CC BY
83
УДК 615.32:616.8-009.24
Ж.Б. Дашинамжилов, К.С. Лоншакова, Д.Б. Жамбалова, А.А. Гулевич, С.М. Николаев
ПРОТИВОСУДОРОЖНОЕ ДЕЙСТВИЕ ФИТОСРЕДСТВА «НЕЙРОФИТ»
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ) Республиканский наркологический диспансер МЗ РБ (Улан-Удэ)
На модели тиосемикарбазидных судорог у крыс линии Вистар, в экспериментальной работе установлено, что при. введении «нейрофита» время наступления судорог удлиняется по сравнению с контролем, длительность судорожного периода уменьшается, существенно сохраняется выживаемость животных. По данным, исследования, «нейрофит» не уступает, препарату сравнения — настойке пиона.
Патоморфологические изменения структур головного мозга у животных получавших «нейрофит», характеризовались менее выраженными изменениями. Отмечался, незначительный, отек вещества головного мозга, некоторые сосудистые нарушения, интенсивность изменений нервных клеток коры.,
подкорковых образований и мозжечка значительно сокращалась (на 36 %), преобладали клетки с явлениями. «первичного раздражения».
Ключевые слова: нейрофит, тиосемикарбазидные судороги, нервные клетки
ANTICONVULSIVE EFFECT OF PHYTOREMEDY «NEUROPHYTE»
Zh.B. Dashinamzhilov, K.S. Lonshakova, D.B. Zhambalova, A.A. Gulevich, S.M. Nikolayev
The Institute of General and Experimental Biology SB RAS (Ulan-Ude) Republican Narcological Dispensary of Ministry of Health, Republic Burytia (Ulan-Ude)
In Albino Wistar rat model of thiosemicarbazide convulsions, it has been established, that «Neurophyte» administration, elongates the starting time of convulsions compared, with controls, whereas convulsion period. is decreased. The animal survival is also higher. «Neurophyte» was shown to be as good, as the remedy of comparison. — tincture Paeoniae.
Pathomorphological changes of brain structures in animals received. «Neurophyte» were less pronounced. Nonsignificant brain swelling and some vascular disturbances were noted. The intensity of changes in neurons, subcortical structures and cerebellum, significantly decreased, (by 36 %), cells with, «primary irritation» were predominant.
Key words: Neurophyte, thiosemicarbazide convulsions, neurons
Судорожные синдромы сопровождают многие заболевания. По данным ВОЗ адекватное противо-судорожное лечение получают всего лишь 8 — 30 % больны х от общего количества нуждающихся. Это объясняется наличием у современных противосу-дорожных препаратов побочных эффектов, из-за которых больные самостоятельно прекращают лечение, либо применяют их от случая к случаю.
Перспективными для фармакологической коррекции судорожных синдромов и связанных с ними осложнений со стороны жизненноважных функциональных систем организма являются средства растительного происхождения, отличающиеся широтой терапевтического действия, малой токсичностью при длительном применении без риска возникновения побочных реакций [4, 6, 9].
Целью настоящего исследования явилось определение противосудорожной активности фитосредства «нейрофит», состоящего из пиона уклоняющегося (Paeonia anomala L.), валерианы лекарственной (Valeriana officinalis L.), шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi), плодов боярышника (Crataegus), душицы обыкновенной (Origanum vulgare L.) и других видов сырья, при экспериментальном повреждении головного мозга у крыс линии Вистар.
МЕТОДИКА
Эксперименты проведены на крысах линии Вистар обоего пола с исходной массой 170 — 230 г. Церебропротекторный эффект «нейрофита» изучали при экспериментальном повреждении головного мозга крыс введением тиосемикарбазида. Тиосемикарбазид вводили однократно внутри-брюшинно в дозе 20 мг/кг массы животных [1, 6]. Животным 1-й опытной группы внутрижелудоч-но вводили фитосредство «нейрофит» в дозе 200 мг/кг (в пересчете на суховоздушное сырье) в виде отвара. Отвар готовили по ГФ XI [3], исходя из соотношения сырье: вода 1:10, и вводили в желудок крысам 1 раз в сутки в течение 4 дней и пятый раз за 1 час до тестирования. Животным 2-й опытной группы по аналогичной схеме вводили
препарат сравнения — деалкоголизированную настойку пиона уклоняющегося в дозе 200 мг/кг (доза, проявляющая оптимальный фармакологический эффект). В контроле по аналогичной схеме вводили дистиллированную воду в эквивалентном объеме. О фармакотерапевтической эффективности лекарственных средств судили по длительности судорог, латентного периода, выживаемости животных [1, 8] и по патоморфологической картине головного мозга [5, 7].
