CC BY
31
УДК / UDC 619:616.391 -084:636.592.053.2.087.8
ПРОФИЛАКТИКА ГИПОВИТАМИНОЗОВ У ИНДЮШАТ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА «АЛФАВИТ АДзЕ»
PREVENTION OF HYPOVITAMINOSIS IN TURKEYS WHEN USING THE COMPLEX MEDICINE "ALFAVIT ADsE"
Власова Е.Ю., ветеринарный врач Vlasova E.Yu., Veterinary Surgeon [email protected] Белкин Б.Л., доктор ветеринарных наук, профессор Belkin B.L., Doctor of Veterinary Sciences, Professor E-mail: [email protected] Крюков В.И., доктор биологических наук, профессор Kryukov V.I., Doctor of Biological Sciences, Professor E-mail: [email protected] ФГБОУ ВО «Орловский государственный аграрный университет
имени Н.В. Парахина», Орел, Россия Federal State Budgetary Educational Establishment of Higher Education "Orel State Agrarian University named after N.V. Parakhin", Orel, Russia
Для получения максимальной продуктивности индеек необходимо их полноценное сбалансированное кормление. Особое внимание следует уделять содержанию в рационе витаминов. Целью работы был анализ возможности профилактики гиповитаминоза у 6-7-недельных индюшат путём включения в рацион препарата «АЛФАВИТ АД3Е», задаваемого в разных дозах трём группам птиц. Первая группа получала полную рекомендованную (100%) дозу препарата, вторая - только 50% дозы, а рацион птиц третьей группы не содержал препарата. Контрольные взвешивания и клинический осмотр птиц проводили ежедневно. В первый и седьмой дни эксперимента у птиц индивидуально брали кровь для анализов. В сыворотке крови анализировали содержание витаминов А и Е, фосфора и кальция. В эритроцитах определяли частоту встречаемости микроядер и ядерных аномалий. Установлено, что при недостатке в организме птиц витаминов A, D3 и Е происходит замедление прироста живой массы птиц, возникают морфофизиологические нарушения и снижение в сыворотке крови содержания витамина А на 41,5%, витамина Е - на 55,0% фосфора - на 64,0%, кальция - на 34,0%. В эритроцитах индеек с уменьшением дозы витаминов возрастала частота микроядер от 0,87±0,11%о до 1,05±0,12%о и 2,03±0,17%о в 1-й, 2-й и 3-й группах, соответственно. Аналогично изменялись индивидуальные частоты других ядерных аномалий, но эти изменения были статистически недостоверными. Однако анализ суммарных частот всех аномалий показал наличие статистически достоверных различий между 1-й и 3-й группами птиц (P<0,05). На основании результатов сделан вывод, что недостаток витаминов A, D3 и Е приводит к существенным морфофизиологическим аномалиям, замедлению темпов их роста и развития, а также к усилению нестабильности генома. Для профилактики гиповитаминоза у индеек может быть рекомендован препарат «АЛФАВИТ АД3Е».
Ключевые слова: индейка (Meleagris gallopavo), гиповитаминозы, клинические признаки, профилактика, микроядра, «АЛФАВИТ АД3Е».
A complete balanced feeding is needed to maximize turkey productivity. Particular attention should be paid to the content of vitamins in the diet, most of which are essential substances. The aim of the work was to analyze the possibility of preventing hypovitaminosis in 6-7-week-old turkey poultry by introducing the drug "ALFAVIT AD3E" into the diet. Different doses of the drug were given to three groups of birds. The first group received the full recommended (100%) dose of the drug, the second
- only 50% of the dose, and the drug was not present in the diet of birds of the third group. Control weighings and clinical examination of birds were performed daily. Birds were individually bled for analysis on the 1st and 7th days of the experiment. The content of vitamins A and E, phosphorus and calcium was analyzed in blood serum. The frequency of micronuclei and nuclear anomalies was determined in red blood cells. The results of the study showed that with a deficiency of vitamins A, D3, and E in the body of birds, growth in live weight of birds slows down, morphophysiological disorders occur, and the content of vitamin A in the blood serum decreases by 41.5%, vitamin E -by 55.0% phosphorus - by 64.0%, calcium - by 34.0%. When birds received a reduction of vitamins doses, the frequency of micronuclei in turkey red blood cells increased from 0.87±0.11%o to 1.05±0.12% and 2.03±0.17% in the 1 st, 2nd and 3rd groups, respectively. The individual frequencies of other nuclear anomalies varied similarly, but these changes were statistically unreliable. However, analysis of the total frequencies of all anomalies showed the presence of statistically significant differences between the 1st and 3rd groups of birds (P<0.05). Based on the results obtained, it was concluded that a lack of vitamins A, D3 and E leads to significant morphophysiological anomalies, a slowdown in growth and development, and also to increased instability of the somatic cells genome in birds. For the prevention of hypovitaminosis in turkeys, the multivitamin preparation «ALFAVIT AD3E» may be recommended.
