CC BY
43
46
ЛЕКЦИИ
УДК 618.19-006.6-097
V V. Novikov1, А. V. Alyasova2, О. V. Utkin1, Е. V. Lyutina1, D. V. Novikov1, L. V. Varshavskaya2
THE SOLUBLE ANTIGENS CD38 AND CD95 AT BREAST CANCER
1 Lobachevsky University of Nizhny Novgorod 2 Medical A cademy of Nizhny Novgorod
ABSTRACT
The soluble forms of immune cells membrane antigens modulate the immune response. Soluble CD95-antigen may circulate in blood as monomeric or oligomeric forms. The serum level of monomeric soluble CD95-antigen is elevated at breast cancer, on the other hand, the serum level of oligomeric soluble CD95-antigen is decreased. The serum level of summary fraction of CD95-antigen is a predective factor of the responsibility to polychemiotherapy. The level of soluble CD3 8-antigen is also elevated in serum of patients with breast cancer. The successive therapy was associated with the decrease of soluble CD38 serum level. The resistance of patients to chemotherapy was connected with high CD38 serum level. The possible mechanism of breast cancer escape from immune surveillance was proposed.
Key words: CD38, CD95, breast cancer.
В. В. Новиков1, А. В. Алясова2, О. В. Уткин1, Е. В. Лютина1, Д. В. Новиков1, Л. В. Варшавская2
РАСТВОРИМЫЕ АНТИГЕНЫ CD38 И CD95 ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
1 Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского 2 Нижегородская государственная медицинская академия
РЕЗЮМЕ
Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы модулируют иммунный ответ на опухоли, выступая в роли ограничительных факторов, участвующих в формировании механизмов ухода опухоли от иммунного ответа. Примерами таких антигенов являются растворимые антигены CD95 и CD38. Растворимый С095-антиген может находиться в мономерной и олигомерной формах. При раке молочной железы повышается уровень мономерной формы растворимого СБ95-антигена и падает содержание его олигомерной формы. Сывороточный уровень суммарной фракции растворимого СБ95-антигена служит прогностическим показателем ответа на полихимиотерапию больных раком молочной железы. В сыворотке крови больных раком молочной железы также увеличивается содержание растворимого CD3 8-антигена. Успешная полихимиотерапия сопровождается падением его сывороточного содержания. Устойчивость к полихимиотерапии характеризуется отсутствием изменений в его содержании. Предлагается возможный механизм участия растворимого СВ38-антигена в механизмах ухода опухоли от иммунного ответа.
Ключевые слова: CD38, CD95, рак молочной железы.
ВВЕДЕНИЕ
Характер опухолевого роста во многом зависит от эффективности иммунологических защитных механизмов и от способности трансформированных клеток уходить от иммунологического надзора. К белкам, способным регулировать иммунные механизмы и выступать в качестве факторов ухода опухоли от иммунологического контроля, относятся растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы. Они могут вызывать множественные эффекты, отражающие роль растворимых
форм мембранных антигенов в регуляции иммунологических механизмов на разных этапах реализации иммунного ответа [4]. Нарушение их равновесного содержания в межклеточном пространстве и биологических жидкостях организма приводит к модуляции межклеточных мембранных взаимодействий и соответственно иммунного ответа. В связи с этим растворимые формы мембранных антигенов можно рассматривать в качестве эндогенных иммунорегуляторов, тесно связанных с работой всех звеньев иммунитета.
Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы
Существует два основных способа образования растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы. Первый — это альтернативный сплайсинг матричной РНК, приводящий к образованию транскрипта, соответствующего растворимой форме мембранного антигена. При сплайсинге мРНК чаще всего исключается экзон, кодирующий трансмембранный участок. В результате образуется форма белка, не способная заякориться на мембране и продуцирующаяся во внеклеточное пространство. Альтернативный сплайсинг матричной РНК известен для множества мембранных антигенов клеток иммунной системы, в т. ч. для таких широко известных и функционально'важных антигенов, как антиген Баз (С095), опосредующий апоптоз. Во многих случаях наряду с мембранной формой синтезируется несколько форм мРНК, соответствующих различным растворимым изоформам антигена [6].
