CC BY
52УДК 616.98/:595.42](476)
РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГРУППЫ КЛЕЩЕВЫХ ПЯТНИСТЫХ ЛИХОРАДОК В ПОПУЛЯЦИЯХ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ
РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
Н.П. МИШАЕВА, Л.С. ЦВИРКО1, Т.И. САМОЙЛОВА2
'Полесский государственный университет, г. Пинск, Республика Беларусь 2ГУ «РНПЦ эпидемиологии и микробиологии», г. Минск, Республика Беларусь,
Введение. Клещевые пятнистые лихорадки (КПЛ) - группа острых трансмиссивных болезней человека, вызываемых риккетсиями (род Rickettsia, сем. Rickettsiaceae) - облигатными внутриклеточными паразитами, размножающимися в цитоплазме эндотелиальных клеток. КПЛ являются классическими зоонозами, возбудители которых циркулируют в природных очагах между животными и кровососущими членистоногими (чаще всего - клещами), которые способны передавать риккетсии человеку. Люди обычно заражаются через укус клеща или, реже, через гемолимфу растертого клеща. Клинически КПЛ характеризуется лихорадкой, головной болью, миалгией, маку-лопапулезной сыпью на всем теле, включая ладони и подошвы. На месте присасывания клеща может развиться струп, который чаще всего остается незамеченным. Отмечена лимфоаденопатия (TIBOLA - tick-borne lymphadenopathy), редко - биполярный лимфангит.
В настоящее время группа клещевых пятнистых лихорадок включает 27 видов, из которых 17 -патогенны для человека, остальные виды (новые, еще с недоказанной для человека патогенно-стью) интенсивно изучаются.
Клещевые пятнистые лихорадки регистрируются в ряде стран Америки (Канада, Калифорния, Техас, Аризона, Флорида, Атлантическое побережье) и Европы (Польша, Украина, Словакия), а также в Средней Азии, Монголии, Китае, Пакистане, Индии, Таиланде, России. Известно, что в России клещевой риккетсиоз регистрируется с 1953 года, в 2012 г. там выявлено 1759 случаев КПЛ. Зараженность клещей возбудителями КПЛ в сопредельных с Республикой Беларусь странах составила в Польше 3%, в Украине и Словакии - 6%, в России - 15% [5-9].
Цель исследования - распространенность возбудителей группы клещевых пятнистых лихорадок в популяциях иксодовых клещей родов Ixodes и Dermacentor, собранных в Республике Беларусь.
Методика и объекты исследования. На носительство риккетсий исследованы 553 пастбищных клеща (роды Ixodes и Dermacentor), собранных в различных областях Беларуси.
Клещей I. ricinus собрано 327 (59,1%), D. reticulatus - 226 (40,9%). С растительности собрано 453 (81,9%) клеща, с крупного рогатого скота - 99 (17.9%), один клещ снят с собаки (0,2%). Среди клещей, собранных с растительности, преобладал I. ricinus (63,8%; 289/453), со скота наиболее часто снимали D. reticulatus (61,6%; 61/99). Клещей на зараженность риккетсиями исследовали методом ПЦР в реальном времени и гнездовой ПЦР в РНПЦ эпидемиологии и микробиологии и институте иммунологии Великого Княжества Люксембург, г. Люксембург, в рамках международного сотрудничества.
Результаты и их обсуждение. Нами впервые в 2010-2012 гг. проведено изучение клещей I. ricinus белорусской популяции на носительство генетических маркеров Rickettsia sрр. Исследовано 363 имаго I. ricinus, собранных с растительности. Результаты представлены в таблице 1. Из нее видно, что практически на всей территории республики встречаются клещи, инфицированные риккетсиями (зараженность от 13,9 до 41,0%), наиболее высокая зараженность (30,8-41,0%) отмечена в западных и северо-западных регионах Беларуси (Брестская, Гродненская и Витебская области), где показатель риккетсофорности клещей значительно превышал среднереспубликанский уровень (30,3%).
Таблица 1 - Результаты исследования клещей Ixodes ricinus на зараженность Rickettsia spp. методом ПЦР в реальном времени
Наименование областей Исследовано клещей Из них положительных Процент риккетсофорности
Брестская 122 50 41,0
Витебская 99 31 31,3
Гомельская 36 5 13,9
Гродненская 39 12 30,8
Минская 45 7 15,6
Могилевская 22 5 22,7
В целом по республике 363 110 30,3
Дальнейшие исследования показали, что ДНК риккетсий выявляется также в луговых клещах D. reticulatus, причем процент выявления ДНК риккетсий в этих клещах был достоверно выше (43,8%, 99/226. р<0,01), чем в I. ricinus (30,3%).