Патоморфологические исследования головного мозга крыс проводили с использованием общепринятых гистологических методик, описанных в специальных изданиях [5, 7]. Подопытных животных умерщвляли методом мгновенной декапитации под легким эфирным наркозом. Кусочки головного мозга фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и этиловом спирте восходящих концентраций. После фиксации головной мозг крысы разрезали в нескольких направлениях: сагиттальном — по средней линии через гиппокампову борозду; дорсальном — на уровне боковых желудочков и вертикальном — на уровне гипоталамуса. После обезвоживания проводили заливку срезов в парафин, гистологические срезы готовили на микротоме, осуществляли окраску гематоксилин — эозином, крезил — виолетом по Нисслю, использовали метод Ван Гизона. Комплексное использование гистологических методик при изучении головного мозга экспериментальных животных позволило детально выявить толщину серого вещества, число его слоев, состояние клеток, характер изменения сосудов и нейроглии. С целью определения тяжести поражения головного мозга крыс при использовании нейротоксических агентов, производили подсчет общей площади (8общ), площади занимаемой некротизированными клетками (^некр) и площади занимаемой измененными нейронами (8изм) — сморщенными, лишенными длинных отростков, с тотальным или центральным хроматолизом, изменением содержания вещества Нис-сля, вакуолизацией цитоплазмы, просветлением перинуклеарного пространства, базафильной зер-
нистостью краевых отделов цитоплазмы, смещением ядер на периферию клеток.
Полученные экспериментальные данные обработаны методами вариационной статистики с использованием непараметрического критерия Вил-коксона-Манна-Уитни [2].
РЕЗУЛЬТАТЫ
В результате проведенных исследований установлено, что на модели тиосемикарбазидных судорог при введении «нейрофита» в указанной дозе время наступления судорог удлиняется на 10 % по сравнению с контролем (табл. 1), длительность судорожного периода уменьшается, существенно сохраняется выживаемость животных. По данным исследования, «нейрофит» не уступает препарату сравнения — настойке пиона.
При патоморфологическом исследовании структур головного мозга при введении тиосеми-каразида наиболее часто наблюдали изменения сосудов в виде небольших аневризматических расширений капилляров, участков сужения или запусте-вания капилляров, отмечались единичные кровоизлияния. В эндотелиальных клетках ядра выглядели пикнотичными или были подвержены лизису, цитоплазма была набухшей, принимала гомогенный вид. Отмечался значительный отек вещества головного мозга. Дистрофическим изменениям подвергались нервные клетки I слоя коры головного мозга, клетки пирамидного слоя аммонова рога, клетки глубоких слоев мозга, клетки Пуркинье коры мозжечка. Нервные клетки были несколько уменьшены в размерах, интенсивнее окрашены, длинные отростки клеток не просматривались.
В группе белых крыс, получавших препарат сравнения, настойку пиона, микроскопически обнаруживали полнокровие и отечность вещества головного мозга, дистонию мозговых сосудов, одиночные диапедезные кровоизлияния. Полнокровие было в большей мере выражено в подкорковых образованиях. При дальнейшем изучении гистологических препаратов в нервных клетках выявлялись клетки со значительными изменениями (центральный и тотальный хроматолиз, смещение ядер на периферию клетки, исчезновение ядрышка, мутное набухание).
Патоморфологические изменения структур головного мозга у животных получавших «нейрофит», характеризовались менее выраженными изменениями. Отмечался незначительный отек веще-
ства головного мозга, некоторые сосудистые нарушения, интенсивность изменений нервных клеток коры, подкорковых образований и мозжечка значительно сокращалась (на 36 %), преобладали клетки с явлениями «первичного раздражения».
