Научная статья на тему 'Распространение Listeria monocytogenes и ее роль в инфекционной патологии на Дальнем Востоке России'

Распространение Listeria monocytogenes и ее роль в инфекционной патологии на Дальнем Востоке России Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
375
82
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
СИКВЕНС-ТИПЫ / ЭПИДЕМИЧЕСКИ ОПАСНЫЕ ШТАММЫ / LISTERIA MONOCYTOGENES / SEQUENCE TYPES / EPIDEMICALLY DANGEROUS STRAINS

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Зайцева Елена Александровна, Ермолаева Светлана Александровна, Пуховская Наталия Михайловна, Мусатов Юрий Святославович, Иванов Леонид Иванович

В последнее время важное значение придается изучению лис‑ териоза, вызываемого бактериями Listeria monocytogenes, в свя‑ зи с их возрастающей ролью в перинатальной и неонатальной патологии, способностью вызывать тяжелые формы заболева‑ ния, массивной контаминацией и накоплением в пищевых про‑ дуктах. Изучено распространение на Дальнем Востоке России патогенного вида L. monocytogenes, выявлены его эпидемически опасные штаммы и установлено их участие в развитии листе‑ риозной инфекции в регионе. Впервые определена филогенети‑ ческая структура штаммов L. monocytogenes, распространенных на Дальнем Востоке, и подтверждено существование двух фи‑ логенетических линий внутри вида. Установлена связь между филогенетическим положением штамма L. monocytogenes и его эпидемиологическим потенциалом. Впервые показано, что рас‑ пространенные среди диких грызунов и морских гидробионтов штаммы L. monocytogenes могут обусловливать внутриутробную инфекцию у человека, что свидетельствует о возможности пря‑ мого заноса вирулентных микроорганизмов из окружающей среды в антропогенные системы.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Зайцева Елена Александровна, Ермолаева Светлана Александровна, Пуховская Наталия Михайловна, Мусатов Юрий Святославович, Иванов Леонид Иванович

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

SPREADING LISTERIA MONOCYTOGENES AND ITS ROLE IN INFECTIOUS PATHOLOGY IN THE RUSSIAN FAR EAST

Summary Currently a great attention is focused upon the study of listeriosis caused by Listeria monocytogenes bacteria due to their increasing role in perinatal and neonatal pathology and capability of causing severe forms of the disease, massive contamination and accumulation in food products. The authors study expansion of the disease-causing type L. monocytogenes in the Russian Far East, identify its epidemically dangerous strains and contribution to propagation of the listerial infection in the region. The authors first specify phylogenetic structure of L. monocytogenes strains known to exist in the Far East and confirm two phylogenetic lines inside the species. There is a connection between phylogenetic position of L. monocytogenes strain and its epidemiological potential. The authors first show that L. monocytogenes known to be widespread among wild gnawing animals and marine hydrobionts can cause intrauterine infection in human beings that is indicative of a probability of a direct carrying of virulent microorganisms from the environment into anthropogenic systems.

Текст научной работы на тему «Распространение Listeria monocytogenes и ее роль в инфекционной патологии на Дальнем Востоке России»

2. Бахолдина С.И, Шубин Ф.Н., Соловьева Т.Ф. Дефицит кислорода при низкой температуре роста увеличивает инвазивную активность и устойчивость к тепловому шоку Yersinia pseudotuberculosis // Журн. микробиол. 2009. № 3. С. 18-23.

3. Куклева Л.М., Кутырев В.В., Проценко О.А. Молекулярногенетические аспекты инвазивных и антифагоцитарных свойств иерсиний // Мол. генетика. 1996. № 1. С. 11-15.

4. Псевдотуберкулез / Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседно-ва Н.Н. и др. М.: Медицина, 2001. 256 с.

5. Ценева Г.Я., Солодовникова Н.Ю., Воскресенская Е.А. Молекулярные аспекты вирулентности иерсиний // Клин. микробиол. и антимикробн. химиотерапия. 2002. № 3. С. 248-266.

6. Finlay B.B., Cossart P. Exploitation of mammalian host cell functions by bacterial pathogens // Science. 1997. Vol. 276. P 718-725.

Поступила в редакцию 15.02.2010.