Следующим этапом работы было проведение сравнительного изучения интенсивности зараженности риккетсиями лесных (I. ricinus) и луговых (D. reticulates) клещей с генотипированием выделенных изолятов. Методом гнездовой ПЦР было исследовано 327 I.ricinus и 226 D. reticulatus (всего 553 клеща), собранных с растительности и снятых с животных (КРС, собаки). Установлено, что риккеттсии группы пятнистых лихорадок были выявлены в 135 клещах из 553 исследованных, что составило 24,4%. Их идентификация показала, что в клещах I. ricinus регистрируются преимущественно R. helvetica, R. monacensis, в клещах D. reticulatus - R. raoultii (таблица 2). Зараженность риккетсиями клещей D. reticulatus составила 48,3% (99 из 226 исследованных), она была значительно выше, чем I. ricinus - 11,0% (36 из 327). Кроме того, в 36 клещах D. reticulatus, собранных с растительности, и в 43 напитавшихся клещах этого вида была выявлена ДНК риккет-сий, которые были отнесены нами к группе RRG (Rickettsia rickettsii group).
Таблица 2 - Виды риккетсий группы КПЛ, выявленные в голодных и напитавшихся клещах Ixodes ricinus и Dermacentor reticulatus
Виды риккетсий Общее число положительных находок ДНК риккетсий в клещах, собранных ^ В том числе
в клещах I. ricinus, то-бранных с: в клещах D. reticulatus, собранных с:
животных абс. ч/% растительности абс. ч/% животных абс. ч/ % растительности абс. ч/% животных абс. ч/% растительности абс. ч/%
R.helvetica 1(1,0) 29 (6,4) - 29 (10,0) 1 (1,6) -
R.monacensis - 5 (1,1) - 5 (1,7) - -
R. raoultii 23 (23,0) 37 (8,2) 1 (2,6) - 22 (35,5) 37 (22,6)
Группа RRG 4 (4,0) 36 (7,9) 1 (2,6) - 3 (4,8) 36 (22,0)
Всего 28 (28) 107 (23,6) 2(5,3) 34(11,7) 26 (41,9) 73 (44,5)
Как видно из представленных данных, переносчиками R. helvetica и R. monacensis являются, в основном, лесные клещи I. ricinus, а луговые клещи (D. reticulatus) инфицированы преимущественно R. raoultii.
Результаты наших исследований согласуются с данными литературы о широком распространении R. helvetica в странах Европы в клещах Ixodes ricinus и находками R. raoultii в клещах рода Dermacentor. С R. helvetica исследователи связывают лихорадочные заболевания, сопровождающиеся поражением кровеносных сосудов и развитием перикардитов [1, 3]. Что касается R. raoultii, то следует подчеркнуть высокий процент носительства этого вида риккетсий клещами белорусской популяции, который составляет от 22,6% (в голодных клещах, собранных с растительности) до 35,5% (в клещах, снятых с животных). По литературным данным зараженность иксодовых
клещей родов Dermacentor, Haemaphysalis, Rhipicephalus, Dermacentor, Ixodes (Евразия, Северная Африка), указанным возбудителем (R. raoultii) колеблется в пределах 4,5-16,0% [1-4].
Новый вид риккетсий группы КПЛ R. monacensis впервые был обнаружен в Германии из клещей I. ricinus, а затем - в Венгрии и Испании. В Северной Испании этот вид риккетсий явился этиологическим агентом острого риккетсиоза, передаваемого клещами, что подтверждено изоляцией и детекцией риккетсий в образцах крови пациентов [1]. Анализ показал, что ДНК R. helvetica была выявлена в 29 (10%) клещах I. ricinus, снятых с растительности, и в напитавшемся клеще D. reticulatus, снятом с собаки на дачном участке в окрестностях г. Минска. Пять клещей этого же вида (1,7%), снятых с растительности, содержали ДНК R. monacensis, а 59 клещей D. reticulatus (37 голодных, 22 напитавшихся) содержали ДНК риккетсий R. raoultii. Все перечисленные виды риккетсий являются возбудителями КПЛ.
В заключение следует отметить, что наибольшее количество клещей, инфицированных R. raoulti, было собрано в Брестской (20,7%; 17/82) и Могилевской (16,1%; 5/31) областях, в то время как в Гродненской и Гомельской областях преобладали клещи, инфицированные R. helvetica (соответственно 15,6% и 9,8%). Клещи, инфицированные R. monacensis, были собраны в Минской области.
Наибольший интерес представляет выявление микст-инфицированных клещей, которые могут являться переносчиками нескольких патогенных организмов. В наших исследованиях оказалось таких 14 особей, из них 8 клещей содержали ДНК риккетсий. Как видно из таблицы 3, чаще всего микст-инфицированные особи выявлялись среди голодных самок I. ricinus (11 экземпляров), чем среди D. reticulatus (3 клеща).