Key words: turkey (Meleagris gallopavo), hypovitaminosis, clinical signs, prophylaxis, micronuclei, "ALFAVIT AD3E".
Введение. Снижение себестоимости продуктов птицеводства тесно связано со стоимостью их рациона. Рационы должны содержать натуральные высококачественные корма и кормовые витаминные добавки. Несбалансированные кормовые рационы приводят к серьёзным биохимическим и онтогенетическим сдвигам в организме [1-4].
Своевременные научно обоснованные меры профилактики минеральной и витаминной недостаточности за счёт полноценного рациона позволяют сохранять высокую продуктивность птицы, снижать её заболеваемость и падеж [5]. Существует более 36 питательных веществ, необходимых для нормального роста и хорошей репродуктивной способности домашней птицы, причём рацион птиц должен быть сбалансированным по этим веществам [6, 7]. Однако на практике часто бывает трудно разобраться в причинах отставания в росте и развитии птицы, её плохом оперении, снижении яйценоскости, пониженной выводимости цыплят, так как эти явления, как правило, вызваны множеством различных причин [8]. Одной из этих причин является несбалансированность кормов по составу витаминов - низкомолекулярных органических веществ с различной химической структурой, выполняющих важные биологические функции в живых организмах.
Все известные витамины, за исключением витамина С, являются для сельскохозяйственной птицы незаменимыми веществами. Содержание разных витаминов в рационе птицы варьирует в диапазоне от миллионной до миллиардной доли процента, но при этом каждый из них очень важен для нормального обмена веществ, поддержания здоровья и высокой продуктивности [9].
Цель исследований заключалась в анализе эффективности нового поливитаминного препарата «АЛФАВИТ АД3Е» для профилактики морфофизиологических и цитогенетических аномалий у молодняка индеек при гиповитаминозе.
Условия, материалы и методы. Изучение влияния препарата «АЛФАВИТ АД3Е» в качестве профилактического средства от гиповитаминозов было проведено на самцах индейки домашней (Meleagris gallopavo, f. domestica) породы Big-6.
«Алфавит АД3Е» - коммерческое название комплексного препарата жирорастворимых витаминов на водной основе, в 1 мл которого содержится
витамина А - 50000 МЕ, витамина Dз - 5000 МЕ, витамина Е - 30 мг. Благодаря водной основе, препарат быстро адсорбируется и легко усваивается. Он нетоксичен и хорошо переносится птицей. Этот препарат хорошо зарекомендовал себя в качестве средства профилактики гиповитаминозов кур, а продукция птицеводства после применения этого препарата используется без ограничений.
Кормление птицы проводили гранулированным комбикормом марки ПК-12. Все индюшата до пятидневного возраста ежедневно получали витаминно-аминокислотный комплекс. Содержание птицы напольное, поение свободное из поилок. Перед началом эксперимента из здоровых 36-дневных птиц общего поголовья были сформированы три экспериментальные группы по 8 самцов в каждой. Птицы 1-ой группы получали полный кормовой рацион и витаминный препарат «Алфавит АДзЕ», задаваемый птицам методом выпойки из расчёта 0,5 л/1000 л воды в течение 5 дней. С учётом среднего объёма потребления индюшатами воды и концентрации в ней препарата за этот период каждая птица получили по 7,2 мл препарата (100 % от рекомендуемой нормы). Птицы 2-ой группы получали полный кормовой рацион, но витаминный препарат «Алфавит АДзЕ», давали птицам в указанные выше сроки в половинной дозе - из расчёта 0,25 л/1000 л воды, т.е. за весь период исследований каждая птица получила по 3,6 мл препарата (50% от рекомендуемой нормы). Птиц 3-ей группы кормили кормом стандартного рациона, но без витаминного препарата «Алфавит АДзЕ».
