CC BY
18
frequent respiratory diseases, with disturbances in the microbiocenosis of the nasopharynx]. Lechashchiy vrach. 2014;9:26-29. Russian.
4. Trajkov D, Mirkovska-Stojkovikj J, Petlichkovski F. Association of cytokine gene polymorphisms with chronic obstructive pulmonary disease in Macedonians. Iran J Allergy Asthma Immunol. 2009;8(1):31-42.
5. Smolnikova M, Smirnova S, Freidin M and other. Immunological parameters and gene polymorphisms (C-590T IL4, C-597A IL10) in severe bronchial asthma in
children from the Krasnoyarsk region, west Siberia. Int J Circumpolar Health. 2013;72:72-78.
6. Miyake Y, Tanaka R, Arakawa М and other. Relationship between polymorphisms in IL4 and asthma in Japanese women: the Kyushu Okinawa Maternal and Child Health Study. J Investig Allergol Clin Immunol. 2013;23(4):242-7.
7. Yang HJ. Association between the interleukin-4 gene C-589T and C-33T polymorphisms and asthma risk: a meta-analysis. Med Res Arch. 2013;44:127-35.
♦
УДК 618.11-008.6-092.9:547.993:661.693 https://doi.org/10.26641/2307-0404.2018.1(part 1).127240
ПРОТЕКТИВНИЙ ЕФЕ^Г ЦИТРАТУ ГЕРМАН1Ю ПРИ ЕНДОТОKСИН-IНДУKОВAНIЙ ОВАР1АЛЬН1Й ДИСФУНЩП В МИШЕЙ P.I. Янчй 1
1нститут фiзiологiï iм. О.О.Богомольця HAH Украти 1 вул. Богомольця, 4, Кшв, 01024, Укра'та TOB «Нанотехнологи i наноматерiали» 2 вул. Казимира Малевича, 84, Кшв, 03150, Укра'та Bogomoletz Institute of Physiology of NAS of Ukraine 1
Bogomoletz str., 4, Kyiv, 01024, Ukraine"Nanomaterials andNanotechnologies" LTD 2 Kazimir Malevich str., 84, Kyiv, 03150, Ukraine e-mail: elena-shepel@ukr.net
Kлючовi слова: цитрат германт, лтополкахарид, ооцити, клтини гранульози, ушкодження ДНК, апоптоз, некроз
Key words: germanium citrate, lipopolysaccharide, oocytes, granulosa cells, DNA damage, apoptosis, necrosis
Реферат. Протективный эффект цитрата германия при эндотоксин-индуцированной овариальной дисфункции у мышей. ^ндра^ая Е.А., Грушка Н.Г., Km^y^HKO В.Г., Павлович С.И., Срибна В.А., Янчий Р.И.
Известно, что эндотоксин граммнегативных бактерий - липополисахарид (ЛПС) вызывает нарушение репродуктивной функции у женщин. Овариальную дисфункцию при эндотоксемии воспроизводили введением ЛПС самкам мышей (3 мг/кг) и исследовали возможное протективное действие цитрата германия (Ge), полученного с помощью нанотехнологии. Введение ЛПС приводило через 24 часа к патологическим изменениям в яичниках: угнетению мейотического созревания ооцитов in vitro, повреждению ДНК в клетках гранулезы (по оценке методом ДНК-комет) и снижению их жизнеспособности за счет усиления как некроза, так и апо-птоза. Предобработка мышей цитратом Ge (100 мкг/кг, внутрибрюшинно дважды: за 24 и 1 час до ЛПС) эффективно снижала генотоксический стресс и клеточную гибель. Инъекции цитрата Ge в условиях действия
О.А. Кондрацька I, Н.Г. Грушка I,
B.Г. Каплуненко 2,
C.I. Павлович I, В. О. Срiбна I,
ЛПС способствовали повышению качества ооцитов (по результатам улучшения мейотического созревания), что может быть связано с цитопротективным действием препарата на клетки микроокружения ооцитов. Наши данные свидетельствуют о перспективности применения цитрата Ge для восстановления репродуктивной функции при эндотоксемии.
