Научная статья на тему 'Прооксидантно-антиоксидантное состояние организма при окислительном стрессе в условиях модуляции L-аргинин-NO системы'

Прооксидантно-антиоксидантное состояние организма при окислительном стрессе в условиях модуляции L-аргинин-NO системы Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
257
45
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
NITRIC OXIDE / ANTIOXIDANT SYSTEM / LIPID PEROXIDATION / LIPOPOLYSACCHARIDE / ОКСИД АЗОТА / АНТИОКСИДАНТНАЯ СИСТЕМА / ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ / ЛИПОПОЛИСАХАРИД

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Глебов Андрей Николаевич

Целью данной работы было изучение параметров прооксидантно-антиоксидантного равновесия при окислительном стрессе на крысах в условиях модуляции L-аргинин-NO системы. Наименьшие нарушения при окислительном стрессе прооксидантно-антиоксидантного равновесия отмечались в условиях направленной селективной коррекции L-аргинин-NO системы.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Глебов Андрей Николаевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

The body prooxidant-antioxidant balance during an oxidative stress combined with a modulation of L-arginine-NO system

We aimed to study the parameters of prooxidant-antioxidant balance during an oxidative stress in the male laboratory rats combined with a modulation of L-arginine-NO system. The least prooxidant-antioxidant disbalances during the oxidative stress were observed after the selective inhibition of inducible NO synthase.

Текст научной работы на тему «Прооксидантно-антиоксидантное состояние организма при окислительном стрессе в условиях модуляции L-аргинин-NO системы»

Система оценивания проводилась с использованием чек — листов (лист экспертной оценки), разработанного для каждого навыки с учетом особенностей каждой манипуляции. Для оценки сложных умений обучающихся (сочетание клинического мышления, знаний и навыков) использовалась интеграционная объективная оценка с помощью виртуальных систем и роботов-симуляторов пациента, дополненная структурированным оценочным листом, заполненным экспертом, типа ОБСЕ.

Результаты и выводы: по результатам итогового испытания 51,7% студентов получили отличные оценки (86-90), 33,1% - хорошие (69-85) и 15,2% -удовлетворительные (51-68), средний балл в группе наблюдения составил 82,6 по 100-балльной си-

стеме. Таким образом, использование модульной схемы имитационного обучения способствует эффективному изучению и освоению сестринских практических навыков у студентов медицинского института, высокой мотивации и успеваемости обучающихся, о чем свидетельствует средний балл (82,6) в группе наблюдения по итогам сдачи практических навыков. Формирование модульной системы симуляционного обучения в освоении сестринских навыков должно осуществляться с чередованием модулей (этапов), причем критерием перехода на следующий этап являются показатели достаточного уровня мастерства предыдущего модуля, оцениваемые экспертами по разработанному чек листу.

Список литературы:

1. Tigay Zh. G., Dogotar O. A., Kostsova N. G., Akhuba L. G., Sopetik V. S., Organization of the simulation education in Institute of medicine of the Peoples' Friendship University of Russia.; В сборнике: The tenth European Conference on Biology and Medical Sciences - 2016. - P. 81-83.

2. The effectiveness of the simulation training of basic practical skills in 3rd-year medical students of the Peoples' Friendship University of Russia и Kostsova N. G., Dogotar O. A., Tigay Zh. G., Sopetik V. S., Akhuba L. G. В сборнике: The Tenth European Conference on Biology and Medical Sciences - 2016. - P. 79-81.

3. Importance of the simulation training in education of basic nursing skills of 2-year students of the Institute of medicine of peoples' Friendship University of Russia Dogotar O. A., Tigay Zh. G., Kostsova N. G., Sopetik V. S., Akhuba L. G. В сборнике: The Tenth European Conference on Biology and Medical Sciences - 2016. - P. 75-76.

4. Методы и формы симуляционного обучения в подготовке специалистов по специальности « Сестринское Дело» Косцова Н. Г. , Шубина Л. Б., Грибков Д. М., Тигай Ж. Г. , Доготарь О. А., Сопетик В. С., Шек Д. Л. Вестник последипломного медицинского образования. - 2015. - No 3. - P. 4-9.