Контрольные взвешивания индюшат проводили ежедневно в течение 7 дней с начала эксперимента. При клиническом обследовании выполняли осмотр, пальпацию, термометрию. Для анализов кровь у птиц брали индивидуальными одноразовыми шприцами из подкрыльцовой вены в первый и седьмой дни эксперимента. Биохимические анализы выполнены общепринятыми методами. Методика цитогенетического анализа была описана ранее [10]. В мазках крови каждой птицы анализировали по «10 тыс. эритроцитов. Частоты встречаемости микроядер и ядерных аномалий в эритроцитах птиц трёх вариантов опыта сравнивали между собой, используя Ы-критерий Фишера в соответствии с рекомендациями [11, с. 166-169].
Результаты и обсуждение. Биологическое действие витаминов состоит в активном их участии в обменных процессах. В метаболизме питательных веществ витамины или участвуют непосредственно, или включаются в состав сложных ферментных систем. Витамины вовлекаются в процессы окисления углеводов и жиров. В результате окисления образуются различные вещества необходимые организму как пластический и энергетический материал. Витамины способствуют нормальной пролиферации клеток, развитию и росту организма, поддерживают иммунные реакции, обеспечивающие его устойчивость к неблагоприятным факторам окружающей среды. Именно поэтому недостаток витаминов в кормах неблагоприятно и очень резко отражается на развитии быстро растущей птицы.
Витамин А необходим для роста и развития индюшат. Он играет важную роль в эмбриональном развитии, влияет на формирование иммунитета и другие важные жизненные процессы в организме [12]. Установлено, что у индюшат, получавших корма с недостатком витамина А, происходят повреждения в организме. Вначале они возникают на серозно-слизистых оболочках, а при хронической недостаточности витамина наступает повреждение почечных канальцев, что ведёт к азотемии и подагре. Недостаток витамина А приводит к снижению выводимости индюшат из яиц, повышению смертности птенцов в инкубаторе [13].
Витамин D нужен домашней птице для лучшего обмена кальция и фосфора. При недостатке витамина D значительно снижается выводимость индюшат, у птенцов наблюдается рахит. У них в двух-трёх-недельном возрасте становятся мягкими и гибкими клюв и когти, оперение беднеет. Пористость костей приводит к их переломам [9].
Витамин Е участвует в тканевом дыхании, биосинтезе белков и делении клеток. Недостаток витамина Е приводит к развитию энцефаломаляции (размягчению головного мозга), экссудативному диатезу и дистрофии мышечного желудка. При дефиците витамина Е в сочетании с дефицитом серосодержащей аминокислоты у индюшат в 4-недельном возрасте развиваются признаки миопатии алиментарного происхождения, особенно в грудной мышце [14]. Недостаток витамина Е и селена у индюшат может закончится миопатией мышечного желудка и сердечной мышцы.
Как было указано выше, препарат «АЛФАВИТ АД3Е» индюшата первой группы получали в полной дозе (100% рекомендуемой нормы) - 7,2 мл. Курс дачи комплексного витаминного препарата был 5 дней. Перед началом эксперимента масса тела индюшат в этой группе в возрасте 36 дней составила 1,92±0,01 кг. Клиническое обследование индюшат в этой группе показало, что птица имела хорошее гладкое, ровное оперение. Перья на теле были расположены равномерно. Нарушений координации движений не обнаружено. Температура тела составляла 40,9-41,0°С, т.е. была в пределах физиологической нормы. За минуту птицы делали 18-20 вдохов. Кожа на туловище была эластичной, блестящей, без повреждений. Кожа на конечностях хорошо ороговевшая, чешуйчатая, без оперения. Слизистая оболочка ротовой полости нежно-розового цвета, умеренной влажности, без повреждений. Роговица глаз без повреждений, прозрачная. Конъюнктива бледно-розового цвета. Кольца трахеи не деформированы. Целостность костей не нарушена, деформаций не обнаружено. Мускулатура груди хорошо развита. Стенки мышечного желудка упругие. Слизистая оболочка клоаки бледно-розового цвета, без повреждений. Тонус мышц был в норме.
