. Т. 4. Векторы энергообеспечения. Санкт-Петербург : Айсинг, 2014. 296 с.
27. Трушина Э.Н., Выборнов В.Д., Ригер Н.А., Мустафина О.К., Солнцева Т.Н., Тимонин А.Н. и др. Эффективность использования аминоксилот с разветвленной цепью (ВСАА) в питании спортсменов-единоборцев // Вопросы питания. 2019. Т. 88, № 4. С. 48-56. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2019-10041
28. Lalit M.B., Venkatesh A.B., Naik S.N., Satya S., Bal L.M. Sea buckthorn berries: a potential source of valuable nutrients for nutraceuticals and cosmeceuticals // Food Res. Int. 2011. Vol. 44. Р. 1718-1727. DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodres.2011.03.002
29. Samanta A.K., Jayapal N., Senani S., Kolte A.P., Sridhar M. Prebiotic inulin: Useful dietary adjuncts to manipulate the livestock gut microflora // Braz. J. Microbiol. 2013. Vol. 44, N 1. Р. 1-14. DOI: https://doi.org/10.1590/S1517-83822013005000023
30. Chiang C.P., Wu Y.-H., Wu Y.-C., Chang J.Y.-F., Wang Y.-P., Sun A. Anemia, hematinic deficiencies, hyperhomocysteinemia, and serum gastric parietal cell antibody positivity in 884 patients with burning mouth syndrome // J. Formos. Med. Assoc. 2020. Vol. 119. P. 813-820. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jfma.2019.10.013
31. Oka Sh., Okabe M., Tsubura Sh., Mikami M., Imai A. Properties of fucoidans beneficial to oral healthcare // Odontology. 2020. Vol. 108, N 1. Р. 34-42. DOI: https://doi.org/10.1007/s10266-019-00437-3
32. Wang L., Ding Yu., Zhang X., Li Y., Wang R., Luo X. et al. Isolation of a novel calcium-binding peptide from wheat germ protein hydrolysates and the prediction for its mechanism of combination // Food Chem. 2018. Vol. 239. Р. 416-426. DOI: https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2017.06.090
33. Gili R.D., Penci M.C., Irigoyen M.R.T., Giner S.A., Ribotta P.D. Effect of wheat germ heat treatment by fluidised bed on the kinetics of lipase inactivation // Food Bioprocess Tech. 2018. Vol. 11. Р. 1002-1011. DOI: https://doi.org/10.1007/s11947-018-2069-6
34. Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Бизенкова М.Н. Общая характеристика источников образования свободных радикалов и антиоксидантных систем // Успехи современного естествознания. 2006. № 7. С. 37-41.
35. Messias L.H.D., Polisel E.E.C., Manchado-Gobatto F.B. Advances of the reverse lactate threshold test: non-invasive proposal based on heart rate and effect of previous cycling experience // PLoS One. 2018. Vol. 13. P. 19-23.
36. Yang W.-H., Park H., Grau M., Heine O. Decreased blood glucose and lactate: is a useful indicator of recovery ability in athletes? // Int. J. Environ. Res. Public Health. 2020. Vol. 17. P. 1-16. DOI: https://doi.org/10.3390/yerph17155470
References
Beck K.L., Thomson J.S., Swift R.J., Hurst P.R. Role of nutrition in performance enhancement and postexercise recovery. Open Access J Sports Med. 2015; 6: 259-67. DOI: https://doi.org/10.2147/ OAJSM.S33605
Burke L.M., Meyer N.L., Pearce J. National nutritional programs for the 2012 London Olympic Games: a systematic approach by three different countries. Nestle Nutr Inst Workshop Ser. 2013; 76: 103-20. DOI: https://doi.org/10.1159/000350263
Kreider R.B., Wilborn C.D., Taylor L., et al. ISSN exercise & sport nutrition review: research & recommendations. J Int Soc Sports Nutr. 2010; 7: 7-43. DOI: https://doi.org/10.1186/1550-2783-7-7
Lavrinenko S.V., Vybornaya K.V., Kobel'kova I.V., Sokolov A.I., Zhukova L.A., Klochkova S.V., et al. The feasibility of specialized products for nutrition of sportsmen in the preparatory period of the sports cycle. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2017;
1.
