УДК 612.225[577.122.8:591.438]
М.ТЛуценко
АКТИВНОСТЬ 8Н-ГРУПП В БРЫЖЕЙКЕ КРОЛИКА ПРИ ОБЩЕМ ОХЛАЖДЕНИИ ОРГАНИЗМА
Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН,
Благовещенск
РЕЗЮМЕ
Изучена реакция SH-групп в брыжейке кроликов на общее охлаждение организма при температуре -30°С по три часа ежедневно в течение 5-30 дней. Установлено выраженное снижение содержания SH-групп в цитоплазме жировых клеток и эндотелии капилляров брыжейки.
Ключевые слова: брыжейка, общее охлаждение, SH-группы.
SUMMARY
M.T.Lutsenko
ACTIVITY OF SH-GROUPS IN MESENTERY OF A
RABBIT AT WHOLE-BODY HYPOTHERMIA
The reaction of SH-groups in the mesentery of a rabbit to whole-body hypothermia at -30°C for three hours daily during 5-30 days was studied. The apparent decrease of SH-groups in cytoplasm of fat cells and endothelium of mesentery capillaries was found out.
Key words: mesentery, hypothermia, SH-groups.
Известно, что тиоловые группы (SH-группы) органических соединений обладают высокой и разнообразной реакционной способностью: легко окисляются с образованием дисульфидов и сульфокислот; легко вступают в реакции алкилирования, ацилирования, тиол-дисульфидного обмена, образуют меркаптиды (при реакции с ионами тяжелых металлов) [2, 4]. Они участвуют в ферментативных реакциях образования и переноса ацильных остатков, связанных с метаболизмом липидов и углеводов [5]. Сульфгидрильные группы глутатиона участвуют в обезвреживании чужеродных органических соединений, восстановлении перекисей и в осуществлении его ферментных функций [3]. В составе активных центров ряда ферментов сульфгидрильные группы участвуют в их каталитическом действии, в связывании субстратов, коферментов и ионов металлов. Каталитическая роль сульфгидриль-ных групп ферментов заключается в образовании промежуточных соединений с субстратами или в переносе электронов и протонов от субстратов к акцепторам [5]. Блокирование сульфгидрильных групп при помощи специфических респектов вызывает частичное или полное торможение активности многих ферментов. Важную роль в стабилизации белков, в том числе ферментов, антител и некоторых гормонов играют дисуль-фидные связи (—S—S—), которые образуются при окислении сульфгидрильных групп, в процессе биосинтеза белков. Расщепление дисульфидных связей приводит к нарушению наживной структуры белков и утрате ими биологической активности [1].
Вместе с тем, в доступной литературе совершенно отсутствуют сведения об активности 8Н-групп в капиллярах и адиподоцитах при общем охлаждении организма.
Материалы и методы исследования
Опыты проводились на кроликах породы Шиншилла в возрасте 6 месяцев. Животные подвергались общему охлаждению в климатокамере 11_КА-3 101 (Германия). В опыте было использовано 40 животных, которые были разделены на 4 группы: интактные (контрольная группа) - 10 животных; подвергавшиеся общему охлаждению в течение 5 дней по 3 часа при температуре -30°С ежедневно (1 группа) - 10 кроликов; кролики, подвергавшиеся общему охлаждению в течение 15 дней по 3 часа при температуре -30°С ежедневно (2 группа) - 10 кроликов; кролики, подвергавшиеся общему охлаждению в течение 25 дней по 3 часа при температуре -30°С ежедневно (3 группа) - 10 кроликов.
Животных забивали методом воздушной эмболии. Брыжейку натягивали на покровное стекло и фиксировали в нейтральном 10% формалине. После фиксации препараты окрашивали для выявления 8Н-групп с использованием реактива ДДД (дигидроксидинафтил-дисульфид) по Барнетту и Зелигману. Препараты заключались в глицерин-желатину.
Результаты исследования и их обсуждение
Брыжейка богато снабжена кровеносными сосудами и тесно прилежащим к ним жировыми клетками. В условиях общего охлаждения под влиянием адре-нало-надпочечниковой системы стимулируется большой выброс в кровь адреналина и кортизола, под воздействием которых происходит интенсивный процесс распада сложных липидов и переход жирных кислот в периферическую кровь.
Сульфидные группы, обеспечивающие построение клеточных мембран адиподоцитов и эндотелия капилляров в норме выявляются в большом количестве как в стенке капилляров, так и в цитоплазме жировых клеток.
