Ветеринарный врач. 2023. № 6. С. 68 - 72 The Veterinarian. 2023; (6): 68 - 72
Научная статья
УДК 619:616-08:616-303.48
DOI: 10.33632/1998-698Х_2023_6_68
ПРОТИВОПАРАЗИТАРНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ НОВОЙ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ «К-55» ПРИ ЭЙМЕРИОЗЕ ПТИЦ
Рамис Разяпович Гиззатуллин, кандидат ветеринарных наук, [email protected]: Минсагит Хайруллович Лутфуллин, доктор ветеринарных наук, [email protected]: Данил Наильевич Мингалеев, доктор ветеринарных наук, [email protected]: Рамия Разяповна Гиззатуллина, кандидат ветеринарных наук, [email protected]: Розалия Рустамовна Тимербаева, кандидат ветеринарных наук, [email protected]:
Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Казань, Россия
Автор, ответственный за переписку: Гиззатуллин Рамис Разяпович.
Аннотация. Эймериоз является одним израспространенным заболеванием птиц, вызываемая простейшими, которая приводит к уменьшению продуктивности и экономическим потерям в птицеводстве. В данном исследовании проводилось изучение противоэймериозной эффективности новой фармакологической субстанции «К-55» при лечении цыплят, зараженных эймериозом. Под руководством преподавателей кафедры эпизоотологии и паразитологии был поставлен опыт на 30 цыплятах двадцатидневного возраста, которые были заражены оттитрованной дозой спорулированныхооцистэймерий в дозе 2000 клеток на 1 кг веса. Результаты исследований показали, что у контрольных групп в тонком отделе кишечника у экспериментально зараженных эймериозом цыплят отмечались подострое и десквамативное катаральное воспаление. В некоторых участках кишечной стенки заметно разрушение не только ворсинок, но и всего эпителиального монослоя крипты. Гидрографическая структура тонкого отдела кишечника была сохранена на 7 и 14-е сутки после лечения фармакологической субстанцией «К-55». В кишечнике находились ворсинки с уплощенным и широким основанием. Призмы в ворсинках были представлены множеством бокаловидных экзокриноидов, с признаками повышенной секреции. В апикальной зоне не было выявлено гиперсекреции. Плотная основа ворсинок характеризуется гиперплазией ретикулоцитов, фибробластов и эндотелиальных клеток кровеносных сосудов. По всей видимости, мышечный слой состоял из непрерывного и неравномерного слоя. Исследование показало, что новая фармакологическая субстанция «К-55» эффективна при лечении эймериоза птиц.
Ключевые слова: эймериоз, экстенс и интенсэффективность, цыплята, патоморфологические и гистохимические изменения.
Для цитирования: Гизатуллин Р.Р., Лутфуллин М.Х., Мингалеев Д.Н., Гизатуллина Р.Р., Тимербаева Р.Р. Противопаразитарная эффективность новой фармакологической субстанции «К-55» при эймериозе птиц // Ветеринарный врач. 2023 №6 С.68-72. DOI: 10.33632/1998-698Х_2023_6_68
ANTIPARASITIC EFFICACY OF THE NEW PHARMACOLOGICAL SUBSTANCE "K-55" IN
AVIAN EIMERIOSIS
Ramis R. Gizzatullin, candidate of veterinary sciences, [email protected] Minsagit K. Lutfullin, doctor of veterinary sciences, [email protected] Danil N. Mingaleev, doctor of veterinary sciences, [email protected] Ramia R. Gizzatullina, candidate of veterinary sciences, [email protected] Rosalia R. Timerbayeva, candidate of veterinary sciences, [email protected]
Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, Kazan, Russia
Corresponding author: Gizzatullin Ramis Razyapovich
Abstract. Aimeriosis is one of the most common diseases of birds caused by protozoa, which leads to a decrease in productivity and economic losses in poultry farming. In this study, the anti-eimeriosis efficacy of the new pharmacological substance "K-55" was studied in the treatment of chickens infected with eimeriosis. Under the guidance of teachers of the Department of Epizootology and Parasitology, an experiment was carried out on 30 chickens of twenty-day age who were infected with a titrated dose of sporulated cocystameria at a dose of 2000 cells per 1 kg of weight. The results of the studies showed that subacute and desquamative catarrhal inflammation was observed in the control groups in the small intestine of chickens experimentally infected with eimeriosis. In some areas of the intestinal wall, the destruction of not only the villi, but also the entire epithelial monolayer of the crypt is noticeable. The hydrographic structure of the small intestine was preserved on the 7th and 14th days
after treatment with the pharmacological substance "K-55". In the intestine there were villi with a flattened and wide base. The prisms in the villi were represented by a multitude of goblet-shaped exocrinoids, with signs of increased secretion. No hypersecretion was detected in the apical zone. The dense base of the villi is characterized by hyperplasia of reticulocytes, fibroblasts and endothelial cells of blood vessels. Apparently, the muscle layer consisted of a continuous and uneven layer. The study showed that the new pharmacological substance "K-55" is effective in the treatment of avian eimeriosis.