2.
4
86 (4): 99-103. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2017-00065 (in Russian)
5. Zaborova V.A. Energy supply and nutrition in sports. Moscow: Fizicheskaya kul'tura, 2011: 107 p. (in Russian)
6. Shirato M., Tsuchiya Y., Sato T., et al. Effects of combined p-hydroxy-p-methylbutyrate (HMB) and whey protein ingestion on symptoms of eccentric exercise-induced muscle damage. J Int Soc Sports Nutr. 2016; 13: 7-12. DOI: https://doi.org/10.1186/ s12970-016-0119-x
7. Burke L., Cox G. The Complete Guide to Food for Sports Performance. Peak Nutrition for Your Sport. Australia: Allen and Unwin, 2010: 545 p.
8. Gavrilova N.B., Shchetinin M.P., Moliboga E.A. Modern state and prospects of the development of production of specialized foodstuffs for athletes. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2017; 86 (2): 100-6. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2017-00039 (in Russian)
9. Trofimov I.E. Research and development of technology of protein-carbohydrate fermented milk product for specialized nutrition. Vestnik OmGAU. Tekhnicheskie nauki [Bulletin of OmGAU. Technical Science]. 2016; 1 (21): 235-42. (in Russian)
10. Vorob'eva V.M., Shatnyuk L.N., Vorob'eva I.S., Mikheeva G.A., Trushina E.N., Zorina E.E., et al. Classification and characterization of specialized foods for sportsmen nutrition. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2010; 79 (6): 64-8. (in Russian)
11. Valenta R., Dorofeeva Yu.A. Sport nutrition: the role of macro-nutrients and minerals in endurance exercises. Foods Raw Mater. 2018; 6 (2): 403-12. DOI: https://doi.org/10.21603/2308-4057-2018-2-403-412
12. Zilova I.S., Nikityuk D.B. Analyses of special foods for sportsmen (received for 2007-2010 years). Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2011; 80 (2): 71-5. (in Russian)
13. Volchegorsky I. A., Dolgushin 1.1., Kolesnikov O.L., Tseylikman V.E. Experimental modeling and laboratory assessment of the adaptive reactions of the body. Chelyabinsk: ChGPU, 2000: 112 p. (in Russian)
14. Methods of biochemical research. In: M.I. Prokhorov (ed.). Leningrad, 1982: 272 p.
15. Kazenov A.M., Maslova M.N., Shalabodov A.D. Study of Na/ K-ATPase activity in mammalian erythrocytes. Biokhimiya [Biochemistry]. 1984; 49 (7): 1089-95. (in Russian)
16. Omura T., Sato R. The carbon monoxide-binding pigment of liver microsomes. J Biol Chem. 1964; 239 (7): 2370-8.
17. Stal'naya I.D., Garishvili T.G. Method for the determination of malondialdehyde using TBA. In: Modern Methods in Biochemistry. Moscow: Meditsina, 1977: 66-8. (in Russian)
18. Gavrilov V.B., Mishkorudnaya M.I. Spectrophotometric assay of the blood plasma lipid hydroperoxides. Laboratornoe delo [Laboratory Work]. 1983; (3): 33-6. (in Russian)
19. Gleeson M. Immunological aspects of sport nutrition. Immunol Cell Biol. 2016; 94 (2): 117-23. DOI: https://doi.org/10.1038/ icb.2015.109
20. JastrzQbska E., Wadas E., Daszkiewicz T., Pietrzak-Fiecko R. Nutritional value and health-promoting properties of mare's milk -a review. Czech J Anim Sci. 2017; 62 (12): 511-8. DOI: https://doi. org/10.17221/61/2016-CJAS
21. Markiewicz-K^szycka M., Wojtowski J., Czyzak-Runowska G., Kuczynska B., Puppel K., Krzyzewski J., et al. Concentration of selected fatty acids, fat-soluble vitamins and p-carotene in late lactation mares' milk. Int Dairy J. 2014; 38: 31-6. DOI: https://doi. org/10.1016/j.idairyj.2014.04.003
22. Fotschki J., Szyc A.M., Laparra J.M., Markiewicz L.H., Wro-blewska B. Immune-modulating properties of horse milk administered to mice sensitized to cow milk. J Dairy Sci. 2016; 99 (12): 9395-404. DOI: https://doi.org/10.3168/jds.2016-11499
