CC BY
95
ная гиперхромная анемия. Количество RBC резко снижено, отмечается увеличение MCV и МСН при нормальных значениях МСНС. Эритроцитарная гистограмма значительно смещается вправо, уплощается, растягиваясь вдоль оси X. В процессе лечения витамином В12 отмечается положительная динамика со стороны эритроцитарных показателей. Фракция незрелых ретикулоцитов (ЖР) повышается значительно раньше (на 2-3-й день лечения) и опережает подъем ретикулоцитов (ДЕТ%).
АИГА диагностируют по наличию аутоантител, фиксированных на эритроцитах с помощью пробы Кумбса, при которой антшлобулиновые антитела вступают во взаимодействие с иммуноглобулинами эритроцитов (прямая реакция Кумбса) и вызывают агглютинацию эритроцитов. Отрицательная проба Кумбса не исключает АИГА. Выделяют несколько форм АИГА в зависимости от типа АТ. Симптоматические или вторичные АИГА развиваются на фоне лимфопролиферативных заболе-
ваний и других злокачественных опухолей, болезней соединительной ткани, инфекций, аутоиммунных заболеваний. Анемия, как правило, носит макроцитарный, нормо- или гиперхромный характер и сопровождается умеренным, реже высоким ретику-лоцитозом. В мазках крови отмечается анизоцитоз, полихрома-тофилия, могут присутствовать сфероциты, макроциты, эритро-кариоциты. В ОАК выявляются повышение MCV, MCH, RDW, эритроцитарная гистограмма уплощается и смещается вправо.
Таким образом, использование эритроцитарных и ретику-лоцитарных показателей, получаемых на гематологическом анализаторе BC-6800 компании Mindray, позволяет:
- провести быстрый скрининг на наличие анемического синдрома;
- определить характер анемии;
- оценить интенсивности эритропоэза в костном мозге;
- мониторировать изменение параметров крови в ходе проводимой терапии.
публикации по проблемам цитологии и гематологии
Н.С. Агеева, О.В. Желтякова, Н.В. Пыжова, Е.А. Беззуб-цева. Сравнительный анализ результатов цитологического исследования материала шейки матки и цервикально-го канала, полученного при профилактическом осмотре, с помощью различных видов инструментария. ООО "Си-тилаб", Самара
Проведена сравнительная оценка применения адекватности забора материала цервикального канала и шейки матки различными видами инструментария, в частности комбинацией зондом универсальным типа А-2 и шпателем Эйра и зондом комбинированным цитощеткой Cervix Brash типа F1 у 80 женщин при скрининговом осмотре.
Одним из основных методов скрининга и уточняющей диагностики заболеваний шейки матки является цитологическое исследование, которое позволяет выявлять фоновые, предраковые процессы и инвазивный рак в начальных стадиях. Однако, по данным разных авторов, показатели чувствительности цитологического метода при выявлении предопу-холевых состояний и рака колеблются в широких пределах: от 30 до 83%. Основной причиной низкой чувствительности являются погрешности при получении материала и приготовлении препаратов: слишком тонкий или толстый мазок, потеря клеток при переносе материала со щетки на предметное стекло, неравномерное распределение клеток на стекле и плохо анализируемые скопления клеток.
Цель исследования - сравнительный анализ результатов цитологического исследования материала шейки матки и цервикального канала, полученного различными видами инструментария.
Проведено скрининговое исследование у 80 женщин в возрасте от 21 года до 65 лет (средний возраст 30 ± 10 лет). Цитологический материал слизистой оболочки шейки матки и цервикального канала получали с помощью комбинированной цитощетки Cervix Brash типа F1, материал врач-гинеколог наносил на одно предметное стекло, а комбинацией зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра материал наносился на два предметных стекла с идентификацией, как экто- и эндоцервикс. Препараты окрашивали по Романовскому, изучали под микроскопом, ретроспективно оценили результаты исследования.
Выбор оптимального метода забора материала для получения качественных цитологических препаратов являлся главной задачей, которую предстояло решить. Для оценки возможностей использования тех или иных инструмента-риев для цитологического исследования анализировали как
эпителиальный компонент материала, конкретно наличие или отсутствие клеток из зоны стыка/трансформации, но и, несомненно, наличие фоновых процессов и реактивных изменений эпителия, возрастных изменений, доброкачественных и злокачественных поражений каждым из сравниваемых методов, что в совокупности составляет основу профилактического скринингового осмотра.