Таким образом, исследуемое фитосредство в указанном объеме обладает противосудорожным действием, оказывая ингибирующее влияние на подкорковые центры продолговатого мозга, благоприятно влияет на морфофункциональное состояние головного мозга, и тем самым укорачивает клоническую и тоническую фазы судорог. Полученные в работе данные свидетельствуют о том, что реализация фармакотерапевтической эффективности «нейрофита» способствует широкий спектр фармакологической активности изучаемого фитосредства. Высокая фармакологическая активность «нейрофита» обусловлена содержанием комплекса биологически активных веществ: фла-воноидов, алкалоидов, эфирных масел, поливитаминного комплекса, органических кислот, макроэлементов и микроэлементов, дубильных веществ.
Одним из важнейших аспектов молекулярноклеточных механизмов церебропротекторного действия «нейрофита» является наличие антиок-сидантной и мембраностабилизирующей активностей, реализация которых связана с присутствием в них, главным образом, комплекса фенольных соединений [10].
Полученные данные аргументируют целесообразность применения «нейрофита» в неврологической практике в качестве средства, улучшающего функциональное состояние нервной системы.
ВЫВОДЫ
■ На модели тиосемикарбазидных судорог при введении «нейрофита» время наступления судорог удлиняется, длительность судорожного периода уменьшается и существенно сохраняется выживаемость животных.
■ Патоморфологические изменения структур головного мозга у животных получавших «нейрофит», характеризовались менее выраженными изменениями. Отмечался незначительный отек вещества головного мозга, некоторые сосудистые нарушения, интенсивность изменений нервных клеток коры, подкорковых образований и мозжечка значительно сокращалась, преобладали клетки с явлениями «первичного раздражения».
Таблица 1
Влияние «нейрофита» на течение судорог, вызванных тиосемикарбазидом
Группы животных Латентный период, сек. Длительность судорог, сек. Выживаемость, %
Контрольная группа, (дистилл. вода) 107,0 ± 6,08 24,5 ± 2,41 10
Опытная группа, («нейрофит», 200 мг/кг) 131,1 ± 3,58* 22,8 ± 2,06 50
Группа сравнения(настойка пиона, 200 мг/кг) 136,07 ± 3,91* 21,35 ± 1,29 30
Примечание: * - разница достоверна при сравнении с контролем при Р < 0,05; п - количество животных в группе.
■ Широкий спектр фармакологической активности «нейрофита» определяется антиоксидантным действием и мемраностабилизирующим эффектом.
■ Полученные данные аргументируют целесообразность использования «нейрофита» в неврологической практике в качестве средства, улучшающего функциональное состояние нервной системы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Фармакологические свойства диагама — нового потенциального ноотропного средства / Н.И. Андреева, В.В. Аснина и др. // Химико-фармацевтический журн. — 1998. — № 9. — С. 43 — 48.
2. Биометрия: Пособие для биохимических специальностей вузов / Под ред. Г.Ф. Лакина. — М., 1980. - 293 с.
3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. — 11-е, изд., доп. — М.: Медицина, 1990. — 400 с.
4. Крылов А.А. Руководство по фитотерапии /
А.А. Крылов, В.А. Марченко. — СПб.: Изд-во «Питер», 2000. — 416 с.
5. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники / Г.А. Меркулов. — М., 1956. — С. 143—145.
6. Начатой В.Г. Клиническая фармакология /
B.Г. Начатой. — СПб.: Изд-во СпбМУ им. Акад. И.П. Павлова, 2000. — 288 с.
7. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная / Э. Пирс. — М., 1962. — 962 с.
8. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Мин-во здравоохранения Рос. Федерации. Департамент контроля качества, эффективности и безопасности лекарств. средств, Науч. центр экспертизы и гос. контроля лекарств. средств. Фармакол. гос. ком. — М., 2000. — 398 с.: ил.
9. Соколов С.Я. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия) / С.Я. Соколов, И.П. За-мотаев. — 3-е изд. стереотип. — М., 2000. — 512 с.
10. Хазанов В.А. Митохондриальные эффекты в механизме антигипоксического действия экстракта шлемника байкальского / В.А. Хазанов, Р.Р. Сайфутдинов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1999. — Т. 128, №9. —
C. 327 — 329.