GALACTOSE AS A CONTRIBUTING FACTOR IN MULTIPLICATION OF PSEUDOTUBERCULOSIS BACTERIA IN

vitro and in vivo

S.I. Bakholdina1, F.N. Shubin2, M.P. Isaeva1, A.V. Rakin3,

T.F. Solovyova1

1 Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, FEB RAS (159100 Ann. of Vladivostok Av. Vladivostok 690022 Russia), 2 Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Siberian Branch of RAMS (1 Selskaya St. Vladivostok 690087 Russia), 3 Max von Pettenkofer-Institute for Hygiene and Medical Microbiology (9a Pettenkoferstrafie D-80336 Mtinchen Germany)

Summary - The authors study effects of galactose in reproduction of enterobacteria and virulent properties of pseudotuberculosis bacteria of‘galactose phenotype’. Twenty strains of enterobacteria were being cultivated under aerobic conditions using Luria broth (LB) and LB with 0.5 % of galactose (LB+Gal). The reproduction dynamics was estimated by studying optical density of suspensions. Noninbred mice were infested with Yersinia pseudotuberculosis strain known to carry recombinant plasmid with reporter system based upon fluorescent protein. The authors have studied two groups by 10 animals undergone peroral introduction of bacterial suspension cultivated in LB and LB+Gal broths. The biological material was inoculated on nutrient agar with chloramphenicol to calculate the number of colonies per 1 gram of fecals mass and liver in 48-72 hours. Most of Y. pseudotuberculosis strains were propagating more intensively in the LB+Gal broth. The others, except Y. ruckeri and Y. pestis Pestoides, showed the same characteristics. The strains of Escherichia coli found in the LB+Gal broth demonstrated increasing multiplication. The Salmonella and Shigella strain propagation did not depend on carbohydrates. As observed, Y. pseudotuberculosis bacteria cultivated in the LB+Gal broth propagated more intensively in the digestive tract and demonstrated increasing capability of penetrating epithelial barrier of bowels thus percolating the internal environment.

Key words: Yersinia pseudotuberculosis, galactose, virulence, bacterial biomass.

Pacific Medical Journal, 2010, No. 4, p. 16-19.

УДК 579.869.1:616.98(571.63)

РАСПРОСТРАНЕНИЕ LISTERIA MONOCYTOGENES И ЕЕ РОЛЬ В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ НА ДАЛЬНЕМ ВОСТОКЕ РОССИИ

Е.А. Зайцева1, С.А. Ермолаева2, Н.М. Пуховская3, Ю.С. Мусатов3, Л.И. Иванов3, Г.П. Сомов1

1 НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН (690087 г. Владивосток, ул. Сельская, 1),

2 НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (123098 г. Москва, ул. Гамалеи, 18),

3 Хабаровская противочумная станция Роспотребнадзора (680031 г. Хабаровск, Санитарный пер., 7)

Ключевые слова: Listeria monocytogenes, сиквенс-типы, эпидемически опасные штаммы.

В последнее время важное значение придается изучению лис-териоза, вызываемого бактериями Listeria monocytogenes, в связи с их возрастающей ролью в перинатальной и неонатальной патологии, способностью вызывать тяжелые формы заболевания, массивной контаминацией и накоплением в пищевых продуктах. Изучено распространение на Дальнем Востоке России патогенного вида L. monocytogenes, выявлены его эпидемически опасные штаммы и установлено их участие в развитии листе-риозной инфекции в регионе. Впервые определена филогенетическая структура штаммов L. monocytogenes, распространенных на Дальнем Востоке, и подтверждено существование двух филогенетических линий внутри вида. Установлена связь между филогенетическим положением штамма L. monocytogenes и его эпидемиологическим потенциалом. Впервые показано, что распространенные среди диких грызунов и морских гидробионтов штаммы L. monocytogenes могут обусловливать внутриутробную инфекцию у человека, что свидетельствует о возможности прямого заноса вирулентных микроорганизмов из окружающей среды в антропогенные системы.

Интерес к изучению распространения бактерий Listeria monocytogenes вызван многочисленными эпи-

Зайцева Елена Александровна - канд. мед. наук, в.н.с. лаборатории экологии патогенных бактерий НИИЭМ СО РАМН; тел.: 8 (4232) 44-26-04, e-mail: [email protected]

демическими вспышками листериоза в развитых странах (Франция, США, Германия, Испания и др.), связанных с употреблением в пищу продуктов, кон-таминированных этим микроорганизмом. Он может вызывать тяжелые инфекции (менингит, менингоэн-цефалит, септицемия, гастроэнтериты и др.) с высоким уровнем летальности. Особую группу риска при листериозе составляют беременные женщины, у которых инфицирование может обусловливать аборты и мертворождения, чаще на последнем триместре беременности [9].