Результаты проведенного сравнительного анализа показали, что качество препаратов выше при использовании комбинации инструментариев - зонда универсального типа А-2 и шпатели Эйра. В 96% наблюдений получены препараты с адекватным материалом, в 4% - недостаточно адекватные (небольшое количество клеток плоского и единичные клетки железистого эпителия, наличие элементов крови в скудном количестве), неадекватные препараты отсутствовали. Основной причиной неадекватного и недостаточно адекватного материала при заборе с помощью комбинированной цитошет-ки Cervix Brash типа F1 было наличие скудного клеточного компонента на фоне большого количества элементов крови: в 4% препаратов получено большое количество слизи и элементов крови, единичные клетки плоского эпителия и отсутствие клеток цилиндрического эпителия, в 8% - умеренное количество слизи и элементов крови, небольшое число групп клеток плоского эпителия и единичные клетки железистого и метаплазированного эпителия. Количество адекватных препаратов составило 88%.
Число препаратов, в которых присутствовали клетки из зоны стыка/трансформации при применении комбинации зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, было в 86% случаев, в то время как при использовании комбинированной цитощетки Cervix Brash типа F1 это число составило всего 35% наблюдений. Из полученных данных можно предположить, что наличие клеток железистого и/или метапла-зированного эпителия зависит не только от того, как врач-гинеколог получил материал, но и с помощью каких видов инструментариев осуществлялся забор биоматериала.
Элементы крови в достаточном количестве (не связанные с менструальным циклом) присутствовали в 31% случаев при заборе комбинированной цитощеткой Cervix Brash типа F1 и лишь в 10% наблюдений при применении комбинации зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра.
В препаратах, полученных при применении комбинации зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра и комбинированной цитощетки Cervix Brash типа F1, сравнение цитологической картины распределилось следующим образом:
на норму пришлось 53 и 54%, 40 и 41% составили воспалительные процессы, по 1% на атрофический и трихомонад-ный кольпит, в 3% наблюдений получили эстрогенный тип мазка.
В 1% наблюдений по препарату, полученному комбинацией зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, отметили признаки гиперкератоза, и также в 1% случаев установлен диагноз CIN II, что не найдено при заборе материала зондом комбинированной цитощеткой Cervix Brash типа F.
В препаратах, полученных комбинацией из зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, обнаружено достаточное количество клеточного материала (клеток плоского и железистого эпителия) для постановки цитологического заключения:
- общее число неадекватных и недостаточно адекватных препаратов, полученных при заборе комбинацией зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра меньшее, чем при соответствующем заборе материала зондом комбинированной ци-тощеткой Cervix Brash типа F-1 (4% и 12% соответственно);
- оценка характера патологического процесса дала положительный результат (1% случая наличия CIN II) при заборе комбинированными инструментариями, и не обнаружена при приготовлении препарата, полученного с помощью зонда комбинированной цитощетки Cervix Brash типа F-1;
- наличие реактивных признаков изменения эпителия (1% гиперкератоза) выявлено при применении комбинации зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, что не получено при использовании комбинированной цитощетки Cervix Brash типа F-1;
- обнаружение элементов крови значительно меньшее при комбинации зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, чем при использовании зонда комбинированной цито-щетки Cervix Brash типа F-1 (10 и 31% соответственно).
Таким образом, учитывая проведенную работу, проанализировав полученные результаты при наличии большого разнообразия видов инструментария, наиболее эффективной явилась комбинация зонда универсального типа А-2 и шпателя Эйра, применяемая для забора биоматериала из шейки матки и цервикального канала при профилактическом осмотре.
О.И. Анфиногенова, Т.П. Бондарь. Использование компьютерной морфометрии клеток периферической крови в оценке здоровья студентов. ФГАОУ ВПО СевероКавказский федеральный университет, Ставрополь
Адаптация к студенческой жизни - это сложный и многогранный процесс, требующий вовлечения всех резервов организма. В процессе учебных занятий в вузе создаются достаточные предпосылки для утомления обучающихся и следствием этого должно быть включение защитно-приспособительных реакций. Как известно, из всех систем организма система крови одна из первых включается в реакцию адаптации и играет чрезвычайную роль в поддержании гомеостаза организма в изменившихся условиях жизнедеятельности. Клеточный состав крови здорового человека довольно постоянен, поэтому различные его изменения, наступающие при адаптации, могут иметь важное диагностическое значение.
