CC BY
25
42 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
тетразолилбромидом (МТТ) по отношению к культуре Цель исследования — разработка мышиного гомологич-клеток карциномы легких человека А549 (CCL-185). Эф- ного биспецифичного анти-СВ3-анти-СВ19-антитела и его фект на микротубулярную сеть тех же клеток определен характеристика in vitro. иммунофлуоресцентным методом с использованием мо- Материалы и методы. Дизайн гена гомолога выполнен ноклональных антител мышей к а-тубулину (Sigma, США) в соответсвии с дизайном гена биспецифичного антитела и флуоресцентно меченных AlexaFlour488 козьих вторич- GNR-047. Все работы, связанные с получением образца ных антител к иммуноглобулинам мышей (Invitrogen, Гер - гомологичного антитела, выполняли в соответствии с вну-мания). тренними операционными процедурами. Связывание го-Результаты. Аналоги тубулокластина с модифициро- мологичной молекулы с рецепторами CD3 и CD19 на по-ванным адамантановым фрагментом проявляют цитоток- верхности клеток мышиных линий Bcl-1 и ТК-1, клеток сичность в наномолярном интервале концентраций, при- крови и селезенки мышей контролировали методом прочем большинство из них более активны (IC50 = 6 — 21 нМ), точной цитометрии. Специфическую активность гомолога чем колхицин (IC50 = 27 ± 2 нМ). Гидрофобные и объемные определяли в тесте антителозависимой клеточно-опосре-заместители в адамантане независимо от их расположения дованной цитотоксичности (ADCC). мало влияют на величину цитотоксичности, которая оста- Результаты. При использовании последовательностей ется во всех случаях высокой. Уменьшение активности антител, специфичных к мышиным рецепторам CD3 производного аминоадамантана (IC50 = 400 ± 20 нМ), по- и CD19, проведен дизайн гена гомологичного биспеци-видимому, связано с высокой степенью его ионизации фичного антитела. Сконструированы экспрессионные и низкой способностью проникновения в клетку. Все со- векторы с синтетическим целевым геном. Образец мыши-единения данной серии проявляют сильный кластеризую- ного гомолога соответствующего качества получен в ре-щий эффект. Цитотоксичность производных тубулокласти- зультате хроматографического выделения из культуральной на с модифицированным линкером зависит от числа жидкости стабильно трансфицированных клеток CHO. метиленовых групп в различных фрагментах цепи. Показано связывание гомолога с рецепторами CD3 и CD19 Заключение. Для ряда аналогов тубулокластина с вари- на поверхности клеток мышиных линий Bcl-1 и ТК-1, лим-ациями каркасной группировки продемонстрировано уси- фоцитов и спленоцитов мышей. Гомологичное мышиное ление цитотоксичности по отношению к клеткам карци- антитело обладает соответствующей разрабатываемому номы легких А549 по сравнению с колхицином. препарату высокой ADCC-активностью при использова-Работа поддержана грантами РФФИ (№ 15-03-04894) и РАН нии спленоцитов мыши в качестве эффекторных клеток. (ОХНМ 9). Заключение. Получен и охарактеризован образец мышиного биспецифичного анти-CD3-анти-CD19-антитела. С.В. Иванов, В.М. Симонов, Р.Л. Анисимов, Данные проведенных исследований свидетельствуют, о том, А.А. Пискунов, Г. Н. Порошин, Е. В. Сазонова, что полученное гомологичное биспецифичное антитело по сво-И.П. Фабричный, С. Г. Аббасова, А. П. Карпов им in vitro характеристикам соответствует о том, что разраба-РАЗРАБОТКА ГОМОЛОГИЧНОЙ МОЛЕКУЛЫ тываемому препарату GNR-047 и может быть использовано ИННОВАЦИОННОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ для проведения токсикологических исследований на мышах. БИСПЕЦИФИЧНОГО АНТИТЕЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ В-КЛЕТОЧНЫХ ЛИМФОМ С ЦЕЛЬЮ ПРОВЕДЕНИЯ А.В. Ивличев, Д.А. Мудрак, Н.А. Наволокин, ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Г.А. Афанасьева, С.А. Тычина, М. О. Корчаков, НА МЫШАХ Н.В. Полуконова, А.Б. Бучарская, Г.Н. Маслякова ООО «МБЦ«Генериум», Москва АКТИВНОСТЬ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ Введение. Несмотря на достигнутые успехи в лечении ЛИПИДОВ ПРИ ПЕРОРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ В-клеточных лимфом, потребность в разработке новых ФЛАВОНОИДСОДЕРЖАЩЕГО ЭКСТРАКТА препаратов и подходов для их лечения остается довольно БЕССМЕРТНИКА ПЕСЧАНОГО НА ФОНЕ острой. Инновационный отечественный препарат нового по- ПЕРЕВИВАЕМОГО РАКА ПЕЧЕНИ РС-1 коления GNR-047 на основе биспецифичных моноклональ- ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского» ных антител открывает новые перспективы для успешного Минздрава России, Саратов лечения В-клеточных лимфом, устойчивых к стандартной Цель исследования — изучить влияние флавоноидсо-таргетной терапии. Препарат GNR-047 связывается с ре- держащего экстракта бессмертника песчаного на актив-цептором CD3 Т-клеток и с рецептором CD19 опухолевых ность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в экспери-В-клеток, что приводит к их физическому сближению, менте in vivo на лабораторных крысах с перевитым раком в результате которого формируется иммунологический си- печени. напс, приводящий к лизису опухолевых CD19+-клеток. Материалы и методы. Сырье собрано на территории Ввиду отсутствия релевантного вида животного, необхо- Саратовской области, экстракт бессмертника получен ав-димого для проведения токсикологических исследований торским способом (патент № 2482863). Дизайн экспери-антитела GNR-047, была инициирована разработка его мента: животные с перевитым раком печени РС-1 были мышиного гомолога. Настоящая работа посвящена полу- разделены на 2 группы. Первая — группа сравнения с опу-чению образца биспецифичного антитела, связывающего- холью без воздействия экстракта; вторая группа — экспе-ся с мышиными рецепторами CD3 и CD19, и изучению его риментальная с однократным пероральным введением свойств in vitro. экстракта бессмертника песчаного через 1 мес после пере-
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