DOI: http://dx.doi.org/10.20534/ELBLS-17-1-58-61

Glebov Andrey Nikolaevich, Belarusian State Medical University, PhD (Medicine), Assotiated Professor E-mail: hlebau@mail.ru

The body prooxidant-antioxidant balance during an oxidative stress combined with a modulation of L-arginine-NO system

Abstract: We aimed to study the parameters of prooxidant-antioxidant balance during an oxidative stress in the male laboratory rats combined with a modulation of L-arginine-NO system. The least prooxidant-antioxidant disbalances during the oxidative stress were observed after the selective inhibition of in-ducible NO synthase.

Keywords: nitric oxide, antioxidant system, lipid peroxidation, lipopolysaccharide.

The body prooxidant-antioxidant balance during an oxidative stress combined with a modulation of L-arginine-NO system

Глебов Андрей Николаевич, Белорусский государственный медицинский университет, кандидат медицинских наук, доцент E-mail: hlebau@mail.ru

Прооксидантно-антиоксидантное состояние организма при окислительном стрессе в условиях модуляции L-аргинин-NO системы

Аннотация: Целью данной работы было изучение параметров прооксидантно-антиоксидантного равновесия при окислительном стрессе на крысах в условиях модуляции Ь-аргинин-NO системы. Наименьшие нарушения при окислительном стрессе прооксидантно-антиоксидантного равновесия отмечались в условиях направленной селективной коррекции Ь-аргинин-NO системы.

Ключевые слова: оксид азота, антиоксидантная система, перекисное окисление липидов, липополисахарид.

Имеющиеся в настоящее время данные свидетельствуют о том, что окислительный стресс играет ведущую роль в генезе различных патологических состояний, таких как ишемия-реперфузия, атеросклероз, сердечная недостаточность, гипертензия, почечная недостаточность, кардиомиопатии. В основе развития окислительного стресса лежит чрезмерная выработка активных форм кислорода/азота или недостаточность клеточных механизмов защиты, ограничивающих их образование и негативное воздействие. Образование активных кислородных метаболитов играет ключевую роль в механизмах развития окислительного стресса, отражающего нарушение баланса в системе оксиданты-антиоксиданты [1, 127-135], т. е. прооксидантно-антиоксидантного равновесия. Свободный радикал N0 синтезируется в организме для обеспечения многих нормальных клеточных функций, однако высокие уровни N0, взаимодействуя с другими окислителями, образуют активные формы азота, которые повреждают различные клеточные мишени. Образуемый из N0 и О2*- перокси-нитрит в организме является сильным окислителем, реагирующим с различными биомолекулами (белки, липиды, ДНК). Активные формы кислорода и азота находятся в сложных взаимоотношениях, обеспечивающих как синергические, так и антагонические эффекты, которые зависят от изменения скорости образования N0 и О2*- [4, 22-24]. Целью данной работы было изучение параметров прооксидантно-антиоксидантного равновесия при окислительном стрессе в условиях коррекции Ь-аргинин-МО системы.

Методика исследований. Исследования были проведены на лабораторных крысах-самцах (п=72)