Целью исследования явилось изучение количественных и морфометрических особенностей клеток периферической крови у студентов в процессе адаптации к условиям обучения в вузе на разных курсах, в зависимости от пола и возраста. Проведено комплексное исследование относительного количества клеток периферической крови и цитоморфоме-трических параметров клеточного состава у 135 студентов Северо-Кавказского федерального университета трех курсов. Из них 44 девушки и 24 юноши в возрасте 17-21 года. Обследуемые были признаны клинически здоровыми, исключены студенты с острыми воспалительными, инфекционными заболеваниями, эндокринными болезнями. Количество эритроцитов в крови у студентов-первокурсников и студентов третьего курса находилось в пределах референсных величин. Тем не менее данный показатель имел тенденцию к снижению как у девушек (4,52 ± 0,06), так и у юношей-
первокурсников (4,95 ± 1,14) в сравнении с этими данными у студентов третьего курса (4,60 ± 0,05 у девушек, 5,13 ± 0,10 у юношей). Характер изменений концентрации гемоглобина в крови у сравниваемых групп в целом соответствовал динамике количества эритроцитов. Показатель анизоцитоза эритроцитов, отражающий гетерогенность популяций эритроцитов, демонстрирует достоверные различия (p < 0,001) между студентами-первокурсниками (14,45 ± 0,15 у девушек, 14,74 ± 0,23 у юношей) и у них же на третьем курсе (13,63 ± 0,18 у девушек, 13,68 ± 0,21 у юношей). Соответственно, данный показатель в процессе адаптации к обучению имеет тенденцию к снижению на более старшем курсе. Изучение размерных характеристик клеток крови в группах студентов не выявило достоверных различий среднего диаметра (7,05 ± 0,55 (1-й курс) и 6,98 ± 0,61 (3-й курс) соответственно), площади клеток (41,2 ± 4,9 (1-й курс) и 39,4 ± 5,6 (3-й курс) соответственно) и показателя пойкилоцитоза (4,9 ± 0,70 (1-й курс) и 4,5 ± 0,31 (3-й курс)). При этом перечисленные мор-фометрические данные были выше в группе студентов первого курса. Анализ эритроцитарной формулы выявил следующую картину. Количество дискоцитов преобладало (84,7%) у студентов первого курса. Также у них выявлены изменения в эритроцитарной формуле за счет увеличения доли деформированных необратимо измененных форм (7,6%). Подобные изменения в эритроцитарной формуле являются показателем ригидности адаптивных возможностей красных клеток крови за счет усиления эритродиереза нестойких или обратимых форм эритроцитов. Кроме того, выявленные изменения формулы эритроцитов при разных видах стрессовых воздействий можно объяснить снижением их стойкости, появлением фракции молодых или увеличением фракции старых менее устойчивых форм. Таким образом, проведенное исследование демонстрирует напряжение механизмов адаптации у студентов первокурсников, что проявляется в снижении компенсаторных возможностей организма в новых условиях среды обитания. Это иллюстрируется увеличением количества эритроцитов, гемоглобина, снижением анизоцитоза эритроцитов, количества как обратимо, так и необратимо измененных форм эритроцитов, что свидетельствует о снижении компенсаторных возможностей организма на первом курсе обучения в новых условиях среды обитания.
А.А. Блоцкий1, Р.А. Блоцкий1, Д.А. Ланшаков2, В.В.Чайка3, К.С. Голохваст3. Диагностика апоптоза и некроза поли-позной ткани носа на фоне разных видов термотерапии с помощью гистохимического исследования каспазы 3 и Bcl-xL. 1Амурская государственная медицинская академия, Благовещенск; ^Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск; 'Дальневосточный федеральный университет, Владивосток
При лечении разными формами термотерапии полипоз-ного и других гиперпластических процессов в полости носа протекают деструктивные процессы. Обычная диагностика с помощью биопсии и гистологического исследования не позволяет выявить тип процесса: апоптоз или некроз.
В данной работе приводятся результаты гистохимического исследования морфофункционального состояния по-липозной ткани на фоне проводимой лазерной интерстици-альной (от 1 до 10 Вт) и радиоволновой термотерапии (от 15 до 40 Вт). Показано, что лазериндуцированный апоптоз клеток полипозной ткани протекает наиболее вероятно по митохондриальному пути, что подтверждается положительной окраской на каспазу 3 и носит дозозависимый характер. В пользу версии об апоптозе через каспазу 3 говорит тот факт, что количество клеток, положительно окрашенных, растет пропорционально увеличению интенсивности лазерного излучения, тогда как активация лимфоцитов лазером не носит дозозависимого характера. Продемонстрировано, что ингибирование апоптоза с помощью Bcl-x1 протекает при невысокой интенсивности лазерного излучения (1-5 Вт) и далее (5-10 Вт) процесс носит однонаправленный характер.
