Ранние проявления иммуномодулирующего действия коревой вакцины в эксперименте in vitro Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

медщинстя иммуншогш Оригинальные статьи

© 2002, СПб РО РААКИ

РАННИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ КОРЕВОЙ ВАКЦИНЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

in vilro

Ляшенко В.А., Александер С.К., Ковалёва Л.Г., Лавров В.Ф., Юминова Н.В.

Лаборатория детских вирусных инфекций Государственного учреждения Институт вирусных препаратов им. О.ГАнджапаридзе Российской академии медицинских наук

Резюме. Исследовано два вида иммуномодулирующего действия вируса коревой вакцины in vitro: влияние на уровень бласттрансформации лимфоцитов крови, индуцированной ФГА, и воздействие на некоторые функции гранулоцитов: адгезивную способность, аггрегацию клеток и активность в НСТ-тесте. Уровень индуцированной ФГА бласттрансформации лимфоцитов снижался в присутствии вируса кори, показатели же активности гранулоцитов (в культуре, обогащенной этими клетками), напротив, несколько повышались. Реакции гранулоцитов на вирус кори напоминала ранее изученные реакции моноцитов и макрофагов. Ответ гранулоцитов на вирус кори развивался очень быстро (2 часа), следовательно, он не был результатом размножения вируса, но - его соединения с поверхностными рецепторами клеток. Получены первые данные по предотвращению воздействия вируса кори на различные типы клеток с помощью стимуляторов их жизнедеятельности - бактериальной поливакцины ВГТ-4 и пептида МП-2, обладающего иммуностимулирующей активностью.

Ключевые слова: бласттрансформация, гранулоцит, корь, иммунодепрессия, иммуностимуляция.

Liashenko V.A., Alexander S.К., Kovaljova L.G., Lavrov V.F., Youminova N.V.

EARLY EVIDENCES OF MEASLES VACCINE IMMUNOMODULATING EFFECTS in vitro Abstract. Two forms of measles virus induced immunomodulation were investigated in vitro. We observed measles vaccine virus influence on human lymphocyte blast transformation (after PHA stimulation) and some changes in human granulocyte functions: granulocyte adhesion level, cell aggregation and cell activity in NBT test. Lymphocyte blast transformation level decreased in the presence of measles vaccine virus, whereas function of granulocytes were stimulated. The responses of granulocytes to the virus seemed to be identical with those of monocytes and macrophages, which were investigated in analogous experiments. The responses of granulocytes were too quick (during 2 hours), so they were not the result of measles virus multiplication, but only of measles virus interactions with some cell receptors. The first data on measles virus effect neutralization were obtained. Two types of stimulators were investigated: bacterial poly vaccine VP-4 and peptide immunostimulator MP-2. (Med.Immunol., 2002, vol.4, N1, pp 21-27)

Последствия - повышение общего уровня смертности, снижение иммунологической реактивности, в том числе - способности лимфоцитов к бласттрансформации в присутствии лектинов, удавалось обнаружить в течение длительного времени после вакцинации детей в возрасте до 6 месяцев сверхвысокой дозой коревой вакцины [7, 16]. Конкретные механизмы иммунодепрессивного или иммуномодулирующего действия коревой вакцины до сих пор не ясны, хотя по этому поводу накоплен целый ряд клинических и экспериментальных данных. Так, эффект подавления способности лимфоцитов к бласттрансформации проявляется в процессе заболевания корью [24, 34] или после вакцинации [6, 11, 27]. Аналогичное явление наблюдалось в эксперименте на

В течение последних 10 лет иммунодепрессивное действие вируса кори изучалось весьма интенсивно, включая и исследование эффекта живых вакцин [2,3,4, 20, 21, 22]. Одной из причин повышенного интереса к данному вопросу послужили наблюдения относительно опасных последствий применения высокодозной коревой вакцины у детей в возрасте до 6 месяцев [7,12].