Keywords: eimeriosis, extens and intensities, chickens, pathomorphological and histochemical changes
Введение. Для увеличения поголовья птицы и повышения его продуктивности необходимо значительно улучшать работу по профилактике и ликвидации в птицеводческих хозяйствах различных инвазионных болезней, в том числе эймериоза птиц.
Важную роль в борьбе с эймериозом играет правильный выбор и использование эймериостатика. Он способен подавлять развитие паразитов и защищать организм животного от негативных последствий заболевания. Однако, помимо этого, важно соблюдать профилактические меры, условия содержания и кормления, а также регулярно проводить дегельминтизацию. Только комплексное воздействие позволит бороться с эймериозом и сохранять здоровье животных [9,10,11].
Изучение механизмов воздействия уже используемых и вновь синтезированных противопаразитарных препаратов, а также изучение структурных изменений, обменных нарушений в тканях хозяев после воздействия кокцидиостатиков, остается актуальной проблемой. Данная работа была посвящена изучению патоморфологических изменений кишечника у больных эймериозом и леченных противопаразитарной фармакологической субстанцией «К-55» птиц.
Материалы и методы. Опыт проводился в условиях виварии кафедры эпизоотологии и паразитологии на 30 цыплятах двадцатидневного возраста свободных от паразитов. Птиц заражали суспензией спорулированных ооцист эймерий в дозе 2000 ооцист на 1 кг массы тела. Отобранную птицу разделили на две группы, экспериментальную и контрольную. Цыплятам первой группы с лечебной целью задавали фармакологическую субстанцию «К-55» в дозе 30 мг/кг один раз два дня подряд с кормом. Вторая группа препарат не получала, и они служили в качестве контроля. Количество выделяемых ооцист определяли путем копрологических исследований по методу Фюллеборна. Леченную и контрольную группу животных на 7 и 14 сутки убивали и после вскрытия брали кусочки тонкого отдела кишечника, фиксировали в 10% формалине (9:1), для гистологической оценки эффективности действия нового лечебного средства. Укладку фиксированного материала осуществляли с помощью специального раствора, который был залит в парафин. С помощью гематоксилина и эозина, азур-эозина, красителей, окрашенных в синий цвет, и красителей, окрашенных в зеленый цвет, были получены гистологические срезы толщиной 5-10 мкм. Срезы окрашивали с помощью гематоксилина и эозина, азур II-эозина и ШИК - реакцией по А.Л. Шабадашу (1947).
Результаты исследований и их обсуждение. В контрольной группе основные патологические изменения были выявлены в органах пищеварения у больных эймериозом цыплят. Сильное присутствие в тонком кишечнике эймерии приводит к возникновению хронического, десквамативного катарального энтерита. В стенке толстого кишечника произошло разрушение эпителия слизистой оболочки до полного распада структуры апикальной области, затем и основания ворсинок. На поверхности слизистой оболочки в некоторых местах сохранялись только структура крипт. В соединительнотканной основе слизистой оболочки кишечных ворсинок и крипт отмечали резко разреженность клеток, разволокнение пучков коллагеновых и ретикулиновых волокон, мукоидное и в отдельных случаях фибриноидное набухание стенок мелких кровеносных сосудов. В некоторых случаях фибриноидное набухание стенок мелких кровеносных сосудов наблюдается в большинстве случаев.