В случае радиоволнового излучения в дозировках от 15 до 40 Вт деструктивные процессы в рыхлой соединительной ткани полипа протекают по пути некроза, так как ни в одной экспериментальной группе не обнаружено положительной окраски на активированную каспазу 3. Также отмечается дозозависимый эффект зоны некроза. Если при малых дозах (15-20 Вт) строение ткани полипа в целом сохранено -очаги некроза не превышают 20-30% от площади ткани, то при более высоких дозировках наблюдаются обширные поля мертвой ткани - отсутствует свечение ядер клеток. Безусловно, высокие дозировки радиоволновой терапии не являются методом выбора, поскольку после них будет образовываться грубая рубцовая ткань с пониженными свойствами ремоду-ляции.
Работа выполнена при поддержке Научного фонда ДВФУ, Государственного задания МОН РФ и гранта Президента для молодых кандидатов МК-1547.2013.5.
И.Л. Давыдкин, О.А. Гусякова, О.И. Федорова, Т.Ю. Степанова, И.А. Селезнева, С.И. Мурский, О.А. Кизирова, А.И. Габрильчак, И.В. Горбачева, И.А. Судьбина. Диагностическое значение морфометрии нейтрофилов периферической крови. ГБОУ ВПО "Самарский государственный медицинский университет" Минздрава Российской Федерации
С целью изучения реакции нейтрофилов периферической крови у лиц разного возраста и пола на примере пневмонии обследованы 116 больных внебольничной бактериальной пневмонией (80 мужчин и 36 женщин), которые были разделены на три возрастные группы: 1-я - 18-44 года (больные молодого возраста), 2-я - 45-59 лет (больные среднего возраста) и 3-я - 60-74 года (больные пожилого возраста), контрольные группы составили практически здоровые мужчины (п = 16) и женщины (п = 14) 18-44 лет. Всем обследованным при поступлении в стационар проведены общий анализ крови и компьютерная морфометрия нейтрофилов периферической крови в стандартно приготовленных мазках, окрашенных по Лейшману.
Анализ полученных результатов показал, что уровень лейкоцитов периферической крови у больных пневмонией трех групп (7,2 • 109, 8,2 • 109, 6,8 • 109, соответственно), значимо выше, чем у здоровых (5,8 • 109/л). Площадь нейтрофильных гранулоцитов у женщин, больных пневмонией (151,6, 149,7, 150,9 мкм2), уменьшается относительно контрольной группы как за счет площади ядра (58,3, 57,8, 59,9 мкм2), так и за счет площади цитоплазмы (93,3, 91,9, 90,9 мкм2), значимы различия площади ядра нейтрофилов в 1-3-й и 2-3-й группах, цитоплазменно-ядерное отношение (ЦЯО) увеличивается в группах больных пневмонией женщин молодого (1,69) и среднего возраста (1,62), значимы различия ЦЯО между 2-й и 3-й возрастными группами. Площадь нейтрофилов у мужчин, больных пневмонией, уменьшается в группах больных среднего (158,6 мкм2) и пожилого возраста (155,9 мкм2), причем этот показатель имеет различия в 1-3-й и 1-2-й группах. Площадь ядра нейтрофилов уменьшена во всех группах мужчин, больных пневмонией (63,0, 60,5, 60,8 мкм2), относительно контрольной группы (64,6 мкм2) и имеет различия в 1-3-й и 1-2-й группах. Площадь цитоплазмы уменьшена у пожилых (95,2 мкм2) относительно контрольной группы (99,7 мкм2), 1-й (100,6 мкм2) и 2-й групп (98,1 мкм2), а также имеет значимые различия между 1-й и 2-й группами.
Отмечается общая тенденция к уменьшению площади клетки и ядра нейтрофилов у больных. Уменьшение размеров нейтрофилов при воспалении можно объяснить тем, что при ускоренном делении предшественников зрелых нейтрофилов в клетках не успевают увеличиваться ядра и цитоплазма. Увеличение ЦЯО нейтрофилов у больных пневмонией женщин молодого и среднего возраста относительно контрольной группы может свидетельствовать о большей степени активации нейтрофильного звена защиты организма. Отсутствие увеличения ЦЯО у больных пневмонией мужчин молодого и среднего возраста и пожилых больных, возможно, объясняет факт более тяжелого течения пневмонии в этих группах
больных, что следует учитывать при лечении больных с данной патологией.