Второй способ образования растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы — это протеолитическое отщепление внеклеточной части мембранных белков с поверхности клеток, называемое протеолитическим шеддингом. С помощью протеоли-тического шедцинга образуется более двух десятков известных в настоящее время растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы. Растворимые формы одного и того же мембранного антигена нередко могут образовываться и путем альтернативного сплайсинга, и за счет протеолитического шедцинга. Примером тому — растворимый РаБ-анти-ген, для которого известно существование обеих форм. В то же время для такого антигена, как растворимый СБЗ 8-антиген, продемонстрирован путь образования только за счет шед цинга.
Механизмы регулирующего действия растворимых форм мембранных антигенов клеток довольно разнообразны. Так, они выполняют роль межклеточных коммуникаторов, связываясь с лигандами своих мембранных гомологов на поверхности клеток, что может приводить к блокаде взаимодействия 2 клеток, препятствуя тем самым передаче сигнала от клетки к клетке и супрессии иммунного ответа. Растворимый антиген, являющийся продуктом одной клетки, взаимодействуя с лигандом на другой клетке, способен выступать в качестве трансмиттера, активирующего или подавляющего функцию другой клетки вплоть до инициации ее гибели путем апоптоза. Растворимые формы мембранных антигенов могут действовать как аутокринные факторы, связываясь с мембранным лигандом (при его наличии на поверхности той же клетки) или мешая взаимодействию клетки-продуцента растворимого антигена с клеткой-партнером. В последнем случае предполагается, что растворимые антигены вмешиваются в образование на клеточной мембране функционально активных белковых гомодимеров и гомотримеров и переводят их в неактивное состояние.
Обнаружено, что эффекторное действие растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы зависит от особенностей их структурной организации. В частности, мономерная форма растворимого СБ95-антигена препятствует проведению в клетку апоптотического сигнала, возникающего при взаимодействии мембранного С095-антигена с Баз-лигандом. В то же время тримерная форма растворимого СБ95-антигена сама обладает цитотоксической активностью, вызывая гибель клеток при взаимодействии с Рав-ли-гандом [21].
В норме растворимые формы мембранных антигенов находятся в равновесном. состоянии. Изменение концентрации какого-либо растворимого антигена вызывает нарушение гомеостатического равновесия и модуляции иммунного ответа. Смещение равновесия между мономерной и олигомерной формой растворимых антигенов также может привести к нарушению гомеостатического равновесия [5].
Методы определения растворимых антигенов СБ38 и СБ95
В работе было исследовано сывороточное содержание растворимых форм антигенов СБ95 и СБ38 к сыворотке крови больных раком молочной железы. Содержание растворимого СВ95-антигена определяли в сыворотке крови 64 больных в возрасте от 23 до 65 лет с гистологически подтвержденным диагнозом рака молочной железы. Сывороточное содержание растворимого СЭЗ 8-антигена определяли у 55 больных раком молочной железы. Всем больным провели полное клиническое обследование. Определение количества растворимых антигенов осуществляли в динамике с помощью разработанных авторами иммунофермент-ных методов с применением моноклональных антител серии ИКО.
При оценке сывороточного уровня суммарной фракции растворимого С095-антигена в качестве первых антител, сорбируемых на твердую фазу, использовали поликлональные антитела против антигенов мо-нонуклеарных клеток периферической крови. После внесения в инкубационную среду образца сыворотки крови, инкубации и отмывания несвязавшихся белков в лунки планшетов для иммуноферментного анализа вносили моноклональные антитела ИКО-160, меченные пероксидазой, и после соответствующей инкубации и отмывки проявляли реакцию. Олигомерную форму СБ95-антигена определяли, используя моноклональные антитела ИКО-160 в качестве как первых, так и вторых антител, конъюгированных с пероксидазой хрена. Сывороточное содержание растворимого С038-антигена определяли, используя поликлональные антитела против антигенов мононуклеарных клеток периферической крови и конъюгированные с пероксидазой моноклональные антитела ИКО-20 против СОЗ8-антигена [1]. Результаты выражали в условных единицах. Контрольную группу составили 30 здоровых женщин, сопоставимых по возрасту с обследованными больными.
