CC BY
27
Прогностическая значимость экспрессии гена BRCA1 у больных раком молочной железы
М.М. Цыганов, М.К. Ибрагимова, А.М. Певзнер, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская, Н.В. Литвяков
НИИ онкологии ФГБНУ«Томский национальный исследовательский медицинский центр РАН»; Россия, 634009 Томск, Кооперативный переулок, 5
Контакты: Матвей Михайлович Цыганов [email protected]
Введение. В настоящее время при выборе тактики лечения особое положение стал занимать BRCA-ассоциированный рак молочной железы, хотя изначально лекарственное лечение таких пациентов немногим отличалось от терапии спорадического заболевания. Хорошо известно, что наличие в опухолевых клетках такого явления, как дефицит гомологичной рекомбинации, обусловленный в основном дефектом генов BRCA1/2, связано с эффективностью лечения. В настоящее время активно изучается влияние снижения функциональной активности BRCA1 на чувствительность опухоли к ДНК-повреждающим агентам и на прогноз заболевания.
Цель исследования — оценка связи экспрессии гена BRCA1 в опухоли молочной железы с прогнозом заболевания. Материалы и методы. В исследование включены 111 больных раком молочной железы T1—4N0—3M0 (IIA—IIIB стадии) с морфологически верифицированным диагнозом. Оценена начальная и послеоперационная экспрессия гена BRCA1 в опухолевом материале. Из опухолевого материала до неоадъювантной химиотерапии и после нее выделяли РНК. Уровень экспрессии BRCA1 оценивали с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в режиме реального времени. Результаты. Были оценены отдаленные результаты лечения пациентов в зависимости от уровня экспрессии гена BRCA1. Установлено, что наличие гипоэкспрессии BRCA1 (уровень менее 1) в опухолевой ткани после неоадъювантной химиотерапии является благоприятным прогностическим фактором и сопряжено с высокими показателями безметастатической выживаемости (p = 0,0002). Кроме этого, аналогичный результат показан для пациентов, пролеченных по схеме неоадъювантной химиотерапии FAC (фторурацил, доксорубицин, циклофосфан) (p = 0,005). Несмотря на отсутствие статистически значимых различий, у 8 больных, пролеченных химиотерапией с включением препаратов платины, наблюдался низкий уровень экспрессии BRCA1 врезидуаль-ной опухоли и зарегистрирована 100 % безметастатическая и общая выживаемость.
Заключение. На основании полученных данных можно полагать, что аберрантное состояние гена BRCA1 (низкая экспрессия) в опухоли молочной железы может являться перспективным потенциальным маркером прогноза заболевания.
Ключевые слова: рак молочной железы, ген BRCA1, экспрессия, безметастатическая выживаемость, прогноз, дефицит гомологичной рекомбинации
Для цитирования: Цыганов М.М., Ибрагимова М.К., Певзнер А.М. и др. Прогностическая значимость экспрессии гена BRCA1 у больных раком молочной железы. Успехи молекулярной онкологии 2019;6(2):55—60.
cv
CV
us
и ш U
ж ш
и
DOI: 10.17650/2313-805X-2019-6-2-55-60
The prognostic significance of BRCA1 gene expression in patients with breast cancer
M.M. Tsyganov, M.K. Ibragimova, A.M. Pevzner, E. Yu. Garbukov, E.M. Slonimskaya, N. V. Litviakov
Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of Sciences; 5Kooperativny Pereulok, Tomsk 634009, Russia
Background. Nowadays, BRCA-associated breast cancer occupies a special position in the choice of treatment strategy. Although, the drug treatment of such patients was almost the same as the treatment of sporadic disease. Of particular interest is the assessment of the deficit of homologous recombination, which may include various dysfunctions of the BRCA1 gene. Moreover, it has been shown that a decrease in the functional activity of BRCA1 is reflected in the sensitivity of the tumor to DNA damaging agents, and the prognosis of the disease becomes more favorable.