Abstract. Protective effect of germanium citrate in endotoxin-induced ovarian dysfunction in mice. Kondratska O.A., Grushka N.G., Kaplunenko V.G., Pavlovych S.I., Sribna V.O., Yanchii R.L._Now it is known that endotoxin of gramnegative bacteria - lipopolysaccharide (LPS) is associated with disturbances of reproductive function in women. To simulate an ovarian dysfunction in endotoxemia and to explore a possible protective action of germanium (Ge) citrate obtained via nanotechnology we used LPS administration into female mice (3 mg/kg). Treatment with LPS caused pathological changes in mouse ovaries at 24h post-injection: an impairment of oocyte maturation in vitro, DNA damage in granulosa cells (as estimated by DNA-comet assay) and a decrease in their viability by increasing both necrosis and apoptosis. Pretreatment of mice with Ge citrate (i.p. 100 mkg/kg, 2 injections: 24 h and 1 h before LPS) was effective to reduce genotoxic stress and cell death. Ge citrate administration to LPS-treated mice significantly enhanced oocyte quality (as indicated by improvement in oocyte maturation) that may be due to cytoprotective effect of this compound on surrounding follicular cells. Our results support potential therapeutic application of Ge citrate to improve reproductive function in endotoxemia.
Дослщження останнього часу доводять, що певш розлади жшочо! репродуктивно! функци пов'язаш з дieю ендотоксину грамнегативних мiкроорганiзмiв - лшополюахариду (ЛПС). Сту-тнь циркуляторно! ендотоксеми позитивно корелюе iз запаленням яечниюв у жшок [12]. ЛПС попршуе стеро!догенез та фолшулогенез, що спричиняе оварiальну дисфункщю та без-плщдя, причому цей ендотоксин може безпо-середньо впливати на клггини гранульози через Toll-подiбний рецептор 4 (TLR4) [15]. Дiя бак-терш або бактерiальних продукпв, таких як ЛПС, призводить до невдач застосування допо-мiжних репродуктивних технологш, включаючи ушкодження ооципв, попршення якост ем-брюшв, утруднення екстракорпорального заплщ-нення та ускладнення ваптносп [6, 12, 15].
Отже, нагальною потребою е розробка i застосування протективних та лiкувальних за-собiв при ендотоксин-опосередкованих розладах репродуктивно! функци, серед яких ниш активно дослщжуються оргашчш сполуки германiю (Ge), що мають широкий спектр бюлопчно! ди i певнi протективнi властивостi [1, 7, 13]. Ми вико-ристовували вггчизняний препарат - цитрат Ge, отриманий методом електроiмпульсно! нанотех-нологи [3], який характеризуеться екологiчною безпекою, високою чистотою та бiодоступнiстю. Було показано, що випоювання цим препаратом сприяло покращенню iмунобiологiчних по-казниюв щурiв, у тому числi !х фертильностi i молочностi самиць [1, 4, 10]. У представленш робой ми застосовували розчин цитрату Ge на моделi ендотоксеми з метою дослщження його впливу на ушкоджену функцiю яечникiв у мишей.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
Дослiдження проводили на статевозрших самицях мишей лши Альбiно (масою 18-22 г).
При робот дотримувались Мiжнародних прин-цишв Свропейсько! конвенци про захист хре-бетних тварин Ради Свропи (Страсбург, 1986). Системну ендотоксемда моделювали за допо-могою внутрiшньоочеревинного (в/о) введення ЛПС (E. coli 0111:B4, Sigma, USA) у дозi 3 мг/кг маси мишь Через 24 год. тварин тддавали ефiр-ному наркозу й вилучали матерiал для до-слiджень. Водний розчин цитрату Ge (ТОВ "На-нотехнологи i наноматерiали", Ки!в, Укра!на) доводили до необхщного об'ему фiзiологiчним розчином - ФР (0,4 мл/20 г маси миш^ i застосовували в/о в дозi 100 мг/кг, двiчi: за 24 год. та за 1 год. до введення ЛПС. Контрольними були тварини, яким вводили ФР.
