CC BY
3УДК 619:616.993.192
ПРОТИСТОЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ АМИДОВ ЖИРНЫХ КИСЛОТ И ИЗВЕСТНЫХ АНТИПРОТОЗОЙНЫХ ПРЕПАРАТОВ
А.Е. Святогорова - младший научный сотрудник, к.с.-х.н., ОЯСГО: 0000-00034233-1740, БРГЫ-код: 2369-0027, АиШогГО: 719399 Л.Н. Фетисов - ведущий научный сотрудник, к.в.н., ОЯСГО: 0000-0002-26181079, БРШ-код: 8809-2266, АиШогГО: 508873 А.А. Зубенко - главный научный сотрудник, д.б.н., ОЯСГО: 0000-0001-79437667, БРШ-код: 7776-8122, АиШогГО: 180846
Северо - Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт - филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»,
Новочеркасск, Россия.
Аннотация. Сотрудниками ТК «По химическому синтезу новых лекарственных соединений» в СКЗНИВИ - филиал ФГБНУ ФРАНЦ была проведена оценка перспективности использования амидов миристиновой и олеиновой кислот в роли протистоцидных средств в сравнении с ведущими антипротозойными препаратами, такими как трихопол, толтразурил, противомалярийный препарат хлорохин и антибиотик бициллин 5. Антипротозойное действие веществ определяли по нашей методике в жидкой питательной среде методом серийных разведений. Объектом исследования являлись простейшие вида Сolpoda steinii. Результат показал, что при концентрации раствора амида миристиновой кислоты 4,63 мкг/мл и выше гибель Сolpoda 8(втИ наступала в течение 1-2 мин, при концентрации раствора амида олеиновой кислоты 9,25 мкг/мл - в течение 2 минут; при концентрации 15,63 мкг/мл хлорохина - в течение полутора часов, при концентрации 1,95 мкг/мл - в течение 18 часов; раствора толтразурила 22,5 мкг/мл - в течение 19,5 ч., трихопола и антибиотика бициллина 5 - 250 мкг/мл -в течение 18 ч и 19 ч. соответственно. Таким образом, синтезированные нами амиды жирных кислот показывают лучшие результат в сравнении с известными препаратами и дают возможность использовать более низкие концентрации растворов с меньшим временем воздействия препарата для протистоцидного эффекта.
Ключевые слова: амид миристиновой кислоты, амид олеиновой кислоты, протистоцидная активность, антипротозойные средства
PROTISTOCIDAL ACTIVITY OF FATTY ACID AMIDES AND KNOWN
ANTIPROTOZOAL DRUGS A.E. Svyatogorova - junior researcher, PhD, ORCID: 0000-0003-4233-1740, SPINcode: 2369-0027, AuthorlD: 719399 L.N. Fetisov - Leading Researcher, Ph.D., ORCID: 0000-0002-2618-1079, SPINcode: 8809-2266, AuthorID: 508873 A.A. Zubenko - Chief Researcher, Doctor of Biological Sciences, ORCID: 00000001-7943-7667, SPIN-code: 7776-8122, AuthorID: 180846
North-Caucasus Zonal Scientific Research Veterinary Institute - Branch of the Federal State Budget Scientific Institution «Federal Rostov Agricultural Research
Centre»
Annotation. The staff of the Creative Team "On the chemical synthesis of new medicinal compounds" at the NCZSRVI - Branch of the FSBSI FRARC evaluated the prospects of using myristic and oleic acid amides as protistic agents in comparison with leading antiprotozoal drugs such as trichopol, toltrazuril, antimalarial drug chloroquine and the antibiotic bicillin 5. Antiprotozoal action of substances it was determined according to our methodology in a liquid nutrient medium by the method of serial dilutions. The object of the study was the protozoa of the species Colpoda steinii. The result showed that at a concentration of myristic acid amide solution of 4.63 micrograms/ml and above, the death of Solpoda steinii occurred within 1-2 minutes, at a concentration of oleic acid amide solution of 9.25 micrograms/ml - for 2 minutes; at a concentration of 15.63 micrograms/ml of chloroquine - for an hour and a half, at a concentration of 1.95 micrograms/ml - for 18 hours; toltrazuril solution 22.5 mcg / ml - for 19.5 hours, trichopol and the antibiotic bicillin 5 - 250 mcg / ml - for 18 hours and 19 hours, respectively. Thus, the fatty acid amides synthesized by us show better results in comparison with known drugs and make it possible to use lower concentrations of solutions with a shorter exposure time of the drug for a protistocidal effect.