Objective: assessment of the association of BRCA1 gene expression in a breast tumor with the prognosis of the disease. Materials and methods. The study included 111 patients with breast cancer T1—4N0—3M0 (stage IIA—IIIB), with a morphologically verified diagnosis. Initial and postoperative expression of BRCA1 in tumor material was evaluated. RNA was isolated from the tumor material before treatment and after neoadjuvant chemotherapy. The level of BRCA1 expression was assessed using reverse transcriptase quantitative real-time polymerase chain reaction.
Results. As a result of the study, long-term results of treatment of patients were evaluated depending on the level of BRCA1 gene expression. The presence of BRCA1 hypoexpression (level less than 1) in tumor tissue after neoadjuvant chemotherapy was found to be a favorable prognostic factor and is associated with high rates of metastasis-free survival (p = 0.0002). In addition, a similar result is shown for patients treated with the FAC (fluorouracil, doxorubicin, cyclophosphamide) neoadjuvant chemotherapy regimen (p = 0.005). Despite the absence of statistically significant differences, in 8patients who underwent chemotherapy with the inclusion of platinum drugs, there was a low level of BRCA1 expression in a residual tumor and 100 % non-metastatic and overall survival.
CV CV
us
Conclusion. Based on the data obtained, it can be assumed that the aberrant state of the BRCA1 gene (low expression) in a breast tumor may also be a promising marker for the prognosis of the disease, which confirms the undoubted relevance of the study, but also requires further detailed study.
Key words: breast cancer, BRCA1, expression, non-metastatic survival, forecast, lack of homologous recombination
For citation: Tsyganov M.M., Ibragimova M.K., Pevzner A.M. et al. The prognostic significance of BRCA1 gene expression in patients with breast cancer. Uspekhi molekulyarnoy onkologii = Advances in Molecular Oncology 2019;6(2):55—60.
и
Ш
u
X ш
и
Введение
В настоящее время определение наличия терминальных мутаций гена BRCA1 у больных раком молочной железы (РМЖ) и раком яичников является неотъемлемой частью выбора тактики лечения. При этом полученная информация позволяет обеспечить своевременные мероприятия по диагностике и профилактике заболевания. Кроме этого, установлено, что BRCA1-ассоциированный РМЖ в отличие от спорадической формы заболевания показывает высокую чувствительность к препаратам платины и PARP-ингибиторам, что делает возможным индивидуализацию выбора лекарственной терапии на основе молекулярно-генетиче-ских характеристик опухоли [1].
Важно отметить, что наличие терминальных мутаций определяет не только схему химиотерапевтиче-ского лечения, но и прогноз заболевания. Так, мета-анализ 2015 г. показал, что больные раком яичника с мутацией BRCA1 имели более высокие показатели общей выживаемости (ОВ) и безрецидивной выживаемости по сравнению с таковыми в контрольной группе, тогда как при РМЖ был продемонстрирован обратный результат: носительство мутации ассоциировалось с худшим прогнозом заболевания [2]. В одном из последних исследований также было показано, что возникновение реверсивных мутаций генов BRCA1 и BRCA2 в опухоли после неоадъювантной химиотерапии (НХТ) у пациентов с РМЖ сопряжено с плохим ответом на химиотерапию, развитием ранних рецидивов и смертью [3]. Большой интерес представляет оценка дефицита гомологичной рекомбинации, который может включать различные дисфункции гена BRCA1, такие как снижение экспрессии, развитие аллельного дисбаланса, делеция данного гена, потеря гетерозиготности, генетическая нестабильность опухоли и т. д. [4]. В результате дефицита гомологичной рекомбинации опухоль становится чрезвычайно чувствительной к ДНК-повреждающим агентам, а прогноз заболевания становится более благоприятным [5]. Таким образом, определение дисфункции гена BRCA1 в опухоли молочной железы может быть использовано в качестве потенциального биомаркера чувствительности химиотерапии и прогноза заболевания.
Цель исследования — оценка связи экспрессии гена BRCA1 в опухоли молочной железы с прогнозом заболевания.