Сывороточный уровень растворимого CD95-антигена при раке молочной железы
Антиген CD95 (Fas) в мембранной форме принимает участие в инициации одного из путей апоптоза. Он относится к рецепторам семейства фактора некроза опухоли, является мембранным белком I типа и экспрессируется на поверхности клеток широкого спектра тканей (кератиноцитах, гепатоцитах, клетках иммунной системы и др.). Ген APT, кодирующий антиген CD95 (Fas) человека, локализован в длинном плече 10-й хромосомы и состоит из 9 экзонов. В структуре Fas-антигена можно выделить следующие регионы: внеклеточный, состоящий примерно из 160 аминокислот, закодированных в первых 5 экзонах гена АПТ, трансмембранный, закодированный в 6-м экзоне, и внутриклеточный, соответствующий 7-9-му экзону. Для индукции апоптоза необходимо взаимодействие гомотримера антигена CD95 (Fas) со своим лигандом (FasL), который также является гомотримером [9, 11,23, 25].
Обнаружено несколько альтернативных вариантов мРНК, кодирующих мембранные и растворимые формы С095-антигена. Среди растворимых выделяют доминирующую форму, образующуюся за счет делеции 6-го экзона. Остальные образуются за счет единичных или комбинированных делеций экзонов, приводящих к сбою рамки считывания первичного транскрипта. Общей особенностью делеций, обусловливающих появление растворимой формы, является сохранение первых 2 экзонов [19, 20].
Продукты трансляции альтернативных форм мРНК растворимого CD95-a№rareiia, синтезируемые в растворимой форме, способны ингибировать апопто-тические процессы. Мономерные формы растворимого СБ95-антигена блокируют центры связывания на Fas-лиганде, предотвращая таким образом связывание последнего с мембранным С095-антигеном. Функциональные свойства растворимых форм СБ95-антигена ассоциированы с первыми 49 аминокислотными остатками [16, 20].
Как мембранный, так и растворимый CD95-антиген может образовывать олигомерную (тримерную) форму [13, 21]. Обнаружено, что олигомеризация растворимого CD95-aHTnreita индуцирует его цитотоксичность. Доминирующая форма этого антигена может присутствовать в сыворотке крови как в мономерной, так и в олигомерной форме. У здоровых доноров растворимый СВ95-антиген находится преимущественно в мономерной форме, при ревматоидном артрите почти весь — в олигомеризованной [21]. Известно также, что растворимый СБ95-антиген может образовываться за счет протеолитического шедцинга [4].
Наши исследования показали, что у впервые поступающих в стационар больных раком молочной железы независимо от стадии заболевания средний сывороточный уровень суммарной фракции растворимого СВ95-антигена достоверно превышает норму в 2,8 раза и соответствует 1129,9±131,9 U/ml. Сывороточный уровень суммарной фракции растворимого CD95-aH-тигена статистически достоверно превышает конт-
рольный уровень на I стадии и затем сохранятся повышенным от стадии к стадии, достигая на IV стадии величины, превышающей норму в 3 раза (рис. 1).
1400
U/ml
1200
1000
800
600
400
200
Рис. 1. Сывороточный уровень суммарной фракции растворимого СБ95-антигена на разных стадиях рака молочной железы:
1 — здоровые доноры; 2 — I стадия; 3 — II стадия; 4 — III стадия; 5 — IV стадия
В отличие от суммарной фракции растворимого ■ СВ95-антигена сывороточное содержание его олигомерной фракции падает в сравнении с нормой от стадии к стадии. Так, если в норме сывороточный уровень олигомерного С095-антигена составляет 252,1+28,7 и/т1, то у больных раком молочной железы на IV стадии заболевания он снижается до 121,5±10,3 и/т1 (р<0,05) (рис. 2).