По окончании опыта масса тела индюков в первой группе составила 2,25±0,005 кг, или на 14,7% выше первоначального. Ежедневный прирост массы тела составил 55,3 грамма, что соответствовало норме (рис. 1). На седьмой день после начала эксперимента содержание витамина А в сыворотке крови увеличилось на 4,5%, витамина Е - на 2,4%, фосфора - на 13,7%, кальция - на 15,3% (рис. 2).
с кормом разное количество (100%, 50% от нормы) и не получавших (0%) витаминный препарат «АЛФАВИТ АД3Е»
Вторая группа индюшат получила препарат «АЛФАВИТ АДзЕ» в половинной дозе - 3,6 мл, из расчета 0,250 л / 1000 литров воды. Первоначальная масса тела, как и в первой группе, составила 1,92±0,01 кг. Уже со 2-го дня клинического наблюдения у индюшат в этой группе стали проявляться патологические изменения. Птица становилась малоподвижной, голова и крылья были опущены, нарушалась координация движения (появлялась шаткая походка). Температура тела оставалась в пределах физиологической нормы, но частота дыхания понизилась. Изменения кожного покрова и оперения стали наблюдаться с з-го дня эксперимента. Оперение было взъерошено, кожный покров стал несколько сморщенным, сухим, но без видимых повреждений. Кожа конечностей -ороговевшая, бледная, чешуйчатая. На 4-й день эксперимента у птиц второй группы в ротовой полости стали обнаруживаться бело-серые бляшки. В носовых отверстиях имелось незначительное количество прозрачных, водянистых истечений. На пятый день наблюдения обнаружены творожистые скопления в уголках глаз. Клюв, когти, череп были несколько размягчены, наблюдалось искривление ребер. Слизистая оболочка клоаки была анемичной, без повреждений, тонус мышц снижен. Обнаружены отеки. На 6-й день отмечено сильное угнетение индюшат; они полностью оказывались от корма, сидели, нахохлившись, и даже при вспугивании оставались неподвижными. Одна птица пала. Патологоанатомические изменения у неё были такими же, как у павших двух индюков третьей группы, и они будут описаны ниже. У индюков отмечено резкое отставание в росте. На седьмой день эксперимента у птиц второй опытной группы в сыворотке крови установлено снижение содержания витамина А на 22,0%, витамина Е - на 26,0%, фосфора - на 57%, кальция - на 13,6%, по сравнению с первым днём эксперимента (рис. 2), что указывает на гиповитаминоз. При взвешивании в конце эксперимента средняя масса тела индюков второй группы составила 1,7з±0,01 кг, т.е. они похудели на 10,0%.
Клиническое состояние индюшат третьей группы, не получавшей препарат «АЛФАВИТ АДзЕ», перед началом эксперимента не отличалось от состояния птиц первой и второй групп. Средняя масса тела их была равной 1,92±0,01 кг. Уже на второй день эксперимента активность индюшат снизилась. Голова и крылья были опущены, отмечено нарушение координации движения. Аппетит у птиц был снижен, наблюдалась жажда. Дыхание было несколько затруднённое, но температура тела оставалась в пределах физиологической нормы. Более заметные клинические изменения стали наблюдаться уже с з-го дня эксперимента. У большинства индюшат отмечено судорожное подергивание головы, выворачивание и запрокидывание ее на спину. У большинства отмечена диарея. Кожа ног стала грубеть. Появились взъерошенность и выпадение пера на теле, часть его около клоаки загрязнена пометом. Слизистая оболочка ротовой полости была бледноватой, сухой, язык бледный и сухой. На 4-й день наблюдения индюшата становились еще менее подвижными. Отмечено слезотечение и вместе с этим сухость роговицы глаз. Веки были опухшими, у многих склеены корками экссудата. В области шеи и головы наблюдали отеки, затруднявшие дыхание. На 5-й день у оставшихся индюшат отмечена остеомаляция. Они передвигались с трудом или вовсе не могли двигаться. На шестой день наблюдали полный отказ птицы от корма. Индюшата сидели неподвижно, нахохлившись. Отмечено значительное отставание в росте, две птицы погибли (в 4-й и 7-ой дни эксперимента). Средняя масса 6 индюшат была равна 1,48±0,01 кг или на 22,7% ниже, чем она была в первый день опыта. На седьмой день эксперимента у птиц этой группы в сыворотке крови содержание витамина А снизилось на 41,5%, витамина Е - на 55,0%, фосфора - на 64,0%, кальция - на 34,0%, по сравнению с первоначальным периодом.
