CC BY
22
УДК 616.94-022.7(616.24-002.4+616.25-002.3):612-092.9:591.145.2
К.В.Самсонов
ПУТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОГО АЛЬФА-ТОКСИНА ИЗ ОЧАГОВ ГНОЙНО-НЕКРОТИЧЕСКИХ ВОСПАЛЕНИЙ ЛЕГКИХ, СОЧЕТАЮЩИХСЯ С ЭМПИЕМОЙ ПЛЕВРЫ, В ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА ЖИВОТНЫХ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
В эксперименте на 12 кроликах доказан преимущественный чрезлимфатический путь резорбции стафилококкового а-токсина из
гнойно-деструктивных полостей легких и плевры.
SUMMARY
KV.Samsonov
STAPHYLOCOCCUS ALPHA-TOXTN PROPAGATION FROM SUPPURATIVE-NECROTIC FOCUSS OF LUNG TMFLAMMATTON ACCOMPANIED WITH PLEURA EMPYEME IN THE EXPERIMENTS ON ANIMALS
Results of the experiments which included 12 rabbits showed trans lymphatic resorbtion path for staphylococcus а-toxin from suppurative-destructive lung and pleura cavities.
Гнойно-некротические неспецифические заболевания легких часто осложняются развитием эмпиемы плевры [4]. В течении и исходе гнойнонекротических заболеваний легких и плевры ведущую роль играет интоксикация организма микробными токсинами и другими продуктами жизнедеятельности микроорганизмов [1].
Изучения распространения бактериальных токсинов из очагов гнойно-некротических воспалений легких, сочетающихся с эмпиемой плевры не проводилось, поэтому нами была выполнена эта работа.
Материал и методы исследования
Экспериментальные исследования проводились на 12 взрослых кроликах обоего пола породы шиншилла весом от 1,9 до 2,1 кг. В первой контрольной серии опытов (6 кроликов) была выполнена модель закрытого ограниченного гнойнонекротического воспаления (абсцесса) легкого [2]. Во второй серии опытов (6 кроликов) была создана модель абсцесса легкого, сочетающегося с эмпиемой плевры [3].
Для изучения путей распространения бактериального токсина из закрытых гнойнонекротических очагов легких и гнойных плевральных полостей нами была применена следующая методика. В полость закрытого абсцесса легкого или в гнойновоспаленную плевральную полость животным вводили очищенный стафилококковый а-токсин, меченый I125 в разведении 1:200, в объёме 2 мл в дозе 3,5 mKu на 1 кг веса животного. Стафилококковый а-токсин, меченный I125, был получен в лабораториях стафилококковых инфекций и ботулизма НИИ
эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи (г. Москва) со следующими характеристиками: белок (по Лоури) - 0,06 мг/мл, гемолизирующая активность - 0,5, радиоактивность (без учёта эффективности счёта) - 1,7-108 имп/мин/мл или 0,7 тКи/мл, молекулярный вес 36000.
За 20 минут до начала эксперимента опытного кролика поили молоком. Под внутривенным тиопенталовым наркозом (15 мг тиопентала натрия на 1 кг веса), в сочетании с местной инфильтрационной анестезией 0,5%-ного раствором новокаина, производили разрез кожи по проекции внутренней ярёмной вены - от середины шеи до верхней трети грудины (слева - для дренирования грудного лимфатического протока, справа - для дренирования правого лимфатического протока).
Послойно выделялась перевязывалась внутренняя яремная вена, в сторону ярёмно-ключичного венозного соустья вводился по направителю катетер для сбора лимфы. Затем, находили подключичную вену и перевязывали ее на уровне середины ключицы, после осторожной отсепаровки от окружающих тканей перевязывалась начальная часть плече-головной вены. В образовавшийся венозный резервуар для сбора лимфы впадали мелкие венозные веточки, которые дополнительно перевязывались.
Из линейного разреза на внутренней поверхности бедра послойно выделялась и катетеризировалась в центральном направлении бедренная вена - катетер для забора проб крови продвигался до уровня нижней полой вены. Оба катетера промывались гепарином и до начала эксперимента перекрывались.