Кттини яечниюв мишей видшяли нефермен-тативно (мехашчно). Мейотичне дозрiвання ооципв дослiджували при !х культивуваннi в стерильних умовах у середовищi DME з 15 ммоль/л HEPES, при 37°С. Через 2-4 год. куль-тивування пiдраховували ооцити, що перебували на стади метафази I - розчинення зародкового пухирця, а тсля 20 год. - на стади метафази II -формування першого полярного тiльця.
Оцiнку життeздатностi та шляхiв загибелi клiтин гранульози проводили безпосередньо тсля !х видiлення методом прижиттевого под-вiйного фарбування флуоресцентними барвни-ками нукле!нових кислот Хехст 33342 i йодиду пропiдiума (Sigma-Aldrich, USA), як описано нами рашше [14]. Апоптоз оцiнювали за вира-женою конденсащею хроматину та його пери-феричним розташуванням, ущiльненням та фраг-ментацiю ядер. Клiтини з ушкодженими мембранами (iз зафарбованими йодидом пропiдiума червоними ядрами) рахували як некротичнi. Клiтини без ушкодження плазматично! мембрани та без апоптотичних змiн ядер рахувались як живь Використовували вiдеосистему передачi
72
МЕДИЧН1ПЕРСПЕКТИВИ / MEDICNIPERSPEKTIVI
зображення на комп'ютер з люмшесцентного мшроскопа "Люмам И-1" (iмерсiйний об'ектив х90), аналiзували не менше нiж 200 клггин.
Ушкодження ДНК оцшювали методом луж-ного гель-електрофорезу iзольованих клггин (метод ДНК-комет) за [9], з модифшащями, як описано ранiше [2]. Аналiз не менше нiж 100 ДНК-комет на кожнш електрофореграмi здш-снювали вiзуально, використовуючи люмшес-центний мшроскоп "Люмам И-1" (водно^мер-сшний об'ектив ><30). 1х розподiляли за загально-визнаною класифiкацiею (залежно вщ ств-вiдношення ДНК у "головГ' та "хвосп" комети) на 5 клашв з числовим значенням вщ 0 до 4 [9]. Ступшь ушкодження ДНК визначали як ii^^c ДНК - комет (1дк): 1дк =(0n0+1 nj+2 П2+З Пз+4 щ)/£, де n0- n4 - число ДНК-комет кожного типу, £ -сума шдрахованих комет.
Результати обробляли в програмi GraphPad Prism version 5.00 for Windows (GraphPad Software, USA). Пюля перевiрки на нормальнють розподiлу за критерiем Колмогорова-Смирнова аналiз трьох груш даних (не менше 6 мишей у кожнш) проводили з використанням one-way ANOVA з подальшим множинним порiвнянням за тестом Newman-Keuls. Вiдмiнноcтi вважали
статистично значущими при р<0,05. Результати виражали як M±m (середне±стандартна похибка).
РЕЗУЛЬТАТИ ТА IX ОБГОВОРЕННЯ
Використання ЛПС е апробованою моделлю як системних, так i органних iмуноiндукованих процешв. Однак рiзнi види й лшп лабораторних тварин, а також особливосп препаратiв ЛПС E. coli рiзних cеротипiв зумовлюють вираженicть реакци на ендотоксин. Ми вводили ЛПС E. coli (серотип 0111:B4) в/о самицям мишей у дозi 3 мг/кг маси тша, яка за проведеними рашше до-cлiдженнями спричиняла через 24 год. змши маси тварин, ректально! температури та лейкограми кровi (загальна кiлькicть нейтрофiлiв зростала в 3,1 разу, паличкоядерних — у 4,0 рази, р<0,001). На rai зазначених системних змiн вiдбувалоcя по-рушення функцiй органiв, зокрема яечниюв. Вве-дення ЛПС пригнiчувало мейотичне дозрiвання ооцитiв in vitro (рис. 1): вщсоток ооцитiв, що досягали як стадй метафази I, так i метафази 2, був нижчим, шж у контролi. У мишей, яким вводили цитрат Ge на тлi ЛПС, суттево шдвищувалася кшь-юсть ооцитiв з розчиненим зародковим пухирцем та формуванням першого полярного тшьця (рис. 1), тобто цей препарат сприяв покращенню оогенезу, порушеного за умов ендотоксемп.
