Рациональный путь снижения токсических проявлений левамизола Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

РАЦИОНАЛЬНЫЙ ПУТЬ СНИЖЕНИЯ ТОКСИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ЛЕВАМИЗОЛА

М.М. Наумов, С.Т. Карелин, И.В. Воинова

Аннотация. Рациональный путь устранения токсических проявлений левамизола, не снижая его терапевтической эффективности, заключается во введении в состав фармакопейного левамизола 1% янтарной кислоты, которая ликвидирует побочные токсические явления, улучшает иммунометаболические процессы в организме животных.

Ключевые слова: левамизол, токсичность, янтарная кислота, комплексный препарат, иммуномодулятор, антгельминтик, дегельминтизация.

В сельскохозяйственных организациях Курской области имеются инвазионные заболевания, в частности у свиней, такие, как аскаридоз, трихоцефалез, эзофагостомоз. При анализе результатов лабораторных исследований, проведенных в специализированных хозяйствах и в частном секторе за последние 40 лет (1970-2010) установлено, что оздоровление поголовья идет крайне медленно. Так экстенсива-зированность свиней аскаридозом снизилась с 14,8% до 13,5%, трихоцефалезом с 19,7% до 12,4%, эзофагосто-мозом с 7,2% до 4,7% [8.-С.125-128]. Известно, что основным методом борьбы с инвазионными заболеваниями продолжают оставаться лечебные мероприятия. А их эффективность в основном зависит от активности лечебных средств, а также ряда других причин. Прежде всего, от длительности применения соединений близких по их химическому строению, в результате чего у возбудителей развивается резистентность к лечебным средствам [3.-С.30-35].

В настоящее время приобретенные иммунодефици-ты и нарушения обменных процессов являются актуальнейшими проблемами ветеринарной и гуманной медицины. Эти патологии тесно связаны между собой и зачастую обусловлены токсикозами алиментарного, инфекционного и инвазионного происхождения.

Актуальным является разработка комплексных препаратов, обладающих иммунометаболическим и противонематозным действием, введение которых вызвало бы системный лечебно-профилактический эффект, направленный на нормализацию обменных и иммунных процессов, а также гепатопротекторной и ант-гельминтной активностью.

Известен запатентованный в Российской Федерации антгельминтный комплексный препарат против нематодозов животных [1]. Данный препарат включает в своем составе антгельминтик нилверм (на основе ле-вамизола), нуклеинат натрия - иммуномодулятор, аминокислоту Ь-аргинин и в качестве растворителя, раствор Хенкса. Данный препарат обеспечивает высокую антгельминтную активность. Однако, как свидетельствуют наблюдения, он недостаточно эффективен при токсикозах, гепатозах и обладает побочным действием на организм животных.

Творческая группа ученых, возглавляемая профессором А.А. Евглевским из Курского научно-

исследовательского института агропромышленного производства Россельхозакадемии, разработала новый препарат, исключающий вышеуказанные недостатки [7]. Для усиления гепатопротекторной активности в состав нового препарата была включена янтарная кислота. В качестве антгельминтика и иммуномодулятора в состав комплексного препарата включен левамизол [5.-С.48-50].

Левамизол - высокоэффективный антгельминтик и иммуномодулятор преимущественно клеточной системы иммунитета. Однако обладает выраженным побочным, преимущественно судорожным действием на организм, в связи с чем его неохотно используют в клинике лечения больных животных.

Механизм антигельминтного действия основан на специфическом ингибировании сукцинатдегидрогена-зы, в связи с чем блокируется важнейшая для нематод реакция восстановления фумарата и нарушается течение биоэнергетических процессов гельминтов. При изучении антигельминтного действия левамизола было обнаружено, что он повышает общую сопротивляемость организма и может быть использован как средство для иммунотерапии. Опыты на изолированных клетках и наблюдения за здоровыми и больными животными показали, что препарат способен восстановить измененные функции Т-лимфоцитов и фагоцитов и вследствие своего тимомиметического эффекта может регулировать клеточные механизмы иммунологической системы. Левамизол был предложен для лечения различных заболеваний с расстройствами иммуногенеза: первичные и вторичные иммунодефицитные состояния, аутоиммунные болезни, хронические и рецидивирующие инфекции, опухоли и др. Помимо неблагоприятного течения заболевания, показанием к применению препарата служило снижение клеточного иммунитета (уменьшение количества Т-лимфоцитов, повышение количества В-лимфоцитов в периферической крови).