В) Г)
Рисунок 2 - Содержание исследуемых веществ в сыворотке крови индюшат, получавших с кормом разное количество (100%, 50% от нормы) витаминного препарата «АЛФАВИТ АД3Е» и не получавших его (0%): А) витамин А (мкг/100 мл);
Б) витамин Е (мкг/100 мл), В) фосфор (ммоль/л); Г) кальций (ммоль/л).
При патологоанатомическом вскрытии трупов индюшат отмечено сильное истощение, бледность кожных слизистых оболочек, отек подкожной клетчатки. Перо было тусклое, загрязненное пометом. Отмечены обширные подкожные инфильтраты, особенно в области головы и шеи. Фибринозное воспаление и размягчение роговицы. На ребрах рахитические четки, утолщения и в эпифизах трубчатых костей, искривление киля. Сердечная мышца дряблая, печень увеличена и также дряблая. На внутренних органах отмечено отложение уратов. Обнаружены кровоизлияния в мозжечке и водянка головного мозга.
Помимо морфофизиологических изменений у индюшат недостаток витаминов влиял и на стабильность их генома, что было обнаружено с использованием микроядерного теста. Микроядрами называют небольшие, содержащие хроматин структуры, находящиеся в цитоплазме клетки и расположенные изолированно от клеточного ядра. Микроядра формируются из
отдельных хромосом или их фрагментов, оказавшихся не связанными нитями веретена деления с центриолями делящейся клетки. После цитокинеза такие хромосомы или их фрагменты остаются в цитоплазме одной из дочерних клеток. Полагают, что вокруг них образуется оболочка, сходная с оболочкой основного ядра. Обычно в клетке обнаруживают одно микроядро, реже - два или три. Спонтанная частота образования микроядер в клетках здоровых птиц не варьирует от сотых до десятых долей промилле. Воздействие неблагоприятных факторов может существенно повышать частоту встречаемости микроядер в клетках. Поэтому частоту микроядер можно использовать в качестве биотеста для выявления и анализа силы воздействия неблагоприятных факторов. Причинами образования микроядер могут быть факторы внешние -ионизирующая радиация, мутагенные, кластогенные и аневогенные вещества окружающей среды, а также факторы внутренние - вещества, образующиеся в процессе метаболических процессов, происходящих в организме.
Анализ микроядер широко используют в медицине [15, 16]. Микроядерное тестирование клеток различных тканей у человека в значительной степени стандартизировано. Стандартизация методик микроядерного тестирования в ветеринарной практике отсутствует и это остаётся важной задачей. Среди сравнительно большого числа публикаций о частотах микроядер в клетках птиц мы обнаружили лишь одну публикацию [17], в которой сообщается о спонтанной частоте микроядер в эритроцитах периферической крови трёх здоровых мексиканских индеек. Сведения о частотах микроядер в клетках индеек при различных заболеваниях до настоящего времени не известны.
Поскольку частота микроядер в клетках не велика, то одно из направлений совершенствования микроядерного тестирования было связано с увеличением числа анализируемых клеток. В ранних публикациях авторы исследований ограничивались одной тысячью и даже пятьюстами исследованных клеток. Позже, для повышения достоверности анализа число анализируемых клеток было рекомендовано увеличить до 3 тысяч. Такие объёмы выборочных совокупностей анализируемых клеток фигурируют в довольно большом количестве публикаций. Именно по этой причине первоначально выполненный нами анализ микроядер у индейки при гиповитаминозе был ограничен 3 тысячами проанализированных эритроцитов у каждой птицы [10]. Появление многочисленных автоматизированных систем анализа микроядер в клетках, позволяющих за короткий срок и с минимальными трудозатратами анализировать по 10 тыс. эритроцитов, сделало фактическим стандартом для исследований последних лет именно такой объём выборок анализируемых клеток. Учтя этот факт, мы провели дополнительный анализ ранее выполненного эксперимента, увеличив количество проанализированных от каждой особи эритроцитов до 10 тыс.