Рис. 2. Сывороточный уровень олигомерной формы растворимого СБ95-антигена на разных стадиях рака молочной железы:
1 — здоровые доноры; 2 — I стадия; 3 — II стадия; 4 — III стадия; 5 — IV стадия
* Статистически достоверные различия в сравнении с нормой.
Таким образом, сывороточное содержание олигомерной и суммарной фракций растворимого С095-антигена при раке молочной железы меняется противоположным образом. Повышение уровня суммарной фракции обусловлено увеличением сывороточной концентрации мономерных молекул антигена. Подъем их концентрации может быть следствием 2 процессов: активации секреции растворимого С095-антигена, продуцирующегося путем альтернативного сплайсинга матричной РНК, и активацией шеддинга его с мембраны клеток. Возможно, повышение уровня мономеров связано с шедцинггом, однако вопрос остается открытым.
Увеличение концентрации мономерной формы растворимого СБ95-антигена может выступать в качестве механизма защиты опухоли от иммунного надзора. Повышенная в сравнении с нормой концентрация мономерной формы обеспечивает блокаду Раз-зависимо го апоптоза опухолевых клеток, присоединяясь к БаБ-лиганду на Т-лимфоцитах или встраиваясь в мембранные олигомеры С095-антигена на клетках-мишенях. В результате блокируется взаимодействие клетки-мишени и клетки-эффектора.
Подъем сывороточной концентрации растворимого С095-антигена при раке молочной железы обнаружен рядом авторов [10, 22, 24]. Продемонстрировано прогностическое значение сывороточного уровня этого антигена. Показано, что падение его сывороточного содержания ассоциировано с благоприятным прогнозом течения рака молочной железы. Наши данные подтверждают мониторинговую значимость сывороточного содержания суммарной фракции растворимого СБ95-антигена.
На старте полихимиотерапии среднее содержание растворимого С095-антигена в сыворотке крови статистически достоверно не различалось как у больных, успешно ответивших на проводимое лечение, так и у резистентных больных. При эффективности полихимиотерапии и последующем длительном безреци-дивном течении заболевания сывороточное содержание растворимого СВ95-антигена уже в течение первых 2 недель достигало нормы, а затем опускалось ниже нормы, сохраняясь на таком уровне в течение 14 нед. Понижение сывороточного уровня антигена наблюдалось у 33 из 34 больных, успешно ответивших на полихимиотерапию (табл. 1).
Таблица 1
Содержание растворимого СБ95-антигена в крови больных раком молочной железы, и/т1
Характер течения заболевания Уровень Снижение уровня (количество больных) Подъем уровня (количество больных)
до полихимиотерапии после полихимио- терапии
Ремиссия 955.51124,0' 233,2131,7 20 1
Кратковременная ремиссия (3-4 мес.) 1343,11206,4* 686,21120,5* 9 4”
Прогрессия 1533,61281,4* 2171,61334,0* 8 12
* Статистически достоверные различия в сравнении с нормой.
Кратковременная ремиссия (3-4 мес) сопровождалась разнонаправленным изменением уровня растворимого С095-антигена. Из 24 больных, находившихся под наблюдением, у 15 происходило снижение сывороточного содержания этого антигена, у 9 больных — его подъем. Вследствие этого средний уровень растворимого С095-антигена не менялся, оставаясь повышенным. У 75 % больных с прогрессированием опухолевого процесса его уровень постепенно нарастал.
Результаты исследования позволяют заключить, что сывороточный уровень растворимого С095-ан-тигена может быть использован в мониторинговых целях, а его падение в процессе полихимиотерапии — свидетельствовать об эффективности проводимого лечения.