Е.Н. Егорова, Р.А. Пустовалова, М.А. Горшкова. RDW (Red cell Distribution Width) - как маркер гипоксического состояния тканей. ГБОУ ВПО Тверская ГМА
Быстрое развитие гематологии, обогащение ее новыми достижениями науки, а также оснащение клинико-диагностических лабораторий автоматическими гематологическими анализаторами позволяют современному клиницисту получать достоверную информацию о малейших изменениях в популяциях клеток крови. Однако полноценная интерпретация врачом-клиницистом всех параметров и гистограмм возможна при участии специалистов клинической лабораторной диагностики. Особенно это касается показателей красной крови: MCV (Mean cell volume), RDW (Red cell Distribution Width), MCH (Mean cell hemoglobin), MCHC (Mean cell hemoglobin concentration), поскольку при различных патологических состояниях включаются компенсаторные механизмы, воздействующие на эритрон, что выражается изменением значения указанных эритроцитарных индексов.
В настоящее время можно считать доказанным, что в определенных условиях, как остро возникших, так и хронических, когда организм испытывает повышенную потребность в клетках крови, наряду с основным фоновым кроветворением может включаться и параллельное шунтовое, образующее дополнительную популяцию клеток. Представление о шун-товом кроветворении было сформулировано в работах А.И. Воробьева, М.Д. Бриллиант (1977-1981). Наиболее полно шунтовое кроветворение изучено в условиях напряженного эритропоэза. Один из механизмов шунтового кроветворения - исключение одного или нескольких циклов митотических делений эритроидных клеток в костном мозге, в результате чего большее количество делящихся клеток достигает дифференцированной стадии при меньшем числе митозов и, соответственно, имеют больший размер. Особый интерес в плане показателя, характеризующего включение шунтового кроветворения, представляет индекс RDW, который определяется как "ширина распределения эритроцитов", т. е. показатель гетерогенности эритроцитов, и рассчитывается как коэффициент вариации среднего объема эритроцитов. В норме индекс RDW составляет 11,7-14,5% и характеризует степень анизоцитоза эритроцитов и традиционно учитывается при диагностике анемий. RDW целесообразно анализировать вместе с гистограммой распределения объемов эритроцитов и величиной MCV, что позволяет точнее характеризовать изменения в периферическом звене эритрона.
Таким образом, значение индекса RDW более 14,5% можно считать показателем гипоксического состояния тканей. Тканевая гипоксия возникает при различных патологических состояниях: анемиях, воспалении, интоксикации, инфекциях, поэтому учет увеличения значения индекса RDW позволит врачу-клиницисту определить направление диагностического поиска.
М.С. Казакова, С.А. Луговская. Оценка диагностической эффективности концентрации сывороточного железа для выявления железодефицитного состояния у женщин репродуктивного возраста. Кафедра клинической лабораторной диагностики ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образованиям Минздрава РФ, Москва
Для диагностики анемии у небеременных женщин ВОЗ с 1968 г рекомендует использовать пороговое значение концентрации гемоглобина (HGB) 120 г/л. Известно, что самые часто встречающиеся виды анемии у женщин - ЖДА (желе-зодефицитная анемия) и АХЗ (анемия хронических заболеваний), сопровождаются снижением концентрации сывороточного железа. Нередко исследование метаболизма железа при анемии ограничивается этим параметром, несмотря на давно известную информацию о низкой специфичности, чувствительности и большой вариабельности концентрации сывороточного железа. В исследовании "Nutritional Anaemias. Report
of a WHO Scientific Group", опубликованном в 1968 г., концентрация железа у обследованных женщин оценивалась относительно порогового значения, составляющего 50 мкг/дл (или 8,95 мкмоль/л). Основной критерий для диагностики анемии по уровню гемоглобина в настоящее время остался прежним, однако для оценки содержания сывороточного железа используются другие пороговые значения (cut off), несколько отличающиеся в разных лабораториях, что зависит от рекомендаций производителей реагентов.
Цель исследования - определить среди пациентов с легкой степенью анемии (по классификации ВОЗ 110-119 г/л) и в контрольной группе (с нормальным уровнем гемоглобина) лиц с дефицитом железа и оценить диагностическую эффективность использования порогового значения концентрации сывороточного железа.
