CC BY
8© Коллектив авторов, 2022 https://doi.org/10.29296/24999490-2022-02-04
РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ РЕЦЕПТОРА ПРОГРАММИРУЕМОЙ ГИБЕЛИ КЛЕТКИ sPD-1 И ЛИГАНДА sPD-L1, А ТАКЖЕ НЕКОТОРЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ В КРОВИ ПЕРЕБОЛЕВШИХ COVID-19
Н.Е. Кушлинский, И.В. Бабкина, Е.С. Герштейн, Н.В. Любимова, Ю.С. Тимофеев, Е.А. Короткова, Г.Н. Зубрихина, Т.В. Давыдова, О.В. Сомонова, И.С. Стилиди
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Российская Федерация, 115522, Москва, Каширское шоссе, д. 24
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Кушлинский Николай Евгеньевич — академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, заведующий лабораторией клинической биохимии, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7(499) 324-11-79. E-mail: kne3108@gmail.com ORCID: 0000-0002-3898-4127
Бабкина Ирина Валентиновна — доктор медицинских наук, врач клинической лабораторной диагностики лаборатории клинической биохимии ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (499) 324-11-69. E-mail: docbabkina@rambler.ru ORCID: 0000-0001-9285-3470
Герштейн Елена Сергеевна — доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической биохимии; ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (499) 324-11-59. E-mail: esgershtein@gmail.com ORCID: 0000-0002-3321-801X
Любимова Нина Васильевна — доктор биологических наук, главный научный консультант лаборатории клинической биохимии, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (499) 324-26-04. E-mail: biochimia@yandex.ru ORCID: 0000-0003-0430-2754
Тимофеев Юрий Сергеевич — кандидат медицинских наук, врач клинической лабораторной диагностики лаборатории клинической биохимии ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (499) 324-26-04. E-mail: timofeev_lab@mail.ru ORCID: 0000-0001-9305-6713
Короткова Екатерина Андреевна — кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории клинической биохимии; ФГБУ «Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7(499) 324-11-59. E-mail: katinka-kor@yandex.ru ORCID: 0000-0002-2509-5232
Зубрихина Галина Николаевна — доктор медицинских наук, научный консультант клинико-диагностической лаборатории, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (903) 199-06-84. E-mail: zubrlab@list.ru ORCID: 0000-0002-5854-9755
Давыдова Татьяна Владимировна — кандидат биологических наук, заведующая клинико-диагностической лабораторией, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7 (919) 764-61-44. E-mail: davydova.tata@mail.ru ORCID: 0000-0002-5769-3114
Сомонова Оксана Васильевна — доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник клинико-диагностической лаборатории, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7(915) 343-74-87. E-mail: somonova@mail.ru ORCID: 0000-0003-4706-2439
Стилиди Иван Сократович — академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, директор, ФГБУ«Национальный медицинский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Тел.: +7(499) 324-24-24. E-mail: info@ronc.ru ORCID: 00000002-0493-1166
Введение. Основной причиной тяжести течения COVID-19 и смерти пациентов является «цитокиновый шторм» — сильный воспалительный ответ, вызванный SARS-CoV-2. Ключевую роль в экспрессии медиаторов воспаления играют макрофаги — иммунные клетки, способствующие устранению патогенов и восстановлению поврежденных тканей. Кроме известных цитоки-нов, макрофаги экспрессируют белок PD-L1 — лиганд рецептора апоптоза PD-1.
Цель исследования — сравнительный анализ уровней растворимых форм рецептора программируемой гибели клеток (sPD-1) и его лиганда (sPD-L1), а также биохимических и гематологических показателей крови у лиц, перенесших COVID-19.