Сывороточной уровень растворимого СБ38-ан-тигена при раке молочной железы
Наряду с определением у больных раком молочной железы сывороточного уровня растворимого С095-антигена нами было изучено сывороточное содержание растворимой формы СБЗ 8-антигена. Он является мембранным гликопротеином I типа, имеет молекулярную массу 45 кДа, экспрессирован на мембране гемопоэтических предшественников, тимоцитов, активированных Т-лимфоцитов, плазматических клеток, моноцитов, служит маркером активации лимфоцитов. Внеклеточная часть СБ38-антигена функционирует как фермент, катализирующий синтез и гидролиз циклической АДФ-рибозы, являющейся мощным мобилизатором внутриклеточного Са2+. Антиген СЭ38 выступает также в качестве антигена адгезии. Его лигандом является антиген С031, экспрессированный на лейкоцитах и эндотелии сосудов [17, 18].
СБЗ 8-антиген может находиться в растворимой форме, образующейся путем протеолитического шеддинга с участием 2п2+-зависимых протеиназ. Она блокирует взаимодействие мембранных антигенов СБ38 и С031 [12]. Сывороточное содержание растворимого СОЗ 8-антигена повышается при аутоиммунных заболеваниях, миеломной болезни, вирусных гепатитах, урогенитальном хламидиозе, тяжелых ожогах, ВИЧ-инфекции [2, 3, 7, 8, 14, 15].
Уровень растворимого СБЗ 8-антигена в сыворотке крови больных раком молочной железы ранее не был исследован. В связи с эти мы оценили сывороточное содержание данного антигена на разных стадиях карциномы молочной железы. Как следует из рис. 3, начиная со II стадии рака молочной железы, сывороточное содержание растворимого СБЗ 8-антигена значительно повышается в сравнении с нормой. Повышенный уровень его сохраняется после мастэктомии и лучевой терапии. Успешная полихимиотерапия в большинстве случаев приводила к снижению уровня сывороточного С038-антигена до нормы (табл. 2). Из 20 больных, достигнувших ремиссии, только в 1 случае наблюдалось отсутствие падения сывороточного содержания данного антигена.
и/т!
Характер течения заболевания Уровень Снижение уровня (количество больных) Подъем уровня (количество больных)
до полихимиотерапии после полихимио- терапии
Ремиссия 955,5±124,0* 233,2±31,7 20 1
Кратковременная ремиссия (3-4 мес) 1343,1±206,4* 686,2±120,5* 9 4”
Прогрессия 1533,6±281,4* 2171,6±334,0* 8 12
Статистически достоверные различия в сравнении с нормой '* У 2 больных изменений не выявлено.
пользования сывороточного уровня растворимого С038-антигена в качестве мониторингового показателя при раке молочной железы.
Повышенная концентрация растворимого СБ38-антигена способна привести к блокаде взаимодействия мембранных антигенов СБ38 и СБ31 в момент поступления эффекторных клеток из сосудистого русла в ткани. Как следствие возможно предотвращение поступления эффекторных клеток в тканевое пространство и соответственно к опухолевому очагу (рис. 4). Повышение концентрации растворимого С038-ан-тигена может, таким образом, сформировать дополнительные механизмы ограничения иммунного ответа на опухоль, в частности на развитие карциномы молочной железы.
Рис. 3. Сывороточное содержание растворимого СОЗ 8-антигена на разных стадиях карциномы молочной железы:
1 — норма; 2 — I стадия; 3 — II стадия; 4 — III стадия; 5 — IV стадия
* Статистически достоверные различия в сравнении с нормой.