Исследования последних лет показали, что внутри вида L. monocytogenes выделяются три филогенетические линии, отличающиеся по своему эпидемическому потенциалу. Линия, с которой связано до 90% эпидемических вспышек листериоза у человека, у разных авторов имеет обозначение как линия I, линия II или линия В и характеризуется принадлежностью к определенному сероварианту и наличием определенных генов, кодирующих белки-интернали-ны [6, 10, 12]. Из 13 известных серовариантов L. monocytogenes не все способны вызвать заболевание.

Подавляющее большинство случаев (90%) листериоза у людей связано только с L. monocytogenes трех се-ровариантов - 1/2a, 1/2b и 4b, причем около 50% случаев вызывают штаммы сероварианта 4b [9]. Повсеместное распространение листерий и их значительная роль в инфекционной патологии человека обусловливают необходимость всестороннего изучения этого возбудителя.

В России, в том числе и на Дальнем Востоке, до настоящего времени листериоз все еще остается редко диагностируемым заболеванием. Ограничены сведения о циркуляции листерий в окружающей среде и их биологических свойствах, мало изучены эпидемиологические аспекты и клинические проявления листериозной инфекции. До сих пор неизвестно, какие именно свойства эпидемически опасных штаммов L. monocytogenes способствуют их высокой вирулентности. Поэтому имеется острая необходимость активизировать работу по изучению листери-оза, что и определило направление наших исследований.

Цель работы - анализ распространения на Дальнем Востоке России L. monocytogenes, выделение ее эпидемически опасных штаммов и установление их роли в развитии листериозной инфекции в регионе.

Материал и методы. С целью обнаружения бактерий, относящихся к роду Listeria, микробиологическому анализу подверглись 3950 различных объектов окружающей среды (почва, вода, образцы биоматериала от грызунов и морских гидробионтов, пищевое сырье и продукты питания, смывы с оборудования) и клинический материал (отделяемое из влагалища у беременных женщин, плаценты, мертворожденные плоды) [1, 3, 4, 15].

Микробиологические исследования проводились на средах с использованием методов, рекомендованных ГОСТ Р 51921-2002 и МУК 4.2.1122-02 для выявления листерий, а также с использованием питательных сред в авторской разработке [5]. Антигенные свойства культур определяли в линейной реакции агглютинации с помощью типовой поливалентной и моновалентных (I и IV серотипов) листериозных сывороток, изготовленных во ВНИИВВиМ (г. Покров). Для фаготипирования использовали набор бактериофагов L-2A и L-4A (ВНИИВВиМ, г. Покров).

Для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР) использовали бактериальные лизаты, приготовленные из суточных культур листерий [3]. Серогруппоспецифические маркерные гены выявляли с помощью мультиплекс-ПЦР-метода, предложенного Doumith et al. [11]. Молекулярно-генетическое типи-рование штаммов проводили с помощью тест-системы «АмплиСенс Listeria monocytogenes» (г. Москва) по программе фирмы-изготовителя. Нуклеотидные последовательности открытых рамок считывания генов, кодирующих белки-интерналины А, В, С и Е (inlA, inlB,inlC, inlE) и гена prs, кодирующего консер-

вативный для рода Listeria белок фосфорибозилпи-рофосфатсинтазу, были получены из базы данных ListiList (http://www.pasteur.fr), содержащей последовательность генома штамма EGDe, который был использован в данной работе как положительный контроль. Определение генов, кодирующих белки-интерналины А, В, С и Е, осуществляли с использованием в ПЦР праймеров, описанных Е.А. Зайцевой и др. [2, 15]. ПЦР осуществляли на амплификаторе «Терцик» («ДНК-технология», г. Москва). Выделение фрагментов ДНК из агарозного геля осуществляли с помощью набора GFX PCR DNA and Gel Band Purification Kit (Amersham). Секвенирование фрагментов ДНК проводилось в Институте молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта, в центре «Геном» (г. Москва).

Последовательности, полученные в результате секвенирования, были прочитаны с помощью программы Chromas v.1.45 (http://www.technelysium.com. au/chromas.html). Множественное выстраивание последовательностей было осуществлено с помощью программы ClustalW 1.83.XP [13]. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей проводили с использованием пакета программ DnaSP 4.10 [14]. Нуклеотидные последовательности были депонированы в GenBank (accession No. EF056129-EF056209, EU0408816-EU0409019).

