CC BY
13
УДК 616.36.00:615.32
ПРОЛИФЕРАЦИЯ ГЕПАТОЦИТОВ И БИОАМИННЫЙ ФОН У КРЫС ПОСЛЕ РЕЗЕКЦИИ ЛЕВОЙ ДОЛИ ПЕЧЕНИ НА ФОНЕ ПРИЕМА БИОКОРРЕКТОРОВ
HEPATOCYTE PROLIFERATION AND BIOAMINE BACKGROUND IN RATS AFTER RESECTION OF HEPATIC LEFT LOBE BY INTAKE OF BIOCORRECTORS
О. Ю. Гурьева
O. Y. Guryeva
ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени. И. Н. Ульянова»,
г. Чебоксары
Аннотация. В работе устанавливается изменение содержания в гепатоцитах биогенных аминов у животных с резекцией левой доли печени, в пищевой рацион которых ежедневно комплексно вводили биологически активные вещества «Трепел» и «Сувар». Начиная с третьих суток после резекции левой доли печени и до конца эксперимента в гепатоцитах увеличивается содержание катехоламинов, серотонина и гистамина; параллельно происходит активация пролиферации гепатоцитов.
Abstract. The given research states the content changing of biogenic amines in hepatocytes of animals with resection of hepatic left lobe, in dietary intake of which the complex of biologically active substances «Trepel» and «Suvar» were daily introduced. Beginning with the third day after resection of hepatic left lobe and to the end of the experiment the content of catecholamines, serotonin and histamine is increasing in hepatocytes; simultaneously the activation of hepatocyte proliferation takes place.
Ключевые слова: крысы, гепатоциты, резекция левой доли печени, биологически активные вещества.
Keywords: rats, hepatocytes, resection of hepatic left lobe, biologically active substances.
Актуальность исследуемой проблемы. В последние годы в мире возрос интерес к изучению биогенных аминов при различных патологических процессах. В этой связи становится важным вопрос о патологии печени, занимающей восьмое место среди причин смертности населения.
Ранее нами были проведены морфометрические исследования, которые показали, что после резекции левой доли печени у крыс резко возрастала пролиферативная активность гепатоцитов [1]. Представляется целесообразным сопоставить биоаминный фон гепатоцитов с их пролиферативной активностью после резекции левой доли печени.
Целью данной работы явилось изучение содержания в гепатоцитах печени после резекции ее левой доли биогенных аминов: гистамина, серотонина, катехоламинов.
Материал и методика исследований. Экспериментальными животными явились 20 белых беспородных крыс массой 250-290 г, которым под глубоким эфирным масочным наркозом была резецирована левая доля печени. Они были разбиты на две группы: 10 опытных, 10 контрольных животных. Начиная с первых дней и до конца эксперимента опытным животным ежедневно к основному рациону одновременно комплексно добавляли биологически активные вещества «Трепел» в дозе 1,25 мг/кг массы тела и «Сувар» в дозе 40 мг/кг массы тела; питание осуществляли в режиме свободного доступа к пище и воде. Животных выводили из эксперимента эфиром на 3-, 5-, 10-, 14-и 30-й день после резекции. Полученные криостатные срезы печени обрабатывали люминесцентно-гистохимическими методами Фалька-Хилларпа (1962) в модификации Е. М. Крохиной (1969) и Кросса для выявления биогенных аминов. Уровень биогенных аминов определяли с помощью насадки ФМЭЛ-1А, установленной на люминесцентном микроскопе при выходном напряжении 800 В. Для определения уровня гистамина использовали интерференционный фильтр № 7 с длиной волны 515 нм, серотонина -№ 8 с длиной волны 525 нм, катехоламинов - № 6 с длиной волны 480 нм, зонд насадки - 0,5. Показания снимали с измерительной части вольтметра в условных единицах флюоресценции.
Контролем служили 10 крыс того же возраста, пола и массы, в рацион которых после резекции печени биологические вещества не вводились. Достоверность результатов проверяли по t-критерию Стьюдента.
Результаты исследований и их обсуждение. На 3 сутки после резекции у животных опытной группы ткань печени в области операционной раны была представлена гомогенным структурным детритом розового цвета, в котором определяются единичные бледные ядра погибших гепатоцитов, а также эритроциты. В краевой зоне повреждения наблюдаются гепатоциты с резко выраженными дистрофическими изменениями по типу белковой и жировой дистрофии. По краю резекции отмечается умеренное количество клеток, преимущественно лимфоцитов, гистиоцитов и макрофагов.
На 5 сутки после резекции: в области резекции лежат гепатоциты со слабовыра-женными дистрофическими изменениями. В удалении от зоны резекции подавляющее число гепатоцитов имеет морфологически нормальное строение. В месте повреждения наблюдается большое количество разнообразных клеток. Отмечается гипертрофия гепа-тоцитов, которая в наибольшей степени выражена по месту резекции. На периферии клеточного инфильтрата определяются вытянутые клетки фибробластического характера и нежные тонкие волокна.
На 10 сутки сохраняется полнокровие органа, фрагментация балок в дольках, нек-ротизированные гепатоциты. Регистрируются участки компенсаторной гипертрофии печени. В гепатоцитах отмечаются дистрофические изменения по типу белковой дистрофии. В клеточном инфильтрате преобладают фибробласты, по периферии прослеживаются нежные волокна.
На 14-й день в зоне резекции наблюдаются небольшие участки зрелой волокнистой соединительной ткани, богатой волокнами и клетками типа фибробластов и фиброцитов, с небольшим количеством элементов лимфоидного типа.