Адрес для переписки:

Ляшенко Всеволод Андреевич, профессор,

109088 Москва, 1-я Дубровская ул.15,

Институт вирусных препаратов

им. О.Г. Анджапаридзе РАМН, лаборатория

детских вирусных инфекций.

Тел.: (095)274-42-51, факс (095)274-57-10.

хлопковых крысах, чувствительных к коревой пневмонии [23]. Высказано предположение о том, что в его основе лежит снижение уровня интерлейкина 2 в сыворотке с одновременным повышением уровня интерлейкинов 4 и 6, обусловленным активностью Т-хелперов второго типа [19].

В некоторых случаях тот же эффект был воспроизведен in vitro - в условиях воздействия вируса коревой вакцины на культуру лимфоцитов с последующей стимуляцией их лектином [20,21, 22]. В связи со сказанным возникает вопрос о том, нельзя ли снять данный вид иммунодепрессивного действия, вводя в систему активатор иммунокомпетентных клеток, вызывающий поликлональную активацию лимфоцитов, связанную с активностью интерлейкина-2. В данном исследовании с этой целью были использованы два препарата: вакцина ВП-4, представляющая собой смесь поверхностных антигенов Staph.aureus, Klebsiella, Proteus, E.coli, применяемая интраназально для лечения хронических респираторных инфекций [1], и иммуномодулирующий пептид МП-2, апробированный в эксперименте как средство стимуляции иммунитета в условиях развития опухолей [5].

Второй задачей исследования был опыт кратковременного воздействия вируса коревой вакцины на культуру клеток крови человека, обогащенную гра-нулоцитами. Предполагалось выявить ранние этапы иммуномодулирующего действия вируса, не связанные с его размножением.

Основанием для такой постановки вопроса послужили сведения о воздействии вируса на нелимфоидные иммунокомпетентные клетки человека - моноциты и древовидные клетки [8, 17, 18, 24, 26]. До сих пор роль гранулоцитов при кори почти не исследовались хотя они способны образовать ряд веществ (ферменты, факторы адгезии, супероксиданионы), которые могут повлиять на состояние других иммунокомпетентных клеток и иммунной системы в целом [30, 31].

Таким образом, общая задача исследования - характеристика ранних изменений различных иммунокомпетентных клеток после контакта с вирусом живой коревой вакцины in vitro.

Материалы и методы

Вирус коревой вакцины Л-16 был выращен в культуре клеток Vero в среде RPMI 1640. Надосадочная жидкость содержала 5,0х105 цитопатогенных единиц, т.е. была “высокотиражной” в качестве вакцины. Вируссодержащая жидкость была разлита в пробирки, заморожена и хранилась при температуре -45°С.

Для постановки реакции бласттрансформации была использована смесь клеток (лимфоцитов, гранулоцитов, моноцитов), которую получали из гепаринизированной крови взрослого донора пу-

тем её отстаивания при комнатной температуре в течение 30-40 минут. Осадок содержал, преимущественно, эритроциты, надосадочная фракция -выше упомянутые клетки. Полученную фракцию разводили средой 11РМ1 таким образом, чтобы 1х10в клеток содержалось в 1 мл среды, и разливали по 200 мкл в ячейки платы для культивирования, добавляя ФГА Зегуа из расчёта 2 мкг/мл, вирус коревой вакцины - 5х103 ЦПД50/мл, а также -препараты ВП-4 (10 мкг/мл) или МП-2 (0,1 мкг/ мл). В опытах бласттрансформации планшеты с пробами инкубировали 48 часов во влажной камере, в атмосфере, обогащённой СО . Затем в каждую камеру вносили Н! тимидин из расчёта 0,1 микрокюри на пробу и продолжали инкубацию ещё 18 часов, после чего проводили осаждение меченой ДНК клеток на фильтры-мишени и их отмывку, используя 5% трихлоруксусную кислоту и этиловый спирт. Каждый вариант опыта был испытан в 3-5 пробах, суммарные данные трех опытов обрабатывали статистически с использованием критерия Фишера и метода “критерий знаков”.