Результаты исследования. С целью эффективного выделения культур листерий из разнообразных объектов окружающей среды и клинического материала вначале были разработаны и апробированы на большом количестве материала «Дифференциально-диагностическая среда для листерий» (патент РФ № 2184782 от 10.07.02, НИИЭМ СО РАМН), «Комплексная индикаторная среда для дифференциации листерий» (патент РФ № 2303060 от 20.07.07, НИИ-ЭМ СО РАМН), жидкая сухая (заявка на изобретение № 2008111691 от 26.03.08, НИИЭМ СО РАМН) и плотная (заявка на изобретение № 2008132232 от 4.08.08, НИИЭМ СО РАМН) питательные среды для культивирования бактерий рода Listeria и других микроорганизмов [5]. Это было связано с отсутствием стандартных отечественных сред, а использование сред, предложенных зарубежными авторами, было затруднено из-за дороговизны и дефицита входящих в их состав компонентов.

Используя комплекс современных питательных сред, среды в авторской разработке, подобрав оптимальную схему исследования различных проб для выделения листерий, была сформирована коллекция, включающая 238 изолятов (из них 112 отнесены к виду L. monocytogenes). Отмечено, что в Дальневосточном регионе РФ выделяются разнообразные виды бактерий рода Listeria - L. monocytogenes, L. innocua, L. seelige-ri, L. ivanovii и L. welschimeri (рис.). Эти бактерии были обнаружены в различных объектах окружающей среды -в речной воде, растениях, водорослях, изолированы

Listeria spp. (28,3 %) L. welshimeri (0,8 %) L. monocytogenes (47,1 %)

L. seeligeri (2,9%) L. ivanovii (1,2%)

Рис. Удельный вес бактерий рода Listeria, выделенных на территории Дальнего Востока.

из органов грызунов, морских гидробионтов, клинического материала, пищевых продуктов (мясных, молочных, рыбных, мясе птицы), а также в смывах с оборудования на производственных предприятиях.

По нашим данным, наиболее контаминирован-ными бактериями рода Listeria оказались продукты питания (6,3%). Патогенный вид L. monocytogenes выделяли из мясных (12,7% - свинина, говядина), куриных (2,9%), овощных (1,2% - капуста, лук, салат), молочных (0,9% - сыры) продуктов и морепродуктов (1,6% - навага, пиленгас, сельдь). Наряду с L. monocytogenes (2,8%) часто пищевые продукты были контаминированы бактериями вида L. innocua (2,7%), особенно мясные (отечественного и импортного производства - говядина, свинина, пельмени, мясные палочки), реже рыбные (семга, горбуша). Другие виды листерий, например L. seeligeri, встречались в рыбных (горбуша, волосозуб), L. welschimeri - в мясных продуктах. Кроме пищевых продуктов на территории Приморского края бактерии вида L. innocua выделили из силоса (2,1%), органов мышевидных грызунов (0,2%). Было также зафиксировано выделение L. monocytogenes из воды и ила реки Кневичи.

Среди биотических объектов в Дальневосточном регионе патогенный вид L. monocytogenes обнаружили у мышевидных грызунов рода Apodemus (52,6%), лесных полевок рода Myodes (47,4%), морских гид-робионтов (1,4%: морской гребешок, морская звезда, морской еж, камбала), человека (мертворожденные плоды, клинический материал от беременных женщин, плаценты, трупный материал от больного, умершего от листериозного менингита) [3, 4].

С использованием современных методов серо-и фаготипирования, а также метода мультиплексной ПЦР [11] показано антигенное разнообразие культур L. monocytogenes, выделенных в Дальневосточном регионе. Следует отметить, что среди этих культур, изолированных с 1997 по 2008 г., отмеча-

лось превалирование сероварианта 4b (75%), что в эпидемическом плане является неблагополучным признаком. Чаще всего культуры листерий этого сероварианта выделяли из макроорганизмов (клинический материал от людей, органы грызунов и морских гидробионтов). Среди изолятов, полученных из пищевых продуктов, в большинстве случаев встречались сероварианты 1/2a, 1 /2b, 1/2c, реже -серовариант 4b.