Вокруг первых, которые расположены преимущественно у основания ворсинок [7], были диффузные компактные скопления, состоящие из эозинофильных гранулоцитов, лимфоидных клеток и единичных макрофагов. Но некоторые из них, как и в случае с клетками, имеющими признаки некробиоза, были повреждены. Во всех сохранившихся участках кишечника капиллярная сеть была обезвожена [6]. На фоне широко распространенной патогенной активности эймерий, большинство кишечных крипт у больных птиц теряло регенерационный потенциал. С ними в эпителии почти полностью исчезли митотически активные энтероциты, что привело к полному исчезновению энтероцитов. Содержание клеточных компонентов с фигурами митоза среднем по группе равнялось 2,07±0,11. В эти моменты ядро эпителия этих крипт было сильно наполнено просообразным содержимым, которое выделялось просветленным матриксом. Заметно разрушение не только ворсинок, но и всего эпителиального монослоя крипты в некоторых участках кишечной стенки. В межмышечных нервных сплетениях, гладкие клетки вырабатывали отек цитоплазмы и не имели четкой выраженности деталей хроматина в их бледно-окрашенных ядрах. Гистологические срезы после окрашивания кишечника ШИФФ-реактивом, обнаружили компактные и собранные в виде гнезд скопления или единично расположенные шизонтыэймерий. Методом азур II эозином выявить генерацию эймерий в виде внутриклеточно локализованной шизонты эймерий удается с большим трудом [2] (рис. 1).
Рисунок 1 - Контрольная группа. Гнездообразное скопление шизонтов E. maxima в эпителии тонкого отдела кишечника на 14-е сутки. Окраска ШИФФ-реактивом. Ув.400.
Через семь дней после лечения новой фармакологической субстанцией «К-55» структура кишечной стенки тонкого отдела была слабо выражена, что объясняется предшествующим разрушением. Новые кишечные ворсинки были полиморфными и имели в основном укороченное строение. На рисунке 2 показано, что в кишечнике имеется большое количество ворсинок, имеющих широкое основание и узкую апикальную часть. На боковой поверхности ворсинок располагались монослой столбчатых эпителиоцитарных клеток. Апикальная область некоторых ворсинок была лишена эпителия и содержала многочисленные с признаками атрофии энтероциты. Из-за этого в клеточной структуре не происходит уплотнения ворсинок и крипт, а также их разрежения. По данным исследования, в регенераторной области крипт были обнаружены одиночные митотически активные клетки 2,4±0,17. Восстанавливаемые кишечные ворсинки были представлены множеством ретикулоцитов, малодифференцированных и лимфоидных клеток, а также несколькими гладкомышечными клетками. В центре ворсинок были обнаружены самые большие концентрации этих клеток. Слизистая основа была слабо выражена и плохо передавалась в мышечную пластинку, которая имела неравномерную толщину. При этом, в мышечном слое сохранялись признаки волокнистого разволокнения [3]. Мозговые оболочки сохранили признаки набухания нейроплазмой и бледной окраски ядс£
Рисунок 2 - Тонкий отдел кишечника. На 14 сутки после применения фармакологической субстанции «К-55» в области крипт обнаруживали единичные митотически активные клетки. Окраска
гематоксилином и эозином. Ув. 240.
Шизонты эймерий при окраске ШИФФ-реактивом не выявлялись как на поверхности, так и внутри клеток эпителия ворсинок и крипт. Картина морфологии тонкого отдела кишечника, сохраненная на 14-е сутки после лечения, сохранилась в подавляющем большинстве во всех участках среза кишечной стенки [2,3]. При этом был полностью восстановлен кишечный эпителий. Ворсистые участки на поверхности апикальной области сохраняли следы десквамации эритроцитов, что свидетельствует о сохранении признаков десквамации энтероцитов. По причине неполного обновления эпителия кишечных ворсинок, часть их была деформирована и имела множество мелких клеток на боковой поверхности и апикальной области. В результате соединения соединительной основы кишечных ворсинок и крипт, лимфоциты проникли в новообразованные капилляры, ретикулоциты и гладкомышечные клетки. На поверхности и в клетках кишечных крипт находились по 3,76±0,25 фигур митоза. При окраске Шифф-реактивом выявить наличие шизонтов кокцидий не удавалось. Этот мышечный слой имел однородную толщину. Непосредственно внутри и снаружи мышечная оболочка была с хорошо выраженными признаками мукоидного набухания межмышечной соединительной ткани, резко ослабла. По структуре клеток межмышечных нервных сплетении можно было определить структуру клеток, которые образовывались в результате их слияния.