Мейотичне дозрiвання
100 1
90 -
80 -
70 -
60 -
50 -
40 -
30 -
20 -
10 -
0 -1
Метафаза 1 Метафаза 2
□ Контроль ПЛИС HGe+ЛПС
Примiтки: * - р<0,05 вiдносно контролю - введення ФР; + - рР<0,05, ++ - Р<0,01 вiдносно ди ЛПС.
Рис. 1. Вплив введення ЛПС та цитрату Се (Се+ЛПС) самицям мишей на вiдсоток ооцимв,
що досягли метафази I та метафази II
Розвиток i яюсть ооцитiв у багатьох аспектах чин порушення оогенезу, доcлiджували наявнicть залежить вiд функцiонального стану клiтин !х пошкоджень ДНК, життездатнicть та загибель мiкрооточення. Тому, з метою визначення при- кштин гранульози. Методом гель-електрофорезу
+
поодиноких кл^ин було встановлено, що вве-дення ЛПС збшьшувало iнтегральний показник, що характеризуе ушкодження ДНК - iндекс ДНК-комет (1днк) - з 1,56±0,23 у контролi до 2,98±0,08 (р<0,001). За умов ендотоксемп (рис. 2) значно зростала кiлькiсть клiтин з високим рiвнем розривiв ДНК (комети класiв 3, 4). Лужна модифшащя методу ДНК-комет дала можливють визначити розриви ниток ДНК, лужно-лабшьш сайти та мюця неповно! ексцизшно! репарацп. Отже, отримаш результати свiдчать, що ендо-токсемiя спричиняе сильний генотоксичний
стрес клггин фолiкулярного оточення ооцитiв. Введення цитрату Ge призводило до суттевого зменшення 1днк з 2,98±0,08 за умов дп ЛПС до 1,62±0,13 (р<0,001). Вiдбувалось зниження вщ-сотка клггин iз сильно пошкодженою ДНК до рiвня показникiв у контрольних тварин, тодi як вiдсоток клiтин з штактною або мало ушкодже-ною ДНК суттево збiльшувався (рис. 2), тобто застосований препарат сприяв значному по-слабленню генотоксичного стресу клггин яечника, спричиненого ЛПС.
Кшьккть кМтин з р1зним ступенем ушкодження ДНК
□ Контроль ШЛПС □Ge+ЛПС
Прим1тки: *** - р<0,001 вщносно контролю - введення ФР; +++ - р<0,001 пор1вняно з д1ею ЛПС.
Рис. 2. Вплив введення ЛПС та цитрату Се (Се+ЛПС) на в1дсоток фол1кулярних кл1тин з низьким р1внем пошкодження ДНК (комети клас1в 0 та 1) та кл1тин 1з сильним ушкодженням ДНК (комети клас1в 3 та 4)
Як вщомо, при змiнах у ДНК вщбуваеться И репарацiя або (при сильному ушкодженш й не-можливостi репарацп) запускаеться процес ел> мшацп клггини. За умов надмiрних порушень та недостатносп ресурсiв клiтини И загибель вщбуваеться не апоптозом (бiльш фiзiологiчним шляхом), а за некротичним шляхом - iз розривом плазматично! мембрани та виходом прозапаль-ного та iмуногенного клiтинного вмiсту назовнi. Ми встановили, що при дп ЛПС значно змен-шувався вiдсоток живих клiтин гранульози через посилення як некрозу, так i апоптозу (рис. 3). Введення цитрату Ge покращувало життездат-нiсть клiтин. За таких умов рiвень апоптозу i, що особливо важливо, рiвень загибелi клггин за про-запальним некротичним шляхом суттево змен-шувався (рис. 3). Таким чином, нашi дослщжен-
ня засвiдчили виражену цитопротективну дiю цитрату Ge при ендотоксемп: як на рiвнi ДНК (збереження генетичного апарату), так i на рiвнi посилення життездатносп клiтин та зменшення 1х загибелi.