Keywords: myristic acid amide, oleic acid amide, protistocidal activity,
antiprotozoal agents
Введение. Из большого количества исследованных нами химических соединений, в основном мы устанавливаем вещества, обладающие антипротозойной активностью в отношении инфузорий вида Colpoda steinii. Исследования по синтезу и определению биологической активности новых соединений с целью отбора новых субстанций для разработки антибактериальных и антипротозойных средств проводили в СКЗНИВИ — филиал ФГБНУ ФРАНЦ [2, 3, 6, 8]. Наиболее отличившиеся соединения с протистоцидной и антибактериальной активностью оказались катионные ПАВ ряда амидов жирных кислот [1, 7, 9]. В процессе исследования и поиска новых антипротозойных препаратов для рыб было замечено, что известные препараты оказывают меньшее воздействие на антипротозойную активность в сравнении с препаратами сравнения [5].
Перед нами была поставлена цель: провести оценку амидов миристиновой и олеиновой кислот в качестве протистоцидных средств в сравнении с известными препаратами: трихопол, толтразурил, хлорохин и антибиотик бициллин 5.
Материал и методика. Антипротозойную активность амида миристиновой кислоты и амида олеиновой кислоты определяли в жидкой питательной среде методом серийных разведений по нашей методике [4]. В качестве тест-культуры использовали инфузорий вида Colpoda steinii. Минимальная концентрация, при которой погибали все особи простейших мы считали протистоцидной.
Результаты и обсуждение.
Для того, чтобы изучить протистоцидное воздействие, мы провели оценку и сравнение протистоцидной активности водных растворов с различным содержанием амида миристиновой кислоты и амида олеиновой кислоты в отношении простейших вида Colpoda steinii. В таблице 1 представлены результаты определения минимальной концентрации амида миристиновой кислоты, вызывающие максимальный эффект - гибель всех простейших.
Таблица 1 - Результаты изучения протистоцидной активности водного
раствора гидрохлорида амида миристиновой кислоты в отношении _простейших вида Colpoda steinii._
Экспозиция, мин Концентрация раствора амида миристиновой кислоты в лунке, мкг/мл
9,25 4,63 2,31 1,16 0,58 0,29 0,14
2 + + - - - - -
3 + + + - - - -
5 + + + + - - -
10 + + + + + - -
15 + + + + + - -
20 + + + + + + +
30 + + + + + +
40 + + + + + + +
Примечание: «+» - простейшие погибли; «-» - простейшие живы.
Амид миристиновой кислоты с концентрацией раствора 4,63 мкг/мл и более вызывает наступление гибели в первые две минуты воздействия на Colpoda steinii, 0,14 мкг/мл - в течение 40 мин.
В таблице 2 представлены результаты определения минимальной концентрации амида олеиновой кислоты для летального исхода простейших.
Таблица 2 - Результаты изучения протистоцидной активности водного раствора гидрохлорида амида олеиновой кислоты в отношении простейших __вида Colpoda steinii._
Экспозиция Концентрация раствора амида олеиновой кислоты, мкг/мл
151,25 75,63 37,5 18,5 9,25 4,63 2,31 1,16 0,58 0,29 0,14 0,08 0,04
2 мин + + + + + - - - - - - - -
3 мин + + + + + + - - - - - - -
5 мин + + + + + + - - - - - - -
10 мин + + + + + + - - - - - - -
15 мин + + + + + + - - - - - - -
20 мин + + + + + + - - - - - - -
30 мин + + + + + + - - - - - - -
1 ч + + + + + + - - - - - - -
2ч + + + + + + - - - - - - -
3 ч + + + + + + + - - - - - -
4,5 ч + + + + + + + - - - - - -
бч + + + + + + + - - - - - -
18 ч + + + + + + + + + - - - -
Амид олеиновой кислоты с концентрацией раствора 9,25 мкг/мл и более вызывает наступление гибели в течение двух минут воздействия на простейших; 2,31 мкг/мл - в течение 3 часов и 0,58 мкг/мл - в течение 18 ч.
В таблице 3 представлены результаты определения минимальной концентрации препарата сравнения хлорохина для летального исхода простейших.
Таблица 3 - Результаты изучения протистоцидной активности препарата
сравнения хлорохина в отношении
Экспозиция, мин Концентрация раствора хлорохина в лунке, мкг/мл
15,63 7,81 3,91 1,95 0,98 0,49 0,24
2 - - - - - - -
5 - - - - - - -
10 - - - - - - -
15 - - - - - - -
30 - - - - - - -
1ч
2ч
1 ч 30 мин +
18 ч + + + +
Примечание: «+» - простейшие погибли; «-» - простейшие живы.