Заключение. У экспериментально зараженных эймериозом цыплят в тонком отделе кишечника, произошло разрушение эпителия слизистой оболочки до полного распада структуры апикальной области, затем и основания ворсинок [2]. На поверхности слизистой оболочки в некоторых местах сохранялись только структура крипт. Соединительная ткань кишечной ворсинки и крипт имела резкое разрежение клеток, а также сильное уплотнение пучков коллагеновых волокон и набухание стенок мелких кровеносных сосудов было зафиксировано в соединительнотканной основе слизистой оболочки кишечника. У основания ворсинок располагались диффузные [7] скопления из эозинофильных гранулом, лимфоидных клеток и имеющими признаки некробиоза. Заметно разрушение не только ворсинок, но и всего эпителиального монослоя крипты в некоторых участках кишечной стенки. В межмышечных нервных сплетениях гладкие клетки не имели четкой выраженности деталей хроматина в их бледно-окрашенных ядрах [6]. Гистологические срезы тонкого отдела кишечника проводили ШИФФ -реактивом, легко обнаружили компактные и собранные в виде гнезд скопления или единично расположенные шизонтыэймерий.
Через семь дней после лечения фармакологической субстанцией «К-55» структура кишечной стенки тонкого отдела была слабо выражена, что объясняется предшествующим разрушением. Восстанавливаемые кишечные ворсинки были представлены множеством ретикулоцитов, малодифференцированных и лимфоидных клеток, а также несколькими гладкомышечными клетками. Слизистая основа была слабо выражена и плохо передавалась в мышечную пластинку, которая имела неравномерную толщину. При этом, в мышечном слое сохранялись признаки волокнистого разволокнения. Спайки между клетками эпителия ворсинок и крипт не выявлялись при окраске ШИФФ-реактивом.
На 14-й день после лечения рисунок гистологического строения тонкого отдела кишечника был сохранен на 100% во всех частях среза кишечной стенки. В области крипт и основания ворсинок кишечного эпителия был полностью восстановлен. Шизонты не обнаружили. Согласно результатам патоморфологических исследований тонкого отдела кишечника птиц, экспериментально зараженных и леченых новой фармакологической субстанцией «К-55» в дозе 30 мг/кг, обладает эффективным кокцидиоцидным действием на все внутриклеточные генерации эймерий, способствует быстрому протеканию репаративных процессов в пораженных тканях птиц.
Список источников
1. Бакулин, В.А. Болезни птиц / В.А. Бакулин // С.-Петербург, 2006. - 686 с.
2. 2.Гиззатуллин Р.Р. Клинико-морфологическая оценка эффективности соединения «Дегельм-14» при эймериозе кур / Р.Р. Гиззатуллин // Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. - Нижний Новгород, 2013. - 196 с.
3. 3.Гиззатуллин, Р.Р. Сравнительная патоморфологическая оценка действия соединения «Дегельм-14» и препарата ампролиум на печень и тонкий кишечник цыплят, больных эймериозом / Р.Р. Гиззатуллин, И.Н. Залялов, М.Х. Лутфуллин // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Том 237. - 2019. - №1. - С.48-51.
4. 4.Елисеева, Е.А. Эффективные средства профилактики паразитозов птиц / Е.А. Елисеева // Птицеводство. -2003. - № 7. - С. 46-47.
5. 5.Журавлева, А.З. Сравнительная эффективность мадувита и цигро при кокцидиозе цыплят / А.З. Журавлева // Ветеринария. - 2012. - № 10. - С. 15-16.
6. 6.Залялов, И.Н. Патоморфологическая оценка эффективности соединения «Дегельм-14» при эймериозе кур / И.Н. Залялов, Р.Р. Гиззатуллин, А М. Идрисов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Том 227. - 2010. - №1. - С.42-47.
7. 7.Лутфуллин, М.Х. Эймериоз кур / М.Х. Лутфуллин, Н.А. Лутфуллина, И.Н. Залялов, Р.Р. Гиззатуллин, И.В. Галкина // Казанская государственная академия ветеринарной медицины, - Казань, 2015.-101с.
8. 8.Лутфуллин, М.Х. Противопаразитарные препараты нового поколения / М.Х. Лутфуллин, Н.А. Лутфуллина, А.С. Гасанов // Казанская государственная академия ветеринарной медицины, - Казань, 2017. - 216 с.