Материал и методы. Провели иммуноферментный анализ sPD-1 и sPD-L1 и биохимические исследования у 72 сотрудников ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава РФ, перенесших COVID-19. Группу контроля составили 57 здоровых
доноров. Факт перенесенного заболевания подтвержден наличием в сыворотке крови антител к иммуноглобулинам класса G (SARS-Cov-2 IgG) с помощью ИФА тест-системой Antigma-G (Generium, Россия). Концентрации sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови исследовали реактивами Human sPD-L1 ELISA kit и Human sPD-1 ELISA kit (Affimetrix, eBioscience, США). Уровни железа, трансферрина и ферритина определяли на автоматическом анализаторе Cobas (Roche). Общий анализ крови выполняли на автоматическом анализаторе Sysmex XE-2100 (Япония).
Результаты. В сыворотке крови лиц, перенесших COVID-19 (через 30-50 дней со времени появления первых симптомов), отмечено значимое снижение уровней sPD-L1 и изменение корреляции между компонентами системы sPD-1/sPD-L1. Выявлена статистически значимая прямая взаимосвязь между концентрациями растворимых форм рецептора sPD-1 и его лиганда sPD-L1 с уровнями железа, гемоглобина и количеством эритроцитов, а также между sPD-L1 и ферритином. Взаимосвязи между уровнями sPD1 и sPD-L1 и показателями эритроцитов (MCV, MCH, RDW-SD) не обнаружено.
Заключение. Полученные результаты расширяют представление о роли sPD-1 и sPD-L1 у лиц, перенесших COVID-19, демонстрируют взаимосвязь между процессами апоптоза, некоторыми биохимическими и гематологическими показателями сыворотки крови и являются основанием для дальнейших исследований.
Ключевые слова: COVID-19, sPD-1, sPD-L1, ферритин, трансферрин, железо, гемоглобин, эритроциты
SOLUBLE FORMS OF PROGRAMMABLE CELL DEATH RECEPTOR sPD-L AND LIGAND sPD-L1, AS WELL AS SOME BIOCHEMICAL AND HEMATOLOGICAL INDICATORS IN THE BLOOD OF COVID-19 DISEASED N.E. Kushlinskii, I.V. Babkina, E.S. Gerstein, N.V. Lyubimova, Yu.S. Timofeev, E.A. Korotkova, G.N. Zubrikhina, T.V. Davydova, O.V. Somonova, I.S. Stilidi
N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Kashirskoe shosse, 24, Moscow, 115522, Russian Federation
INFORMATION ABOUT THE AUTHORS
Kushlinskii Nikolay Evgen'evich — Academician of RAS, Doctor of Medical Sciences, Professor, head of the laboratory of clinical biochemistry, Federal State Budgetary Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-11-79. E-mail: kne3108@gmail.com ORCID: 0000-0002-3898-4127
Babkina Irina Valentinovna — Doctor of Medical Sciences, doctor of clinical laboratory diagnostics of the laboratory of clinical biochemistry Federal State Budgetary Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-11-69. E-mail: docbabkina@rambler.ru ORCID: 0000-0001-9285-3470
Gerstein Elena Sergeevna — Doctor of Biological Sciences, Professor, leading researcher of the laboratory of clinical biochemistry; Federal State Budgetary Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-11-59. E-mail: esgershtein@gmail.com ORCID: 0000-0002-3321-801X
Lyubimova Nina Vasilyevna — Doctor of Biological Sciences, chief scientific consultant of the laboratory of clinical biochemistry Federal State Budgetary Institution «N.N.Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7 (499) 324-26-04. E-mail: biochimia@yandex.ru ORCID: 0000-0003-0430-2754
Timofeev Yuriy Sergeevich — Candidate of Medical Sciences, doctor of clinical laboratory diagnostics of the laboratory of clinical biochemistry Federal State Budgetary Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-26-04. E-mail: timofeev_lab@mail.ru ORCID: 0000-0001-9305-6713
Korotkova Ekaterina Andreevna — Candidate of Biological Sciences, senior researcher of the laboratory of clinical biochemistry; Federal State Budgetary Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-11-59. E-mail: katinka-kor@yandex.ru ORCID: 0000-0002-2509-5232
Zubrikhina Galina Nikolaevna — Doctor of Medical Sciences, scientific consultant of the clinical and diagnostic laboratory, Federal State Budgetary Institution « N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7 (903) 199-06-84. E-mail: zubrlab@list.ru ORCID: 0000-0002-5854-9755