23. Salimei E., Park Y.W. Mare Milk. Handbook of Milk of Non-Bovine Mammals. Hoboken, NJ: Wiley; Blackwell, 2017: 36975.
24. Sinyavskiy Yu.A., Yakunin A.V., Ibraimov Y.S., Barmak S.M. Perspectives of hydrolysates from mare's milk use in sport nutrition. Sporto Mokslas. 2017; 1 (87): 38-44. DOI: https://doi.org/10.15823/ sm.2017.6
25. Mazhitova A., Kulmyrzaev A. Physiologically functional components of mare's milk. MJEN (Manas Journal of Engineering). 2015; 3: 1-8.
26. Karkishchenko N.N., Uyba VV., Karkishchenko V.N., Shustov E.B., Kotenko K.V., Lyublinsky S.L. Essays on sports pharmacology. Vol. 4. Vectors of energy supply. Saint Petersburg: Aysing, 2014: 296 p. (in Russian)
27. Trushina E.N., Vybornov V.D., Riger N.A., Mustafina O.K., Solntseva T.N., Timonin A.N., et al. The effectiveness of the use of branched-chain amino acid (BCAA) in the nutrition of combat athletes. Voprosy pitaniia [Problems of Nutrition]. 2019; 88 (4): 48-56. DOI: https://doi.org/10.24411/0042-8833-2019-10041 (in Russian)
28. Lalit M.B., Venkatesh A.B., Naik S.N., Satya S., Bal L.M. Sea buckthorn berries: a potential source of valuable nutrients for nutraceuticals and cosmeceuticals. Food Res Int. 2011; 44: 1718-27. DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodres.2011.03.002
29. Samanta A.K., Jayapal N., Senani S., Kolte A.P., Sridhar M. Prebi-otic inulin: Useful dietary adjuncts to manipulate the livestock gut microflora. Braz J Microbiol. 2013; 44 (1): 1-14. DOI: https://doi. org/10.1590/S1517-83822013005000023
30. Chiang C.P., Wu Y.-H., Wu Y.-C., Chang J.Y.-F., Wang Y.-P., Sun A. Anemia, hematinic deficiencies, hyperhomocysteinemia, and serum gastric parietal cell antibody positivity in 884 patients with burning mouth syndrome. J Formos Med Assoc. 2020; 119: 813-20. DOI: https://doi.org/10.1016/jjfma.2019.10.013
31. Oka Sh., Okabe M., Tsubura Sh., Mikami M., Imai A. Properties of fucoidans beneficial to oral healthcare. Odontology. 2020; 108 (1): 34-42. DOI: https://doi.org/10.1007/s10266-019-00437-3
32. Wang L., Ding Yu., Zhang X., Li Y., Wang R., Luo X., et al. Isolation of a novel calcium-binding peptide from wheat germ protein hydrolysates and the prediction for its mechanism of combination. Food Chem. 2018; 239: 416-26. DOI: https://doi.org/10.1016/j. foodchem.2017.06.090
33. Gili R.D., Penci M.C., Irigoyen M.R.T., Giner S.A., Ribotta P.D. Effect of wheat germ heat treatment by fluidised bed on the kinetics of lipase inactivation. Food Bioprocess Tech. 2018; 11: 1002-11. DOI: https://doi.org/10.1007/s11947-018-2069-6
34. Chesnokova N.P., Ponukalina E.V., Bizenkova M.N. General characteristics of the sources of formation of free radicals and antioxi-dant systems. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya [Successes of Modern Natural Science]. 2006; (7): 37-41. (in Russian)
35. Messias L.H.D., Polisel E.E.C., Manchado-Gobatto F.B. Advances of the reverse lactate threshold test: non-invasive proposal based on heart rate and effect of previous cycling experience. PLoS One. 2018; 13: 19-23.
36. Yang W.-H., Park H., Grau M., Heine O. Decreased blood glucose and lactate: is a useful indicator of recovery ability in athletes? Int J Environ Res Public Health. 2020; 17: 1-16. DOI: https://doi. org/10.3390/ijerph17155470