Опыты с прилипающими клетками (по преимуществу, гранулоцитами) проводили в следующей системе: полученный суммарный препарат лейкоцитов крови разводили средой 11РМ1, содержащей 10% сыворотки телёнка, разливали в пластиковые чашки диаметром 3,5 см и инкубировали во влажной камере при +37°С в течение полутора часов. Затем среду аккуратно отсасывали, чашки дважды промывали КРМ1, чтобы удалить “неприлипшие” клетки и факторы исходной плазмы. Клетки, сохранившиеся на поверхности чашки, считали “прилипающими”; обычно около 90% этих клеток составляли гранулоциты, остальные - лимфоциты, моноциты, немногочисленные макрофаги. Далее в чашки вносили вирус Л-16 в различных концентрациях или “стимулятор” ВП-4, разведенные в среде с 10% сыворотки теленка. Чашки инкубировали во влажной камере при +37°С в течение 2 часов, затем аккуратно промывали их поверхность, фиксировали клетки этиловым спиртом и окрашивали по Романовскому-Гимза. После отмывания и просушивания клетки на чашках исследовали двумя методами:

1) Просчитывали общее количество клеток в 10 полях зрения инвертированного микроскопа (объектив 1x40). Просчитанная средняя арифметическая служила показателем средней “адгезивной способности” исследуемых клеток.

2) Определяли состав клеточной популяции в 150 полях зрения, обращая внимание на морфологические особенности лимфоцитов и гранулоцитов, а также - количество и размер клеточных агрегатов ( иммерсионный объектив 1x90). Суммарное количество агрегатов (начиная от трёх соединившихся клеток) служило показателем уровня агрегации клеток.

Табл. 1. НЕЙТРАЛИЗАЦИЯ С ПОМОЩЬЮ ВП-4 ИЛИ МП-2 ИММУНОДЕПРЕССИВНОГО ДЕЙСТВИЯ КОРЕВОЙ ВАКЦИНЫ В ОПЫТЕ ИНДУЦИРОВАННОЙ БЛАСТТРАНСФОРМАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА

Группа наблюдений Количество наблюдений Средняя геометрическая числа импульсов Н3 тимидина/мин Границы средней геометрической при Р=0,1

Контроль 9 2056 1914-2754 (К)

ФГА 8 12710 9550-16630 (Ж)

Л-16 9 2541 1905-3311 (=К)

ФГА+Л-16 9 3733 2042-6761 (<ФГА)

ВП-4 9 2612 2089-3162 (=К)

ФГА+Л-16+ВП-4 9 11891 10260-14160 (=ФГА)

МП-2 9 5794 4365-7586 (Ж)

ФГА+Л-16+МП-2 9 22095 18240-25120 (>ФГА)

Примечание: Условия эксперимента - ФГА 2 мкг/мл, вирус Л-16 - 5х103 цитопатогенных единиц (ЦПД50)/мл, поливакцина ВП-4 - 10 мкг/мл, МП-2 - 0,1 мкг/мл, лейкоцитов - 200000 в 250 мкл на пробу.

Кроме того, в ряде опытов было определено воздействие вакцины Л-16 и препарата ВП-4 на активность гранулоцитов в НСТ-тесте. Исследуемые клетки наносили в каплях на предметное стекло, инкубировали с Л-16 и ВП 4 в течение 2 часов, затем проводили НСТ-тест в соответствии с клинико-лабораторной инструкцией. В каждом опыте было использовано 4-8 микрокультур, что в дальнейшем позволяло проводить статистическую обработку результатов. С помощью иммерсионной микроскопии для каждой культуры определяли “индекс НСТ”, рассчитывая затем средние значения полученных индексов.

Результаты

При относительно непродолжительной инкубации лимфоцитов с Л-16 подавление их способности к бласттрансформации было достоверным, хотя и не слишком демонстративным (в 3-4 раза).