Материалы и методы
В исследование были включены 111 больных РМЖ T1—4N0—3M0 (IIA—IIIB стадии) с морфологически
верифицированным диагнозом в возрасте 25—68 лет (средний возраст 48,0 ± 0,87 года), получавшие лечение в клинике НИИ онкологии Томского НИМЦ в период с 2006 по 2018 г. (табл. 1). В соответствии с Consensus Conference on neoadjuvant chemotherapy in carcinoma of the breast (26—28 апреля 2003 г., Филадельфия, Пенсильвания) [6] все больные получали 2—8 курсов НХТ по схемам FAC (фторурацил, доксорубицин, цикло-фосфан), CAX (циклофосфан, доксорубицин, капеци-табин), CP (циклофосфан, цисплатин) и монотерапию доцетакселом. Через 3—5 нед после НХТ больным выполняли операцию, затем — 2 курса адъювантной химиотерапии по схеме FAC, лучевую терапию и/или гормональное лечение назначали по показаниям. Исследование проводили в соответствии с Хельсинкской декларацией 1964 г. (исправленной в 1975 и 1983 гг.) и с разрешением локального этического комитета НИИ онкологии Томского НИМЦ (протокол № 1 от 14 января 2013 г.). Все пациенты подписали информированное согласие.
В качестве исследуемого материала использовали биопсийные опухолевые образцы (~10 мм3), взятые до лечения под ультразвуковым контролем, а также операционный материал (~60—70 мм3) после НХТ. Образцы опухоли помещали в раствор RNAlater (Ambion, США) и сохраняли при температуре —80 °С (после 24-часовой инкубации при температуре +4 °С) для дальнейшего выделения РНК.
Выделение РНК. Тотальная РНК была выделена из 111 парных образцов опухоли до лечения и после НХТ с использованием набора RNeasy mini kit Plus, содержащего ДНКазу I (Qiagen, Германия), с добавлением в раствор РНК ингибитора РНКаз Ribolock (Fermentas, Литва). Концентрацию и чистоту выделения РНК оценивали на спектрофотометре NanoDrop-2000 (Thermo Scientific, США) (125-210 нг/мкл; А260/А280 = 1,85-1,95; А260/А230 = 1,80-2,00). RIN (RNA Integrity Number) составил 7,6-8,0. Для получения комплементарной ДНК на матрице РНК проводили реакцию обратной транскрипции с помощью набора RevertAid™ (Thermo Scientific, США) со случайными гексанукле-отидами.
Количественная полимеразная цепная реакция. Уровень экспрессии гена BRCA1 (PubMed NM_007294.3) оценивали с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в режиме реального времени с оригинальными праймерами и зондами по технологии TaqMan (прямой праймер 5'-ACAGCTGTGTGGTGCTTCTGTG-3'; обратный
Таблица 1. Клинико-морфологические параметры обследованных больных раком молочной железы
Table 1. Clinical and morphological parameters examined breast cancer patients
Параметр n (%)
Возраст, лет: Age, years: <45 >45 38 (34,2) 73 (65,8)
Размер опухоли: Tumor size: T1 T2 T3 T4 14 (12,6) 82 (73,9) 7 (6,3) 8 (7,2)
Лимфогенное метастазирование: Lymphogenous metastasis: N0 N1 N2 N3 44 (39,6) 47 (42,3) 10 (9,0) 10 (9,0)
Молекулярный подтип: Molecular subtype: люминальный В luminal B трижды негативный triple negative НЕЯ2-положительный HER2-positive 78 (70,3) 12 (10,8) 21 (18,9)
Схема неоадъювантной химиотерапии: Neoadjuvant chemotherapy scheme: CAX FAC доцетаксел docetaxel CP 28 (25,2) 45 (40,9) 30 (27,0) 8(7,2)
Ответ на неоадъювантную химиотерапию: Response to neoadjuvant chemotherapy: прогрессирование progression стабилизация stabilization частичная регрессия partial regression полная регрессия full regression 12 (10,8) 34 (30,6) 57 (51,4) 8 (7,2)
Примечание. CAX — циклофосфан, доксорубицин, капеци-табин; FAC — фторурацил, доксорубицин, циклофосфан; CP — циклофосфан, цисплатин.