Вiдомо, що ЛПС е лпандом TLR4, який екс-пресований переважно на клiтинах вродженого iмунiтету i викликае !х активацiю та синтез прозапальних чинникiв, серед яких активнi форми кисню та азоту, що спричиняють окси-дативний та нiтрозативний стрес клггин [6, 15]. Наслiдком цього е пошкодження ДНК та кт-тинна загибель, що може бути одним з меха-нiзмiв розладiв функцiй яечникiв, як виявлених у цьому дослiдженнi при ендотоксемп, так i за шших моделей ушкодження репродуктивно! функцп [5, 8, 11, 14]. За ЛПС-вдукованого
74
МЕДИЧН1ПЕРСПЕКТИВИ / МБЫСШ РЕЯЗРЕКТШ
запалення цитопротективна дiя цитрату Ge може бути пов'язана з його антиоксидантними вла-стивостями, що пiдтверджуeться послабленням перекисного окиснення лiпiдiв при застосуванш сполук Ge, у тому чист й цитрату [1, 7, 10]. Це
не виключае i прямо! позитивно! ди на функцii ооцш!в та фолiкулярних клiтин, оскiльки показано, що препарати Ge прямо впливають на функцiональний стан iмуноцитiв та iнших кл> тин, а також на рiвень експресii гешв [7, 10, 13].
Кл1тинна загибель
□ Контроль ПЛПС DGe+ЛПС
Примiтки: * - p<0.05, *** - p<0.001 вiдносно контролю - введения ФР, ++ - p<0.01, +++ - р <0,001 по вщношенню до ди ЛПС.
Рис. 3. Вплив введения ЛПС та цитрату Ge (Ge+ЛПС) на життездатнкть, некротичну та апоптотичну загибель кл1тин гранульози. За вксю ординат - в1дсоток живих кл1тин i кл1тин з морфолопчними проявами апоптозу або некрозу
ВИСНОВКИ
1. При введенш ЛПС мишам (модель ендо-токсемii) вiдбувалися патолопчш змiни в яеч-нику: попршувалося мейотичне дозрiвання ооцитiв, спостерiгалося ушкодження ДНК клiтин гранульози, зменшення ix життездатностi та по-силення некрозу й апоптозу.
2. Цитрат Ge, застосований на rai ендоток-семи, чинив виражений цитопротективний ефект
на кл^ини гранульози: послаблював гено-токсичний стрес, значно зменшував загибель та шдвищував життездатнiсть клiтин.
3. Введення цитрату Ge покращувало яюсть ооцитiв (за даними мейотичного дозрiвання), що, принаймнi частково, пов'язано з його протек-тивною дiею на клггини мiкрооточення ооцитiв.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Гематологiчнi i бiохiмiчнi показники орга-нiзму щурiв F2 у перюд тривалого випоювання нано-Ge цитрату / Р.С. Федорук, У.1. Тесарiвська, М.1. Хра-бко [та ш.] // Бiол. тварин. - 2017. - Т. 19, № 3. - С. 115121. doi: http://dx.doi.org/10.15407/animbiol19.03.115
2. Грушка Н.Г. Вплив шпбпора полi (АДФ-рибо-зо) полiмерази 4-гiдроксиквiназолiну на загибель iмуно-компетентних клiтин за умов iмунокомплексноi патоло-г]11 у мишей / Н.Г. Грушка // Фiзiол. журнал. - 2017. -Т.63, №1. - С.43-45. doi: https://doi.org/10.15407/fz63.01.043
3. Пат. Украiни № 38391. Споаб отримання кар-боксилатiв металiв «Нанотехнолопя отримання кар-боксилатiв металiв» / М.В. Косшов, В.Г. Каплуненко
МПК (2006): C07C 51/41, C07F 5/00, C07F 15/00, C07C 53/126 (2008.01), C07C 53/10 (2008.01), A23L 1/00, B82B 3/00. Опубл. 12.01.2009, бюл. № 1/2009.