Хлорохин оказывает воздействие на простейших в течение 1 ч 30 мин. при концентрации 15,63 мкг/мл, гибель Colpoda 81ети, при концентрации 1,95 мкг/мл. наступила в течение 18 часов.
Таблица 4. Результаты изучения протистоцидной активности препарата
сравнения толтразурила в отношении простейших вида Со1рос!а МсчпИ
Экспозиция Концентрация раствора толтразурила в лунке, мкг/мл
12500 6250 3125 1565 750,3 375 180 90 45 22,5 11,25 6,125
19,5 ч + + + + + + + + + + - -
2,25 1,121 0,56 0,28 0,14 0,07 0,035
19,5 ч - - - - - - -
В таблице 4 представленны результаты минимального уровня антипротозойного воздействия препарата толтразурила, который находится в пределах концентрации 22,5 мкг/мл в течение 19,5 ч.
В таблице 5 представлены результаты определения минимального уровня протистоцидной активности препарата сравнения трихопола, составляющий 250 мкг/мл при воздействии в течении 18 ч на колпод.
Таблица 5. Результаты изучения протистоцидной активности препарата сравнения трихопола (метронидазола) в отношении простейших вида
Со1роёа Б1етп
Примечание: «+» - простейшие погибли; «-» - простейшие живы.
В таблице 6 представлены результаты определения минимального уровня протистоцидной активности антибиотика бициллина 5 который составляет 250 мкг/мл при воздействии на простейших в течение 19 ч.
Таблица 6. Результаты определения уровня протистоцидной активности препарата сравнения бициллина 5 в отношении простейших вида Со1роёа
Б1еши
Экспозиция Концентрация раствора бициллина 5 в лунке, мкг/мл
500 250 125 62,5 31,25 15,625 7,81 3,91 1,95 0,98 0,49 0,244
19 ч + + - - - - - - - - - -
Примечание: «+» - простейшие погибли; «-» - простейшие живы.
Заключение. По результатам исследования очевидно, что известные препараты, такие как трихопол, толтразурил, хлорохин и антибиотик бициллин 5, в сравнении с амидами жирных кислот, показали результаты протистоцидного воздействия ниже, чем синтезированные нами химические соединения.
Литература
1. Зубенко, А. А. Изучение параметров безопасности амида олеиновой кислоты на аквариумных рыбах / А. А. Зубенко, Л. Н. Фетисов, А. Е. Святогорова // Ветеринария Северного Кавказа. - 2022. - № S5. - С. 60-69. - DOI 10.56660/77368_2022_5_60. - EDN VWLZZH.
2. Изучение параметров безопасности амида миристиновой кислоты на аквариумных рыбах / А. Е. Святогорова, Л. Н. Фетисов, А. А. Зубенко, К. Н. Кононенко // Актуальные вопросы развития отраслей сельского хозяйства: теория и практика : Материалы IV Всероссийской конференции молодых ученых АПК, п. Рассвет, 19-20 мая 2022 года. - п. Рассвет: Общество с ограниченной ответственностью "АзовПринт", 2022. - С. 156-161. - DOI 10.34924yFRARC.2022.65.75.001. - EDN BUQZKF.
3. Новое направление поиска антипротозойных средств / А. Е. Святогорова, А. А. Зубенко, Л. Н. Фетисов, К. Н. Кононенко // Ветеринария Северного Кавказа. - 2021. - № 2. - С. 2-9. - EDN DKXKGZ.
4. Проблема разработки антипротозойных средств для лечения и профилактики протозоозов рыб, теоретические и практические подходы к её решению / Л. Н. Фетисов, А. Е. Святогорова, К. Н. Кононенко [и др.] // Российский паразитологический журнал. - 2022. - Т. 16, №2 3. - С. 367-376. - DOI 10.31016/1998-8435-2022-16-3-367-376. - EDN RLCCNQ.
5. Протистоцидная активность катионных поверхностно-активных веществ и известных антипротозойных препаратов / А. А. Зубенко, А. Е. Святогорова, Л. Н. Фетисов [и др.] // Вестник КрасГАУ. - 2022. - №2 12(189). - С. 149-156. - DOI 10.36718/1819-4036-2022-12-149-156. - EDN QOMHXV.
6. Святогорова, А. Е. Изучение параметров безопасности амидов жирных кислот на аквариумных рыбах / А. Е. Святогорова, Л. Н. Фетисов // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии. -2023. - Т. 12, № 1. - С. 143-146. - DOI 10.48612/вЬогшк-2023-1-36. - EDN SSSVAO.
