CC BY
86
Сб. материалов конф. «Безопасность месторождений и an opportunity of use of mineral waters of a resort "Thawed"
проявлений минеральных вод Приморского края». Вла- // Balneoresources the Far East: Collection Materials conf.
дивосток, 2001. 159-164. «Safety of deposits and displays of mineral waters of Primorye
Simonova I.N., Knyshova V.V. Balneoterapevticheskie of Territory». Vladivostok, 2001. 159-164.
PHYSIOTHERAPY OF SINUSITIS AMONG ADULTS AND CHILDREN IN CONDITIONS OF THE MAGADAN DISTRICT HOSPITAL
2Elena Victorovna KUCHEROVA, JMarina Vladimirovna ANTONYUK,
2Irina Vladimirovna POLYARNAYA, 2Larisa Vadimovna BARANOVA
Vladivostok Branch of the Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration of SB RAMS - Research Institute of Medical Climatology and Rehabilitative Treatment 2Municipal Departament healt organization Magadan district hospital
Clinico-rentgenological cure rates of patient with acute or chronic sinusitis were analysed. It was revealed that electrophoresis of mineral water exerts apparent local anti-edematous and anti-inflammatory action, favours abstersion of sinuses of nose. Treatment methods which were based on using of natural and physiotherapeutic factors and adopted in work of the Magadan district hospital allow to reject from long antibiotic therapy and reduce costs on treatment of patient with sinusitis.
Key words: acute or chronic sinusitis, electrophoresis, cure rates
Kucherova E.V. - head department otorinolargologycal, doctor of righer category; e-mail: [email protected] Antonyuk M.V. - Doct. Med. Sci., head of lab. rehabilitative treatment Polyarnaya I.V. - deserved doctor RF, head doctor
Baranova L.V. - head department physical therapy, doctor of righer category
УДК 615.322+616.36
РАСТИТЕЛЬНЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПОЛИФЕНОЛОВ В ВОССТАНОВЛЕНИИ ФУНКЦИИ ПЕЧЕНИ У БОЛЬНЫХ АЛКОГОЛИЗМОМ
1Наталья Федоровна КУШНЕРОВА, 1Светлана Евгеньевна ФОМЕНКО,
1Владимир Геннадьевич СПРЫГИН, 2Татьяна Викторовна КУШНЕРОВА,
1Лариса Николаевна ЛЕСНИКОВА
Тихоокеанский океанологический институт им. В.И.Ильичева ДВО РАН, Владивосток;
2Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, Владивосток
Исследовано влияние препарата «Калифен» на биохимические показатели крови, характеризующие функциональное состояние печени больных хроническим алкоголизмом II стадии. Показано нарушение метаболических реакций синтеза фосфолипидов, полиненасыщенных жирных кислот семейства п-6 и п-3,
этерифицирующей функции печени. Однократный прием «Калифена» совместно со стандартной терапией способствовал нормализации изученных биохимических параметров крови. Отмечалась тенденция к восстановлению метаболических реакций синтеза фосфолипидов и этерифицирующей функции печени. Введение «Калифена» в общую терапию снимало состояние оксидативного стресса в результате ингибирования свободно-радикальных реакций и снижения образования токсичных продуктов липопероксидации.
Ключевые слова: этиловый спирт, кровь, липиды, калифен, алкоголизм
Кушнерова Н.Ф. - д.б.н., профессор, зав. лаб. биохимии, е-таИ: [email protected]
Фоменко С.Е. - к.б.н., вед. науч. сотр. лаб. биохимии
Спрыгин В.Г. - к.б.н., вед. науч. сотр. лаб. биохимии
Кушнерова Т.В. - к.м.н., науч. сотр. лаб. фармакологии
Лесникова Л.Н. - к.б.н., науч. сотр. лаб биохимии
Одним из наиболее широко распространенных гепатотоксических веществ является этиловый спирт, потребление которого сопровождается развитием тяжелой патологии печени. Ограничительным моментом для проведения активного противоалкогольного и восстановительного лечения является привыкание к лекарственным препаратам, индивидуальная непереносимость, возрастной фактор. Следовательно, целесообразно искать гепатопротекторы в ряду естественных природных антиоксидантов, в частности, среди растительных препаратов, содержащих флавоноиды (полифеноль-ные структуры) [1]. В результате многолетних экспериментальных исследований был разработан и предлагается к употреблению экстракт из калины, обладающий гепатопротекторными свойствами (патент № 2177330), имеющий торговое название «Калифен» (свидетельство на товарный знак № 228327, ТУ 9168-079-00480052-07) и представляющий собой сложную композицию различных биологически-активных веществ: лейкоантоцианы, катехины, флавонолы, органические кислоты, свободные аминокислоты, редуцирующие сахара и ряд других органических соединений. Полифенолы составляют свыше 60 % сухого остатка экстракта [2]. Целью работы явилось изучение влияния водного раствора комплекса биологически активных веществ из экстракта «Калифен» на динамику метаболических реакций у больных хроническим алкоголизмом, находящихся в условиях стационарного лечения.