4. Р1ст, розвиток i репродуктивна функщя са-миць щур1в та життездатишсть ix приплоду за випоювання р1зних доз цитрату гермашю / Р.С. Федорук, М.1. Храбко, М.М. Цап, О.Е. Марцинко // Бю-лопя тварин. - 2016. - Т. 18, № 3. - С. 97-106. doi: http://dx.doi.org/10.15407/animbiol18.03.097
5. Срiбна В.О. Однонитковi розриви ДНК клтшн фолiкулярного оточення ооцитiв, тимуса i лiмфатич-них вузлiв за умов експериментального iмунокомплекс-ного ушкодження та застосування аитиоксиданга /
В.О. Cpi6ra, Н.Г. Грушка, Р.1. Янчш // Вiсник проблем бюлоги i медицини. - 2016. - Вип. 2(3). - С. 195-199.
6. Эндотоксиновая агрессия в патогенезе хронических воспалительных заболеваний органов малого таза и бесплодия или антиэндотоксиновое направление их лечения / Г.Г. Энукидзе, И.А. Аниховская, А.А. Марачев, М.Ю. Яковлев // Физиология человека. - 2006. - Т. 32, № 3. - С. 117-123. doi: 10.1134/S0362119706030169
7. Advances in Effect of Germanium or Germanium Compounds on Animals - A Review / L. Li, T. Ruan, Y. Lyu, B. Wu // Journal of Biosciences and Medicines. -2017. - Vol. 5 - P. 56-73. doi: 10.4236/jbm.2017.57006
8. Ceria nanoparticles boost activity of aged murine oocytes / N.Y. Spivak, E.A. Shepel, N.M. Zholobak [et al.] // Nano Biomed. Eng. - 2012. - Vol. 4, № 4. -P. 188-194. doi: 10.5101/nbe.v4i4.p188-194
9. Collins A.R. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications, and limitations / A.R. Collins // Mol Biotechnol. - 2004. - Vol. 26, N 2. -P. 50-55. doi: 10.1385/MB:26:3:249
10. Dolaychuk O.P. Physiological Reactivity and Antioxidant Defense System of the Animal Organism Induced by Germanium, Chromium, and Selenium "Nano-aquacitrates" / O.P. Dolaychuk, R.S. Fedoruk, S.J. Kro-pyvka // Agricultural Science and Practice. - 2015. - № 2. - Р. 50-55. doi: 10.15407/agrisp2.02.050
11. Inhibition of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) protects against experimental immune complex-induced ovarian failure in mice / E. Shepel, N. Grushka, N. Makogon [et al.] // Int J Health Sci Res. - 2016. -Vol. 6, N 11. - P. 103-108.
12. Metabolic endotoxaemia-a potential novel link between ovarian inflammation and impaired progesterone production / K. Tremellen, N. Syedi, S. Tan, K. Pearce // Gynecol Endocrinol. - 2015. - Vol. 31, N 4. - P. 309312. doi: 10.3109/09513590.2014.994602
13. Nakamura T. The Oral Intake of Organic Germanium, Ge-132, Elevates a-Tocopherol Levels in the Plasma and Modulates Hepatic Gene Expression Profiles to Promote Immune Activation in Mice / T. Nakamura, T. Takeda, Y. Tokuji // Int. J. Vitam. Nutr. Res. - 2014. - Vol. 84, N 3-4. - P. 183-195. doi: 10.1024/0300-9831/a000205
14. Poly (ADP-ribose) polymerase inhibitor, 3-ami-nobenzamide, protects against experimental immune ovarian failure in mice / N. Makogon, T. Voznesenskaya, T. Bryzgina [et al.] // Reprod. Biol. - 2010. - Vol. 10, N 3. - P. 215-226.