массой 200-220 г, содержавшихся в условиях вивария при температуре 20 °C. Окислительный стресс моделировали внутривенным введением липополисахари-да (ЛПС) от Escherichia coli в дозе 5 мг/кг «Sigma». Используются различные дозы этого препарата (наиболее часто применяются в дозе от 2 до 20 мг/кг) и способы введения [8, 968-972], позволяющие создавать различной степени тяжести окислительное повреждение. Нами была выбрана доза 5 мг/кг ЛПС внутривенно и продолжительность эксперимента 180 мин, что обеспечивало моделирование окислительного стресса средней степени тяжести. Коррекция L-аргинин-NO системы выполнялась внутривенной инъекцией L-аргинина в дозе 300 мг/кг — за 10 мин до введения липополисахарида, метилового эфира №-нитро-L-аргинина «Sigma» (L-NAME) в дозе 20 мг/кг, селективного ингибитора NO-синтазы — L-лизин-Nш -ацетамидина «Sigma» (L-NIL) в дозе 2 мг/кг через 45 мин после введения ЛПС. Через 180 мин после введения ЛПС осуществляли забор тканей (сердца, легких, печени, почек, мышц). По нашим данным и ряда авторов, используемые нами дозы и способы введения веществ для коррекции L-аргинин-ЫО системы наиболее приемлемы, так как обеспечивают достаточно значимую коррекцию NO-образующей функции организма 6, 1724-1732; 9, 986-972].Концентрацию диеновых конъюгатов (ДК) определяли по измерению конъюгированных диеновых структур из образуемых гидроперекисей полиненасыщенных жирных кислот [7, 58-73]. Уровень оснований Шиффа (ОШ) определяли по интенсивности флуоресценции хлороформного экстракта при длине волны возбуждения 344 нм и длине волны эмиссии 440 нм на спектроф-

луориметре «F-4010» «Hitachi» [7, 82-94]. Ката-лазная активность в биологическом материале оценивалась по количеству израсходованной перекиси водорода, способной образовывать с солями молибдена стойко окрашенный комплекс на спектрофотометре «СФ-46» при длине волны 410 нм [2, 107-116]. Содержание а-токоферола определяли по интенсивности флуоресценции гептанового экстракта при длине волны возбуждения 292 нм и длине волны флуоресценции (эмиссии) 325 нм на спектрофлуо-риметре «F-4010» фирмы «Hitachi» [2, 120-129]. Полученные данные статистически обрабатывались общепринятым методом вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента.

Результаты исследования. Полученные данные свидетельствуют о том, что при окислительном стрессе в тканях интенсифицируются процессы ПОЛ. Уровень диеновых конъюгатов возрастал на 137.6% (p<0.001) - в сердце, 184.1% (p<0.001) - в лёгких, 101.2% (p<0.001) - в печени, 90.4% (p<0.001) -в почках; а оснований Шиффа - 99.2% (p<0.001) -в сердце; 111.3% (p<0.001) - в лёгких; 81.8% (p<0.001) - в печени; 121.3% (p<0.001) - в почках. Наименьшие нарушения при окислительном стрессе прооксидантно-антиоксидантного равновесия в тканях отмечались в условиях направленной селективной коррекции L-аргинин-NO системы. При этом прирост содержания диеновых конъюгатов был меньше на 27.6% (p<0.05) в сердце, 32.6% (p<0.01) 27.4% (p<0.02) в печени, 25.1% (p<0.02) в почках; а оснований Шиффа на 13.8% (p<0.01) в сердце; 26.1% (p<0.001) в лёгких; 19.6% (p<0.001) в печени; 16.8% (p<0.001) в почках по отношению к контрольной группе, получавшей ЛПС.

Учитывая значимость антиоксидантной системы (АС) в поддержании прооксидантно-антиоксидант-

ного равновесия в организме, очередной задачей было изучение влияния на основные факторы системы антиоксидантной защиты введения в кровоток ЛПС. Так, полученные данные свидетельствуют о том, что при окислительном стрессе в тканях снижается активность каталазы и содержание а-токоферола. Наиболее значимо активность каталазы уменьшилась в сердце (49 .6%, р<0 .001), в лёгких (51 .7%, р<0 .001), в печени (50 .9%, р<0 .001), в почках (57 .2%, р<0 .001), а уровень а -токоферола в лёгких (54 .9%, р<0 .001). Введение в условиях окислительного стресса Ь-ОТЬ увеличивало значение этих показателей антиоксидантной защиты, в сравнении с группой животных получавших только ЛПС. Ь-аргинин и неселективный блокатор Ь-ЫАМЕ столь выраженного защитного эффекта не оказывали.