Davydova Tatiana Vladimirovna — Candidate of Biological Sciences, head of the clinical and diagnostic laboratory, Federal State Budgetary Institution» N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7 (919) 764-61-44. E-mail: davydova.tata@mail.ru ORCID: 0000-0002-5769-3114
Somonova Oksana Vasyl'evna — Doctor of Medical Sciences, leading researcher of the clinical and diagnostic laboratory, Federal State Budgetary Institution» N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7 (915) 343-74-87. E-mail: somonova@mail.ru ORCID: 0000-0003-4706-2439
Stilidi Ivan Sokratovich — Academician of RAS, Doctor of Medical Sciences, Professor, Director of the Federal State Budgetary Institution» N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» Ministry of Health of Russia. Tel.: +7(499) 324-24-24. E-mail: info@ronc.ru ORCID: 0000-0002-0493-1166
Introduction. The main reason for the severity of COVID-19 and the death of patients is the «cytokine storm» — a strong inflammatory response caused by SARS-CoV-2. Macrophages, immune cells that help eliminate pathogens and repair damaged tissues, play a key role in the expression of inflammatory mediators. In addition to known cytokines, macrophages express the PD-L1 protein, a ligand of the PD1 apoptosis receptor.
The aim of the study was to comparatively analyze the levels of soluble forms of the programmed cell death receptor (sPD-1) and its ligand (sPD-L1), as well as biochemical and hematological parameters in the blood of patients who underwent COVID-19.
Material and methods. We carried out sPD-1 and sPD-L1 enzyme immunoassay and biochemical studies in 72 employees of the N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation who have undergone COVID-19. The control group consisted of 57 healthy donors. The fact of the disease was confirmed by the presence of antibodies to class G immunoglobulins (SARS-Cov-2 IgG) in the blood serum using the ELISA test system Antigma-G (Generium, Russia). The concentrations of
sPD-1 and sPD-L1 in blood serum were studied using the Human sPD-L1 ELISA kit and Human sPD-1 ELISA kit (Affimetrix, eBioscience, USA). The levels of iron, transferrin and ferritin were determined on an automatic analyzer Cobas (Roche). Complete blood count was performed on an automatic Sysmex XE-2100 analyzer (Japan).
Results. In the serum of those who underwent COVID-19 (30-50 days after the onset of the first symptoms), there was a significant decrease in sPD-L1 levels and a change in the correlation between the components of the sPD-1 / sPD-L1 system. A statistically significant direct relationship was found between the concentrations of soluble forms of the sPD-1 receptor and its ligand sPD-L1 with the levels of iron, hemoglobin and the number of erythrocytes, as well as between sPD-L1 and ferritin. No relationship was found between sPD-1 and sPD-L1 levels and erythrocyte counts (MCV, MCH, RDW-SD).
Conclusion. The results obtained expand the understanding of the role of sPD-1 and sPD-L1 in persons who have undergone COVID-19, demonstrate the relationship between the processes of apoptosis, some biochemical and hematological parameters of blood serum, and are the basis for further research.
Key words: COVID-19, sPD-1, sPD-L1, ferritin, transferrin, iron, hemoglobin, erythrocytes
ВВЕДЕНИЕ
Пандемия COVID-19, вызванная SARS-CoV-2, привела к гибели большого числа людей во всем мире. Основной причиной тяжести заболевания и смерти пациентов является «цитокиновый шторм» — сильный воспалительный ответ, вызванный SARS-CoV-2 [1, 2]. Ключевую роль в экспрессии медиаторов воспаления играют макрофаги — иммунные клетки, способствующие устранению патогенов и восстановлению поврежденных тканей [3]. Кроме известных цитокинов, макрофаги экспрессируют и белок — PD-L1 — лиганд рецептора программируемой клеточной гибели PD-1 (Programmed cell death protein-1). Они также принимают участие в метаболизме железа [4].