Для выявления эпидемически значимых изоля-тов из различных источников с помощью молекулярно-генетических методов были определены гены, кодирующие факторы инвазии - белки-интернали-ны (inlA, inlB, inlC, inlE, inlF, inlG, inlH) [2, 3]. В результате в подавляющем большинстве случаев выявлены гены-интерналины inlA, inlB, inlC, inlE, которые были использованы для дифференцирования культур листерий. С этой целью было осуществлено секвенирование внутренних областей этих генов (LRR-домены, непосредственно вовлеченные в процесс взаимодействия листерий со специфическими рецепторами эукариотических клеток). Кроме генов, кодирующих интерналины, был секвенирован внутренний фрагмент гена prs, кодирующий белок общего метаболизма у бактерий рода Listeria - фосфори-бозилсинтазу.

Определение нуклеотидной последовательности фрагментов генов prs, inlA, inlB, inlC и inlE позволило разделить дальневосточные изоляты L. monocytogenes на две группы, соответствующие описанным филогенетическим линиям и коррелирующие с принадлежностью к определенному сероварианту. Большинство культур принадлежали к 1-й филогенетической линии, наиболее опасной в эпидемическом плане (в своих исследованиях мы придерживались обозначения филогенетических линий по M. Wiedman et al. [12]).

Типирование культур по пяти вышеперечисленным генам выявило 19 сиквенс-типов и позволило дифференцировать эпидемически не связанные между собой изоляты листерий (табл.). Было отмечено, что среди дальневосточных изолятов заметно преобладали 1-й и 10-й сиквенс-типы. Остальные сиквенс-типы были представлены всего одним изо-лятом L. monocytogenes, за исключением 4-го (1 изо-лят из мертворожденного плода и 1 - из пищевого продукта), 5-го (4 изолята из мертворожденных плодов), 7-го (3 изолята из мертворожденных плодов, 2 изолята от носителей и по 1 изоляту из морских гидробионтов и продуктов) и 9-го (2 изолята от грызунов).

Важно отметить, что к 1-му сиквенс-типу принадлежали изоляты, полученные из окружающей среды (1 изолят, 1999 г.), из мертворожденных плодов (4 изолята, 2005 г.) и от грызунов (7 изолятов, 2005 г.). Культуры L. monocytogenes, относящиеся к 10-му сиквенс-типу, выделены из морских гидробионтов

Таблица

Характеристика сиквенс-типов (СТ) изолятов L. monocytogenes, выделенных на территории Дальнего Востока

СТ Аллель гена Число изолятов

inlA inlB inlC inlE prs общее в группе специфичного хозяина1

МП Н Г МГ П

1 1 1 1 1 1 12 4 0 7 0 1

2 1 3 1 1 1 1 1 0 0 0 0

3 1 9 1 1 1 1 1 0 0 0 0

4 1 9 1 4 2 2 1 0 0 0 1

5 1 9 1 3 2 4 4 0 0 0 0

6 1 10 1 3 2 1 1 0 0 0 0

7 9 13 9 6 5 7 3 2 0 1 1

8 2 1 5 1 1 1 0 0 1 0 0

9 10 13 8 7 6 2 0 0 2 0 0

10 2 1 6 1 1 13 3 0 0 9 1

11 2 5 4 1 1 1 0 0 0 1 0

12 2 6 4 1 1 1 0 0 0 1 0

13 2 2 4 1 1 1 0 0 0 1 0

14 3 8 3 1 2 1 0 1 0 0 0

15 2 1 4 1 1 1 0 1 0 0 0

16 1 4 1 1 1 1 0 0 0 0 1

17 7 15 9 6 5 1 0 0 0 0 1

18 10 14 11 2 5 1 0 0 0 0 1

19 7 12 10 9 5 1 0 0 0 0 1

1 МП - мертворожденные плоды, Н - носители, Г - грызуны, МГ - морские гидробионты, П копитающие (кроме грызунов).

продукты, объекты окружающей среды и мле-

залива Петра Великого (9 культур), морепродуктов торговой сети (1 культура) и из мертворожденных плодов (3 культуры), что может свидетельствовать об эпидемиологической связи между ними.

Сравнительный анализ биологических характеристик L. monocytogenes, принадлежащих к 1-му и 10-му сиквенс-типам, показал однородность свойств изолятов в каждой группе (наличие каталазной, гемолитической, липазной, гиалуронидазной и лецитина-зной актиности, подвижность при 22 °С и ее отсутствие при 37 °С, биохимические свойства по отношению к углеводам).