С целью предотвращения свёртывания лимфы и крови при их наружном выделении по катетерам, животным внутривенно вводился гепарин из расчёта 400 ЕД на 1 кг веса. Для взятия проб мочи в мочевой пузырь через уретру вводился катетер. При создании правосторонних моделей закрытого абсцесса или эмпиемы плевры дренировали правый лимфатический проток, при левосторонних моделях дренировали левый грудной лимфатический проток.
В течение опытов лимфа собиралась постоянно по часам в специальные резервуары, кровь из нижней полой вены бралась периодически.
По истечении времени опытов кролики забивались, навески биологических жидкостей (лимфа, кровь, моча) исследовали методом радиоактивной индикации.
Радиоактивная индикация проводилась до опытов - исследовали вводимую в лёгкое или в плевральную полость дозу радиоактивного изотопа, и после опытов - исследовали пробы-навески биологических жидкостей весом 1 г.
Радиоактивность проб определялась на установке фирмы «Гамма» (ВНР) с автоматическим селективным по энергии счётчиком с колодезным датчиком (типа Ж-138/А), настроенным на I125 - 0,03 Мэв, в режиме 60 с, с рангом 103 импульсов; 3-кратно, с вычитанием фона. Затем рассчитывалась средняя активность (и) в импульсах/60 с на каждую пробу .Перед введеняием радиоактивного препарата определялась стандартная активность (АС) - количество импульсов за 60 с в 1 г сырой ткани животного. Вычисление Ас начиналось с трехразового определения общего количества импульсов радиоактивного изотопа, вводимого в организм животного. Затем вычислялась средняя (М) всех определений.
Стандартная активность (Ас) вычислялась по формуле: АС=М/р, где р - общий вес животного в граммах.
Результаты измерения уровня накопления радиоактивности в органах и биологических жидкостях во всех группах опытов выражали относительной удельной активностью (ОУА) - это отношение средней активности (и), в имп/60 с, 1 г исследуемой сырой биологической жидкости к стандартной активности 1 г сырой ткани: ОУА=и/АС.
Результаты исследований
Изучение резорбции очищенного
стафилококкового а-токсина, меченного I125, из зоны закрытого гнойно-некротического воспаления легких показало максимальное увеличение радиоактивности в лимфе через 4 часа после внутрилегочного введения токсина, затем радиоактивность снижалась (табл.). При этом отмечено, что максимальная радиоактивность лимфы правого лимфатического протока была достоверно выше - 24,4±1,38 ед. ОУА (р<0,05), чем лимфы грудного лимфатического протока - 10,1±0,87 ед. ОУА.
При гнойно-некротическом воспалении легких уровень радиоактивности в крови быстро возрастал до 1,55±0,26 ед. ОУА в течение первого часа от момента внутрилегочного введения токсина, затем концентрация токсина ступенеобразно увеличивалась к 5 часу опыта до 3,43±0,44 ед. ОУА. Через сутки
концентрация токсина в крови достигала максимальных величин - до 4,36±0,4 ед. ОУА.
Следует отметить, что при закрытом гнойнонекротическом воспалении легких лимфатический путь был основным в резорбции очищенного а-токсина, меченного I125, из легочной ткани (рис.). В условиях закрытого гнойно-некротического воспаления легких резорбция микробного токсина в кровь была в 6 раз меньше, чем в лимфу.
Стафилококковый а-токсин медленно выделялся с мочой, при гнойно-некротическом воспалении легких концентрация токсина в моче через час после его внутрилегочного введения возрастала до 5,15±1,8 ед. ОУА и затем уменьшалась: через 5 часов - до 4,3±0,39 ед. ОУА, а через сутки - до 2,8±0,6 ед. ОУА.
Такая же зависимость элиминации стафилококкового а-токсина, меченного I125, отмечена из очагов гнойных плевральных полостей. Разница была лишь в скорости элиминации бактериального токсина. При введении токсина в гнойные плевральные полости концентрация его в лимфе достигала максимальной величины по истечении 3,5 часов с начала испытаний. Затем концентрация токсина медленно уменьшалась к 5 часу опытов.
Всасывание бактериального токсина, меченного I125 , в кровь и в лимфу из гнойных плевральных полостей было несколько выше, чем из закрытых ограниченных гнойно-некротических воспалений легких. Этот факт можно объяснить большей всасывающей поверхностью плевральной полости.