Note. CAX — cyclophosphamide, doxorubicin, capecitabine; FAC —fluo-rouracil, doxorubicin, cyclophosphamide; CP — cyclophosphamide, cisplatin
праймер 5'-CATTGTCCTCTGTCCAGGCATC-3'; зонд FAM-5'-CATCATTCACCCTTGGCACAGGTGT-3' -BHQ1; ампликон 107 bp) на амплификаторе Rotor-Gene-6000 (CorbettResearch, Австралия). Праймеры и зонды (FAM-BHQ1) были подобраны с помощью программы Vctor NTI Advance 11.5 и базы данных NCBI. Проверка последовательности ампликона в базе
Primer-BLAST показала, что используемые праймеры отжигаются на всех представленных изоформах гена BRCA1.
Полимеразную цепную реакцию ставили в 3 репликах в объеме 15 мкл, содержащем 250 мкМ dNTPs (Sibenzyme, Россия), 300 нМ прямого и обратного праймеров, 200 нМ зонда, 2,5 мМ MgCl2, 19 SE buffer (67 мМ Трис-HCl, pH 8,8 при 25 °C, 16,6 мМ (NH4)2SO4, 0,01 % Tween-20), 2,5 ед. HotStart Taq polymerase (Sibenzyme, Россия) и 50 нг комплементарной ДНК. Двухшаговая программа амплификации включала 1 цикл: 94 °С, 10 мин — предварительная денатурация; 40 циклов: 1-й шаг — 94 °С 10 с и 2-й шаг — 60 °С 20 с.
В качестве генов-рефери использовали GAPDH (glyce-raldehydes-3-phosphatedehydrogenase) и ACTB (actin beta). Уровень экспрессии гена BRCA1 нормализовали по отношению к экспрессии генов-рефери и измеряли в условных единицах. Относительную экспрессию оценивали с помощью метода Pfaffl [7]. В качестве калибратора использовали РНК от 20 пациентов, выделенную из нормальной ткани молочной железы, полученной во время операции от больных, которым не проводилась НХТ. Уровень экспрессии в нормальной ткани принимали за единицу.
Статистические методы. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 8.0 (StatSoftlnc., США). Статистическую обработку полученных результатов выполняли с помощью принятых методов параметрической и непараметрической статистики. Определение нормальности распределения осуществляли по критерию Шапиро—Уилка. Для проверки гипотезы о значимости различий между исследуемыми группами использовали критерий Вилкоксона—Манна—Уитни. Вычисляли средние показатели и стандартные ошибки относительных величин. Сравнение частот по качественным данным анализировали с помощью двустороннего критерия Фишера. Для ОВ и безметастатической выживаемости (БМВ) использовали кривые выживаемости, построенные по методу Каплана—Майера.
Результаты
В общей группе из 111 обследованных пациентов отдаленные метастазы развились у 38 (34 %) больных в сроки 4—122 мес от момента постановки диагноза. Однолетняя БМВ составила 97,2 %, 2-летняя — 82,6 %, 5-летняя — 68,8 %.
Сравнение показателей экспрессии гена BRCA1 в опухоли до лечения и после НХТ у больных с наличием гематогенных метастазов по сравнению с группой пациентов без метастазов показало статистически значимые различия в послеоперационном уровне экспрессии данного гена (табл. 2).
Для выявления связи показателей экспрессии BRCA1 с выживаемостью мы воспользовались статистическими характеристиками нашей выборки по уровню экспрессии BRCA1. В результате были получены
CV CV
us
и ш U
ж ш
и
CV CV
us
Таблица 2. Уровень экспрессии BRCA1 в опухоли до неоадъювантной химиотерапии и после нее в зависимости от наличия гематогеннъа метастазов
Table 2. The level of BRCA1 expression in the tumor before and after neoadjuvant chemotherapy, depending on the availability of hematogenous metastases
Экспрессия Наличие гематогенных метастазов и рецидивов (n = 38) Отсутствие гематогенных метастазов и рецидивов (n = 73) p
Expression Availability hematogenous metastases and relapses (n = 38) Absence hematogenous metastases and relapses (n = 73)
BRCA1 до лечения BRCA1 before treatment 0,863 ± 0,136 0,980 ± 0,13 0,875
BRCA1 после лечения BRCA1 after treatment 1,181 ± 0,213 0,512 ± 0,061 0,011
а б
И Ш
u
X ш
и
1,0
0,9
<3
ä 0,8
0,7
£
£ 0,6
и О
Ü 0,5
CÛ S
! 0,4 m
0,3 0,2
Экспрессия BRCA1 <1 / BRCA1 hypoexpression (less than 1) Экспрессия BRCA1 >1 / BRCA1 hyperexpression (more than 1)
Й+++ ■
Ot.....