Обсуждение полученных данных. Несмотря на то, что листериоз регистрируется во многих странах мира и его возбудитель выделяют из большого количества объектов окружающей среды, многих видов животных, пищевых продуктов, клинического материала, вопрос о циркуляции бактерий рода Listeria на Дальнем Востоке к началу нашей работы был совершенно не изучен. В ходе проведенных исследований выявлено генетическое разнообразие представителей этого рода, в том числе патогенного вида L. monocytogenes с преобладанием сероварианта 4b, опасного для людей в эпидемическом плане. По нашим данным, наиболее контаминированными данными бактериями оказа-

лись продукты питания (особенно мясо), в которых чаще всего обнаруживали L. monocytogenes.

Исследования свидетельствуют о распространении листерий в популяции мышевидных грызунов на территории Приморского края, среди которых, по числу инфицированных патогенным для человека и животных видом L. monocytogenes, доминировала полевая мышь (A. agrarius), обитающая на равнинной территории, которая при определенных условиях может явиться фактором передачи возбудителя.

Было также зафиксировано выделение L. monocytogenes из воды и ила реки Кневичи. Резервуарная роль почв и водоемов для возбудителей сапрозоо-нозов была доказана в целом ряде теоретических и экспериментальных работ [7, 8]. Полученные нами результаты свидетельствуют о существовании на Дальнем Востоке России популяции L. monocytogenes, распространенной в естественных экосистемах.

Следствием широкого распространения листерий в природе явилось выделение на Дальнем Востоке возбудителя от людей (из мертворожденных плодов, клинического материала от беременных женщин, плацент, трупного материала) с превалированием эпидемически опасного сероварианта 4b. В наших исследованиях установлено, что среди L. monocytogenes

из клинического материала, от грызунов и морских гидробионтов преобладали штаммы, относящиеся к первой филогенетической линии. Среди изолятов из продуктов питания доминировали штаммы, относящиеся ко 2-й филогенетической линии. Более того, используя методы молекулярно-генетического типи-рования, удалось показать, что 1-й сиквенс-тип штамма L. monocytogenes, распространенный среди мышевидных грызунов, вызвал вспышку внутриутробного листериоза у беременных женщин. Кроме того, 10-й сиквенс-тип листерий, выявленный из морских гид-робионтов и морепродуктов, предназначенных для употребления в пищу, был обнаружен и у клинических изолятов, вызвавших развитие внутриутробного листериоза, что свидетельствует об эпидемиологической связи между ними.

Таким образом, в результате проведенных исследований нами впервые установлена филогенетическая структура штаммов L. monocytogenes, распространенных на Дальнем Востоке. Подтверждено существование двух филогенетических линий внутри этого вида листерий. Установлена связь между филогенетическим положением штамма и его эпидемиологическим потенциалом. В то же время с помощью методов молекулярно-генетического типирования была установлена поликлональность распределения штаммов L. monocytogenes на территории Дальнего Востока. Кроме того, впервые показано, что распространенные среди диких грызунов и морских гидробионтов штаммы возбудителя могут обусловливать внутриутробную инфекцию у человека, что указывает на возможность их прямого заноса из окружающей среды в антропогенные системы.

Полученные результаты диктуют необходимость дальнейшего проведения мониторинга возбудителя листериоза среди лиц из групп риска (особенно среди беременных женщин) и принятия мер профилактики распространения данной инфекции.

Литература

1. Зайцева Е.А., Сомов Г.П. Микробиологическая характеристика Listeria monocytogenes, изолированных из различных источников в Приморском крае // Журн. микробиол., эпиде-миол. и иммунобиол. 2006. № 2. С. 3-6.

2. Зайцева Е.А., Ермолаева С.А, Сомов Г.П. Гены, кодирующие факторы инвазии у штаммов Listeria monocytogenes, изолированных в Европейской части и Дальневосточном регионе России // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2006. № 4. С. 42-44.

3. Зайцева Е.А., Пуховская Н.М., Мусатов Ю.С. и др. Молекулярно-генетические особенности и эпидемиологическая значимость штаммов Listeria monocytogenes, выделенных от беременных женщин и из абортного материала в Дальневосточном регионе России // Клин. микробиол., антимикроб. химиотер. 2007. Т. 9, № 1. С. 81-89.