Увеличение числа проанализированных эритроцитов для каждой птицы с 3 до 10 тыс. отразилось на абсолютных числах обнаруженных аномалий, однако статистически достоверные различия между частотами этих аномалий, определёнными для каждой анализируемой ядерной аномалии в выборках по 3 тыс. и 10 тыс. эритроцитов, отсутствовали.
Частота нормальных эритроцитов у птиц первой группы (получивших полную дозу витаминного препарата) варьировала от 98,96 до 99,18% при среднем значении 99,12±0,05%. Средняя частота нормальных эритроцитов у птиц второй группы (получивших половинную дозу витаминного препарата) была ниже и составила 98,78±0,04% с размахом изменчивости значений у разных
особей от 98,50 до 99,09%. У птиц третьей группы (не получавших витаминного препарата) средняя частота нормальных эритроцитов была ещё меньше -98,07% при крайних значениях 97,54 и 98,45%. Различия между средними значениями частот первой и второй, а также второй и третьей групп птиц были статистически недостоверными, но различия между средними частотами нормальных эритроцитов в первой и третьей группах птиц имели статистически достоверные различия при Р<0,05.
Частоты эритроцитов с микроядрами составили 0,87±0,11, 1,05±0,12 и 2,03±0,17%о для первой второй и третьей групп птиц, соответственно. Тенденция к увеличению частоты микроядер при уменьшении дозы витаминов, получаемых птицей, явно просматривается, но статистически достоверных различий между ними не установлено.
Помимо «классических» микроядер в клетках встречается ряд аномалий морфологии основного ядра, которые, как это подтверждают многочисленные исследования, вызваны действием повреждающих агентов. Частоты некоторых из них, классифицированных в соответствии с рекомендациями [18], были
- С микроядрами ^ Почкующиеся ::: Двулопастные к Выемчатые % Хвостатые
■ Неклассифицир. 100% 50% 0%
Рисунок 3 - Частоты микроядер и различных ядерных аномалий в эритроцитах периферической крови индюшат, получавших с кормом витаминный препарат «АЛФАВИТ АДзЕ» в полной и половинной дозах от нормы (100% и 50%, соответственно) и не получавших его (0%)
Частоты эритроцитов с почкующимися ядрами. Почкующимися называют ядра, имеющие характерные выпячивания ядерной оболочки, напоминающие по форме пузыри, заполненные кариоплазмой, сохраняющей тесную связь с хроматином ядра. Полагают, что образование почкующихся ядер связано с амплификацией определённой части генома [18].
Средние частоты почкующихся ядер у птиц первой, второй и третей групп были равны 0,72±0,10, 1,06±0,12, и 2,90±0,20%, соответственно. Статистически достоверные различия между этими величинами отсутствуют. Значения лимитов частот почкующихся ядер у птиц в первой, второй и третьей группах составлял 0,29-1,08, 0,49-1,55 и 0,45-0,58%, соответственно.
Частоты эритроцитов с двулопастными ядрами. Двулопастные ядра имеют несколько вытянутую форму и посередине продольной оси характерное сужение. Образование такой перетяжки, возможно, свидетельствует о раннем этапе амитотического деления клеток. Однако, если двулопастные ядра рассматривать как указание на ранние этапы амитоза, то следует предположить, что среди проанализированных эритроцитов должны были быть обнаружены двуядерные клетки. Вместе с тем «классических» двуядерных клеток у птиц мы не обнаружили. Частота эритроцитов с двулопастными ядрами у птиц первой группы была минимальной (0,17±0,05%о), у птиц второй группы она была выше (0,70±0,10%о) и, наконец, у птиц третей группы она оказалась максимальной -1,47±0,14%. Явный рост частот этих нарушений, однако, не был статистически достоверным.
Частота эритроцитов с выемкой в ядре. У таких ядер чётко просматривается клинообразная инвагинация ядерной оболочки. У индеек эти структуры обычно были расположены у одного из полюсов овального ядра. В ряде случаев в ядрах с выемкой просматривалась аналогичная структура на противоположном полюсе ядра, что создавало картину расщепления ядра вдоль продольной оси на 2 части. Эта аномалия наиболее часто встречалась у птиц всех трёх обследованных групп. Средняя частота ядер с выемкой у птиц первой группы была равна 5,з0±0,27%. У птиц второй группы она увеличивалась до 5,64±0,280%о и в третьей группе их частота была максимальной (7,16±0,з1%). Вместе с тем, статистически достоверные различия между этими величинами отсутствуют.