Эксперимент проводили в условиях наркологического стационара на мужчинах-добровольцах в возрасте 25-30 лет, разделенных на 2 группы (по 10 человек): 1 группа (контроль) - здоровые, не употреблявшие спиртные напитки в течение длительного времени; 2 группа - больные хроническим алкоголизмом 2 стадии, однократно получившие 100 мл водного раствора сухого остатка экстракта «Калифен», что соответствовало дозе 100 мг общих полифенолов. Данная доза является лечебной при заболеваниях печени [3]. Так как водно-спиртовые экстракты противопоказано использовать в качестве вспомогательной терапии больным алкоголизмом, экстракт «Калифен» предварительно упаривали под вакуумом для удаления этанола и затем доводили дистиллированной водой до половины исходного объема. В полученном растворе определяли содержание общих полифенолов и доводили водой до концентрации 100 мг общих полифенолов в 100 мл раствора. При поступлении больных в стационар им назначали комплекс общепринятых дезинтоксика-ционных и симптоматических средств. В эксперименте они участвовали на 5-й день госпитализации с целью исключения острого влияния этанола. Кровь
исследовали до приема препарата (фон) и через 4 часа после него. Исследование одобрено Комиссией по вопросам этики Тихоокеанского океанологического института им. В.И.Ильичева ДВО РАН.
Экстракт общих липидов из сыворотки крови готовили общепринятым методом. Фракционное разделение фосфолипидов и их количественное определение осуществляли методом двумерной тонкослойной хроматографии [4]. Хроматографическое распределение нейтральных липидов и их количественное определение проводили методом одномерной тонкослойной хроматографии [5]. Для определения жирнокислотного состава липидный экстракт подвергали метанолизу с хлористым ацетилом. Эфиры жирных кислот анализировали на хроматографе «ЛХМ-2000» с пламенно-ионизационным детектором. Жирные кислоты идентифицировали как путем сравнения удерживаемых объемов в исследуемой смеси, так и стандартных препаратов метиловых эфиров жирных кислот (С16 - С24).
Сравнивая фоновые величины уровня нейтральных липидов сыворотки крови у больных алкоголизмом с таковыми у здоровых, следует отметить у первых увеличенное на 12 % содержание триацил-глицерина (ТАГ) (19,36±0,60 % против 17,24±0,82 % в контроле; р<0,05), что обусловлено угнетением активности триглицеридлипазы. Увеличенное содержание свободных жирных кислот (СЖК) на 10 % (17,77±0,65 % против 16,14±0,2 % в контроле; р<0,05) и холестерина (ХС) на 11 % (19,37±0,35 % против 17,43±0,57 % в контроле; р<0,05) связаны как с активацией их синтеза из ацетил-КоА, образовавшегося при окислении этанола, так и в результате активации реакций липолиза в жировой ткани под действием химического стресса (реакция на этанол). Сниженное на 11 % содержание эфиров холестерина (ЭХС) (20,49±0,44 % против 23,07±0,47 % в контроле; р<0,05) обусловлено угнетением активности лецитин-холестерин-ацилтрансферазы (ЛХАТ) и нарушением синтеза и катаболизма липопротеинов. Достоверно различаются и фосфолипидные спектры в сыворотке крови обследуемых обеих групп (табл.).