p = 0,318
1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0
Экспрессия BRCA1 <1 / BRCA1 hypoexpression (less than 1) Экспрессия BRCA1 >1 / BRCA1 hyperexpression (more than 1)
Ц
4-,
О"
p = 0,0002
20 40 60 80 100 120 Время, мес / Time, months
140 160
20 40 60 80 100 120 Время, мес / Time, months
140 160
Рис. 1. Безметастатическая выживаемость больных раком молочной железы в зависимости от уровня экспрессии гена BRCA1 в опухоли до нео-адъювантной химиотерапии (а) и после нее (б)
Fig. 1. Metastasis-free survival ofpatients with breast cancer, depending on the expression level of the BRCA1 gene in the tumor before (а) and after neoadjuvant chemotherapy (б)
2 группы анализа: пациенты с гиперэкспрессией гена В&СА1 (экспрессия >1) и пациенты с гипоэкспрессией (экспрессия <1). Анализ сравнения частот больных с гипер- и гипоэкспрессией в зависимости от основных клинико-морфологических параметров не показал статистически значимых различий. Далее с использованием метода Каплана—Майера было продемонстрировано, что при гипоэкспрессии В&СА1 в опухоли молочной железы после НХТ показатель БМВ статистически значимо выше (log-rank-тест р = 0,0002) по сравнению с таковым у пациентов, у которых наблюдался уровень экспрессии >1 (рис. 1).
Статистически значимых различий в показателях ОВ у пациентов с гипер- и гипоэкспрессий гена В&СА1 как до лечения, так и после НХТ не установлено (log-гап^тест р = 0,131 и р = 0,816 соответственно).
Следующим этапом работы явился анализ показателей ОВ и БМВ в зависимости от уровня экспрессии исследуемого гена и схемы НХТ. С начальным уровнем экспрессии BRCA1 статистически значимых различий в показателях ОВ и БМВ не установлено. Однако было показано аналогично предыдущему результату, что наличие гиперэкспрессии в опухоли молочной
железы после НХТ сопряжено с низкими показателями БМВ у пациентов, пролеченных по схеме FAC (log-rank-тест p = 0,005) и CAX (на уровне выраженной тенденции; p = 0,08) (рис. 2).
Показатель 5-летней БМВ у группы пациентов, получавших схему НХТ FAC (2—8 курсов), с уровнем экспрессии BRCA1 менее 1, составил 67 % против 34 % у пациентов с гиперэкспрессией исследуемого гена.
Наши результаты не показали статистически достоверной связи уровня экспрессии гена BRCA1 с показателями ОВ и БМВ у пациентов, получавших доцетаксел (log-rank-test p = 0,226 и p = 0,805 соответственно).
Интересный результат был отмечен для пациентов, получавших НХТ с включением препаратов платины. Помимо того, что у 7 из 8 больных наблюдался объективный ответ на НХТ (полная и частичная регрессия), все пациенты имели 100 % 2-летнюю БМВ и ОВ. Из-за эффекта малых выборок данный результат не является статистически достоверным. Тем не менее полученные данные свидетельствуют в пользу перспективности дальнейших исследований в этом направлении и ва-лидации прогностической значимости на большей выборке больных.
0
0
1,0
0,9
f 0,8 S
<3 0,7
SP
л 0,6
I-
и
0
Ï 0,5
Ш
m
1 0,4 са
0,3 0,2
-Экспрессия BRCA1 <1 / BRCA1
hypoexpression (less than 1)
---Экспрессия BRCA1 >1 / BRCA1
] _ hyperexpression (more than 1)
i
D-----
p = 0,08
20 40 60 80 100 120 Время, мес / Time, months
б
1,0
0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0
140 160
-Экспрессия BRCA1 <1 / BRCA1
hypoexpression (less than 1)
---Экспрессия BRCA1 >1 / BRCA1
hyperexpression (more than 1)
p = 0,005
о-..............