Частота эритроцитов с хвостатыми ядрами. Аберрации хромосом, вызывающие образование дицентрических хромосом, могут приводить к возникновению при кариокинезе кариоплазматических мостов, формирующихся вокруг тела хромосомы, центромеры которой разошлись к противоположным центриолям и, следовательно, попали в разные дочерние ядра. При разрыве такого кариоплазматического моста остаточная структура в виде клювообразного выроста у ядра или «ядерного хвоста» может ещё некоторое время сохраняться даже после завершения цитокинеза. У семи индюшат первой группы индивидуальные частоты хвостатых ядер варьировали от 0,з9 до 1 ,з9%; средняя же частота была равной 0,76±0,10%. У птиц второй группы частоты оказались ниже, чем в первой, варьируя от 0,10% до 1,07 %%, при средней частоте этой аномалии, равной 0,64±0,09%. Снижение частоты хвостатых ядер во второй группе было статистически недостоверным и, вероятно, обусловлено случайными причинами. Птицы третей группы, не получавшие витаминной добавки, имели самую высокую частоту этой аномалии - 1,22±0,1з%, но различия этой величины от двух предыдущих были статистически недостоверны. На основании этого факта можно сделать заключение, что существенный недостаток витаминов А, йз и Е, вероятно, может вызывать рост частоты образования дицентрических хромосом, приводящих к нарушению корректного распределения наследственной информации между дочерними ядрами.
Частоты эритроцитов с неклассифицированными аномалиями ядер. Наряду с чётко морфологически классифицируемыми ядерными аномалиями в некоторых эритроцитах обнаруживали ядра, морфологические изменения которых не могли быть отнесены ни к одному из описанных выше типов. Из-за отсутствия детально разработанного стандарта выявляемых у сельскохозяйственных птиц ядерных аномалий все они были отнесены к группе неклассифицированных. Их описание и стандартизация для будущих
исследований должна быть предметом отдельной публикации. У птиц первой группы, получившей полную дозу витаминного препарата, средняя частота неклассифицированных аномалий ядер составила 1,01 ±0,12%. Частота этих нарушений ядер в эритроцитах птиц второй группы, получавших половинную дозу витамина, была выше (з,08±0,21%) и у птиц, лишённых витаминной добавки, она была максимальной, достигнув величины 4,55±0,25%. При статистическом сравнении этих трёх величин статистически достоверных различий между ними не обнаружено.
Анализ суммарных частот ядерных аномалий. Механизмы образования отдельных аномалий морфологии ядер ещё не имеют полного объяснения и поэтому часть этих аномалий одни исследователи вынужденно относят к не классифицированным аномалиям, другие просто их не учитывают. Протокол микроядерного теста для птиц пока остаётся не стандартизированным, и разные исследователи используют несколько различные критерии при его выполнении. По этой причине определённой обобщающей характеристикой нестабильности генома может выступать суммарная частота всех ядерных аномалий, обнаруженных у птиц каждой из трёх обследованных групп.
Частоты микроядер и описанных выше ядерных аномалий варьировали от десятых долей до нескольких единиц промилле. Суммы средних частот клеток с аномалиями всех типов у птиц первой, второй и третьей групп были равны 0,88±0,05%, 1,22±0,04% и 1,9з±0,05%, соответственно. Сравнение этих величин показало отсутствие статистически достоверных различий между первой и второй, а также между второй и третьей группами. В то же время средние частоты всех ядерных аномалий у птиц первой и третьей группы имели статистически достоверные различия при Р<0,05. Исходя из этого следует сделать вывод, что у интенсивно развивающихся 6-7-недельных птенцов индейки домашней недостаток в рационе витаминов А, йз, и Е может приводит к дестабилизации генома соматических клеток. При этом не следует исключать возможности возникновения подобных аномалий и в генеративных клетках птиц, что может ставить под угрозу целостность генома будущих поколений этих птиц.
Выводы. На основании полученных результатов исследования можно сделать следующие выводы:
1. Недостаток в рационе 6-7 недельных индюшат витаминов А, йз и Е приводит к понижению в сыворотке крови птиц содержания витамина А на 41,5%, витамина Е - на 55,0% фосфора - на 64,0%, кальция - на 34,0%.
