Противоопухолевый эффект наноразмерных липосом с липофильным пролекарством комбретастатина А4 на мышиной модели острого Т-лимфолейкоза

Моисеева Е.В.; Кузнецова Н.Р.; Ситников Н.С.; Пазынина Г.В.; Федоров А.Ю.; Водовозова Е.Л.

36

ТЕЗИСЫ

МАТЕРИАЛЫ XI ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ..

А.Ф. Миронов1, В.Д. Румянцева1, А.В. Иванов2, Н.Г. Хлебцов3, И.П. Шилов4 ИТТЕРБИЕВЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПОРФИРИНОВ И ИХ КОНЪЮГАТЫ С НАНОЧАСТИЦАМИ ДЛЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОПУХОЛЕЙ

1 Московский ГУТХТ им. М.В. Ломоносова, Москва;

2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва

3Саратовский государственный университет им. Чернышевского, Саратов 4Институт радиотехники и электроники РАН, Фрязино

Успешная борьба с раковыми заболеваниями в значительной мере зависит от возможного более раннего обнаружения опухоли. Одним из перспективных направлений в этой области является флуоресцентная диагностика с использованием иттербиевых (УЪ)-комплексов порфиринов. Они обладают интенсивной люминесценцией, хорошо накапливаются в опухоли, практически не генерируют синглетный кислород и его другие активные формы при облучении. Отсутствие фототоксичности является важным преимуществом УЬ-комплексов по сравнению с обычно используемыми фотосенсибилизаторами в ФДТ, поскольку не приводит в данном случае к нежелательному разрушению тканей. Нами осуществлен синтез большой группы иттер-биевых комплексов природных и синтетических порфиринов и изучены их физико-химические и биологические свойства. Природные порфирины получены на основе доступного гемина крови, а синтетические производные - с использованием одностадийной монопиррольной конденсации. Введение иттербия протекает с высоким выходом. Синтезированные УЬ-комплексы являются устойчивыми соединениями и могут храниться долгое время без разложения. Наиболее эффективным фотосенсибилизатором среди исследованных соединений оказался 2,4-диметоксигематопорфирин IX (УЬ-ФС). Он имеет низкую токсичность, хорошо накапливается в опухоли и интенсивно флуоресцирует в диапазоне 975 - 985 нм, где собственная люминесценция биотканей является минимальной. Его дикалиевая соль хорошо растворима в воде. Данные по кинетике накопления и выведения на мышах-самках линии Ви1Ь/с с привитой опухолью Льюиса свидетельствуют о преимущественном накоплении препарата в опухоли через 48 ч после его введения в организм животных. Селективность УЬ-ФС достигала 16. Показано, что время жизни люминесценции в растворе составляет 8 - 10 мкс и его можно детектировать при концентрациях 10-11 М. Получены композитные золото-серебрянные наночастицы, покрытые мезопористой оболочкой из двуокиси кремния и функционализиро-ванные УЬ-ФС (около 1500 молекул на частицу). Сравнение биораспределения и люминесценции УЬ-ФС и его конъюгата с наночастицами на мышах с привитой карциномой Эрлиха позволило обнаружить существенное увеличение накопления в опухоли конъгата по сравнению с исходным УЬ-ФС.

-1-1-2-1-2-1-

Е.В. Моисеева , Н.Р. Кузнецова , Н.С. Ситников , Г.В. Пазынина , А.Ю. Федоров , Е.Л. Водовозова

ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ЭФФЕКТ НАНОРАЗМЕРНЫХ ЛИПОСОМ

С ЛИПОФИЛЬНЫМ ПРОЛЕКАРСТВОМ КОМБРЕТАСТАТИНА А4

НА МЫШИНОЙ МОДЕЛИ ОСТРОГО Т-ЛИМФОЛЕЙКОЗА

1 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва

2 Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород

Задачи исследования. Антимитотический агент комбретастатин А4 (СА-4) в виде водорастворимого фосфата (СА4Р) недавно одобрен в качестве антиваскулярного противоопухолевого средства для многократного введения после курса лучевой терапии. В данной работе получены липосомы, нагруженные липо-фильным пролекарством СА-4 и несущие углеводный лиганд селектинов 81аЬех. Исследован противоопухолевый эффект на модели острого Т-лимфолейкоза мышей А8Г-ЬЬ; экспрессия селектинов на клетках лим-фомы подтверждена ранее с помощью иммунофенотипирования при цитометрии. Материалы и методы. Экструзионные 100-нм-липосомы состава яичный фосфатидилхолин / фосфатидилинозит из дрожжей / олеоильный эфир СА-4 (СА4-01е) / +-диглицеридный конъюгат 81аЬех, 75:10:15:1 (мол.), получены на установке Ырех (Канада) при 20оС. Для сравнительных испытаний получали мицеллярную форму водонераство-римого СА-4 с фармакопейным детергентом Твин 80 (5% в буфере). Концентрация по СА-4: 22 мг/кг = 70 мкмоль/кг (принятая в клинике дозировка СА4Р: 81 мг/кг = 184 мкмоль/кг). Препараты (0,2 мл) вводили в.в. самкам А8Г-ЬЬ (п=8 в каждой группе) через сутки после инокуляции клеток лимфомы, 6 раз с интервалом в 2-3 дня. Результаты. В используемых дозировке и протоколе введения СА-4 не показал достоверного инги-бирования роста лимфомы и регионарных подмышечных лимфоузлов. Группы, пролеченные препаратами липосом достоверно (р << 0.04) отличались от контроля, начиная с 12 дня, но не различались между собой. Средний размер лимфоузлов у мышей, получавших липосомы, не превысил нормы (1.5-2 мм). К 21 дню был обнаружен только один показатель преимущества 81аЬех-липосом: доля мышей с пораженными лимфоузлами была наименьшей - 25 %, против 50, 63 и 80% в группах, получавших безадресные липосомы с СА4-01е, СА-4 и РВ8-5% Твин 80, соответственно. К 43 дню выживаемость в группах (в том же порядке): 90, 90, 50 и 25 %. Выводы. 1) Препараты липосом с СА4-01е, в отличие от интактного СА-4, показали достоверное противоопухолевое действие в режиме монотерапии. 2) Выраженный эффект адресной доставки может быть получен при введении в состав липосом более 1 мол. % конъюгата 81аЬех.

Работа поддержана грантом РФФИ № 10-04-01021.

№ 2/том 11/2012

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Моисеева Е. В., Кузнецова Н. Р., Ситников Н. С., Пазынина Г. В., Федоров А. Ю.