15. Shimizu T. Molecular and cellular mechanisms for the regulation of ovarian follicular function in cows / T. Shimizu // J. Reprod. Dev. - 2016. - Vol. 62, N 4. -P. 323-329. doi: 10.1262/jrd.2016-044
REFERENCES
1. Fedoruk RS, Tesarivska UI, Khrabko MI, Tsap MM, Dolaychuk OP, Kropyvka SI. [Haematological and biochemical parameters of the F2 rats organism in a period of prolonged watering of nano-Ge citrate]. Biol. Tvarin. 2017;19(3):115-21. Ukrainian. doi: http://dx.doi.org/10.15407/animbiol19.03.115
2. Grushka NG. [The effect of poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor 4-hydroxyquinazoline on death of immune cells under immune complex-mediated injury in mice]. Fiziol. Zh. 2017;63(1):43-50. Ukrainian. doi: https://doi.org/10.15407/fz63.01.043
3. Kosinov MV, Kaplunenko VH. [Pat. of Ukraine N 38391. 2009. IPC (2006): C07C 51/41, C07F 5/00, C07F 15/00, C07C 53/126 (2008.01), C07C 53/10 (2008.01), A23L 1/00, B82B 3/00. Method for metal car-boxylates obtaining "Nanotechnology of obtaining metal carboxylates"]. Publ. 12.01.2009. Ukrainian.
4. Fedoruk RS, Khrabko MI, Tsap MM, Martsyn-ko OE. [Growth, development and reproductive function of female rats and their offspring viability at the conditions of the watering of different doses of citrate germanium]. Biol.Tvarin. 2016;18(3):97-106. Ukrainian. doi: http://dx.doi.org/10.15407/animbiol18.03.097
5. Sribna V, Grushka N, Yanchiy R. [DNA singlestrand breaks of follicular cells surrounding the oocyte, thymic and lymph nodes cells under the conditions of experimental immune complex-mediated inflammation and antioxidant treatment]. Visnyk Probl Biol Med. 2016; 2(3):195-99. Ukrainian.
6. Enukidze G, Anikhovskaya I, Marachev A, Yakovlev M. [Endotoxin aggression in the pathogenesis of chronic inflammatory diseases of small pelvis organs and infertility, or an antiendotoxin approach to their treatment]. Fiziol Cheloveka. 2006;32(3):117-23. Russian. doi: 10.1134/S0362119706030169
7. Li L, Ruan T, Lyu Y, Wu B. Advances in Effect of Germanium or Germanium Compounds on Animals -A Review. Journal of Biosciences and Medicines. 2017;5:56-73. doi: 10.4236/jbm.2017.57006
8. Spivak NYa, Shepel EA, Zholobak NM, Shcher-bakov AB, et al. Ceria nanoparticles boost activity of aged murine oocytes. Nano Biomed. Eng. 2012;4(4), 18894. doi: 10.5101/nbe.v4i4.p188-194
9. Collins AR. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications, and limitations. Mol Biotechnol. 2004;26(3):249-61. doi: 10.1385/MB:26:3:249
10. Dolaychuk OP, Fedoruk RS, Kropyvka SJ. Physiological Reactivity and Antioxidant Defense System of the Animal Organism Induced by Germanium, Chromium, and Selenium "Nanoaquacitrates". Agricultural science and practice. 2015;2:50-55. doi: 10.15407/agrisp2.02.050
11. Shepel E, Grushka N, Makogon N, Voznesens-kaya T, Yanchii R. Inhibition of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) protects against experimental immune complex-induced ovarian failure in mice. Int J Health Sci Res. 2016;6(11):103-8.