Стимулятор ВП-4 был использован в субмитоген-ной дозе, однако его добавление в пробы, содержащие ФГА и Л-16, практически полностью восстанавливало активность ФГА в бласттрансформации (табл. 1). Аналогичным образом действовал и миело-пептид МП-2, хотя его применение приводило к гиперстимуляции бласттрансформации в присут-ствиии ФГА и Л-16 (табл. 1).

Три суммированных в таблице опыта дали один и тот же результат, но разброс величин варианта был значительным, поэтому различие данных в таблице достоверно при Р=0,1.

Обработка тех же опытов методом “критерий знаков” подтвердила реальность различия между уровнями бласттрансформации в группах при уровне достоверности Р=0,05 (табл. 2).

Таким образом, два активатора различной природы, способных стимулировать митогенез лимфоцитов человека, нейтрализовали в использованной

Табл. 2. ВЛИЯНИЕ ВИРУСА Л-16 И ДВУХ СТИМУЛЯТОРОВ (ВП-4 И МП-2) НА УРОВЕНЬ БЛАСТТРАНСФОРМАЦИИ В ПРИСУТСТВИИ ФГА - ОБРАБОТКА С ПОМОЩЬЮ “КРИТЕРИЯ ЗНАКОВ”. (Включение Н3 тимдина в отдельных пробах, сгруппированных по возрастающей)

Контроль:

684, 911, 1024, 1175, 1930, 2425, 2710, 4422, 12130

ФГА:

5585, 5691, 5793, 7432, 17378, 23618, 31274, 36195

(Ж)

Вакцина Л-16:

789, 1198, 1621, 2139, 2603, 3011, 5026, 5222, 6117(=К)

ФГА + вакцина Л16:

98, 140, 4991, 5181, 5708, 11479, 13151, 15658, 28181

(<ФГА)

ВП-4:

1249, 1280, 1410, 2203, 2635, 3028, 3466, 4911, 7322

(>К<ФГА)

ФГА + вакцина Л-16 + ВП4:

3266, 6615, 10341, 13440, 13632, 15793, 16252, 24634, 26045

(>ФГА)

МП-2:

1222, 2491, 4424, 4612, 5674, 7271, 10314, 15040, 19545

(>К<ФГА)

ФГА + вакцина Л-16 + МП-2:

11031, 14715, 15995, 19069, 25441, 26490, 26940, 48597

(>ФГА)

Примечание: в каждую пробу было внесено по 0,1 микрокюри Н3 тимидина.

системе иммунодепрессивное воздействие вируса коревой вакцины Л-16 на лимфоциты человека.

Что касается воздействия вакцины Л-16 на гра-нулоциты донора, оказываемое в течение всего лишь 2 часов, то его скорее можно охарактеризовать как

стимулирующее. В опытах наблюдалось повышение адгезивной способности клеток, инкубированных с вирусом Л-16 в концентрациях 3,3х103, 5х103, 1x10^ ЦПД50/мл. Концентрация 5x101 ЦПД/мл оказалась избыточной - среднее количество клеток на поверх-

Табл. 3. ВЛИЯНИЕ ВИРУСА КОРЕВОЙ ВАКЦИНЫ НА АДГЕЗИВНУЮ СПОСОБНОСТЬ КЛЕТОК КРОВИ (СРЕДНЕЕ КОЛИЧЕСТВО ПРИЛИПШИХ КЛЕТОК В ПОЛЕ ЗРЕНИЯ)

Опыт Вариант Количество Среднее количество Различие с контролем

культивирования наблюдений клеток в поле зрения (Р)