Проанализированы данные общего анализа крови и концентрация сывороточного железа у 470 женщин в возрасте от 18 до 47 лет с анемией легкой степени (группа A, n = 346) и с нормальными значениями гемоглобина в диапазоне 120-125 г/л (контрольная группа B, n = 124). Основные параметры венозной крови, взятой в вакуумные пробирки с К2ЭДТА, определялись на гематологическом анализаторе Sysmex XT-2000i (Sysmex Corporation, Япония). Концентрацию сывороточного железа (Гесыв) определяли количественным колориметрическим методом на биохимическом анализаторе OLYMPUS с использованием реагента OLYMPUS IRON. Для оценки результатов использовали референсные значения (10,7-32,2 мкмоль/л), указанные в инструкции производителя со ссылкой на NCCLS Document H17-A, 1998.
В группе A только у 171 (49%) из 346 женщин концентрация сывороточного железа была ниже 10,7 мкмоль/л. При этом в контрольной группе (B) дефицит железа в сыворотке крови выявлен у 25% обследованных. Среднее значение параметра Fe в группе A составило 12,2 мкмоль/л, в группе B - 15,2 мкмоль/л. Корреляция между содержанием Fe и гемоглобином крови у всех обследованных была слабой (r = 0,22).
Диагностическая эффективность порогового значения концентрации Fe (10,7 мкмоль/л) была оптимальной для концентрации гемоглобина 117 г/л (чувствительность 70,8% и специфичность 56,7%). Для концентрации гемоглобина, рекомендуемого ВОЗ в качестве cut off для диагностики анемии (120 г/л), чувствительность этого же порогового значения (Feсыв= 10,7) составила 90,1%, специфичность - всего 26%. При анализе эффективности cut off, использованного в исследовании ВОЗ в 1968 г. (Fe = 8,95 мкмоль/л) в нашей выборке, оптимальная концентрация гемоглобина в крови также была отмечена при значении 117 г/л (чувствительность 73,4%, специфичность 54,2%).
Результаты нашего исследования наглядно подчеркивают ограничение использования концентрации железа в сыворотке крови в качестве единственного маркера для диагностики железодефицитных состояний в силу его низкой специфичности и недостаточно высокой чувствительности при применении критериев анемии, предложенных ВОЗ.
В.С. Медовый. Доступная система лабораторной телемедицинской поддержки микроскопических анализов. ЗАО "Медицинские компьютерные системы (МЕКОС)", Москва
Качество и объем выполнения микроскопических анализов биоматериалов во многих медицинских лабораториях недостаточны из-за острой нехватки высококвалифицированных кадров, особенно в региональных медицинских учреждениях. Вместе с тем применение появившихся на рынке в последнее десятилетие комплексов автоматизированной микроскопии (КАМ) и повсеместно доступного Интернета создает возможность радикального улучшения ситуации с медицинскими микроскопическими анализами. Использование КАМ автоматизирует создание представительной цифровой модели препарата, ускоряет и оптимизирует визуальный анализ и создает возможность проведения
удаленных телемедицинских консультаций биоматериалов любыми специалистами, независимо от их местонахождения. Благодаря автоматизации рутинных операций микроскопии и рациональному использованию рабочего времени высококвалифицированного персонала создаются условия значительного улучшения состояния этого весьма важного сегмента клинической лабораторной диагностики в масштабах региона и страны в целом. КАМ МЕКОС-Ц2 поддерживает автоматизацию и телемедицинские консультации всех типов медицинских микроскопических анализов (гематологических, цитологических, гистологических, уро-генитальных, спермы, выпотов, мокроты и др.). МЕКОС-Ц2 при выполнении медицинских анализов автоматически или полуавтоматически в диалоговом режиме формирует компактную представительную цифровую модель препарата (ЦМП), пригодную для визуального анализа (с многократным уменьшением затрат времени врача по сравнению с визуальным анализом натурального препарата). Анализ ЦМП врачом может выполняться как локально на комплексе МЕКОС-Ц2, так и дистанционно с применением Интернета. Консультация может выполняться с обычного персонального компьютера, может применяться обычный дешевый доступ к Интернету, не требуется поддержки технических специалистов. Объединение и оптимизация усилий врачей в масштабе региона создает дополнительный эффект за счет встроенного контроля качества, обучения, конференций, создания архивов ЦМП с редкими патологиями и т. д.