Так, у больных (фоновые значения) содержание фосфатидилхолина (ФХ) на 42 % (р<0,001), а фосфа-тидилэтаноламина (ФЭ) на 23 % (р<0,001) было ниже контрольной величины. Следует отметить высокое содержание лизофосфолипидов: количество лизо-фосфатидилхолина (ЛФХ) превышало контрольный уровень в два (р<0,001), а лизофосфатидилэтанола-мина (ЛФЭ) в шесть раз (р<0,001). Эти результаты свидетельствуют о высокой активности фосфолипаз и перекисного окисления липидов (ПОЛ) у больных алкоголизмом. Обращает на себя внимание факт бо-
Таблица
Динамика содержания фосфолипидных фракций в сыворотке крови больных алкоголизмом после однократного приема водного раствора комплекса полифенолов из экстракта «Калифен»
(в % от суммы всех фракций; М±м)
Фракции фосфолипидов Контроль Больные алкоголизмом
Фон ч/з 4 часа
Фосфатидилхолин 46,14±2,26 26,83±2,17*** 32,37±2,15
Лизофосфатидилхолин 11,66±1,12 24,97±1,41*** *19,63±1,31
Сфингомиелин 13,00^1,19 13,00±1,43 15,26±1,33
Фосфатидилэтаноламин 8,44±0,42 6,48±0,44** 6,52±0,41
Лизофосфатидилэтаноламин 2,13±0,76 13,11±1,26*** **8,20±0,87
Фосфатидилсерин 5,00±0,32 4,43±0,33 4,31±0,25
Фосфатидилинозит 8,43±0,77 6,20±0,44* 6,48±0,37
Дифосфатидилглицерин 6,19±0,44 4,98±0,29* 5,23±0,22
Примечание: различия достоверны при: одна звездочка -р<0,05; две -р<0,01; три -р<0,001 (справа - по сравнению с контролем; слева - по сравнению с фоном).
лее низкого содержания дифосфатидилглицерина (ДФГ) (снижение на 20 %; р<0,05) - важного компонента мембран митохондрий, необходимого для функционирования ферментов дыхательной цепи. В общих липидах сыворотки крови больных алкоголизмом (фоновые значения) отмечались глубокие изменения в жирнокислотном спектре при сравнении его с таковым в контроле. В ряду насыщенных жирных кислот количество миристиновой кислоты (14:0) было выше в 2,5 раза. Количество пальмитиновой (16:0) и стеариновой (18:0) кислот повышено в среднем на 24-27 % (р<0,05). В связи с этим возросла сумма насыщенных жирных кислот до 47 % и, соответственно, индекс насыщенности (0,89 против 0,56 в контроле). Увеличилась сумма моноеновых жирных кислот за счет достоверного повышения количества пальмитолеиновой (16:1) жирной кислоты. В ряду ненасыщенных жирных кислот отмечалось снижение количества жирных кислот, относящихся к семейству п-6 и п-3. Полученные различия у здоровых и больных алкоголизмом связаны с тем, что у последних из ацетил-СоА, образующегося при окислении этанола, усиливается биосинтез насыщенных жирных кислот, в частности, миристиновой, пальмитиновой и стеариновой. Нарушение метаболизма линолевой кислоты в арахидоновую, индуцированное этанолом, связано со снижением активности де-сатураз и процесса элонгации [6]. Было установлено, что такие изменения в жирнокислотном спектре сопровождаются увеличением пальмитоилсодержа-
щего фосфатидилхолина и снижением арахидоно-илсодержащих компонентов липопротеинов (ЛП), в результате чего меняются их структурные и функциональные свойства. На основании полученных результатов следует, что хроническое потребление алкоголя сопровождается нарушением синтетических механизмов образования фосфолипидов, по-линенасыщенных жирных кислот (ПНЖК), ЛП. Следовательно, важным этапом в процессе лечения и реабилитации таких больных является восстановление липидного обмена.
Однократный прием водного раствора комплекса полифенолов из экстракта «Калифен» показал выраженную тенденцию к нормализации изученных биохимических параметров. При сравнении показателей нейтральных липидов сыворотки крови до и после приема препарата больными алкоголизмом отмечалась тенденция к снижению количества ТАГ (18,16 ±
0,48 %), СЖК (16,95 ± 0,29 %), и ХС (18,34 ± 0,39 %). Равнозначно, в среднем на 7 % относительно фона увеличилось количество ЭХС. Это свидетельствует о возможности восстановления этерифицирующей функции печени под действием полифенолов, подавленной этанолом. Анализ фракционного состава фосфолипидов сыворотки крови показал, что прием препарата способствовал снижению количества ЛФХ и ЛФЭ на 20-27 % (Р<0,01) и выраженной тенденции к увеличению ФХ (на 21 %). Известно, что полифенолы обладают способностью ингибировать фосфолипазу А2 и тем самым препятствовать разру-
шению фосфолипидов [7]. При исследовании жирнокислотного спектра общих липидов сыворотки крови через 4 часа после приема препарата наметился сдвиг в соотношении насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Это проявлялось как в суммарном количестве этих биохимических параметров, так и в незначительном снижении индекса насыщенности до 0,85. Полученные изменения обусловлены уменьшением на 3-7 % количества миристиновой и пальмитиновой кислот. Это может быть следствием снижения активности синтеза насыщенных жирных кислот из-за прекращения поступления этанола.