1 Контроль 10 46,4 ± 15,8 -

Л-16 5x103 ТЦЦ 9 103,4 ± 19,9 0,05

Л-16 5x104 ТЦЦ 10 58,5 ± 28,0 >0,1

2 Контроль 10 44,5 ± 7,9 -

Л-16 5x103 ТЦЦ 9 67,3 ±11,1 0,05

Л-16 5x104 ТЦЦ 10 38,2 ± 6,2 >0,1

3 Контроль 10 36,6 ± 5,5 -

Л-16 5x103 ТЦЦ 10 71,0 ± 15,2 0,05

4 Контроль 10 61,4 ± 20,5 -

Л-16 3хЮ3ТЦЦ 10 111,6 ± 15,7 0,05

Л-16 5x103 ТЦЦ 10 121,2 ± 15,0 0,05

Л-16 1х104 ТЦЦ 10 109,3 ± 17,8 0,05

Примечание: в графе «Вариант культивирования» указано количество ЦПД50 вируса вакцины Л-16 в 1 мл. Табл. 4. ВЛИЯНИЕ ВИРУСА ВАКЦИНЫ Л-16 НА АГРЕГАЦИЮ ПРИЛИПАЮЩИХ КЛЕТОК

Опыт Инкубация клеток Количество агрегатов различного размера в 150 полях зрения (объектив 1x90, иммерсия) Суммарное количество агрегатов

3-4 клетки 5-7 клеток 8 и более клеток

1 Контроль 6 13 3 22

Л-16 5x103 26 25 15 66

2 Контроль 2 3 3 8

Л-16 5x103 11 8 21 40

3 Контроль 15 7 5 27

Л-16 5x103 32 19 16 66

4 Контроль 9 1 3 13

Л-16 5x103 29 6 4 39

5 Контроль 19 8 6 33

Л-16 3x103 53 16 9 78

Л-16 5x103 63 19 8 90

Л-16 1x104 53 11 4 68

Средние арифметические по общему количеству агрегатов Контроль 20,6 ± 6,4

Л-16 63,8 ±11,8

Примечание: концентрация вируса вакцины Л-16 выражена в ЦПД50/мл. В большинстве случаев она соответствует разведению исходной культуры вируса 1:100.

ности чашек было близким к контрольному; очевидно, сказывалось прямое цитопатогенное действие вирусных антигенов на гранулоциты (табл. 3).

Об усилении адгезивной способности гранулоци-тов под влиянием средней концентрации вируса Л-16 свидетельствует и заметное увеличение количества агрегатов клеток в 150 полях зрения, повышенное в 2,5-5,0 раз по сравнению с контролем. Повышение происходило, главным образом, за счет агрегатов, включающих 3-4 клетки. По всей вероятности, образование крупных агрегатов было затруднено из-за ограничения подвижности гранулоцитов на поверхности чашки (табл. 4).

Суммирование результатов трёх опытов по определению активности гранулоцитов в НСТ-тесте принесло сходные результаты; в контроле средний индекс НСТ составил 2,51 ±0,14, после воздействия вируса Л-16 в концентрации 5x10 ’ ЦПД/мл индекс составил 2,99+0,25, что свидетельствовало об активации способности гранулоцитов к образованию су-пероксиданионов.

Наиболее интересным и неожиданным оказался результат опытов по воздействию стимулятора ВП-4 на активирующее действие Л-16 в короткоживу-щей культуре гранулоцитов. Оказалось, что препарат ВП-4 во всех трех разновидностях опыта снимал или снижал активирующее действие Л-16 - даже и в том случае, когда сам ВП-4 обладал в данном опыте активирующим действием (табл. 5). Таким образом, сложный бактериальный стимулятор ВП-4 нарушал иммуномодулирующую активность вируса коревой

Табл.5. ВЛИЯНИЕ ВИРУСА КОРЕВОЙ ВАКЦИНЫ Л-16 НА СВОЙСТВА ГРАНУЛОЦИТОВ В ПРИСУТСТВИИ АКТИВАТОРА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК (ВП-4)

Тест Воздействие на прилипающие клетки крови Количество проб Средние арифметические показателей Различие с контролем (Р)

