CC BY
91
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОГНОЗИЯ
© ПОЗДНЯКОВА С.П., ХАНИНА М.Г., ИВАНОВА В.В., МИШЕНИНА С.В.
УДК 582.975:615.21
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЭКСТРАКТОВ AGRIMONIA PILOSA LEDEB И БЕРЕСТЫ BETULA PENDULA ROTH
С.П. Позднякова, М.Г. Ханина, В.В. Иванова, С.В. Мишенина Новосибирский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н.,
проф. И.О.Маринкин; кафедра фармакологии, зав. - д.м.н., проф. О.Р. Грек; кафедра фармакогнозии и ботаники, зав. - д.фарм.н., проф. М.А. Ханина.
Резюме. Сухие экстракты Agrimonia pilosa Ledeb. и бересты Betula pendula Roth., содержащие комплексы макро- и микроэлементов и биологически активное вещество, вводили крысам внутрижелудочно для изучения их противовоспалительной активности. Выявлено, что экстракт бересты Betula pendula преимущественно влияет на пролиферативную стадию, а экстракт Agrimonia pilosa - на пролиферативную и экссудативную стадии воспалительного процесса.
Ключевые слова. Agrimonia pilosa, береста Betula pendula, сухие экстракты, противовоспалительная активность.
Позднякова Софья Павловна - студентка 6 курса лечебного факультета НГМУ; e-mail: khanina06@mail.ru.
Ханина Марина Георгиевна - аспирант каф. фармакологии НГМУ; e-mail: Marina.KHANINA@ru.netgrs.com.
Иванова Виктория Валерьевна - врач-педиатр, врач УЗ-диагностики, МБУЗ «ГДКБСМП» РВЦ «Обские зори», соискатель каф. фармакологии НГМУ; е-mail: vik02051982@ya.ru.
Воспаление как патологический процесс, лежащий в основе большинства, заболеваний человека, является одной из основных проблем медицины. С целью коррекции экссудативной стадии воспаления в настоящее время широко применяют нестероидные противовоспалительные средства (НПВС). К сожалению, прием НПВС приводит к осложнениям, прежде всего, связанным с развитием патологии желудочно-кишечного тракта. Препараты способные контролировать пролиферативный компонент хронического воспаления, немногочисленны и обладают рядом более существенных побочных эффектов и противопоказаний [13]. Данная проблема становится крайне актуальной при условии длительного и пожизненного применения препаратов. Это обосновывает актуальность поиска новых эффективных нетоксичных антифлогистиков, способных контролировать обе стадии воспалительного процесса с выраженным терапевтическим эффектом и без нежелательных осложнений.
Настоящий период развития медицины и фармации характеризуется отчетливой тенденцией к более интенсивному использованию лекарственных средств растительного происхождения. Это объясняется многими причинами: мягкостью действия, незначительными побочными реакциями, широким диапазоном доз и спектром фармакотерапевтических эффектов, обусловленных наличием в растениях комплекса биологически активных веществ, что позволяет проводить лечение длительно и повышает его эффективность при хронических заболеваниях [2]. В этом плане представляют интерес лекарственные растения сибирской флоры - репейничек волосистый (Agrimonia pilosa Ledeb.) сем. Розоцветных (Rosaceae) и береста березы повислой (Betula pendula Roth.) сем. Березовые (Betulaceae).
Репейничек волосистый - многолетнее травянистое растение, широко распространенное в Европейской части России, на территории Западной и Восточной Сибири, Дальнего Востока [5]. В народной и традиционной медицине все части растения применяются при широком спектре заболеваний как противовоспалительное, анальгетическое, антитоксическое и др. [3, 9, 15].
В европейских странах виды Agrimonia являются официнальными лекарственными растениями и используются в практической медицине как вяжущее, противовоспалительное средство [14].
Березовая кора - многотоннажный отход процесса переработки березы. В результате окорки березовой древесины на каждом крупном предприятии
з
накапливается до 30 тыс. м бересты [6]. Береста представляет большой интерес для химической переработки с целью получения новых продуктов и биологически активных веществ для практической медицины. Исследования, проведенные в ведущих институтах страны, показали высокую антиоксидантную, антигипоксантную, гепатопротекторную, желчегонную, гиполипидемическую, противовоспалительную, противовирусную,
противоопухолевую, адаптогенную, антимутагенную, иммуномодуляторную активность бересты и ее экстрактов [1, 7].
Цель исследования - провести сравнительную оценку фармакологической активности сухих экстрактов р.волосистого и бересты березы повислой в отношении экссудативного и пролиферативного компонентов воспаления.
Материалы и методы
Исследовались сухие экстракты, полученные методом дробной мацерации при нагревании из надземной части репейничека волосистого (ЭР) и бересты березы повислой (ЭБ). Надземная часть р.волосистого (фаза цветения) и береста березы повислой собраны в Новосибирской области (2010г.). Общий фитохимический анализ исходного сырья и сухих экстрактов проведен фармакопейными и общепринятыми методиками. Анализ компонентного состава и количественного содержания биологически активных веществ (БАВ) проводили методами титриметрии, гравиметрии, хроматографии, хромато-масс-спектрометрии, спектрофотометрии, хроматоспектрофотометрии, атомноэмиссионной спектроскопии с индуктивно-связанной плазмой [4, 8, 11, 12]. Расчеты содержания БАВ проводили в пересчете на абсолютно сухие сырье и экстракты.