9. 9.Мишин, В.С. Адаптация кокцидий кур к антикокцидийным препаратам и методы ее предупреждения / В.С. Мишин, В.М. Разбицкий, А.Н. Калинин// Матер.докл. III -Междунар. вет. конгр. по птицеводству. -
2007. - С. 221-224.
10. 10.Фазлаев, P.P. Патогенез пищеварения у кур при эймериозе / P.P. Фазлаев, Р.Г. Фазлаев // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных / Сборник научных трудов по материалам 16-й Всероссийской научно-методической конференции. - Ставрополь, 2007. - С. 113-114.
11. 11.Фазлаев, P.P. Патогистологические изменения в слепой кишке кур при паразитировании Eimeriatenella / P.P. Фазлаев //Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями / Материалы докладов всероссийской научной конференции, посвященной 130-летию со дня рождения К.И. Скрябина. - Москва,
2008. - С. 490-492.
References
1. Bakulin, V.A. Diseases of birds. / V.A. Bakulin // St. Petersburg, 2006. - 686 p.
2. Gizzatullin R.R. Clinical and morphological evaluation of the effectiveness of the compound "Degelm-14" in chicken eimeriosis / R.R. Gizzatullin // Dissertation for the degree of Candidate of Veterinary Sciences. -Nizhny Novgorod, 2013. - 196 s.
3. 3.Gizzatullin, R.R. Comparative pathomorphological assessment of the effect of the compound "Degelm-14" and the drug amprolium on the liver and small intestine of chickens with eimeriosis / R.R. Gizzatullin, I.N. Zalyalov, M.H. Lutfullin // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, Volume 237. - 2019. - No.1. - pp.48-51. 4.Eliseeva, E.A. Effective means of preventing parasitosis of birds / E.A. Eliseeva // Poultry farming. - 2003. - No. 7.- pp. 46-47.
4. Zhuravleva, A.Z. Comparative effectiveness of maduvit and tsigro in chicken coccidiosis / A.Z. Zhuravleva // Veterinary medicine. - 2012. - No. 10.- pp. 15-16.
5. 6.Zalyalov, I.N. Pathomorphological evaluation of the effectiveness of the compound "Degelm 14 at eimeriosis of chickens / I.N. Zalyalov, R.R. Gizzatullin, and M. Idrisov // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman, Vol 227. - 2010. - №1. - Pp.42-47.
6. 7.Lutfullin, M.H. Eimeriosis of chickens / M.H. Lutfullin, N.A. Lutfullina, I.N. Zalyalov, R.R. Gizzatullin, I.V. Galkina // Kazan State Academy of Veterinary Medicine, - Kazan, 2015.-101c.
7. 8.Lutfullin, M.H. Antiparasitic drugs of a new generation / M.H. Lutfullin, N.A. Lutfullina, A.S. Hasanov // Kazan State Academy of Veterinary Medicine, - Kazan, 2017. - 216 p;
8. Mishin, V.S. Adaptation of coccidia of chickens to anticoccidial drugs and methods of its prevention / V.S. Mishin, V.M. Razbitsky, A.N. Kalinin// Mater.dokl. III -International vet. congr. poultry farming. - 2007. -pp. 221-224.
9. Fazlaev, P.P. Pathogenesis of digestion in chickens with eimeriosis / P.P. Fazlaev, R.G. Fazlaev // Modern problems of pathological anatomy, pathogenesis and diagnosis of animal diseases / Collection of scientific papers based on the materials of the 16th All-Russian Scientific and Methodological Conference. - Stavropol, 2007. - pp. 113-114.
10. Fazlaev, P.P. Pathohistological changes in the cecum of chickens during parasitization of Eimeriatenella / P.P. Fazlaev //Theory and practice of combating parasitic diseases / Materials of reports of the All-Russian scientific conference dedicated to the 130th anniversary of the birth of K.I. Scriabin. - Moscow, 2008. - pp. 490-492.
Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.
Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с
написанием статьи.
All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.
The authors declare that there is no conflict of interest.
Принята к публикации/accepted for publication 18.10.2023;
© Гиззатуллин Р.Р., Лутфуллин М.Х., Мингалеев Д.Н., Гиззатуллина Р.Р. Тимербаева Р.Р., 2023