НСТ Контроль 8 2,50 ± 0,25 -

(индекс)* Л-16 8 2,99 ± 0,26 0,05

ВП-4 50 мкг/мл 8 2,43 ± 0,33 нет

Л-16 + ВП-4 8 2,45 ± 0,31 нет

Адгезивные Контроль 10 37,0 + 5,5 -

свойства Л-16 10 71,0 ± 15,2 0,05

(количество клеток ВП-4 10 мкг/мл 10 81,0 ± 20,6 0,05

в поле зрения) Л-16 + ВП-4 10 53,0 ± 15,7 >0,1

Способность Контроль 6 5,8 ± 4,0 -

к агрегации (общее Л-16 6 15,2 ± 4,2 0,05

количество агрегатов ВП-4 10 мкг/мл 6 15,0 ± 7,2 0,05

на 150 полей зрения) Л-16 + ВП-4 6 11,5 ±7,6 0,1

Показатели НСТ превышали величины, обычно наблюдаемые в клинике. Вероятно, это объясняется длительностью инкубации фагоцитов в каплях на стекле (2,5 часа), в течение которой происходила их дополнительная активация

Примечание: во всех приведенных опытах концентрация вируса вакцины Л-16 составляла 5х103 ЦПД50/мл, т.е. соответствовала разведению исходной культуры вируса 1:100.

вакцины Л-16 при воздействии её как на лимфоциты, так и на гранулоциты.

Обсуждение

Результаты представленного исследования являются предварительными, так как они затрагивают важные, но мало разработанные темы. Одна из них -воздействие вируса кори на гранулоциты. Судя по представленным данным, вирус или его поверхностные белки быстро присоединяются к поверхности гранулоцита, изменяя его функции, т.е. мы можем предполагать наличие на его поверхности соответствующих рецепторов. Косвенно это предположение подтверждается тем, что Миеломоноцитарные колониеобразующие клетки несут на поверхности белок СБ46, являющийся рецептором к вирусу кори и -одновременно - к СЗЬ компоненту комплемента [9]. Эти клетки после дифференцировки превращаются в гранулоциты или моноциты, причем на поверхности последних также обнаружен рецептор С046, существенная роль которого в иммуномодулирующем воздействии вируса кори на моноциты и макрофаги доказана со всей убедительностью [10, 14, 15].

Наши данные о воздействии вируса кори на гранулоциты частично совпадают с таковыми о его влиянии на иные типы клеток. Повышение активности гранулоцитов в НСТ-тесте соответствует усилению образования супероксиданиона N0 макрофагами под влиянием вируса кори [10,14,15]. Отмечено усиление в тех же условиях способности моноцитов к

агрегации, а также прилипанию к заражённым вирусом эпителиальным клеткам [29].

Важная особенность использованной нами методики - кратковременность инкубации гранулоцитов с вирусом, исключающая его размножение в клетках. Таким образом, были исследованы ранние результаты взаимодействия вируса с соответствующими рецепторами. Такой подход вполне оправдан, так как в ряде случаев были получены доказательства развития иммуномодуляции в результате взаимодействия вируса с рецепторами на поверхности клеток [23,27,29]. Конечно, возможен и косвенный путь активации гранулоцитов вирусом кори. Например, уровень их хемотаксиса повышался под влиянием IL-8, образуемого макрофагами после их контакта с вирусом [31]. Таким образом, участие гранулоцитов в развитии коревой иммунодепрессии высоко вероятно и подлежит дальнейшему исследованию.

Второй важный вопрос, затронутый в работе, -исследование путей нейтрализации иммунодепрес-сивного действия вируса кори. Первый достигнутый в этой области успех подлежит тщательной проверке с анализом механизма предотвращения коревой иммуномодуляции тем или иным стимулятором. В системе, содержащей все подклассы лимфоцитов, и ВП-4 и МП-2 могут действовать как индукторы дополнительного образования IL-2, предотвращающего влияние Л-16 на бласттрансформацию. В системе, содержащей фагоциты, могло происходить изменение чувствительности этих клеток к вирусу в результате активирующего воздействия на них ВП-4, сопровождаемого перестройкой поверхности клеток, усилением синтеза некоторых ферментов и суперок-сиданионов. Разумеется, это предположение требует соответствующих доказательств в эксперименте.