2. Сильно выраженные гиповитаминозы А, йз и Е у птиц усиливают нестабильность генома соматических клеток, приводящую к различным структурным аномалиям хромосом и нарушениям митотических делений, суммарная частота которых может достигать статистически достоверных различий.
Как правило, причинами возникновения витаминной недостаточности при выращивании индюшат являются неполноценный и несбалансированный рацион. Недостаток витаминов в рационе взрослых птиц маточного стада также может способствовать рождению слабого и недоразвитого потомства. Проведённые исследования показали, что включение в рацион индюшат препарата «АЛФАВИТ АДзЕ» обеспечивает восполнение недостатка витаминов у быстро развивающихся индеек, высокую их сохранность и продуктивность. Данный препарат следует рекомендовать для профилактики витаминной недостаточности.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Микроядерный тест генотоксичности и его снижение при добавках к комбикорму птиц фитоминералосорбента / И.Н. Яковлева [и др.] II Учёные записки Казанской акад. вет. медицины им. Н.Э. Баумана. 2013. т. 214. С. 5G6-51G.
2. Фисинин В.И., Егоров И. А. Современные подходы к кормлению высокопродуктивной птицы // Птица и птицепродукты. 2015. № 3. С. 27-29.
3. Жилин, Т.О. Продуктивность и естественная резистентность индеек кросса BIG-6 при использовании биодобавок «Глималаск лакт» и «Агроцид супер олиго»: дис. ... канд. с.-х. наук. Персиановский, 2016. 174 с.
4. Айметов Р.В. Продуктивные качества индюшат при использовании в их рационах симбиотического препарата нового поколения: дис. ... канд. с.-х. наук. Казань, 2G17. 130 с.
б. Разведение сельскохозяйственных животных с основами частной зоотехнии и промышленного животноводства / Н.Г. Дмитриев, А.И. Жигачев, A.B. Вилль [и др.]. Л.: Агропромиздат, 2016. 511 с.
6. Кормление сельскохозяйственных животных. Справочник М.: Росагапромиздат. 2G17. 214 с.
7. Шерстюгина М.А. Использование премиксов и БВМК в кормлении кур: дис. ... канд. с.-х. наук. Волгоград, 2G14. 156 с.
В. Кузнецов А.Ф. Гигиена кормления сельскохозяйственных животных Л.: ВО «Агропромиздат», 2014. 160 с.
9. Красота В.Ф, Джапаридзе Т.Г. Разведение сельскохозяйственных животных. М.: ВНИИплем, 2017. 386 с.
1G. Крюков В.И. Власова Е.Ю. Влияние гиповитаминоза на частоту микроядер в эритроцитах периферической крови индейки домашней (Meleagris gallopavo) // Биология в сельском хозяйстве. 2019. № 3 (24). С. 2-9.
11. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. М.: Медицина, 1975. 295 с.
12. Подобед Л.И. Основные особенности эффективного кормления индеек // Птицепром. 2019. № 2 (43). С 12-14.
13. Канивец В., Шинкаренко Л. Индейководство в России // Главный зоотехник. 2GG9. № 11. С.14.
14. Арзуманян Е.А. Животноводство. М.: ВО «Агропромиздат», 2017. 2G5 с.
15. Hayashi M. The micronucleus test - most widely used in vivo genotoxicity test. II Genes and Environment. 2G16 V. 3В. № 1В. б p. DOI 1G.11B6Is41G21-G16-GG44-x.
16. The Micronucleus Assay in Toxicology (Issues in toxicology, Vol. 39.). Eds: S. Knasmüller, M. Fenech. Cambridge: «Royal Society of Chemistry», 2019. 658 p.
17. Spontaneous micronuclei in peripheral blood erythrocytes from 54 animal species (mammals, reptiles and birds): part two / Zúñiga-González G. [et al.] // Mutation Res. 2GGG. V. 467. № 1. P. 99-1G3.
18. Цитогенетические параметры нестабильности генома птиц в эколого-генетическом мониторинге / М.А. Курса [и др.]. // Проблеми безпеки атомних електростанцм i Чорнобиля. Выпуск 3. Часть 2. Киев, 2005. С. 92-98.