20
40
60 80 100 120 Время, мес / Time, months
140 160
Рис. 2. Безметастатическая выживаемость больных раком молочной железы в зависимости от уровня экспрессии BRCA1 в резидуальной опухоли, пролеченных по схемам CAX(а) и FAC (б). CAX — циклофосфан, доксорубицин, капецитабин; FAC — фторурацил, доксорубицин, циклофосфан Fig. 2. Metastasis-free survival ofpatients with breast cancer depending on the level of BRCA1 expression in a residual tumor treated according to the CAX (а) and FAC (б) schemes. CAX — cyclophosphamide, doxorubicin, capecitabine; FAC — fluorouracil, doxorubicin, cyclophosphamide
cv cv
us
и
Ш
u
Обсуждение
В недавнем исследовании на нейроэндокринных опухолях желудочно-кишечного тракта была показана связь экспрессии В&СА1 с прогнозом заболевания [8]. Авторами было установлено, что низкая экспрессия BRCA1 (менее 2) сопряжена с более высокими показателями безрецидивной выживаемости (р <0,05) по сравнению с группой больных, у которых экспрессия была выше 2.
Поскольку BRCA-ассоциированные опухоли развиваются за счет различных механизмов, в том числе повреждений, связанных с системой репарации, двухце-почечных разрывов и сшивок ДНК, то противоопухолевые препараты, вызывающие подобные повреждения (в частности, препараты платины), могут оказаться высокоэффективными, а следовательно, влиять на отдаленные результаты лечения. Положительный эффект такого лечения был показан в основном для наследственного РМЖ и рака яичников [9]. Некоторые авторы указывают, что отсутствие экспрессии В&СА1 является независимым предиктором низких показателей безрецидивной выживаемости у пациентов, получавших химиотерапию на основе таксанов [10].
Полученные нами результаты согласуются с данными литературы. В исследовании 2018 г. было установлено, что при раке яичников низкая экспрессия BRCA1 является благоприятным прогностическим фактором для ОВ пациентов (p = 0,028) [11], при РМЖ низкая экспрессия белка BRCA1 также коррелирует с благоприятным исходом заболевания [12].
Заключение
Таким образом, в результате проведенного исследования установлено, что гиперэкспрессия гена BRCA1 в опухолевой ткани молочной железы после НХТ является неблагоприятным прогностическим фактором и может быть использована в качестве маркера прогноза заболевания. У 7 (из 8 взятых в анализ) пациентов с дефицитом BRCA1 наблюдались наибольшие показатели БМВ среди группы пациентов, получавших в неоадъювантном режиме химиотерапию по схемам FAC и CP. Это свидетельствует о перспективности дальнейшего изучения возможности использования выявления дефицита BRCA1 в качестве маркера чувствительности к химиотерапии и прогноза заболевания.
ж ш
и
а
0
0
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Имянитов Е.Н. Молекулярная диагностика в онкологии. Вопросы онкологии 2012;58:153-63. [Imyanitov E.N. Molecular diagnostics in oncology. Voprosy onkologii = Oncology Issues 2012;58: 153-63. (In Russ.)].
2. Zhong Q., Peng H.L., Zhao X. et al. Effects of BRCA1- and BRCA2-related mutations on ovarian and breast cancer
survival: a meta-analysis. Clin Cancer Res 2015;21:211-20. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-14-1816. 3. Afghahi A., Timms K.M., Vinayak S. et al. Tumor BRCA1 reversion mutation arising during neoadjuvant platinum-based chemotherapy in triple-negative breast cancer is associated with therapy resistance. Clin Cancer
Res 2017;1:1-26.
DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-16-2174.
4. Gerratana L., Fanotto V., Pelizzari G. et al. Do platinum salts fit all triple negative breast cancers? Cancer Treat Rev 2016;48:34-41.
DOI: 10.1016/j.ctrv.2016.06.004.