PD-1 (CD279) — белок из числа иммуноглобулинов (Ig) — играет важную роль в каскаде реакций иммунной системы, направленных на снижение активации Т-лимфоцитов, что имеет значение в подавлении аутоиммунных процессов [5]. Известно 2 лиганда PD-1 — PD-L1 и PD-L2. PD-L1 экспрессируют T- и B-лимфоциты, макрофаги и дендритные клетки, кроме того, PD-L1 выявлен на многих опухолевых клетках в ответ на действие интерферона IFN-y. PD-L1 подавляет ответы Т-клеток после взаимодействия с рецептором PD-1 [6].
Особый интерес представляют сравнительные исследования растворимых форм sPD-1 и sPD-L1 в периферической крови здоровых и больных различными заболеваниями, прежде всего онкологическими. Происхождение sPD-1 и sPD-L1 пока точно не установлено, однако как и растворимые формы других мембранных белков, они могут образовываться либо в результате гидролитического отщепления внеклеточного домена мембраносвязанной молекулы, либо на более раннем этапе — при альтернативном сплайсинге мРНК этой нативной мембранной формы. В экспериментальных исследованиях показана способность sPD-1 подавлять активность PD-1/PD-L1 пути [7, 5].
Данных о взаимосвязи экспрессии PD-1 и PD-L1 с биохимическими и гематологическими показателями у больных, перенесших COVID-19, в доступной литературе немного. В одной из работ по изучению механизмов сепсиса, который может быть одним из осложнений COVID-19, упоминается PD-L1 и фер-
ритин [8]. Авторами проанализированы исследования за последние 10 лет по выявлению биомаркеров, используемых для классификации иммунного ответа хозяина при сепсисе и мониторинга эффективности применяемой дополнительной иммунотерапии. Изучали доступные маркеры воспаления и иммуно-супрессии. Среди эффективных маркеров воспаления выделили ферритин, sCD163, sIL-2Ra и IL-18, определение которых необходимо для диагностики синдрома активации макрофагов (MAS) при сепсисе. К индикаторами иммуносупрессии, вызванной сепсисом, отнесли лимфопению, снижение экспрессии HLA-DR на моноцитах, гиперэкспрессию PD-L1 и IL-10. Предполагается, что для эффективного лечения сепсиса необходим индивидуальный подход с учетом результатов определения биомаркеров у пациента и последующим проведением иммунотерапии.
Сигнальная система PD-1/PD-L1 является важной мишенью для иммунотерапии рака, но существуют доклинические и клинические данные относительно ингибирования этого пути при острых или хронических вирусных инфекциях [9—11]. Таким образом, блокада этого пути может привести к противовирусному эффекту и снижению вирусной нагрузки. E. Yfekeduz и соавт. [12] сообщили о клиническом течении COVID-19 у пациентки пожилого возраста с множественными сопутствующими заболеваниями, принимающей ниволумаб по поводу метастатической злокачественной меланомы. Несмотря на наличие сопутствующих заболеваний, отметили легкое течение заболевания без пневмонии. Полагают, что легкое клиническое течение COVID-19 может быть связано с блокадой пути PD-1/PD-L1 ниволумабом.
Одним из последствий COVID-19 является то, что до 20% людей, перенесших заболевание, страдают так называемым постковидным синдромом. Длительный COVID (симптомы более 3 нед) и хронический постковидный синдром (более 12 нед) — мультисистемные синдромы, требующие многогранного подхода для решения физических, когнитивных, психологических, социальных и профессиональных аспектов этого состояния здоровья [13—15]. К ключевым проявлениям постковидного синдрома относятся слабость и хроническая усталость, характерные, в том числе для железодефицитной анемии.
Особый интерес к метаболизму железа связан с тем, что железо входит в функциональные группы белков, транспортирующих кислород, и ферментов, катализирующих реакции генерации энергии и метаболических процессов [16].
Все вышеперечисленные факты послужили основанием для настоящего исследования, цель которого — сравнительный анализ уровней растворимых форм рецептора программируемой гибели клеток (бРБ-1) и его лиганда (бРБ-Ы), а также биохимических и гематологических показателей в крови больных, перенесших СОУГО-19.