4. Зайцева Е.А., Ермолаева С.А., Сомов Г.П. Распространение Listeria monocytogenes среди мышевидных грызунов на территории Приморского края // Тихоокеанский мед. журн. 2008. № 2. С. 65-69.

5. Зайцева Е.А., Сомов Г.П., Фатеева Л.Н.и др. Питательные среды для выделения, типирования и идентификации бак-

терий рода Listeria // Методическое пособие для бактериологов, Владивосток, 2008. 76 с.

6. Карпова Т.И., Фирсова Т.Е., Родина Л.В. и др. Типирование Listeria monocytogenes на основе полиморфизма генов факторов патогенности // Клин. микробиол., антимикроб. химиотер. 2003. № 5. С. 251-258.

7. Литвин В.Ю., Коренберг Э.И. Природная очаговость болезней: развитие концепции к исходу века // Природная очаговость болезней: исследования института Гамалеи / под ред.

Э.И. Коренберга. М.: Русаки, 2003. C. 12-34.

8. Псевдотуберкулез / Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседно-ва Н.Н., Антоненко Ф.Ф. М.: Медицина, 2001. 254 с.

9. Тартаковский И.С., Малеев В.В., Ермолаева С.А. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика. М.: Медицина для всех, 2002. 200 с.

10. Doumith M., Cazalet C., Simoes N. et al. New aspects regarding evolution and virulence of Listeria monocytogenes revealed by comparative genomics and DNA arrays // Infect. Immun. 2004. Vol. 72. P. 1072-1083.

11. Doumith M., Buchrieser C., Glaser P. et al. Differentiation of the major Listeria monocytogenes serovars by multiplex PCR // J. Clin. Microbiol. 2004. Vol. 42. P. 3819-3822.

12. Wiedman M., Bruce J.I., Keating C. et al. Ribotypes and virulence gene polymorphism suggest three distinct Listeria monocytogenes lineages with differences in pathogenic potential // Infect. Immun. 1997. Vol. 65. P. 2707-2716.

13. Thompson J.D., HigginsD.G., Gibson T.J. CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice // Nucl. Acid. Res. 1994. Vol. 22. P. 4673-4680.

14. Rozas J., Sanches-Del Barrio J.C., MessequerX., Rozas R. DnaSP: DNA polymorphism analyses by the coalescent and other methods // Bioinformatics. 2003. Vol. 19. P. 2496-2497.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

15. Zaytseva E., Ermolaeva S., Somov G.P. Low genetic diversity and epidemiological significance of Listeria monocytogenes isolated from wild animals in the Far East of Russia // Infect. Genet. Evol. 2007. Vol. 7, No. 6. P. 736-742.

Поступила в редакцию 20.02.2010.

SPREADING LISTERIA MoNocYToGENES AND ITS ROLE IN Infectious Pathology IN The RUSSIAN FAR East

E.A. Zaitseva1, S.A. Ermolaeva2, N.M. Pukhovskaya3, Yu.S.

Musatov3, L.I. Ivanov3, G.P. Somov1

1 Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Siberian Branch of RAMS (1 Selskaya St. Vladivostok 690087 Russia),

2 Research Institute of Epidemiology and Microbiology named after N.F. Gamalei (18 Gamalei St. Moscow 123098 Russia), 3 Khabarovsk Plague Control Station (7 Sanitarny Per., Khabarovsk, 680031 Russia)

Summary - Currently a great attention is focused upon the study of listeriosis caused by Listeria monocytogenes bacteria due to their increasing role in perinatal and neonatal pathology and capability of causing severe forms of the disease, massive contamination and accumulation in food products. The authors study expansion of the disease-causing type L. monocytogenes in the Russian Far East, identify its epidemically dangerous strains and contribution to propagation of the listerial infection in the region. The authors first specify phylogenetic structure of L. monocytogenes strains known to exist in the Far East and confirm two phylogenetic lines inside the species. There is a connection between phylogenetic position of L. monocytogenes strain and its epidemiological potential. The authors first show that L. monocytogenes known to be widespread among wild gnawing animals and marine hydrobionts can cause intrauterine infection in human beings that is indicative of a probability of a direct carrying of virulent microorganisms from the environment into anthropogenic systems.

Key words: Listeria monocytogenes, sequence types, epidemically dangerous strains.

Pacific Medical Journal, 2010, No. 4, p. 19-23.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.