CC BY
7
ного раствора, который должен содержать в 1 мл 0,1 мг индола. Из этого раствора разбавлением в 10 раз готовят рабочий раствор с содержанием 0,01 мг индола в 1 мл. Для анализа исследуемой пробы готовят шкалу из рабочего раствора индола (1 жл = 0,01 мг). В ряд колориметрических пробирок приливают 0,05, 0,1, 0,2, 0,5, 1 и 2 мл рабочего раствора. Во всех пробирках доводят объем до 2 мл 10% спиртом (поглотительный раствор). Затем в шкалу и поглотитель с пробой приливают по 2 капли 10% парадиметиламинобензальдегида (раствор готовят в концентрированной соляной кислоте, разбавленной дистиллированной водой в соотношении 1:2). Получают стандартную шкалу с содержанием от 0,0005 до 0,02 мг индола. В нулевую пробирку шкалы наливают 2 мл 10% водного раствора этилового спирта и 2 капли 10% раствора парадиметиламинобензальдегида. Интенсивность розово-фиолетовой окраски в шкале и пробах сравнивают через 5—7 мин. Стандартный раствор индола в уксусной кислоте сохраняется 5 суток. Стандартный раствор индола в 10% спирту пригоден' для работы 1 — 11/г месяца.
Бензол, ацетон, аммиак и сероводород не мешают определению индола. Присутствие в пробах метиламина и формальдегида в концентрациях до 1 мг также этому не мешает. Метод позволяет определять 0,0005 мг индола в колориметрируемом объеме жидкости.
Поступила 7/1У 1964 г
УДК 613-07 : [547.56 : 543.544.42
РАЗДЕЛЬНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЛЕТУЧИХ ФЕНОЛОВ ПРИ ПОМОЩИ БУМАЖНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
— ^ _ а»
Канд. хим. наук Ф. Г. Дятловицкая, инженер-химик Е. Ф. Гладенко
Украинский научно-исследовательский институт коммунальной гигиены, Киев
При разработке метода раздельного определения летучих фенолов в производственных сточных водах и в воде водоема с помощью хроматографии в тонком слое нам не удалось обособить мета- и пара-крезолы. В дальнейшем мы попытались решить эту задачу методом бумажной хроматографии. В качестве подвижного растворителя была избрана смесь бензол—циклогексан (Schleede и Brenustoff). Бумага использовалась ленинградская, медленная. Вначале метод был апробирован на чистых веществах.
На бумагу, предварительно опрысканную раствором соды и высушенную на воздухе, наносили 0,005—0,025 мг соответствующего гомолога фенола в бензольном растворе и помещали в хроматографическую камеру (рис. 1),. куда за сутки до опыта вносили подвижный растворитель. Перед внесением бумаги к смеси растворителей прибавляли метанол.
В результате многочисленных опытов выяснилось, что наилучшим подвижным растворителем для разделения летучих фенолов является смесь бензол — циклогексан в отношении 1:6 с прибавкой 2% метанола.
По истечении времени хроматографирования, которое устанавливали экспериментально, бумагу вынимали из камеры, высушивали на воздухе и проявляли раствором диазотированной сульфаниловой кислотой. Фенол давал желтое пятно, расположенное близко к старту, мета-крезол образовывал ярко-желтое пятно, пара-крезол — сиреневое,
5 Гигиена и санитария. № 10
65
орто-крезол — розовое пятно, наиболее удаленное от места нанесения.
При нанесении всех 4 гомологов фенола на стартовую линию и выдержке в хроматографической камере оказалось, что наилучшее разделение наблюдается при хроматографировании в течение 34 часов. Как видно из рис. 2 (см. дкл.), мета- и пара-крезолы при этом довольно хорошо отделяются и четко отличаются друг от друга по цвету пятен.
ИГ-летучих фенолов при данных условиях1 соответственно были: фенол 0,1, мета-крезол 0,2, пара-крезол 0,26 и орто-крезол 0,42. Для количественного определения указанных соединений вырезывали окрашенные пятна, экстрагировали 1 % КОН и измеряли оптическую плотность на фотоэлектроколориметре.
Воспроизводимость определений была плохая, вероятно, вследствие недостаточного постоянства условий опыта (температура, влажность бумаги и т. д.). Однако сохранялась прямая пропорциональность между оптической плотностью элюата и концентрацией испытуемого вещества. Поэтому в дальнейшем мы отказались от определения по калибровочной кривой, а применили метод стандартных пятен.