Получены противоречивые данные об эффекте ингибирования МО-синтазы, что, возможно, связано с различиями в используемых моделях септического шока и применяемыми дозами ингибиторов синтеза N0, стадией, на которой вводятся коррегирующие средства и реальной местной концентрацией N0 [5, 3873-3881]. Эффект N0 (протекторный или депрессивный) зависит от выраженности окислительного стресса. Если повышенное образование N0 уравновешивается умеренным ростом кислородных радикалов, то он оказывает полезный эффект, и, наоборот, при чрезмерном образовании радикалов по отношению к нему индуцируются повреждающие эффекты [3, 119-132].

Таким образом, полученные данные о характере изменения исследуемых показателей перекисного окисления липидов при окислительном стрессе в условиях введения селективного ингибитора индуцибильной изоформы N0-синтазы демонстрируют вклад монооксида азота в развитие этого состояния и могут быть

использованы для создания путей его коррекции. Список литературы:

1. Зенков Н. К., Ланкин В. З., Меньщикова Е. Б. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты. - М., - 2001 . - 343 с.

2. Aruoma O. I., Cuppett S. L. Antioxidant Methodology: in vivo and in vitro Concepts. NY., - 1997 . - 256 р.

3. Berges A., Van Nassauw L., Bosmans J., Timmermans J. P., Vrints C.//Acta. Cardiol. - 2003 . - Vol. 58, - N 2 . - P. 119-132.

4. Brune B., Zhou J., von Knethen A.//Kidney Int. - 2003 . - No 84 . - P. 22-24 .

5. Connelly L., Palacios-Callender M., Ameixa C., Moncada S., Habbs A. J.//J. Immunol. - 2001 . - Vol. 166 . - P. 3873-3881 .

6. Fisher L. G., Horstman D. J., Hahnenkamp K., Kechner N. E., Rich G. F.//Anesthesiology. - 1999 . - Vol. 91, -No 6 . - P. 1724-1732 .

7. Rice-Evans С. A., Diplock A. T., Symons M. C. R. Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology: techmiques in free radical research. London, - 1991 . - 291 р.

The role and necessity of the simulation training in the treatment of emergency conditions

8. Zhang C., Walker L. M., Hinson J. A., Mayeux P. R.//Pharmacol. Exp. Ther. - 2000 . - Vol. 293, - No 3 . - P. 968-972 .

9. Glebov A. N., Zinchuk V. V. Blood oxygen-carrying function during the oxidative stress induced by lipopolysaccharide with a modification of the L-arginine-NO pathway//Annales Academiae Medicae Bialostocensis. - 2005 . - Vol. 50 . - P. 247-251 .

DOI: http://dx.doi.org/10 .20534/ELBLS-17-1-61-63

Kostcova Nadezhda Grigorievna, Peoples' Friendship University of Russia Simulation Training Centre E-mail: archelaya@yandex.ru Tigai Zhanna Gennadievna, Peoples' Friendship University of Russia Simulation Training Centre E-mail: shekz@mail.ru Shek Dmitrii Leonidovich, Peoples' Friendship University of Russia Simulation Training Centre E-mail: dls3191@gmail.com Akhuba Liia Georgievna, Peoples' Friendship University of Russia Simulation Training Centre E-mail: leka.166@mail.ru

The role and necessity of the simulation training in the treatment of emergency conditions

Abstract: presented modular scheme of training skills contributes to the high motivation, effective learning and development of practical skills among undergraduate medical students. This scheme is a criterion for the transition to the next, more difficult stage of development and regulates the right of access to summer practical training in hospitals.

Keywords: simulation medicine, modular scheme of simulation training, emergency medicine.

Косцова Надежда Григорьевна, Российский Университет Дружбы народов Центр симуляционного обучения E-mail: archelaya@yandex.ru Тигай Жанна Геннадьевна, Российский Университет Дружбы народов Центр симуляционного обучения E-mail: shekz@mail.ru Шек Дмитрий Леонидович, Российский Университет Дружбы народов Центр симуляционного обучения E-mail: dls3191@gmail.com

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.