мунотурбидиметрическими методами. Клинический (общий) анализ крови выполняли на автоматическом анализаторе Бувшех ХЕ-2100 (Япония).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
При анализе уровня растворимого рецептора бРБ1 в сыворотке крови перенесших СОУГО-19 статистически значимых различий с показателями группы практически здоровых доноров не было выявлено. В то же время среднее содержание лиганда
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследованы 72 сотрудника ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава РФ, перенесших COVID-19 (23 мужчины и 49 женщин) в возрасте от 19 до 73 лет (медиана 47 лет), находившихся на амбулаторном лечении с апреля по июнь 2020 г. Концентрации sPD-1 и sPD-L1 исследовали в сыворотке крови 72 лиц, перенесших COVID-19 (через 30—50 дней от начала первых клинических симптомов заболевания), и у 57 здоровых доноров, которые составили группу контроля, в возрасте от 18 до 75 (медиана 46 лет). От всех пациентов получили добровольное информированное согласие на разглашение результатов исследований и публикации результатов в научных изданиях.
У всех лиц факт перенесенного заболевания подтвержден наличием в сыворотке крови антител к Ig класса G (SARS-Cov-2 IgG), выявленных ИФА тест-системой Antigma-G (Generium, Россия). Концентрации sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови здоровых доноров и переболевших COVID-19 исследовали реактивами Human sPD-L1 Platinum ELISA kit и Human sPD-1 ELISA kit (Affimetrix, eBioscience, США). Уровни железа, трансферри-на и ферритина определяли на автоматическом анализаторе Cobas c501 с использованием реактивов Roche: железа — колориметрическим, транс-феррина и ферритина — им-
Таблица 1
КОНЦЕНТРАЦИИ sPD-1 И sPD-L1 В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПЕРЕБОЛЕВШИХ COVID-19 И ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ; пг/мл
Table 1
CONCENTRATIONS OF sPD-1 AND sPD-L1 IN BLOOD SERUM COVID-19 SICKNESS AND HEALTHY DONORS; pg/ml
Группа (число наблюдений) Среднее содержание (M±m) Пределы колебаний Нижний квартиль (Q1) Медиана Верхний квартиль (Q3)
sPD-1
Контроль (n=57) 48,8±2,8 11,3-137,7 35,5 48,6 53,8
Пациенты (n=72) 53,8±4,1 14,2-295,4 34,6 49,2 64,0
sPD-L1
Контроль (n=57) 12,9±1,21 0-56,5 6,9 9,1 16,1
Пациенты (n=72) 6,4±0,22 2,1-19,4 4,8 6,1 7,6
Р 1vs2<0,001
Таблица 2
БИОХИМИЧЕСКИЕ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ В КРОВИ ПЕРЕБОЛЕВШИХ COVID-19
Table 2
BIOCHEMICAL AND HEMATOLOGICAL INDICATORS IN BLOOD OF COVID-19 DISEASED
Показатель, единицы измерения (референсные значения) Среднее содержание (M±m) Пределы колебаний Нижний квартиль (Q1) Медиана Верхний квартиль (Q3)
Железо, мкмоль/л (6,5-30,0) 16,4±0,7 3,2-31,3 12,2 16,5 20,4
Ферритин, нг/мл (30-00) 140,1+15,4 2,4-576,6 42,0 102,2 205,2
Трансферрин, мг/дл (200-380) 266,9+5,9 176,0-376,0 241,0 265,0 289,0
Гемоглобин, г/дл (11,5-16,5) 13,6+0,1 8,4-16,7 12,4 13,8 14,7
Эритроциты, 1012/л (3,50-5,60) 4,6+0,0 3,8-5,6 4,3 4,6 4,9