Установив возможность качественного разделения летучих фенолов в смеси чистых веществ, мы перешли к разработке метода определения их в производственных сточных водах.
Нами было применено 3 метода выделения фенола из сточной воды: непосредственное экстрагирование из воды бензолом после подкисления ее до рН 5,0, экстрагирование бензолом после удаления из сточной воды смол и метод выделения фенолов, основанный на двукратном экстрагировании их из воды эфиром и щелочью. Оказалось, что при первых двух методах пятна получались нечеткие и слабо. окрашенные.
Поэтому мы остановились на последнем методе. Из определенного объема сточной воды экстрагировали все органические вещества эфиром, затем из эфирных вытяжек извлекали фенолы 1 % КОН. Щелочную вытяжку экстрагировали бензолом, сушили бензольную вытяжку над хлористым кальцием и наносили али-квотную часть ее на бумагу. Рядом с пробой наносили определенное количество стандартных растворов всех 4 гомологов фенола.
После выдержки в хроматографической камере производили количественное определение согласно описанному выше способу.
Поскольку существует прямая пропорциальная зависимость между оптической плотностью и концентрацией, мы вывели формулы для расчета содержания летучих фенолов в испытуемых пробах воды. Для фенола, орто- и мета-крезола формула имеет следующий вид:
_ СстРПр V
где Спр — содержание соответствующего гомолога фенола в пробе сточной воды (в мг); Сет — количество фенола, орто- или мета-крезола, нанесенное на бумагу (в мг)\ £)пР — оптическая плотность окрашенного экстракта испытуемой пробы; £)ст — оптическая плотность окрашенного экстракта стандартного пятна; ]/б — объем бензольной вытяжки, который наносится на бумагу; V — объем бензольной вытяжки (в мл).
1 При 18—20°.
Рис. 1. Хро-матогра ф и-ческая камера.
К статье Ф. Г. Дятловицкой и Е. Ф. Гладенко
4
2
1
Рис. 2. Хроматограмма летучих фенолов.
/ — фенол; 2 — мета-крезол; 3 — пара-кре-
зол: 4 — орто-крезол.
К ст. В. В. Подосиновского
Очаг некроза в ткани печени, в окружающих его клетках — резкая крупнокапельная жировая дистрофия. Окраска гематоксилин-эозином, ув. 100Х.
. Для пара-крезола формула имеет следующий вид:
Г(Сст-0,01)Д„р -1 V ... .
пр_Ч £>„ "»V""
%
Указанным методом были определены летучие фенолы в производственных сточных водах (см. таблицу). Для сравнения приведены результаты определения указанных соединений методом хроматографии в тонком слое.
Результаты определения указанных соединений методом хроматографии
в тонком слое
Бумажная хроматография Хроматография в тонком ело
• Предприятие фенол мета-крезол пара-крезол орто-кре- зол фонол орто-крезол мета- и. пара-кре-золы % • ^
«Подземгаз», Тула 72,6 Нет 26,75 11,3 73,0 15,0 24,0
Газогенераторная станция завода «Магнезит» . ...... 301,0 117,0 73,50 73,3 354,0 50,0 158,0
Коксохимический завод, Краматорск . ... 1097,5 Нет 523,80 Следы 1280,0 80,0 • 560,0
Как видно из данных, приведенных в таблице, расхождения между методом бумажной хроматографии и хроматографии в тонком слое для фенола составляют в среднем 10%.
Ошибку определения пара-крезола можно установить только для тех вод, в которых отсутствует мета-крезол. Она составляет в среднем 9%. При совместном присутствии пара- и мета-крезола расхождения в их определении двумя методами составляют в среднем 20%. Что касается орто-крезола, то ошибка определения его с помощью бумажной хроматографии очень велика (расхождения достигают 35%) и рекомендовать его определение этим методом нельзя. Объяснить это можно малой чувствительностью метода бумажной хроматографии, поскольку для всех изученных нами гомологов фенола содержание орто-крезола в сточных водах было наименьшим.
Таким образом, метод бумажной хроматографии может быть рекомендован для полуколичественного определения летучих фенолов в производственных сточных водах. В этом отношении метод, конечно, уступает хроматографии в тонком слое, являющейся количественным методом.
Однако применение бумажной хроматографии возможно в тех случаях, когда требуется раздельное определение мета- и пара-крезо-лов. Тогда можно рекомендовать определение пара-крезола при помощи бумажной хроматографии, а совместное определение при помощи хроматографии в тонком слое. По разности будет определяться мета-
крезол.
• %
Поступила 7/1V 1964 I.