5. Mccabe N., Turner N.C., Lord C.J. et al. Deficiency in the repair of DNA damage
CV CV
us
и ш U
by homologous recombination and sensitivity to poly (ADP-ribose) polymerase inhibition. Cancer Res 2006;66(16):8109-15. DOI: 10.1158/0008-5472. CAN-06-0140.
6. Schwartz G.F., Hortobagyi G.N. Proceedings of the consensus conference on neoadjuvant chemotherapy in carcinoma of the breast, April 26-28, 2003, Philadelphia, Pennsylvania.
Breast J 2004;10:273-94.
DOI: 10.1111/j.1075-122X.2004.21594.x.
7. Pfaffl M.W. A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR. Nucl Acids Res 2001;29:45. DOI: 1093/nar/29.9.e45.
8. Гафтон И.Г., Имянитов Е.Н., Семиглазов В.В. и др. Экспрессия гена BRCA1 при нейроэндокринных опухолях желудочно-кишечного тракта. Сибирский онкологический журнал 2014;16:11-5. [Gafton I.G., Imyanitov E.N., Semiglasov V.V. et. al. BRCA1 gene expression in endocrine tumors of the gastrointestinal tract. Sibirskiy onkolo-gicheskiy zhurnal = Siberian Journal
of Oncology 2014;16:11-5. (In Russ.)].
9. Imyanitov E.N., Moiseyenko V.M. Drug therapy for hereditary cancers. Hereditary Cancer Clin Pract 2011;9:1-16.
DOI: 10.1186/1897-4287-9-5.
10. Kurebayashi J., Yamamoto Y., Kurosumi M. et al. Loss of BRCA1 expression may
Вклад авторов
М.М. Цыганов: разработка дизайна исследования, написание текста рукописи;
М.К. Ибрагимова: анализ полученных данных;
А.М. Певзнер: обзор публикаций по теме статьи;
Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская: получение данных для анализа;
Н.В. Литвяков: разработка дизайна исследования.
Authors' contributions
M.M. Tsyganov: developing the research design, article writing; M.K. Ibragimova: analysis of the obtained data; A.M. Pevzner: reviewing of publications of the article's theme; E.Yu. Garbukov, E.M. Slonimskaya: obtaining data for analysis; N.V. Litviakov: developing the research design.
predict shorter time-to-progression in metastatic breast cancer patients treated with taxanes. Anticancer Res 2006;26(1B):695-701.
11. Tsibulak I., Shivalingaiah G., Wenzel S.
et al. Clinical impact of BRCA1 and BRCA2 mRNA expression in ovarian cancer. Am Society Clin Oncol 2018;36:e17533. DOI: 10.1200/jc0.2018.36.15_suppl. e17533.
12. Nomura H., Kataoka F., Aoki D. et al. Expression of potential biomarkers associated with homologous recombination repair in patients with ovarian or triple-negative breast cancer. Cancer Biomark 2016;16(1):145-52. DOI: 10.3233/CBM-150550.
X ш
и
ORCID авторов/ORCID of authors
М.М. Цыганов/м.M. Tsyganov: https://orcid.org/0000-0001-7419-4512 М.К. Ибрагимова/M.K. Ibragimova: https://orcid.org/0000-0001-8815-2786 А.М. Певзнер/A.M. Pevzner: https://orcid.org/0000-0002-9657-9058 Е.Ю. Гарбуков/E.Yu. Garbukov: https://orcid.org/0000-0002-2917-8158 Е.М. Слонимская/E.M. Slonimskaya: https://orcid.org/0000-0003-4382-5697 Н.В. Литвяков/N.V. Litviakov: https://orcid.org/0000-0002-0714-8927
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Финансирование. Работа поддержана грантом Российского фонда фундаментальных исследований 18-29-09131 мк «Феномен «замирания» опухоли в процессе химиотерапии».
Financing. This work was supported by the grant of the Russian Foundation for Basic Research 18-29-09131 mk «Phenomenon of tumor fading in the process of chemotherapy».
Информированное согласие. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Informed consent. All patients gave written informed consent to participate in the study.
Статья поступила: 24.04.2019. Принята к публикации: 19.06.2019. Article received: 24.04.2019. Accepted for publication: 19.06.2019.