Янтарная кислота по своему строению (бутандио-вая кислота, этан-1,2-дикарбоновая кислота) НООС-СН2-СН2-СООН — это двухосновная предельная кар-боновая кислота. Она участвует в процессе клеточного дыхания кислорододышащих организмов.

Известно, что янтарная кислота - мощный регулятор защитных сил организма, она нормализует систему энергетического обмена, это соединение играет ведущую роль в работе митохондрий - внутриклеточных «энергетических станций». Безвредность янтарной кислоты и ее соединений и способность оказывать положительный эффект при низких дозировках делают возможным ее использование при разработке нового поколения «умных лекарств». Именно эти качества янтарной кислоты послужили основанием для разработки комплексных препаратов, предназначенных для нормализации обменных процессов, профилактики и лечения иммунодефицитов, микроэлементозов, токсико-

зов, повышения эффективности антибиотикотерапии, иммуногенности вакцин против факторных инфекционных болезней. Янтарная кислота обладает высокой адаптогенной, антигипоксической, антиоксидантной, нейротропной активностью, оказывает выраженное нормализующее действие на энергетический обмен и процессы биосинтеза в условиях патологий и экстремальных воздействий .

Целью работы являлся поиск рационального пути устранения токсических проявлений левамизола, не снижая его терапевтической эффективности. В задачи исследований входило:

- изучить действие терапевтических доз левами-зола на лабораторных животных.

- изучить действие токсических доз левамизола на лабораторных животных.

- испытать комплексный препарат левамизола с янтарной кислотой.

- экспериментально обосновать снижение токсических явлений левамизола в комплексе с янтарной кислотой.

Экспериментальная работа выполнялась в условиях кафедры физиологии и химии им. проф. А. А. Сысоева, а также вивария факультета ветеринарной медицины Курской государственной сельскохозяйственной академии им. проф. И.И. Иванова.

В проведении исследований принимали участие старшие научные сотрудники Курского научно-исследовательского института агропромышленного производства Россельхозакадемии В.И. Зайцев и кандидат ветеринарных наук С.Т. Карелин.

В лабораторных экспериментах использовались беспородные белые мыши обоего пола п=32гол., m=21-22г, морские свинки п=24гол., т=200-450г. Исследования включали термометрию животных с использованием электронного термометра «microlife», производство Швейцария, взвешивание до и после эксперимента с применением электронных весов «Scout», модификация Sc6010 фирма «ОНАШ», производство США.

Токсические свойства левамизола изучались в остром и клиническом опыте путем введения левамизола и «левамизол + янтарная кислота» внутрибрюшинно белым мышам, морским свинкам - левамизол (0.25мл) внутримышечно и комплекс левамизол + янтарная кислота 1% (0.25мл).

Одновременно на лабораторных животных изучали симптомы острого экспериментального отравления. Павших животных и особей с признаками отравления препаратом подвергали патологоанатомическому вскрытию.

Общетоксическое действие препарата оценивали в течение 21 дня, учитывали по динамике массы тела животных при взвешивании 1 раз в неделю. Вегетативный статус определяли по состоянию слизистых, шерстного покрова, наличию саливации, диареи, опрятности животных.

Для испытания терапевтических и токсических доз левамизола и комплекса «левамизол + янтарная кислота» были сформированы 4 опытные и 2 контрольные группы лабораторных животных. До эксперимента и в 1,3,5 сутки проводилась ректальная термометрия морских свинок с помощью электронного термометра «microlife» .

Из таблицы №1 видно, что у всех подопытных животных на протяжении эксперимента ректальная температура находилась в пределах 37,5-38,9°С, что соответствует физиологическим границам нормы у морских свинок (37,5-39,5°С).

Испытание на морских свинках терапевтических доз левамизола в сравнении с контрольной группой животных и группой, получившей однократно левами-

зол плюс янтарная кислота, не выявило отклонении в общем физиологическом состоянии, поедаемости корма и поведении. Ректальная температура морских свинок во всех опытных группах была в пределах физиологических границ на всем протяжении эксперимента: у морских свинок (37,5-39,5°С), белых мышей (31,2-38,1°С).

