CC BY
57
УДК 616.34 - 008.11 - 085 : 615.73 + 552.52
ПРОТИВОДИАРЕЙНАЯ АКТИВНОСТЬ МОНТМОРИЛЛОНИТСОДЕРЖАЩЕГО ЭНТЕРОСОРБЕНТА
Тишин А.Н.1, Бесхмельницына Е.А.1, Якушев В.И.1, Тишина О.М.2, ЛинникМ.С.1, Криворученко В.Б.3
Научный руководитель — д.м.н., профессор Покровский М.В.
1 аспирант кафедры фармакологии ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный университет», Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, 85, [email protected] 2врач-терапевт БУЗ «Поликлиника №3», Россия, 302001, г. Орёл, ул.Комсомольская, д.32, 1068573@bsu. edu. ru
3врач-хирург ОГБУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоасафа», Россия, 308007, Белгород, ул. Некрасова, дом 8/9, [email protected]
Резюме. Острая диарея продолжает оставаться важнейшей медико-социальной проблемой. Для лечения острой диареи предложено множество групп лекарственных препаратов. Особое внимание заслуживают энтеросорбенты, ввиду их доступности, высокой эффективности, безопасности, а также отсутствия резорбтивного действия. Поиск новых препаратов с сорбционной активностью представляется актуальной задачей. Монтмориллонит представляет собой глинистый минерал со слоистой структурой, за счет которой он обладает высокой сорбционной емкостью. В экспериментальном исследовании на мышах нами была изучена противодиарейная активноть энтеросорбентов на основе монтмориллонитовых глин крымского месторождения в дозе 1660мг/кг. На модели серотонин-индуцированной диареи показана противодиарейная активность энтеросорбента на основе монтмориллонита под лабораторным шифром К00. Ключевые слова: диарея, энтеросорбенты, монтмориллонит, серотонин-индуцированная диарея
ANTIDIARRHEAL ACTIVITY OF MONTMORILLONITE-CONTAINING ENTEROSORBENT
Tishin A.N.1, Beskhmelnitsyna E.A.1, Yakushev V.I.1, Tishina O.M.2, Linnik M.S.1, Krivoruchenko V.B.
Scientific advisor — professor Pokrovsky M. V., Doctor of Medicine
1BelgorodState Nacional Research University, Russia, 308015, Belgorod, Pobedy st., 85
2"Polyclinic №3 ", Russia, 302001, Orel, Komsomolskaya st., 32
ß
Belgorod Regional Clinical Hospital of St. Joasaph, Russia, 308007, Belgorod, Nekrasov st., house 8/9
Summary. Acute diarrhea continues to be a major medical and social problem. To treat acute diarrhea, many groups of drugs have been proposed. Enterosorbents deserve particular attention, because of their availability, high efficiency, safety, and lack of the resorptive action. The search for new drugs with this activity seems to be an urgent task. Montmorillonite is a clayey mineral with a layered structure, due to which it has a high sorption capacity. In an experimental study in mice, we studied the antidiarrheal activity of enterosorbents based on montmorillonite clays of the Crimean deposit at dose of 1660mg / kg. On the model of serotonin-induced diarrhea, antidiarrheal activity of enterosorbent on the basis of montmorillonite is shown under the laboratory code K00. Key words: acute diarrhea, enterosorbents, montmorillonite, serotonin-induced diarrhea
Введение. Острая диарея является одним из самых распространенных заболеваний во всем мире [5]. По данным литературы, среди взрослого населения в Западной Европе и Соединенных Штатах в среднем каждый человек страдает острой диареей один раз в год [10], более того,
острые диареи являются одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в развивающихся странах и приводят к гибели миллионов людей ежегодно [8].
При лечении острой диареи применяются различные препараты, среди которых регидратационные,
противодиарейные, пробиотики,
антибиотики и энтеросорбенты [7]. Среди энтеросорбентов особое внимание заслуживает смектит диоктаэдрический ввиду его доказанной эффективности при диареях как у взрослых, так и у детей [2, 4, 9]. Диосмектит эффективно сорбирует токсины, бактерии, оказывает
цитопротекторное действие в отношении слизистой оболочки желудка и кишечника [6]. Диостмектит не всасывается в желудочно-кишечном тракте, не оказывает резорбтивного действия и обладает хорошим профилем безопасности [9]. На сегодняшний день на российском фармацевтическом рынке диосмектит представлен субстанциями зарубежного производства [1]. Поэтому, разработка отечественных энтеросорбентов
представляется актуальной задачей.