12. Tremellen K, Syedi N, Tan S, Pearce K. Metabolic endotoxaemia-a potential novel link between
76
МЕДИЧН1ПЕРСПЕКТИВИ / MEDICNIPERSPEKTIVI
ovarian inflammation and impaired progesterone production. Gynecol Endocrinol. 2015;31(4):309-12. doi: 10.3109/09513590.2014.994602
13. Nakamura T, Takeda T, Tokuji Y. The Oral Intake of Organic Germanium, Ge-132, Elevates a-To-copherol Levels in the Plasma and Modulates Hepatic Gene Expression Profiles to Promote Immune Activation in Mice. Int J Vitam Nutr Res. 2014;84(3-4):183-95. doi: 10.1024/0300-9831/a000205
14. Makogon N, Voznesenskaya T, Bryzgina T, Su-khina V, Grushka N, Alexeyeva I. Poly (ADP-ribose) polymerase inhibitor, 3-aminobenzamide, protects against experimental immune ovarian failure in mice. Reprod Biol. 2010;10(3):215-26.
15. Shimizu T. Molecular and cellular mechanisms for the regulation of ovarian follicular function in cows. J Reprod Dev. 2016;62(4):323-9. doi: 10.1262/jrd.2016-044.
♦
УДК 616-022.854.2-08: 615.37:612.112:577.112 https://doi.org/10.26641/2307-0404.2018.1(part 1).127241
е.В. Корецкая ДИНАМИКА Р1ВНЯ ЦИТОК1Н1В
П1Д ВПЛИВОМ Д1АЛ1ЗАТУ ЛЕЙКОЦИТ1В Л1ОФ1Л1ЗОВАНОГО (1МОДИНУ) НА ФОН1 АЛЕРГОСПЕЦИФ1ЧНО1 1МУНОТЕРАШ1 (АС1Т) ПИЛКОВИМИ АЛЕРГЕНАМИ У ХВОРИХ НА ПОЛ1НОЗ
КЗ «Днiпропетровське Knmi4ne об'еднання швидкоХмедичноХ допомоги» ДОР»
консультативно^агностичний центр
вул. В. Антоновича, 65, Днтро, 49006, УкраХна
PI "Dnipropetrovsk Clinical Association of Emergecy Medical Care "
Consultative and diagnostic center
V. Antovovycha str., 65, Dnipro, 49006, Ukraine
e-mail: el.kor.allergy@gmail.com
Ключовi слова: полтоз, алергоспецифiчна iмунотерапiя, дiалiзат лейкоцитiв лiофiлiзованого (1модину) Key words: pollinosis, allergen-specific immunotherapy, dialysate leukocyte lyophilized
Реферат. Динамика уровня цитокинов под влиянием диализата лейкоцитов лиофилизированного (Иммодина) на фоне аллергоспецифической иммунотерапии (АСИТ) пыльцевыми аллергенами у больных поллинозом. Корецкая Е.В. Проведен анализ IL-4, INF-y под влиянием диализата лейкоцитов лиофилизированного (Иммодина) на фоне АСИТ пыльцевыми аллергенами у больных поллинозом. Обследовано 104 человека обоего пола, страдающих поллинозом, средний возраст составил 34,3±1,0 год. Все пациенты ранее получали АСИТ. Показано, что до начала лечения у половины больных поллинозом (n=58 (55,8±4,9)%) уровень IL-4 в крови превышал норму. Уровень IFN-y в сыворотке крови, напротив, был пониженным и выходил за пределы референтного интервала. После предсезонной АСИТ на фоне диализата лейкоцитов лиофилизированного (Иммодин) отмечалось существенное снижение содержания в сыворотке крови IL-4 по сравнению с исходным уровнем - в 1,7 раза, или на 40,2% (p<0,001). Содержание IL-4 в сыворотке крови пациентов основной группы после лечения было на 32,0% ниже, чем у пациентов группы контроля (p<0,001). Уровень IFN-y повысился в 2,4 раза у пациентов основной группы и в 1,9 раза - в группе контроля. Итак, на фоне