МСУ, фл (80-120) 86,3+0,5 62,8-95,6 84,4 86,9 89,4
МСН, пг (27-31) 29,3+0,2 17,9-33,4 28,8 29,5 30,5
ЯВ^Б, фл (37-54) 42,4+0,3 37,3-50,7 37,3 42,0 44,3
Таблица 3
КОРРЕЛЯЦИОННЫЕ СВЯЗИ МЕЖДУ УРОВНЯМИ sPD-1 И sPD-L1, БИОХИМИЧЕСКИМИ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИМИ ПОКАЗАТЕЛЯМИ У ПЕРЕБОЛЕВШИХ COVID-19
Table 3
CORRELATION BETWEEN sPD-1 AND sPD-L1 LEVELS, BIO-CHEMICAL AND HEMATOLOGICAL INDICATORS IN COVID-19 SICKNESS
Сравниваемые показатели Коэффициент Спирмена (rs) Статистическая значимость (Р)
вРБ-1 (пг/мл) & железо (мкмоль/л) 0,23 0,048
вРБ-1 (пг/мл) & трансферрин (мг/дл) -0,05 0,710
вРБ-1 (пг/мл) & ферритин (нг/мл) 0,21 0,075
вРБ-1 (пг/мл) & гемоглобин (г/дл) 0,34 0,004
вРБ-1 (пг/мл) & эритроциты (1012/л) 0,38 0,001
вРБ-Ы (пг/мл) & железо (мкмоль/л) 0,29 0,015
вРБ-Ы (пг/мл) & трансферрин (мг/дл) -0,18 0,209
вРБ-Ы (пг/мл) & ферритин (нг/мл) 0,30 0,010
вРБ-Ы (пг/мл) & гемоглобин (г/дл) 0,34 0,004
вРБ-Ы (пг/мл) & эритроциты (1012/л) 0,37 0,002
sPD-L1 в сыворотке крови в группе переболевших COVID-19 составило 6,4±0,2 пг/мл и было статистически значимо ниже (p<0,001), чем в контроле (табл. 1).
Дополнительный анализ полученных данных показал статистически значимую положительную корреляционную связь между концентрациями sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови переболевших COVID-19 (r=0,40; р=0,0004).
В анализируемой группе больных проводилась оценка показателей обмена железа: уровни сывороточного железа, ферритина, трансферрина, гемоглобина, количества и морфологических характеристик эритроцитов - MCV, MCH, RDW-SD (табл. 2). При этом медианы указанных показателей находились в пределах соответствующих референсных интервалов.
При корреляционном анализе с использованием критерия Спирмена была выявлена статистически значимая прямая взаимосвязь между содержанием железа и уровнем растворимого рецептора sPD-1 (rs=0,23; р=0,048), расцениваемая как слабая, по шкале Чаддока, а также умеренная прямая статистически значимая взаимосвязь между уровнями sPD-1 и показателем гемоглобина в крови (rs=0,34; р=0,004), между уровнями sPD-1 и количеством эритроцитов (rs=0,38; р=0,001) (табл. 3).
Концентрация лиганда sPD-L1 статистически значимо коррелировала с содержанием железа (rs=0,29; р=0,015), ферритина (rs=0,29; р=0,011), гемоглобина (rs=0,34; р=0,004) и количеством эритроцитов (rs=0,37; р=0,002).
Поскольку в проведенном нами исследовании отмечена взаимосвязь между содержанием sPD-1 и
sPD-L1 с количеством эритроцитов и гемоглобина в крови, на следующем этапе нами был проведен анализ взаимосвязи между содержанием компонентов контрольных точек иммунитета в крови и характеристиками эритроцитов: MCV (средний объем эритроцита), MCH (среднее содержание гемоглобина в эритроците) и RDW-SD (распределение эритроцитов по величине). Статистически значимой корреляции между концентрациями sPD-1 и sPD-L1 в сыворотке крови и показателями характеристик эритроцитов не было выявлено.