Цель работы: оценить
противодиарейную активность
энтеросорбента на основе
монтмориллонита на модели серотонин-индуцированной диареи у мышей.
Материалы и методы. Нами были использованы отечественные
энтеросорбенты на основе
монтмориллонитовых глин крымского месторождения под лабораторными шифрами К00, К01, К02, предоставленные ООО «Крымфармамед» для
доклинического изучения (Протоколы контроля качества образцов от 11.11.2016 г). В качестве препаратов сравнения использовали энтеросорбент на основе смектита диоктаэдрического Смекта® («Beaufuor Ipsen Industrie», Франция), и противодиарейный препарат лоперамид (ООО «Озон», Россия).
Исследование было проведено на 60 лабораторных мышах обоего пола массой 25-30 г. Животные находились в стандартных условиях содержания, на естественном световом режиме, при свободном доступе к воде и пище. Манипуляции с экспериментальными животными выполнялись в соответствии с положениями Хельсинской декларации пересмотра 1983 г. о гуманном отношении к животным, методическими
рекомендациями по их выведению из
опыта и эвтаназии, а также правилами лабораторной практики, утвержденными приказом министра здравоохранения и социального развития от 23 августа 2010 г. N 708н «Об утверждении правил лабораторной практики». Животные выводились из эксперимента путём дислокации шейных позвонков. Все работы одобрены локальным этическим комитетом НИУ «БелГУ».
Все животные были разделены в случайном порядке на 6 групп по 10 особей в каждой. После этого животных лишали пищи на 12 ч при свободном доступе к воде. Острую диарею у мышей вызывали внутрибрюшинным введением серотонина гидрохлорида (H9523, Sigma-Aldrich, США) в дозе 3 мг/кг [3]. После этого мыши по одной располагались на белом листе бумаги для оценки времени наступления диареи и подсчета количества дефекаций через часовой интервал в течении 4 ч. Бумажное покрытие менялось каждый час. Для подсчета выраженности ингибирования (ВИ) диареи использовали следующую формулу: ВИ (%)=[(Мк-Мт)/Мк]*100%, где Мк - количество дефекаций в контрольной группе, Мт -количество дефекаций в исследуемых группах.
За 30 мин до внутрибрюшинного введения серотонина гидрохлорида мышам внутрижелудочно вводили водные суспензии энтеросорбентов К00, К01, К02 и препарата Смекта® в дозах 1660 мг/кг, лоперамида в эффективной дозе 3 мг/кг. В контрольной группе животным вводили 2% раствор Твин 80 в объеме 10 мл/кг.
Для статистической обработки результатов использовали пакет программ «Microsoft Excel 2010». За достоверные различия в сравнении средних величин сравниваемых показателей брали t-критерий Стьюдента при p<0,05.
Результаты исследования. При исследовании антидиарейной активности (табл.1) показано, что выраженность ингибирования диареи у энтеросорбента К00 составила 67,7%, при этом время начала диареи значительно увеличивалось по сравнению с контрольной группой с 24,8±8,58 мин до 147,8±11,54 мин (t=25,7,
p<0,001), а количество дефекаций уменьшалось до 6,3±0,9 за 4 ч (1=14,4, р<0,001) по сравнению с контролем. Результаты противодиарейной активности К00 достоверно не отличались от противодиарейной активноти Смекты® по времени наступления диареи и количества дефекаций (1=-0,21, р<0,05 и 1=0,4, p<0,05 соответственно). В то же время
р<0,01 по сравнению с лоперамидом
В результате исследования было выяснено, что энтеросорбенты К00 и Смекта® показали высокую
противодиарейную активность, при этом энтеросорбент К00 имеет терапевтическую эффективность, сопоставимую с таковой у Смекты®. Оба энтеросорбента уступали лоперамиду по времени наступления диареи, по количеству дефекаций за период наблюдения.
Вывод. На модели серотонин-индуцированной диареи энтеросорбент на основе монтмориллонита под
лабораторным шифром К00 показывает сопостовимую со Смектой®
противодиарейную активность.