Увеличение количества арахидоновой кислоты на 32 % обусловлено тем, что полифенолы защищают ПНЖК от процессов свободно-радикального окисления [8].
Обобщая вышесказанное можно заключить, что полифенольный комплекс из экстракта «Калифен» способствует восстановлению метаболических нарушений у лиц больных алкоголизмом и может быть рекомендован к использованию как один из компонентов системы комплексной реабилитации во время стационарного лечения.
Литература
1. Кушнерова Н.Ф., Добряков Ю.И., Спрыгин В.Г Перспективные разработки комплексов биологически активных веществ из природного сырья Дальневосточного региона // Вестн. ДВО РАН. 2003. 2: 66-72.
Kushnerova N.F., Dobryakov Yu.I., Sprygin V.G.
Promising developments of the complexes of the biological
PLANT COMPLEXES OF POLYPHENOLS FOR RESTORATION OF THE LIVER OF ALCOHOLIC PATIENTS
Nataliya Fedorovna KUSHNEROVA, Svetlana Evgenievna FOMENKO, Vladimir Gennadievich SPRYGIN, Tat’yana Viktorovna KUSHNEROVA, Larisa Nikolaevna LESNIKOVA
XV. I. Il’ichev Pacific Oceanological Institute FEB RAS, Vladivostok 2A.V. Zhirmunsky institute of Marine Biologym FEB RAS, Vladivostok
Influence of a preparation is investigated “Kalifen” on the biochemical parameters of blood describing a functional condition of a liver sick chronic alcoholism of II stage. It is shown infringement of metabolic reactions of synthesis phospholipids, polyunsaturated fat acids of family n-6 and n-3, etherifying function of a liver. Unitary reception of kalifen in common with standard therapy promoted normalization of the studied biochemical parameters of blood. The tendency to restoration of metabolic reactions of synthesis phospholipids and suppression etherifying function of liver was marked. Introduction kalifen in the general therapy removed a condition oxidative stress as a result of inhibition of is free-radical reactions and decrease in formation of toxic products lipoperoxides.
Key words: ethanol, blood, lipids, kalifen, alcoholism
Kushnerova N.F. - Doct. Biol. Sci., professor, chief of laboratory of Biochemistry, e-mail: [email protected]
Fomenko S.E. - Cand. Biol. Sci., leading scientific employer of laboratory of Biochemistry
Sprygin V.G. - Cand. Biol. Sci., leading scientific employer of laboratory of Biochemistry
Kushnerova T.V. - Cand. Med. Sci., research worker of laboratory of Pharmacology
Lesnikova L.N. - Cand. Biol. Sci., research worker of laboratory of Biochemistry
active matters from the natural raw material of the Russian Far East // Bull. FEB RAS. 2003. 2: 66-72.
2. Спрыгин В.Г, Кушнерова Н.Ф. Калина - новый нетрадиционный источник олигомерных проантоциани-динов // Хим.-фарм. журн. 2004. 38 (2): 41-45.
Sprygin V.G., Kushnerova N.F. Cranberry:- a new source of oligomeric proanthocyanidins // Khim.-Farm. Zh. 2004. 38: 41-45.
3. Венгеровский А.И., Маркова И.В., Саратиков А.С. Доклиническое изучение гепатозащитных средств // Ведомости фарм. комитета. 1999. 2: 9-12.
Vengerovsky A.I., Markova I.V., Saratikov A.S. Doklinicheskoe studying hepatiprotective of means // Sheets Pharmacol. Committee. 1999. 2: 9-12.
4. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y., Vasendin I.M. An universal reagent for phospholipid analysis // Chromatogr. 1975. 114 (1): 129-141.
5. Amenta J.S. A rapid chemical method for quantification of lipids separated by thin-layer chromatography // J. Lipid Res. 1964. 5 (2): 270-272.
6. Lieber C.S. Metabolism of alcohol // Clin. Liver Dis. 2005. (9): 1-35.
7. Lindahl M., Tagesson C. Flavonoids as phospholipase A2 inhibitors: importance of their structure for selective inhibition of group II phospholipase A2 // Inflammation. 1997. 21 (3): 347-356.
8. Rice-Evans C.A., Miller N.J., Paganga G. Antioxidant properties of phenolic compounds // Trends Plant Sci. 1997. 2: 152-159.