Таблица 1-Показатели ректальной температуры у опытных (п=24) лабораторных животных - морских

Сутки До экспери- После инъекции 2 3 4

Препарат+ч доза, мл \ мента на 1

1)Морские свинки Левами- 38.2±0,3 38,7±0,3 38,4±1,2 38,25±0,2 37,15±0,4

зол,0,75% (0,25)

2)Морские свинки Левамизол , 0,75%+ 37,6±0,4 37,95±0,2 37,6±0,9 38,7±0,2 38,4±0,3

1% Янтарная кислота (0,25)

3)Морские свинки 37,5±0,5 38,45±0,1 36,7±0,9 37,55±0,8 38,3±0,8

1%Янтарная

кисло-

та(0,25)

4)Морские свинки- 38,8±0,1 38,9±0,3 37,2±0,4 38,2±0,2 37,6±0,3

контроль Физ.р- р (0,25)

В следующем опыте на морских свинках весом от 200-450г (таблица 2) испытывалась терапевтическая доза левамизола в сравнении с контролем, где подкожно вводился изотонический раствор №С1, и фармакологическим комплексом «левамизол + янтарная кислота», а также с 1% янтарной кислотой - терапевтическая доза. Все препараты вводились подкожно, продолжительность исследований составляла 5 суток. Прирост массы тела (12%) у лабораторных животных был отмечен в группе «левамизол + янтарная кислота», отвес имел место в контрольной группе лабораторных животных -30%, по нашему мнению, в связи со стресс-фактором.

Таблица 2 - Наблюдение за весом подопытных лабораторных животных (п=24) в период эксперимента (М ± т)

Сутки Препарат+ 1 3 5

доза,мл

1)Морские свинки

Левамизол,0,75% 300±9,5 300±25,0 300±50,0

(0,25)

2)Морские свинки

Левамизол , 0,75%+ 400±10,0 400±10,2 450±10,3

1% Янтарная кисло-

та(0,25)

3)Морские свинки 450±50,0 450±50,5 375±52,0

1%Янтарная кисло-

та(0,25)

4)Морские свинки- 300±25,0 280±20,4 210±0,5

контроль

Физ.р-р(0,25)

Янтарная кислота ускоряет метаболизм, увеличивает подачу кислорода к тканям, следовательно, облегчает переносимость токсичного препарата. Из наблюдений за весом опытных лабораторных животных видно, что в группе животных №2 (левамизол 0,75% + 1% янтарная кислота) зарегистрирован прирост живой массы на 50г по истечении 5 суток наблюдения, а в группе №4 (контрольная) наоборот - наблюдалась потеря в весе, которая составила 90г по сравнению с исходным весом до эксперимента. В следующей серии опытов на лабораторных мышах весом от 21- 48,2г дозировка ле-вамизола превышала терапевтическую дозу в 4, 8-5 раз, не вызвала гибель животных.

Таблица 3- Завышенные дозы левамизола в сочетании с янтарной кислотой в остром опыте (п=6)

Дозировка препарата, превышающая терапевтическую дозу в 10 раз, вызывает гибель животных, получивших левамизол в среднем через 3 минуты 10 секунд, но введение в состав 1% и 2% янтарной кислоты продлевает жизнь мышей в 2 раза (6-6 мин 20 сек).

При внутрибрюшинном введении препарата не нарушилась деятельность функции почек, печени (края острые, нет перерождения, цирроза, нет кровоизлияний), легкие, кишечник не повреждены, т. е. видимых поражений внутренних органов не замечено, гибель, по нашему мнению, произошла на фоне поражения нервной системы.

При изучении параметров токсичности препарата левамизол и комплекса «левамизол + янтарная кислота» в остром опыте отмечено, что превышение терапевтической дозы в 5 раз не вызывало гибель животных и не выявило нарушений в общем физиологическом состоянии лабораторных мышей в последующем наблюдении. В то же время дозировка препарата, превышающая терапевтическую дозу в 10 раз, вызывает гибель животных, получавших левамизол в среднем через 3 мин. - 3 мин. 10 сек., а введение в состав препарата янтарная кислота продлевает жизнь мышей в 2 раза (6 мин. - 6 мин. 20 сек.).

Таким образом, анализ полученных данных дает возможность предположить, что введение янтарной кислоты в состав терапевтической дозы левамизола снижает токсические свойства препарата.