По данным литературы у больных COVID-19 были выявлены изменения размеров и формы клеток крови, что послужило основанием для предположения о возможной связи с процессами повышенного тромбообразования. В частности, описаны статистически значимые изменения в показателях коэффициента вариации распределения эритроцитов (RDW-CV) и параметра стандартного отклонения ширины распределения объема эритроцитов (RDW-SD). При этом степень изменений была более выраженной при тяжелом течении заболевания [17].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
На основании проведенного исследования биохимических и гематологических показателей в крови, перенесших COVID-19, отмечено статистически значимое снижение концентрации sPD-L1 и изменение корреляции между ключевыми компонентами системы sPD1/sPD-L1. Выявлена значимая положительная взаимосвязь между содержанием растворимых форм рецептора sPD-1 и его лиганда sPD-L1 и уровнями железа, гемоглобина и количества эритроцитов, а для sPD-L1 также и с уровнем ферритина.
Полученные нами результаты расширяют представления о роли растворимых форм ключевых компонентов (sPD-1, sPD-L1) контрольной точки иммунитета PD-1/PD-L1, наряду с некоторыми биохимическими и гематологическими показателями в клиническом течении COVID-19 и служат основой
для дальнейших исследований.
* * *
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interest.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Gong J., Dong H., Xia S.Q., Huang Y., Wang D., Zhao Y., Liu W.H., Tu S.H., Zhang M.M., Wang Q., Lu F.E. Correlation analysis between disease severity and inflammation-related parameters in patients with COVID-19: a retrospective study. BMC Infect. Dis. 2020; 20 (1): 963. https://doi. org/10.1186/s12879-020-05681-5.
2. Mehta P., McAuley D.F., Brown M., Sánchez E., Tattersall R.S., Manson J. COVID-19: consider cytokine storm syndromes and immunosuppression. Lancet. 2020; 395 (10229): 1033-4. https://doi.org/10.1016/ S0140-6736(20)30628-0.
3. Merad M., Martin J.C. Pathological inflammation in patients with COVID-19: a key role for monocytes and macrophages. Nat. Rev. Immunol. 2020; 20 (7): 448. https://doi.org/10.1038/s41577-020-0353-y
4. Recalcati S., Locati M., Marini A., Santam-brogio P., Zaninotto F.Differential regulation of iron homeostasis during human macrophage polarized activation. Eur. J. Immunol. 2010; 40 (3): 824-35. https://doi. org/ 0.1002/eji.200939889.
5. Wei S.C., Levine J.H., Cogdill A.P., Zhao Y., Anang N.A.S., Andrews M.C. Sharma P, Wang J, Wargo JA, Pe'er D, Allison JP.Distinct Cellular Mechanisms Underlie Anti-CTLA-4 and Anti-PD-1 Checkpoint Blockade. Cell. 2017; 170 (6): 1120-33. e17. https://doi.org/10.10Wj.cell.2017.07.024,
6. Rowe J.H., Johanns T.M., Ertelt J.M., Way S.S. PDL-1 blockade impedes T cell expansion and protective immunity primed by attenuated Listeria monocytogenes. J. Immunol. 2008; 180 (11): 7553-7. https:// doi.org/10.4049/jimmunol.180.11.7553.
7. Кушлинский Н.Е., Фридман М.В.,
Морозов А.А., Герштейн Е.С., Кадагидзе З.Г., Матвеев В.Б. Современные подходы к иммунотерапии рака почки. Онкоурология. 2018; 14 (2): 54-7. https:// doi.org/10.17650/1726-9776-2018-14-2-54-67.
[Kushlinskii N.E., Fridman M.V., Morozov A.A., Gerstein E.S., Kadagidze Z.G., Mat-veev V.B. Modern approaches to immunotherapy of kidney cancer. Oncourology 2018; 14 (2): 54-7 (in Russian)].
8. Kyriazopoulou E., Giamarellos-Bourboulis E.J. Monitoring immunomodulation in patients with sepsis. Expert Rev. Mol. Diagn. 2021; 21 (1): 17-29. https://doi.org/10.1080/ 14737159.2020.1851199.
9. Bryant-Hudson K.M., Carr D.J. PD-L1-expressing dendritic cells contribute to viral resistance during acute HSV-1 infection. Clin. Dev. Immunol. 2012; 2012: 924619. https://doi.org/10.1155/2012/924619.