В любом случае попытки нейтрализации имму-нодепрессивного действия вируса кори вполне закономерны и опираются на большой материал, посвящённый клиническому и экспериментальному изучению этого феномена.

Список литературы

1. Егорова Н.Б., Крейнин Л.С., Ефремова В.Н. и др. Изучение иммуностимулирующей активности ассоциации антигенов Klebsiella pneumoniae, Staphilococcus aureus, Proteus, coli и отдельных её компонентов в условиях перекрестного заражения // Ж. Микробиол., эпидемиол., иммунобиол. 1985. -№9. - С. 70-74.

2. Ляшенко В.А. Коревая иммунодепрессия при инфекции или вакцинации // Иммунология 1996. -№ 2. - С. 3-6.

3. Ляшенко В.А., Лавров В.Ф., Юминова Н.В., Ковалёва Л. Г. Иммунодепрессивное действие вируса кори in vitro // Вопросы вирусологии 1999. - № 1. -С. 39-41.

4. Тихонова Н.Т., Хромецкая Т.Н., Мамаева Г.А. и др. Количественная характеристика популяций Т-и В-лимфоцитов в периферической крови привитых живой коревой вакциной и больных корью // Иммунология 1981. - № 4. - С. 50-54.

5. Петров Р.В., Михайлова А.А., Фонина Л.Я., Степаненко Р.С. Миелопептиды. - М.: Наука, 2000.

- 180 с.

6. Юминова Н.В., Краснова В.П, Ляшенко В.А. Иммунологические показатели при интраназальном способе ревакцинации живой коревой вакциной // Вопросы вирусологии 1993. - №4. - С.182-184.

7. Aaby P., Samb В., Simindon F. et al. Child mortality after high-titer measles vaccine in Senegal // Lancet 1991. - Vol. 338. - p.1518-1520.

8. Elosen L.M., Ward B.J., Moench T.R., Griffin D.E. Infection of monocytes during measles// T.Inf.Dis. 1993.

- Vol. 168 - p.47-52.

9. Helin E., Salmi A.A., Vanharanta R. Measles virus replication in cells of myelomonocytic lineage is dependent on cellular differentiation stage // Virology 1999.-Vol. 253, №l.-p.35-42.

10. Hirano A., Yang Z., Katayama Y. Et al. Human CD46 enhances nitric oxide production in mouse macrophages in response to measles virus infection in the presence of gamma-interferon: dependence of the CD46 cytoplasmic domains //J. Virol. 1999. - Vol.73, №6 - p. 4776-4785.

11. Hirsh R.L., Mokhtarian F., Griffin D.E. et al. Measles virus vaccination of measles positive individuals suppresses lymphocytes proliferation and chemotactic factor production. // Clin. Immunol. And Immunopathol. 1981. - Vol. 21. - p. 341-350.

12. Garenn М., Leroy O., Beau J.P., Sene I. Child mortality after high-titer measles vaccine: prospective studies in Senegal // Lancet 1991. - Vol. 338. - p.903-907.

13. Griffin D.E., Ward B.J., Esolen L.M. Pathogenesis of measles virus infection: an hypothesis for alterd immune response //J.Infect.Dis. 1994. - Vol. 170 (suppl.l). - p.24-31.

14. Katayama Y., Hirano A., Wong T.C. Human receptor for measles virus (CD46. enhances nitric oxide production and restricts virus replication in mouse macrophages by modulating production of alpha/beta interferon // T.Virol. 2000. - Vol.74. - №3.

- p. 1252-1257.

15. Kurita-Taniguchi М., Fukui A., Hazeki K. et al. Functional modulation of human macrophages through CD46 (measles virus receptor): production of IL-12 p 140 and nitric oxide in association with recruitment of protein-tyrosine phosphatase SHD-1 to CD46 // J. Immunol. 2000. -Vol.165, №9. - p.5143-5152.