Таблица 2
Содержание растворимого СБ38-антигена в крови больных раком молочной железы, и/т1
Рис. 4. Возможный механизм ограничения миграции лимфоцитов в опухолевый очаг:
зСБ38 — растворимый антиген СОЗ 8; тСБ38 — мембранный антиген СОЗ 8
Кратковременная ремиссия до 3-4 мес сопровождалась падением сывороточной концентрации растворимого СОЗ 8-антигена у 9 больных из 15. У 4 больных наблюдался рост уровня антигена, у 2 — содержание не менялось. При прогрессировании опухолевого роста у 12 из 20 больных происходило повышение уровня растворимого СОЗ 8-антигена. 8 из 20 больных характеризовались умеренным снижением содержания тестируемого антигена, ни в одном случае не достигавшим нормы. Результатом явилось повышение среднего уровня растворимого СОЗ 8-антигена в группе больных, не отвечающих на полихимиотерапию.
Таким образом, успешная полихимиотерапия в 19 случаев из 20 сопровождалась нормализацией сывороточного содержания растворимого СОЗ 8-антигена. Случаи резистентности к полихимиотерапии характеризовались сохранением повышенного уровня данного антигена или ростом его концентрации. Полученные результаты свидетельствуют о возможности ис-
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Как следует из приведенных данных, растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы являются эндогенными регуляторами, модулирующими иммунный ответ. Нередко они выступают в качестве ограничителей иммунного ответа и способны принимать участие в формировании механизмов ухода опухоли от иммунологического надзора. Примерами таких антигенов являются растворимые С095 и СОЗ 8. Растворимый С095-антиген может находиться в мономерной форме, блокирующей апоптоз опухолевых клеток, и в олигомерной форме, обладающей цитоток-сическим действием по отношению к клеткам, экспрессирующим Раз-лиганд. При раке молочной железы повышается уровень мономерной формы растворимого С095-антигена и падает содержание его олигомерной формы. Сывороточный уровень суммарной фракции растворимого С095-антигена служит
прогностическим показателем ответа на полихимиотерапию больных раком молочной железы.
В сыворотке крови больных раком молочной железы также увеличивается содержание растворимого CD3 8-антигена. Успешная полихимиотерапия сопровождается падением его сывороточного содержания. Устойчивость к полихимиотерапии характеризуется сохранением высокого сывороточного уровня CD38-антигена. Предполагается, что повышение концентрации растворимого CD3 8-антигена тормозит поступление эффекторных клеток к опухолевому очагу, выступая тем самым в качестве одного из факторов, обеспечивающих уход опухоли от иммунного надзора.
ЛИТЕРАТУРА
1. Барышников А. Ю„ Тоневицкий А. Г. Моноклональные антитела в лаборатории и клинике. — М.: Медицина. — 1997. — 212 с.
2. Вишневская Т. В., Масалова О. В., Шкурко Т. В. и др. Растворимые формы дифференцировочных антигенов в образцах сыворотки крови больных гепатитом С // Мед. иммунол. — 2005. — Т. 7, № 1. — С. 33-40.
3. Егорова Н. И., Курников Г. Ю., Бабаев А. А., Новиков В. В. Сывороточный уровень растворимых молекул межклеточной адгезии при урогенитальном хла-мидиозе // Цитокины и воспаление. — 2003. — Т. 2, № 2. — С. 32-36.
4. Новиков В. В. Растворимые формы дифференцировочных антигенов гемопоэтических клеток // Вопросы гематологии. — 1996. — № 6. — С. 40-43.
5. Новиков В. В. Растворимые дифференцировоч-ные антигены // Иммунотерапия рака. Материалы Европейской школы онкологов. — М., 1999. С. 31-38.
6. Новиков Д. В., Лебедев М. Ю., Уткин О. В. и др. Метод сравнительной оценки экспрессии мРНК мембранной и доминирующей растворимой форм Fas-антигена с использованием ПЦР в реальном времени / Матер. III Моск. Межд. Конгр. «Биотехнология: состояние и перспективы развития». Ч. 1. — М., 2005. С. 195-195.
7. Птицына Ю. С., Борнякова И. А., Новиков В. В. и др. Содержание растворимой формы CD38 антигена в сыворотке крови больных гепатитами В и С // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. — 1999.
— Т. 9, № 1. — С. 75-75.