10. Jubel J.M., Barbati Z.R., Burger C., Wirtz D.C., Schildberg F.A. The Role of PD-1 in Acute and Chronic Infection. Front Immunol. 2020; 11: 487. https://doi.org/10.3389/ fimmu.2020.00487.
11. Schonrich G., Martin J., Raftery M.J. The PD-1/PD-L1 Axis and Virus Infections: A Delicate Balance. Front Cell Infect. Microbiol. 2019; 9: 207. https://doi.org/10.3389/ fcimb.2019.00207.
12. Yekeduz E., Dursun B., Aydin G.Q., Yazgan S.C., Ozturk H.H., Azap A., Utkan G., Urun Y. Clinical course of COVID-19 infection in elderly patient with melanoma on nivolumab. J. Oncol. Pharm. Pract. 2020; 26 (5): 1289-94. https://doi. org/10.1177/1078155220924084.
13. Ahmed H., PatelK., Greenwood D.C.,
Halpin S., Lewthwaite P., Salawu A., Eyre L., Breen A., O'Connor R., Jones A., Sivan M. Long-term clinical outcomes in survivors of severe acute respiratory syndrome (SARS) and Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS) outbreaks after hospitalisation or ICU admission: a systematic review and meta-analysis. J. Rehabil. Med. 2020; 52 (5): jrm00063. https://doi. org/10.2340/16501977-2694.
14. Garg P., Arora U., Kumar A., Wig N. The "Post-COVID" syndrome: how deep is the damage? J. Med. Virol. 2021; 93 (2): 673-4. https://doi.org/10.1002/jmv.26465.
15. Halpin S., O'Connor R., Sivan M. Long COVID and chronic COVID syndromes. J. Med. Virol. 2021; 93 (1): 1242-3. https://doi. org/10.1002/jmv.26587.
16. Мещерякова Л.М., Левина А.А., Цыбульская М.М., Соколова Т.В. Основные механизмы регуляции обмена железа и их клиническое значение. Онкогематология. 2014; 3: 67-71. https:// doi.org/10.17650/1818-8346-2014-9-3-67-71.
[Meshcheryakova L.M., Levina A.A., Tsybul-skaya M.M., Sokolova T.V. The main mechanisms of regulation of iron metabolism and their clinical significance. Oncohematol-ogy. 2014; 3: 67-71 (in Russian)].
17. Wang C., Deng R., Gou L., Fu Z., Zhang X., Shao F., Wang G., Fu W., Xiao J., Ding X., Li T., Xiao X., Chengbin Li C. Preliminary study to identify severe from moderate cases of COVID-19 using combined hematology parameters. Ann. Transl. Med. 2020; 8 (9): 593. https://doi.org/10.21037/atm-20-3391.
Для цитирования: Кушлинский Н.Е., Бабкина И.В., Герштейн Е.С., Любимова Н.В., Тимофеев Ю.С., Короткова Е.А., Зубрихина Г.Н., Давыдова Т.В., Сомонова О.В., Стилиди И.С. Растворимые формы рецептора программируемой гибели клетки sPD-1 и лиганда sPD-L1, а также некоторые биохимические и гематологические показатели в крови переболевших COVID-19. Молекулярная медицина. 2022; 20 (2): 26-31. https://doi.Org/W.29296/24999490-2022-02-04
Поступила 12 января 2022 г.
For citation: Kushlinskii N.E., Babkina I.V., Gerstein E.S., Lyubimova N.V., Ti-mofeev Yu.S., Korotkova E.A., Zubrikhina G.N., Davydova T.V., Somonova O.V., Stilidi I.S. Soluble forms of programmable cell death receptor sPD-L and ligand sPD-L1, as well as some biochemical and hematological indicators in the blood of COVID-19 diseased. Molekulyarnaya meditsina. 2022; 20 (2): 26-31 (in Russian). https://doi.org/10.29296/24999490-2022-02-04