Зона резекции печени на 30 сутки была представлена зрелой волокнистой соединительной тканью, богатой волокнами и содержащей клетки типа фибробластов и фиброцитов.
В удалении от зоны резекции печеночная ткань имела нормальную структуру. Размеры ядер гепатоцитов вариабельны.
У контрольных оперированных животных на 3 сутки на фоне выраженного полнокровия в системе воротной вены балочная структура долек печени нарушена. Вокруг участка резекции отмечаются белковая дистрофия гепатоцитов и большое количество лимфоидных клеток.
На 5 сутки очаг повреждения освобождается от эритроцитов и погибшей ткани, формируются молодые мезенхимальные клеточные элементы.
На 10 сутки зона резекции представлена волокнистой соединительной тканью, богатой клетками и волокнами. Из клеток преобладают вытянутые элементы типа фиброб-ластов и фиброцитов. В удалении от участка резекции ткань печени имеет хорошо выраженное балочное строение, гепатоциты имеют четкие границы; вблизи от места повреждения сохраняется гипертрофия гепатоцитов.
На 14-й день балочное строение печени восстанавливается у 50 % контрольных крыс. Местами определяется стаз капилляров, белковая дистрофия, полиморфизм гепатоцитов и фрагментация долек. Фокусы компенсаторной гипертрофии наблюдаются по всей поверхности среза печени. Участок резекции полностью замещается зрелой волокнистой соединительной тканью.
На 30 сутки балочное строение печени восстанавливается у 100 % контрольных животных. В гепатоцитах признаки дистрофии отсутствуют, но сохраняется их гипертрофия, в наибольшей степени выраженная вблизи от места резекции. Участок резекции представлен массивным очагом соединительной ткани.
Морфометрическое исследование печени опытных групп выявило активацию пролиферативной активности гепатоцитов по сравнению с контролем.
Количественное исследование биогенных аминов установило их резкое увеличение в гепатоцитах по сравнению с контролем начиная с третьих суток после резекции печени. По мере заживления механической травмы содержание биогенных аминов в печени уменьшалось, однако до конца эксперимента их количество в гепатоцитах оставалось выше, чем у контрольных животных.
Уровень гистамина, серотонина, катехоламинов представлен в табл. 1, 2, 3.
Таблица 1
Уровень катехоламинов после резекции левой доли печени (М±т)
Сутки после операции Отделы печеночной дольки Желтые люминесцирующие клетки
центр пери< К и р е
к о к о к о
3 17,1+2,3 20,8+1,28 19,1+4,0 23,1+4,0 37,2+17,0 54,8+17**
5 18,2+1,2 19,7+0,2 23,7+0,8 24,5+0,8 74,5+7,2 81,7+7,2*
10 20,1+0,7 25,9+3,6 22,2+4,6 27,6+4,6 81,9+16,0 85,4+16,0
14 21,5+2,1 29,6+1,1* 22,2+0,8 28,0+0,8 51,6+17,0 64,8+16,8*
30 20,1+0,7 29,6+1,1* 23,2+0,8 28,4+0,8 48,9+3,9 52,8+3,9
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,001
Таблица 2
Уровень серотонина после резекции левой доли печени (М±т)
Сутки после операции Отделы печеночной дольки Желтые люминесцирующие клетки
центр периферия
к о к о к о
3 92,2+25,7 117,9+25,7 119,9+15,5 135,4+15,5 343,8+15,2 495,9+15,2**
5 139,2+14,4 174,8+14,4* 111,8+46,1 165,7+46,1* 771,1+10,9 782,0+10,9
10 142,3+37,1 195,2+37,1* 174,5+50,7 223,8+50,7** 624,5+21,5 698,9+21,5*
14 133,0+20,6 162,4+20,6* 131,3+5,9 137,2+5,9 312,0+11,6 428,4+11,6**
30 105,5+14,7 137,2+14,7* 152,7+7,5 160,2+7,5 444,8+80,4 525,2+80,4*
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,001.
Таблица 3
Уровень гистамина после резекции левой доли печени (М±т)
Сутки после операции Отделы печеночной дольки Желтые люминесцирующие клетки
центр периферия
к о к о к о
3 219,5+10,3 249,2+10,3 321,9+16 365,9+16,0* 676,9+21,0 887,0+21,0 *
5 231+49,0 280+49,0* 366,2+31,6 397,8+31,6* 935+91,6 1026,6+91,6*
10 179,3+80,8 260,1+80,8** 222,0+18,1 406,9+18,1* 671,7+36,8 708,5+36,8*
14 202,8+61,8 231,0+61,8* 341,6+46,5 388,1+46,5* 669,0+26,8 967,5+26,8**
30 220,0+21,0 220,9+19,1 305,5+24,7 310,1+24,7 776,1+15,2 928,6+15,2**
Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,001
Резюме. Проведенное исследование установило, что пролиферативные процессы в печени сопровождаются изменением содержания в гепатоцитах биогенных аминов. У животных с резекцией левой доли печени, в пищевой рацион которых ежедневно вводили биологически активные вещества «Трепел» и «Сувар», с третьих суток после резекции и до конца эксперимента в гепатоцитах увеличивается содержание катехоламинов, серотонина и гистамина.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гурьева, О. Ю. Морфологические изменения в печени крыс после резекции левой доли на фоне приема биокорректоров в ранние сроки после операции / О. Ю. Гурьева, И. И. Малышев, Л. П. Романова, О. В. Воробьева // Новые технологии в диагностике и лечении злокачественных новообразований : материалы межрегиональной научно-практической конференции. - Чебоксары, 2011. - С. 62-65.