8. Птицына Ю. С., Лебедев М. Ю., Королева В. В. и др. Различия в содержании сывороточной формы CD38 антигена при иммунных нарушениях разной этиологии // Медицинская иммунология. — 1999. — Т.
1, № 3^. — С. 82.
9. Рыжов С. В., Новиков В. В. Современне представления о механизмах апоптоза // Рос. биотерап. журн. — 2002. — Т. 1, № 3. — С. 5-11.
10. Bewick М., Conlon М., Parissenti А. М. et al. Soluble Fas (CD95) is a prognostic factor in patients with metastatic breast cancer undergoing high-dose chemotherapy and autologous stem cell transplantation //
J. Hematother. Stem Cell Res. — 2001. — Vol. 10. — P. 759-768.
11. Cascino I., Fiucci C., Papoff C. Ruberti C. Three functional soluble forms of the human apoptosis-inducing Fas molecule are produced by alternative splicing // J. Immunol. — 1995. — Vol. 154. — P. 2706-2713.
12. Funaro A., Horenstein A. L., Calosso L. Identification and characterization of an active soluble form of human CD38 in normal and pathological fluids // Int. Immunol. — 1996. — Vol. 8. — P. 1643-1650.
13. Kamitani T., Nguyen H. P., Yeh E. T. H. Activation-induced Aggregation and Processing of the Human Fas Antigen // J. Biol. Chem. — 1997. — Vol. 272.
— P. 22307-22314.
14. Khudyakova N. E., Egorova N. I., Ptytsina Ju. S. et al. Serum level of soluble adhesion molecules in HIV-infected with markers of other viral diseases // Russ. J. Immunol. — 2003. — Vol. 8, No. 4. — P. 245-250.
15. Lebedev M. Ju., Egorova N. Sholkina M. N. et al. Serum level of different forms of soluble CD38 antigen in burned patients // Bums. — 2004. — Vol. 30. — P. 552-556.
16. Liu J. H., Wei S., Lamy T. et al. Blockade of Fas-dependent apoptosis by soluble Fas in LGL leukemia // Hematology. — 2002. — Vol. 100. — P. 1449-1453.
17. Malavasi F., Funaro A., Rogerro S. Human CD38: a glycoprotein in search of a function // Immunol. Today.
— 1994. — Vol. 15. — P. 95-97.
18. Mehta K., Shahid U., Malavasi F. Human CD38 a cells-surface protein with multiple functions // FASEB J.
— 1996. — Vol. 10. — P. 1408-1417.
19. Otsuki T., Sakaguchi H„ Tomokuni A. et al. Detection of alternatively spliced variant messages of Fas gene and mutational screening of Fas and Fas ligand coding regions in peripheral blood mononuclear cells derived from silicosis patients // Immunology Letters. — 2000. — Vol. 72. — P. 137-143.
20. Papoff C., Cascino I., Eramo A. et al. An N-termi-nal domain shared by Fas/Apo-l(CD95) soluble variants prevents cell death in vitro // J. Immunol. — 1996. — Vol. 156. — P. 4622-4630.
21. Proussakova O. V, Rabaya N. A., Moshnikova A. B. et al. Oligomerization of soluble Fas antigen induces its cytotoxicity // J. Biol. Chem. — 2003. — Vol. 278, №38. — P. 36236-36241.
22. Sheen-Chen S. M., Chen H. S., Eng H. L., Chen W. J. Circulating soluble Fas in patients with breast cancer // World J. Surg. — 2003. — Vol. 27. — P. 10-13.
23. Thompson C. B. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease // Science. — 1995. — Vol. 267. — P. 1456-1462.
24. Ueno T., Toi M., Tominaga T. Circulating soluble Fas concentration in breast cancer patients // Clin. Cancer Res. — 1999. — Vol. 5. — P. 3529-3533.
25. Walczak H., Krammer P. H. The CD95 (APO-1/Fas) and the TRAIL (APO-2) apoptosis systems // Exp. Cell Res. — 2000. — Vol. 256. — P. 58-66.