Проведенные нами исследования позволили сделать следующее заключение: введение в состав фармакопейного левамизола 1% янтарной кислоты ликвидирует побочные токсические явления, улучшает имму-нометаболические процессы в организме животных. Наши поисковые исследования были учтены в разработке нового комплексного препарата[5]. После детальных и углубленных исследований на продуктивных животных, получен патент РФ №2411944 «Иммуноме-таболический антгельминтный препарат» от

20.02.2011г., приоритет 10.06.2009 г. [7].

Список использованных источников

1 Антгельминтный препарат против нематодозов животных / А.Ю. Ханис, Э.Х.Даугалиева, И.А.Архипов // Патент РФ на изобретение № 2200548. Приоритет от 19.01.2001. Бюл. № 5.

2 Багманова Н.Н. Комплексная терапия животных при гельминтозах с использованием антгельминтиков и иммуно-модуляторов // Дисс... к.в.н. - Самара, 2003.

3 Бессонов А. С. Резистентность к паразитам и пути его преодоления //Ветеринария.- 2002. - № 7.

4 Даугалиева Э.Х., Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельхозживотных. - М.: ВО Агропромиздат, 1991.

5 Модифицированный левамизол - эффективный им-мунометаболический антгельминтный препарат / А.А. Евглевский и др. // Ветеринария. - 2011.- № 8.

6 Ивницкий Ю.Ю. Янтарная кислота в системе средств метаболической коррекции функционального состояния и резистентности организма. - СПб.:Лань, 1998.

7 Иммунометаболический антгельминтный препарат / А.А. Евглевский, В.Н. Скира, С.Т.Карелин, В.И.Зайцев, Швец О.М., М.М.Наумов// Патент РФ на изобретение № 2411944. Приоритет от 10.06.2009. Опубл. 20.02.2011. Бюл.№5.

8 Карелин С.Т. //Мат. международной НПК, посвящ. 125-летию ветеринарии Курской обл. «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - Курск, 2008.

9 Карелин С.Т., Зайцев В.И. Новые свойства левамизо-ла в комплексе с янтарной кислотой // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии.- 2011. - № 4.

10 Коваленко А.Л., Белякова Н.В. // Фармация. - 2000. -

№ 5.

11 Оболенский Н.В. Реамберин - новое средство для инфузионной терапии в практике медицины критических состояний // Реамберин: реальность и перспективы: сб. науч. статей. - СПб., 2002.

12 Парфенова И.Е, Щербанюк Т. Г., Кондрашова М.Н. // Нижегородский медицинский журнал. - 2003. - № 5.

13 Препарат для лечения гепатоза животных/ А.Ю. Ханис, Э.Х. Даугалиева // Патент РФ на изобретение № 2200547.Приоритет от 19.01.2001. Бюл. № 1.

14 Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве / под ред. М.Н. Кондрашовой, Ю.Г. Каминского, Е.И. Маевского.- Пущино: ОНТИ РАМН, 1996.

Информация об авторах

Наумов Михаил Михайлович, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры физиологии и химии ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА».

Карелин Станислав Трофимович, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Курского НИИ АПП Рос-сельхозакадемии.

Воинова Инесса Вячеславовна, студентка факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», inessaviv@rambler.ru

№

п/п Подопытные Состав Доза препа- Состояние

животные,г препарата рата животного

1 Белая 0,75% Ле- Жива

мышь вамизол + Превышение (наблюдение

т=21,0 1% Янтарная кислота в 4,8 раз 21день)

2 Белая мышь 0,75% Ле- Превышение Жива

т=21,0 вамизол + 0,5% Янтарная кислота в 4,8 раз (наблюдение 21день)

3 Белая мышь 0,75% Ле- Превышение Гибель через

т=20,8 вамизол без янтарной кислоты в 10 раз 3 мин. 10 сек.

4 Белая мышь 0,75% Ле- Превышение Гибель через

т=22,0 вамизол + 1% Янтарная кислота в 10 раз 6 мин. 20 сек.

5 Белая мышь 0,75% Ле- Превышение Гибель через

т=21,7 вамизол + 2% Янтарная кислота в 10 раз 6 мин. 00 сек.

6 Белая мышь 0,75% Ле- Превышение Гибель через

т=21,5 вамизол + 3% Янтарная кислота в 10 раз 3 мин. 00 сек.