Возможны два способа организации телемедицинских консультаций. В первом случае ЦМП пересылаются в общую облачную базу данных MECOS-VIRT. Консультанты получают централизованный доступ к существующим ЦМП в MECOS-VIRT (консультации off-line). Во втором случае осуществляется прямой доступ консультанта в МЕКОС-Ц2 через Интернет (консультации on-line). Консультант при этом получает возможность не только анализировать ЦМП, но и дистанционно управлять работой МЕКОС-Ц2.
Телемедицинские консультации ЦМП в большинстве случаев не требуют применения линий связи с высокой пропускной способностью. Объем ЦМП препаратов крови, мочи, спермы, фекалий в среднем меньше 2-10 Мб/с.
Система телемедицинских консультаций МЕКОС-Ц2-MECOS-VIRT масштабируема, ее размер может изменяться в широких пределах. Количество лабораторий с МЕКОС-Ц2, получающих консультации, количество экспертов, их территориальное расположение не ограничены. Стоимость организации через MECOS-VIRT или напрямую с доступом к МЕКОС-Ц2 через Интернет незначительна.
О.С. Плеханова, Е.В. Наумова, М.Е. Почтарь, С.А. Лу-говская. Изучение минорного ИНТ-клона на ретикулоци-тах методом проточной цитометрии. ГБОУ ДПО "Российская медицинская академия последипломного образования" Минздрава РФ, Москва
При определении ПНГ-клона методом проточной цитометрии минорные клоны (менее 1%) в популяции грану-лоцитов, моноцитов и эритроцитов часто встречаются при апластической анемии, миелодиспластических синдромах, реже при пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ). В случае обнаружения таких клонов рекомендуется проводить периодический мониторинг размера ПНГ-клона. Ранее нами была предложена методика определения ПНГ-клона в популяции ретикулоцитов, гейтированных по CD71 (рецептор к трансферрину).
Целью данного исследования было изучение минорного ПНГ-клона среди ретикулоцитов при апластической анемии. С 2012 по 2014 г. исследование ПНГ-клона методом проточной цитометрии (цитометры BD FACS Canto IITM, США, и Cytomics FC 500, Beckman Coulter, США) проведено у 91 пациента с апластической анемией согласно методическим рекомендациям Международного общества клинической цитометрии (2010 г.). Помимо традиционного подхода к исследованию ПНГ-клона среди гранулоцитов, моноцитов и
эритроцитов нами дополнительно исследована популяция ретикулоцитов. Использована панель с применением гейти-рующих антител CD235a-FITC (клон 11E4B-7-6, Beckman Coulter), CD71-APZC (клон OKT9, Beckton, Dickinson & Co), а также CD59-PE (клон MEM-43, Beckton, Dickinson & Co).
У 15 пациентов из 91 был обнаружен минорный ПНГ-клон на моноцитах, гранулоцитах либо на эритроцитах. У 4 больных минорный ПНГ-клон присутствовал на популяциях гранулоцитов и моноцитов одновременно (0,2-1% на грану-лоцитах; 0,04-0,7% на моноцитах). Среди ретикулоцитов во всех случаях также обнаруживался клон, который составлял от 0,1 до 1,3%. У 7 пациентов гранулоцитарный ПНГ-клон являлся минорным (0,23-1%), в то время как значения ПНГ-клона среди моноцитов были более высокими (1,1-9,7%). У этих же пациентов ПНГ-клон на ретикулоцитах составлял от 0,2 до 4,9%. У 4 пациентов с апластической анемией значения ПНГ-клона были низкими, но составляли более 1% (1,1-3,8% на гранулоцитах; 1,4-9,7% на моноцитах), при этом являясь минорными на популяции эритроцитов. Размер ретикулоцитарного клона в этих случаях составлял 0,1-5,3%. У 76 пациентов ПНГ-клон не обнаружен как среди ретикуло-цитов, так и среди остальных популяций.
Таким образом, используя комбинацию моноклональных антител CD235a/CD59/CD71 для определения ПНГ-клона на ретикулоцитах, можно успешно мониторировать размер ПНГ-клона даже в случаях минорных его значений.