Эксперименты проведены на крысах-самцах ’^Б1аг развода вивария Института цитологии и генетики СО РАН массой тела 150-180г. Животные содержались в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией (Страсбург, 1986). Сухие экстракты в виде водных растворов вводили крысам внутрижелудочно через зонд ежедневно в течение 7 дней в превентивном режиме в широком диапазоне доз: 150, 100, 50, 25 мг/кг массы тела животного. Контрольная группа животных получала эквивалентный объём растворителя (дистиллированная вода) в аналогичном режиме. В качестве препарата сравнения использовали ацетилсалициловую кислоту (АК) (субстанция).
Противовоспалительные свойства репейничека волосистого (ЭР) и бересты березы повислой (ЭБ) исследовали согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [10].
Острое асептическое воспаление вызывали введением под плантарный апонефроз задней правой лапы 0,1 мл 1 % раствора каррагенина ^/у) за 3,5 ч до определения отека. Величину отека определяли по объему вытесненной воды (мл) лапой.
Пролиферативное хроническое воспаление исследовали на модели «ватной гранулемы». Стерильный ватный тампон (10 мг) имплантировали с помощью иглы (А1 -20 х 40 - 1,17 И25) крысам под кожу передних лап. На 8 сутки животных умерщвляли декапитацией под эфирным наркозом, гранулему вычленяли, взвешивали в сыром и в высушенном виде (при 600 С до постоянной массы). Пролиферативную реакцию оценивали по разнице между массой высушенной гранулемы и исходной массой ватного диска, экссудативную реакцию - по разнице между массами сырой и высушенной гранулемы.
Статистическую обработку полученных результатов проводили путем расчета средней (М) и средней квадратичной ошибки (±т). О достоверности различий судили, используя параметрический критерий Стьюдента (1). Значимость различий считали достоверной при р < 0,05.
Результаты и обсуждение
В надземной части репейничека волосистого установлено присутствие флавоноидов, кумаринов, полифенольных окисляемых (дубильных) веществ, фенолкарбоновых и гидроксикоричных кислот, полисахаридов, хлорофиллов, аскорбиновой кислоты, каротиноидов, эфирного масла, сапонинов, 13
аминокислот, 64 макро- и микроэлементов. Определено содержание основных групп БАВ: кумаринов (2,3%), флавоноидов (2,91%), гидроксикоричных кислот (1,8%), фенолкарбоновых кислот (7,22%), дубильных веществ (7,98%), водорастворимых полисахаридов (2,4%), аскорбиновой кислоты (0,46%), хлорофиллов (0,03%), аминокислот (1,04%).
В бересте березы повислой установлено присутствие флавоноидов, кумаринов, полифенольных окисляемых (дубильных) веществ,
фенолкарбоновых и гидроксикоричных кислот, тритерпеновых сапонинов, 60 макро- и микроэлементов. Определено содержание основных групп БАВ: кумаринов (0,95%), флавоноидов (0,52%), гидроксикоричных кислот (0,49%), дубильных веществ (7,98%), сапонинов (0,99%). Данные по составу и содержанию макро- и микроэлементов в надземной части репейничека волосистого (образец 1) и бересты березы повислой (образец 3) представлены в табл. 1.
ЭР-кристаллический порошок зелено-бурого цвета, с травяным запахом, горького вкуса, растворимый в воде. По качественному составу БАВ соответствует траве репейничека волосистого. Содержание основных групп БАВ: кумаринов (10,37%), флавоноидов (11,02%), гидроксикоричных кислот (6,9%), фенолкарбоновых кислот (8,5%), дубильных веществ (33,7%), водорастворимых полисахаридов (10,4%), аскорбиновой кислоты (1,46%), хлорофиллов (7,09%), аминокислот (2,28%).
ЭБ-кристаллический порошок коричневого цвета, с приятным запахом, сладковато-горького вкуса, растворимый в воде (хорошо при нагревании). По качественному составу БАВ, макро- и микроэлементов ЭБ соответствует бересте, по количественному содержанию отдельных групп БАВ превосходит ее в несколько раз: кумарины (8,21%), флавоноиды (3,94%), гидроксикоричные
кислоты (4,26%), сапонины (7,65%). Данные по составу и содержанию макро- и микроэлементов в сухих экстрактах репейничека волосистого (образец 2) и бересты березы повислой (образец 4) представлены в табл. 1.
Изучение антипролиферативного действия ЭР и ЭБ на модели «ватной гранулемы» показало, что их введение в дозах 100 и 50 мг/кг соответственно способствовало снижению воспалительного разрастания гранулематознофиброзной ткани у животных на 36,4 % и 38,64 % по сравнению с контрольной группой. Введение АК в дозе 250 мг/кг приводило к угнетению пролиферации на 54,5 %.