Охлаждение организма и выброс большого количества гормонов надпочечников очень активно влияет на содержание сульфгидрильных групп в эндотелиальных клетках и цитоплазме адиподоцитов. Уже на 10 день общего охлаждения организма (рис.) интенсивность выявления сульфгидрильных групп в эндотелиальных клетках капилляров и в цитоплазме жировых клеток резко снижается. После месячного охлаждения организма кроликов содержание 8Н-групп в жировых клетках становиться минимальным, а эндотелиальные
клетки вовсе не выявляются.
Таким образом, общее охлаждение организма сильно влияет на содержание 8Н-групп в цитоплазме жировых клеток и в эндотелии капилляров брыжейки, нарушая конформационную структуру белков этих клеток, что приводит к нарушению метаболических
процессов липидно-белкового обмена, поскольку 8Н-группы определяют многочисленные свойства белковых молекул и играют важную роль в образовании и поддержании трехмерной каталитической активной структуры последних [4].
Рис. Брыжейка кролика при общем охлаждении организма при температуре -30°С ежедневно по 3 часа. Реакция на 8Н-группы по Баррнетту-Зелигману. Увеличение 100 х 90. а - контрольная группа;
б - охлаждение организма в течение 5 дней (1 группа), интенсивность реакции на 8Н-группы не снижается; в - охлаждение организма в течение 15 дней (2 группа), резкое снижение 8Н-групп в цитоплазме адиподоцитов и в эндотелиальных клетках капилляров;
г - охлаждение организма в течение 30 дней (3 группа), резкое снижение 8Н-групп в адиподоцитах и полное исчезновение их в эндотелиальных клетках капилляров.
ЛИТЕРАТУРА
1. Глушков С.И. Нарушения системы глутатиона и их роль в патогенезе острых интоксикаций ксенобиотиками с различными механизмами токсического действия: автореф. дис. ... докт. мед. наук. СПб., 2007. 28
2. Гольдштейн Б.И. О биологических свойствах сульфгидрильных групп тканевых белков. Киев: Гос-медизд. УССР, 1959. С. 49-52.
3. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи современной биологии. 1990. Т. 110. Вып.1 (4). С.23-24.
4. Торчинский Ю.М. Сульфгидрильные и дисуль-фидные группы белков. М.: Наука, 1971. 229 с.
5. Friedman М. The chemistry and biochemistry of the sulfhydryl group in amino acids, peptides and proteins. Oxf.-N.Y. 1973.
6. Jocelyn PC. Biochemistry of the SH-group. L.-N.Y.: Academic Press. 1972. 241 p.
Поступила 09.12.2010
Михаил Тимофеевич Луценко, руководитечь лаборатории, 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22;
Mikhail Т. Lutsenko; 22 Kalinin Str., Blagoveschensk, 675000;
E-mai 1: Lucenkomt@mai 1.ru
□ П П
УДК 577.121/. 125.3:616.718.4-002.4-08 Н.В.Захарова, ВА.Доровских, И.В.Борозда, МА.Штарберг
ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ЛЕГГА-КАЛЬВЕ-ПЕРТЕСА НА ФОНЕ
АНТИОКСИДАНТНОЙ ТЕРАПИИ
ГОУ ВПО Амурская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ,
Благовещенск
РЕЗЮМЕ
Болезнь Легга-Кальве-Пертеса во многом является результатом оксидантного стресса и снижения защитной функции антиоксидантной системы.
Методом, способным воздействовать на патогенетические процессы, препятствовать переходу в необратимую стадию остеонекроза головки бедренной кости и повысить эффективность проводимого лечения путем предотвращения нейроди-строфических тканевых и сосудистых реакций, является антиоксидантная терапия. Установлено, что после применения в комплексе лечения антиоксидантов у пациентов с болезнью Легга-Кальве-Пертеса в плазме крови происходит значительное снижение содержания продуктов перекисного окисления липидов и повышение уровня концентрации веществ антиоксидантной системы. Своевременно
начатое лечение с применением анти-оксидантов привело к хорошим и удовлетворительным исходам у 85% больных, в то время как при традиционном лечении такие результаты достигнуты только 56% пациентов.
Кчючевые слова: Болезнь Легга-Кальве-Пертеса, оксидантный стресс, продукты перекисного окисления липидов, антиоксидантная система.
SUMMARY
N.V.Zakharova, V.A.Dorovskikh, I.V.Borozda, M.A.Shtarberg
DYNAMICS OF LIPID PEROXIDATION AND ANTIOXIDANT SYSTEM IN PATIENTS WITH LEGG-CALVE-PERTHES DISEASE AGAINST THE BACKGROUND OF ANTIOXIDANT THERAPY