энтеросорбенты К00 и Смекта® уступали противодиарейному препарату лоперамиду как по времени начала диареи, так и по количеству дефекаций (t=3,6, p<0,01; t=-3,78, p<0,01 и t=3,15, p<0,01; t=-3,2, p<0,01) соответственно. Энтеросорбенты К01 и К02 показали достоверно более низкую противодиарейную активность в сравнении с К00 и Смектой® (p<0,001).
Таблица 1. Эффективность противодиарейной активности изучаемых энтеросорбентов
по сравнению с лоперамидом и смектой
Препарат Дозы Время начала диареи (минуты) Число дефекаций ВИ (%)
Контроль(n=10) 10 мл/кг 24,8±8,58 19,5±2,6 0
Лоперамид (n=10) 3 мг/кг 170,4±14,85* 4,2±1,4* 78,5
К00(n=10) 1660 мг/кг 147,8±11,54*b 6,3±0,9*b 67,7
К01(n=10) 1660 мг/кг 114,7±8,62*a 13,5±2,6*a 30,8
К02(n=10) 1660 мг/кг 118,9±7,21*a 12,2±2,1*a 37,4
Смекта® (n=10) 1660 мг/кг 149,1±13,76*b 6,1±1,1*b 68,7
Примечание: * - p<0,001 по сравнению с контролем; a - p<0,001 по сравнению со Смекта® и К00; -
Литература
1. Бондарев А.В. Разработка состава и технологии гранулированной лекарственной формы с адсорбционным действием на основе монтмориллонитовой глины [Текст]: дисс. ... канд. мед. наук. 14.04.01 / Бондарев Александр Васильевич - Белгород., 2015. - 138 с.
2. Dupont C., Foo J. L. K., Gamier P., Moore N., Mathiex-Fortunet H., Salazar-Lindo E. Oral diosmectite reduces stool output and diarrhea duration in children with acute watery diarrhea. // Clinical Gastroenterology and Hepatology. - 2009. - V.7. - N4. - Р.456-462.
3. Kadowaki M., Nagakura Y., Tomoi M., Mori J., Kohsaka M. Effect of FK1052, a potent 5-hydroxytryptamine 3- and 5-hydroxytryptamine 4 receptor dual antagonist, on colonic function in vivo. // J. Pharmacol. Exp. Ther. -1993. - V.266. - P.74-80.
4. Khediri F., Mrad A.I., Azzouz M., Doughi H., Najjar T., Mathiex-Fortunet H., Garnier P., Cortot A. Efficacy of Diosmectite (Smecta)® in the Treatment of Acute Watery Diarrhoea in Adults: AMulticentre, Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled, Parallel Group Study. Gastroenterology Research and Practice, 2011, Volume 2011, Article ID 783196, 8 pages.
5. Kosek M., Bern C., Guerrant R. L. The global burden of diarrhoeal disease, as estimated from studies published between 1992 and 2000. Bulletin of the World Health Organization, 2003, vol. 81, no. 3: 197204.
6. Mahraoui L., Heyman M., Plique O., Droy-Lefaix M. T., Desjeux J. F. Apical effect of diosmectite on damage to the intestinal barrier induced by basal tumour necrosis factor-a. Gut, 1997, vol. 40, no. 3: 339343.
7. Piescik-Lech M., Shamir R., Guarino A., Szajewska H. Review article: the management of acute gastroenteritis in children. // Aliment Pharmacol Ther. - 2013. -V.37. - Р.289-303.
8. Sarkar M.R., Hossen S.M.M., Howlader M.S.I., Rahman M.A., Dey A. et al.. Antidiarrheal, analgesic and antimicrobial activities of the plant Lalmesta (Hibiscus sabdariffa): a review. // Int J Pharm Life Sci. - 2012. -N1. - Р.1-11.
9. Szajewska H., Dziechciarz P., J. Mrukowicz Metaanalysis: smectite in the treatment of acute infectious diarrhea in children. // Alimentary Pharmacology and Therapeutics. -2006. -V.23, N.2. - P.217-227.
10. Thielman N. M., Guerrant R. L. Acute infectious diarrhea. //New England Journal of Medicine. -2004. - V.350,N. -P.38-47