Т.А. Старовойтова', Ю.Ю. Венгеров2 Видеоцифровая регистрация - универсальный подход для автоматизации и компьютеризации визуальных технологий. 1Городская клиническая больница № 1 им. Н.И Пирогова; 2Институт биохимии им А.Н. Баха РАН, Москва
Задача замены технологий клинических лабораторных исследований, опирающихся на визуальную регистрацию результатов более совершенными, объективными методами, является чрезвычайно актуальной. С одной стороны, развитие полностью автоматизированных высокотехнологичных лабораторных систем приводит к повышению общих требований к точности, достоверности результатов исследований и растущему разрыву по уровню информативности между этими методами и технологиями с визуальной оценкой. С другой стороны, большое количество исследований по разным причинам, в частности в РФ, проводится с привлечением именно визуальной оценки, а в ряде случаев методы, подразумевающие визуальную оценку, не имеют альтернативы.
К сожалению, процесс перехода к компьютеризации визуальных лабораторных методов происходит чрезвычайно медленно, и использование современного уровня компьютерных технологий является явно недостаточно распространенным. При этом уже имеющиеся видеоцифровые системы на осно-
ве цифровых камер и сканеров адекватно решают задачу объективизации и компьютеризации самых распространенных видов визуальных лабораторных исследований. Это торможение связано с такими факторами, как низкая компьютерная грамотность возрастного персонала многих лабораторий, нежелание повышения степени контроля за работой и ответственности среднего персонала и консервативным подходом к оснащению лабораторий распорядителей кредитов ЛПУ областного и районного уровня.
Нашим коллективом разработаны доступные по ценам универсальные видеоцифровые системы "Эксперт-Лаб" на основе сканера и линейка анализаторов "Рефлеком" с применением видеокамеры. Накопленный опыт разработки программного обеспечения (ПО) для обработки изображений лабораторных объектов позволяет компьютеризировать значительную долю визуальных иммунохимических технологий.
Система "Эксперт-Лаб" обеспечивает регистрацию и автоматическую интерпретацию результатов таких типов лабораторных исследований, результаты которых по большей части в КДЛ РФ интерпретируются визуально, как РПГА, реакция микропреципитации, латексная агглютинация, изосе-рологические исследования на плоскости, иммунохромато-графические тесты, иммуноблот-тесты и др. ПО для каждого типа исследований обеспечивает следующие функции: 1) сохранение в базе данных изображения тест-объекта, которое может быть подвергнуто повторной оценке; 2) обеспечение оператора компьютерными возможностями для оценки и ва-лидации интерпретации результатов в сложных случаях; 3) возможность дистанционной технической и методической поддержки; 4) возможность отправки результатов по информационным сетям на центральный удаленный компьютер.
Применение видеоцифровых систем "Рефлеком" направлено на регистрацию результатов экспресс-тестов, и в варианте автономных устройств, они могут найти применение в работах бригад скорой помощи или непосредственно у постели больного. Постоянное совершенствование характеристик и удешевление компьютерных и видеоцифровых систем создает перспективы их использования во всех подразделениях ЛПУ, где проводятся единичные срочные исследования, такие как круглосуточно работающие экспресс-лаборатории, блоки интенсивной терапии, отделения, проводящие первичные определения групп крови, бригады скорой помощи и многие другие.
Замена визуальных технологий системами видеоцифровой регистрации повышает ответственность персонала, достоверность проводимых лабораторных исследований, а широкое внедрение таких систем, организованных в информационные сети, открывает возможности модернизации лабораторной службы РФ на новых принципах.
пути технологического прогресса в лабораторной медицине
С.А. Бабушкин. Автоматизация преаналитического этапа в лаборатории. "West Medica", Москва
Значимость лабораторных исследований возрастает с каждым годом, расширяется спектр выполняемых анализов, появляются новые методики, внедряется новое оборудование. Повышаются требования к преаналитическому этапу, растет объем данных (результатов анализов), которые необходимо обрабатывать ежедневно, увеличивается нагрузка на сотрудников лаборатории. В результате этого лаборатории внедряют информационные системы и штрих-кодирование, чтобы оптимизировать постоянно возрастающий объем работы, а также обеспечить высокую производительность и учет результатов.
Для обеспечения качества исследований необходимо правильно забрать и промаркировать биоматериал. Для разных типов исследований используются разные типы биоконтейнеров (пробирок). В настоящее время выбор соответствующего биоконтейнера проводится в момент взятия крови, часто вручную, путем выбора пробирок из заранее приготовленных штативов, после чего наносится штрих-код. В подготовленный таким образом набор биоконтейнеров забирается кровь. Данная процедура требует больших временных затрат, имеет потенциальный риск перепутать биоконтейнер и/или штрих-код, неровно наклеить штрих-код (что затруднит дальнейшую идентификацию на анализаторе). Как итог - повторный забор крови, дополнительный