Выводы
1. Экспериментальные модели на животных закрытых ограниченных гнойно-некротических заболеваний легких, не осложненных и осложненных эмпиемой плевры, позволяют изучить пути распространения из них бактериального токсина.
2. Стафилококковый а-токсин, меченный I125, резорбируется из гнойно-некротических полостей легких и плевры преимущественно по лимфатическим путям.
Таблица
Накопление радиоактивности в биологических жидкостях после введения очищенного стафилококкового а-токсина, меченного I125, в полости закрытых абсцессов легких (А) и в гнойные плевральные полости (Б), ед. ОУА (М±т)
Вид биологической жидкости Серия опытов Часы после введения и количество вводимого радиоактивного вещества
1 2 3 4 5 р
Лимфа из правого лимфатического протока А 4,96±0,65 13,2±1,4 23,4±3,0 24,4±1,98 21,4±1,35 <0,05
Б 5,64±1,0 16,8±1,6 23,8±2,6 25,1±1,0 22,1±1,2 <0,05
Лимфа из грудного лимфатического протока А 2,4±0,2 4,72±0,6 7,2±0,55 10,1±0,7 8,26±0,75 <0,05
Б 2,6±1,8 5,7±0,6 8,7±0,65 10,9±0,6 9,3±0,5 <0,05
Кровь из нижней полой вены А 1,55±0,26 2,11±0,23 2,81±0,6 3,05±0,4 3,43±0,44 >0,05
Б 1,7±0,3 2,9±0,35 3,2±0,4 3,4±0,4 3,6±0,2 >0,05
Моча А 5,15±1,8 4,9±0,5 4,74±0,7 4,52±0,7 4,3±0,39 >0,05
Б 5,5±1,0 5,1±0,7 4,9±0,8 4,7±0,6 4,4±0,6 >0,05
р <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05
Рис. Динамика радиоактивности крови и лимфы после введения очищенного стафилококкового а-токсина, меченного I125 , в полости закрытых абсцессов легких и эмпиемы плевральных полостей. 1 - показатели резорбции в кровь токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 2 -показатели резорбции в кровь токсина, введенного в гнойные плевральные полости; 3 - показатели резорбции в лимфу грудного лимфатического протока токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 4 - показатели резорбции в лимфу грудного лимфатического протока токсина, введенного в гнойные плевральные полости; 5 - показатели резорбции в лимфу правого лимфатического протока токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 6 - показатели резорбции в лимфу правого лимфатического протока токсина, введенного в гнойные плевральные полости.
ЛИТЕРАТУРА
1. Хирургия легких и плевры: Руководство для врачей [Текст]/И. С.Колесников, М.И.Лыткин.-Л.: Медицина, 1988.-382 с.
2. Разработка экспериментальной модели
абсцесса легкого, сочетающегося с эмпиемой плевры [Текст]/К.В.Самсонов//Бюл. физиол. и патол.
дыхания.-2004.-Вып.18.-С.62-63.
3. Экспериментальное воспроизведение закры-
тых и дренируемых абсцессов легких для изучения элиминации из них бактериального токсина [Текст]/К.В.Самсонов//Бюл. физиол. и патол.
дыхания.-2003.-Вып .14.-С.30-32.
4. Lung abscess and empiema
[ТеХ]/И.Р.'Wiedemann, T.W.Rice//Semin. Thorac.
Cardiovasc. Surg.-1995.-Vol.7, №2.-P.119-128.
П □ □
УДК 619:616.3: 615.246.2:636.7
А.Н. Чубин, Л.А.Набока
ЦИТОГРАММА ТКАНЕВЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА У СОБАК ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ ЛАЗЕРНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ В ПОСТОЯННОМ МАГНИТНОМ ПОЛЕ
Институт ветеринарной медицины и зоотехнии ДальГАУ, Благовещенск РЕЗЮМЕ
Целью данной работы явилось изучение цитограммы тканевых лейкоцитов в слизистой оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле. В
результате проведенных исследовании
установлено, что рубцевание язвы желудка на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле сопровождается снижением количества лимфоцитов, неитрофилов,
эритроцитов, тучных, плазматических,