Массу экссудата в очаге хронического воспаления снижали АК, ЭР, ЭБ в дозах: 250, 100 и 50 мг/кг на 53,3%, 37,8%, 38,5% соответственно.
ЭР и препарат сравнения АК в дозе 100 мг/кг ослабляли флогогенное действие каррагенина, снижая отек воспаленной лапы соответственно на 50 %, и 52,5 %, по сравнению с группой контроля. ЭБ угнетал экссудацию в дозе 150 мг/кг на 67,4 %.
Механизм противовоспалительного действия ЭР и ЭБ на модели каррагенинового отека лапы крысы является поливалентным и обусловлен наличием комплекса биогенных макро- и микроэлементов, липофильных и гидрофильных БАВ (фенольный комплекс, тритерпеновые сапонины, хлорофиллы, витамин С и каротиноиды), обладающих широким спектром биологической активности и оказывающими действие на различные звенья патогенеза экссудативной стадии воспалительного процесса.
Противоотечное действие экстрактов, по-видимому, связано с их влиянием на процессы синтеза, депонирования, высвобождения и превращения медиаторов воспаления (гистамина, серотонина, кининов и др.), а также способностью фенольных соединений оказывать капилляропротективное действие.
Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют о наличии системной противовоспалительной активности у ЭР и ЭБ: с преимущественным влиянием на пролиферативную стадию воспалительного процесса - ЭБ и на обе
стадии (пролиферативную и экссудативную) - ЭР. Выявленная
фармакологическая активность свидетельствует о перспективности
исследуемых объектов (надземная часть репейничека волосистого, береста березы повислой, сухие экстракты из них) и требует дальнейшего более углубленного их исследования.
ANTIINFLAMATORY FEATURES OF AGRIMONIA PILOSA LEDEB. AND BETULA PENDULA ROTH EXTRACTS
S.P. Pozdnyakova, M.G. Khanina, V.V. Ivanova, S.V.Michenina Novosibirsk State Medical University
Abstract. Dry extracts of Agrimonia pilosa Ledeb. and elm of Betula pendula Roth extracts contains macro and microelements and biological active substances. We studied their anti inflammatory activity by applying them intragastric. We revealed that Betula pendula elm’s extract predominantly influences to proliferative stage. Agrimonia pilosa influences predominantly to proliferative and exsudative stages of inflammatory process.
Key words: Agrimonia pilosa, elm of Betula pendula, dry extract, anti inflammatory activity.
Литература
1. Ведерников Д. Н., Рощин В. И. Состав жирных и тритерпеновых кислот углеводородного экстракта из бересты Betula pendula (Betulaceae) // Растительные ресурсы. - 2008. - Т.44, № 3. - С.75-82.
2. Головкин Б.Н., Руденская Р.Н., Трофимова И. А. Биологически активные вещества растительного происхождения. - М.: Наука, 2001. - Т. 1. - 350 с.
3. «Джуд-ши» - памятник средневековой тибетской культуры / Пер. с тиб. -Новосибирск: Наука, 1988. - 349с.
4. Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А., Музычкина Р.А. и др. Природные флавоноиды. - Новосибирск: Гео, 2007. - 232с.
5. Крылов П.Н. Флора Западной Сибири. Томск: изд-во Томского Государственного университета, 1949. - Вып.2. - С. 284-287.
6. Кулагин Е.П., Кислицын А.Н., Рябков В.В. Использование отходов химической переработки коры в качестве удобрений // Хвойные бореальной зоны. - 2003. - Вып. I. - С 128-129.
7. Носик Н.Н., Дерябин П.Г., Исаева Е.И. и др. Интерферонидуцирующие свойства сухого экстракта бересты и его влияние на экспериментальную инфекцию, вызванную вирусом гепатита С // Вопр. вирусологии. - 2005. - Т. 50, № 5. - С.29-32.
8. Определение содержания химических элементов в диагностируемых биосубстратах, препаратах и биологически активных добавок методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной аргоновой плазмой / Метод. указания МУК 4.1.1483-03. М.: ФЦ ГСЭН МЗ РФ, 2003. - 36 с.
9. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Hydrangeaceae - Haloragaceae / Под ред. П.Д. Соколова. - Л.: Наука, 1987. - C 19-21.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р.У. Хабриева. - 2 изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 2005. - 832 с..
11. Симонян А.В., Саламатов А. А., Покровская Ю.С. и др. Использование нингидриновой реакции для количественного определения а-аминокислот в различных объектах / Метод. рекомендации. - Волгоград, 2007. - 106с.
12. Ханина М. А., Серых Е.А. Перспективы использования полыни обыкновенной в медицинской практике // Журн. эксперим. и клинич. медицины. - 2006. - №1-2. - С. 53-60.
13. Чекман И.С. Осложнения фармакотерапии. - Киев: Здоров’я, 1980. - С. 45-53.
14. British Herbal Pharmacopoeia. - 1996. - 212 p.
15. Hong G., Dai Y.-H., Liu P.-X. et al. Advances in research on chemical constituents and pharmacological activities of Agrimonia pilosa // Pharmaceutical Care and Research. - 2008. - Vol. 8, №5. - P. 362-366.