7. Святогорова, А. Е. Токсичность амидов жирных кислот для аквариумных рыб / А. Е. Святогорова, Л. Н. Фетисов, А. А. Зубенко // Актуальные вопросы развития отраслей сельского хозяйства: теория и практика : Материалы V Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых АПК, п. Рассвет, 18-19 мая 2023 года. - п. Рассвет: Общество с ограниченной ответственностью "АзовПринт", 2023. - С. 229-232. - DOI 10.34924/FRARC.2023.68.53.046.
8. Скрининг новых антипротозойных средств - определение терапевтической эффективности при эймериозах / А. И. Клименко, В. В. Чекрышева, А. А. Зубенко [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2022. - № 4. - С. 2427. - DOI 10.33861/2071-8020-2022-4-24-27. - EDN MEJCFL.
9. Чекрышева В.В., Фетисов Л.Н., Святогорова А.Е., Кононенко К.Н. Токсичность катионо-активного соединения амида миристиновой кислоты для аквариумных рыб // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: Наука и высшее профессиональное образование. 2021. № 3 (63). С. 254-262.
References
1. Zubenko, A. A. Studying the safety parameters of oleic acid amide on aquarium fish / A. A. Zubenko, L. N. Fetisov, A. E. Svyatogorova // Veterinary Medicine of the North Caucasus. - 2022. - No. S5. - pp. 60-69. - DOI 10.56660/77368_2022_5_60. - EDN VWLZZH.
2. Study of safety parameters of myristic acid amide on aquarium fish / A. E. Svyatogorova, L. N. Fetisov, A. A. Zubenko, K. N. Kononenko // Topical issues of the development of agricultural industries: theory and practice : Materials of the IV All-Russian Conference of Young Agricultural Scientists, Rassvet village, May 19-20, 2022. - Rassvet village: AzovPrint Limited Liability Company, 2022. - pp. 156-161. - DOI 10.34924/FRARC.2022.65.75.001. - EDN BUQZKF.
3. A new direction in the search for antiprotozoal agents / A. E. Svyatogorova, A. A. Zubenko, L. N. Fetisov, K. N. Kononenko // Veterinary Medicine of the North Caucasus. - 2021. - No. 2. - pp. 2-9. - EDN DKXKGZ.
4. The problem of developing antiprotozoal agents for the treatment and prevention of fish protozoa, theoretical and practical approaches to its solution / L. N. Fetisov, A. E. Svyatogorova, K. N. Kononenko [et al.] // Russian Parasitological Journal. - 2022. - Vol. 16, No. 3. - pp. 367-376. - DOI 10.31016/1998-8435-202216-3-367-376. - EDN RLCCNQ.
5. Protistocidal activity of cationic surfactants and known antiprotozoal drugs / A. A. Zubenko, A. E. Svyatogorova, L. N. Fetisov [et al.] // Bulletin of KrasGAU. -2022. - № 12(189). - Pp. 149-156. - DOI 10.36718/1819-4036-2022-12-149-156. -EDN QOMHXV.
6. Svyatogorova, A. E. The study of safety parameters of fatty acid amides on aquarium fish / A. E. Svyatogorova, L. N. Fetisov // Collection of scientific papers of the Krasnodar Scientific Center for Animal Science and Veterinary Medicine. - 2023. - Vol. 12, No. 1. - pp. 143-146. - DOI 10.48612/sbornik-2023-1-36 . - EDN SSSVAO.
7. Svyatogorova, A. E. Toxicity of fatty acid amides for aquarium fish / A. E. Svyatogorova, L. N. Fetisov, A. A. Zubenko // Topical issues of the development of agricultural industries: theory and practice : Materials of the V All-Russian Scientific and Practical Conference of Young Agricultural Scientists, Rassvet village, May 1819, 2023. - Rassvet village: AzovPrint Limited Liability Company, 2023. - pp. 229232. - DOI 10.34924/FRARC.2023.68.53.046.
8. Screening of new antiprotozoal agents - determination of therapeutic efficacy in eimeriosis / A. I. Klimenko, V. V. Chekrysheva, A. A. Zubenko [et al.] // Veterinary Kuban. - 2022. - No. 4. - PP. 24-27. - DOI 10.33861/2071-8020-2022-4-24-27. -EDN MEJCFL.
9. Chekrysheva V.V., Fetisov L.N., Svyatogorova A.E., Kononenko K.N. Toxicity of the cation-active compound of myristic acid amide for aquarium fish // Izvestiya Nizhnevolzhskogo agrouniversitetskogo complex: Science and higher professional education. 2021. No. 3 (63). pp. 254-262.