16. Leon M.E., Ward B., Kanashiro R. et al. High-titer measles immunization in Peruvian Children // J.Infect.Dis.1993. - Vol.168. -p.1097-1104.

17. Leopardi R., Vainoonpaa R., Hurme M. et al. Measles virus infection enhances IL-1 beta but reduces

tumor-necrosis factor-alfa expression in human monocytes //J.Immunol. 1992. - Vol. 149. - p.2397-2401.

18. Leopardi R., Ilonen J., Mattila L., Salmi A. Effect of measles virus infection on MHC class II expression and antigen presentation in human monocytes // Cell Immunol. 1993. - Vol.147. - p.388-396.

19. Marie J.C., Kehren J., Trscol-Biemont M. et al. Mechanism of Measles Virus-induced Suppression in Inflammatory Immune Responses // Immunity 2001. -Vol. 14, №1. - p.69-79.

20. McChesney M.B., Kehrl J.H., Valsamakis A. et al. Measles virus infection of B-lymphocytes permits cellular activation but blocks progression through the cell cycle // J. Virol. 1987. - Vol. 61. - p.3441-3447.

21. McChesney M.B., Altmann A., Oldstone M.B.A. Suppression of T-lymphocytes function by measles virus is due to cell cycle arrest in G1 // J.Immunol. 1988. -Vol.140. - p. 1269-1273.

22. McChesney M.B., Fujinami R.S., Lerche N.U. et al. Virus-induced immunosuppression: infection of periferal blood mononuclear cells and suppression of immunoglobulin synthesis during natural measles virus infection of rhesus monkeys //J.Infect.Dis. 1989. -Vol.159. - p.757-760.

23. Niewiesk S., Eisenhuth I., Fooks A. et al. Measles Virus-Induced Suppression in the Cotton Rat (Sigmodon hispidus. Model Depends on Viral Glicoproteins //J. of Virology 1997. - Vol. 71, №4. -p.7214-7219.

24. Salonen R., Nonen J., Salmi A.A. Measles virus inhibits lymphocytes proliferation in vitro by two

different mechanisms // Clin.Exp.Immunol. 1989. - Vol 75, №3. - p.376-380.

25. Sanches-Lanier M.P., Guerlin P., Me Laren L.C. et al. Measles-unduced suppression of lymphocytes proliferation//Cell.Immunol. 1988.-Vol. 116.-p.367-381.

26. Schnorr J.J., Xanthakos S., Keiikavoussi P. et al. Induction of maturation of human blood dendritic cell precursors by measles virus is associated with immunosuppression //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997; Vol 94, №10. - p.5326-5331.

27. Schlender J., Schnorr J.J., Cattomen T. et al. Surface interaction of measles virus glycoproteins is necessary and sufficient for the induction of proliferative inhibition of human periferal blood mononuclear cells / / Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1996. - Vol. 93. - p.13194-13199.

28. Smerdman L., Loki A., de Silva A.P.J. et al. Immunosuppression after measles vaccination // Acta Pediatr. 1994. - Vol. 83. - p.164-168.

29. Soilu-Hannien М., Hannien A., Ilonen J. et al. Measles virus haemagglutinin mediates monocytes aggregation and increased adherence to measles-infected endothelial cells // Med. Microbiol. Immunol. 1996. -Vol.185, №2. - p.73-80.

30. Thatte U.M., Gandal P.S., Kulkarni M.R. et al. Polimorphonuclear and monocyte functions in measles // J.Trop.Med. 1991. - Vol. 37, №2. - p.67-70.

31. Van Damme J., Decock B., Coning R. et al. The chemotactic activity for granulocytes produced by virally infected fibroblasts is identical to monocyte-derived interleukin 8 // Eur. J. Immunol. 1989. - Vol.

19, №7. -p.l 189-1194.

поступила в редакцию 08.06.2001 принята к печати 05.07.2001