Таблица 3 - Показатели микст-инфицированности клещей Ixodes ricinus в различных областях Республики
Области
Варианты микст-инфицированности клещей Брестская Витебская Гомельская Гродненская Минская Могилевская В целом по Республике Беларусь, абс., (%+m)
Rickettsia helvetica+ Borrelia garinii 20 22 3 0 2 0 47 (13,0 + 2.2)
Rickettsia helvetica+ TBEV 2 0 0 2 2 0 6 (1,7 + 0.71)
R.raoulti++ B.valaisifna 1 0 6 0 0 0 7 (1,9 +0, 62)
Rickettsia helvetica.+ Borrelia garinii + TBEV 4 3 0 2 1 0 10 (2,7 + 0.85)
Число исследованных клещей 122 99 36 39 45 22 363
Всего микстинфицированных клещей, % 26 (21 ,3) 25 (25 ,3) 3 (8,3) 4 (10,3) 5 (11 ,1) 0 (0) 63 (17,4 + 3.8)
Выявление в иксодовых клещах Беларуси возбудителей группы клещевых пятнистых лихорадок, патогенных для человека, меняет наши представления об этиологическом спектре болезней, возникающих после укуса иксодовых клещей, и делает риск заражения человека клещевыми рик-кетсиозами важной практической проблемой, требующей всестороннего изучения.
Выводы
1. В Республике Беларусь впервые в пастбищных клещах Ixodes ricinus и Dermacentor reticulatus выявлено носительство возбудителей группы клещевых пятнистых лихорадок Rickettsia helvetica, R. monacensis и R. raoultii.
2. Зараженность риккетсиями клещей D. reticulatus (48,3%) была в 4,3 раза выше, чем I. ricinus (11,0%).
3. В 22% исследованных клещей рода Dermacentor выявлены генетические маркеры Rickettsia rickettsii group (RRG), которые пока не удалось идентифицировать
ЛИТЕРАТУРА
1. Алексеев, А.Н. О взаимодействии клещевых патогенов в организме беспозвоночного хозяина, клеща Ixodes ricinus (Acarina, Ixodidae) / А.Н. Алексеев, Е.В. Дубинина, Н.П. Мишаева, И.В. Головлева // Естественные и технические науки. - М., 2011, № 3. - С.136-139
2. Мишаева, Н.П. Трансмиссивные риккетсиозы Республики Беларусь / Н.П. Мишаева, В.А. Горбунов, В. Щерба, А.Л. Лешкевич // Медицинские новости. - 2013. -№12. - C. 7-12.
3. Мишаева, Н.П. Зараженность иксодовых клещей (Acari: Ixodidae) возбудителями риккетсиозных инфекций на территории Республики Беларусь / Н.П. Мишаева, A.L Reye, В.А. Горбунов, В.А. Девятникова, C.P. Muller // Материалы междунар. конф «Фундаментальные и прикладные аспекты изучения паразитических членистоногих в XXI веке» памяти члена-корреспондента РАН Ю.С. Балашова. - Россия, Санкт-Петербург, 2013. - С. 104-105.
4. Мишаева, Н.П. Первый случай обнаружения Rickettsia Raoultii Sp. Nov. - возбудителя пятнистой лихорадки в иксодовых клещах Республики Беларуси / Н.П. Мишаева, С.Е. Яшкова, Т.А. Сеньковец, И.А. Азарова, В.А. Горбунов // Достижения медицинской науки Беларуси. - 2014. вып.18. - С 60-62.
5. Риккетсии и риккетсиозы группы клещевой пятнистой лихорадки в России и Казахстане / Н.В. Рудаков [и др.] - Омск: Издательский центр «Омский научный вестник», 2012. - 288 с.
6. Movila, A. Detection о!" spotted fever group rickettsia and family Anaplasmataceae in Ixodes ricinus ticks from Republik of Moldova and Eastern Ukraine / A. Movila, J.M. Rolain, A. Podavalenco et al. // Clin Microbiol Infect. - 2009. - 15 suppl. - Р. 232-233
7. Stanczak, J. The occurence of Spotted Fever Group (SFG) in northern Poland. / J Stanczak. // Ann N Y Acad Sci. - 2006. -1078. - Р. 512-514.
8. Spitalska, E Rickettsia slovaca and Rickettsia raoulti in Dermacentor marginatus and Dermacentor reticulatus ticks from Slovac Republic / E Spitalska, K Stefanidesova et al. // Exp Appl Acarol - 2012. -57- Р.189-197.
9. Reig, S. Tick-borne lymphadenopathy (TIBOLA) acquired in Southwestern Germany DMC / S. Reig, S. Schmoldt, C. Theilacker et al. // Infect Dis. - 2011. -11. - Р. 167
PREVALENCE OF CAUSATIVE AGENTS OF THE TICK SPOTTED FEVERS GROUP IN POPULATIONS OF IXODES TICKS IN REPUBLIC OF BELARUS
N.P. MISHAEVA, L.S. TSVIRKO, T.I. SAMOILOVA
Summary
The pasture ticks Ixodes ricinus and Dermacentor reticulatus were examined for carriage of tick-borne spotted fever pathogens. It was found that 29 ticks I. ricinus, collected from vegetation, were infected with R. helvetica (10,0%) and 5 ticks - R. monacensis (1,7%). The ticks D. reticulates were infected with R. raoultii from 22,6% (37 ticks, collected from vegetation) to 35,5% (22 ticks, collected from cattle). Key words: ixoded ticks, rickettsia, the tick spotted fevers group.
© Мишаева Н.П., Цвирко Л.С., Самойлова Т.И.
Поступила в редакцию 2 апреля 2015г.
