CC BY
18
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
УДК: 616.24-002-07:615.851:615.4 D01:10.12737/21756
ПРОДУКЦИЯ ЦИТОКИНОВ КЛЕТКАМИ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ В ПОСТКЛИНИЧЕСКУЮ ФАЗУ ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ ПОД ВЛИЯНИЕМ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО МИКРОВОЛНОВОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ЧАСТОТОЙ 1 ГГЦ
С.С. БОНДАРЬ*, И.В. ТЕРЕХОВ*, А.А. ВОЕВОДИН**
* ФГБОУ ВО «Тульский государственный университет», пр-т Ленина, д. 92, г. Тула, 300012, Россия ** ФГБОУ «Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова» Минобороны России, ул. Академика Лебедева, д. 6, г. Санкт-Петербург, 194044, Россия
Аннотация. Цель - исследование цитокинового профиля у лиц с субклиническим иммуновоспа-лительным процессом на примере фазы реконвалесценции внебольничной пневмонии с изучением биологического эффекта облучения клеток цельной крови низкоинтенсивным микроволновым излучением частотой 1 ГГц с помощью аппарата физиотерапии «Акватон».
Материал. Методом иммуноферментного анализа в супернатантах культуры клеток цельной крови пациентов с внебольничной бактериальной пневмонией на 14-20 сутки заболевания определяли концентрацию интерлейкинов (ИЛ): ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-11, ИЛ-12 (р40 и р70), ИЛ-13, ИЛ-15, ИЛ-17А, ИЛ-18, ИЛ-19, ИЛ-21, ИЛ-22, ИЛ-23, ИЛ-24, ИЛ-28А, факторов роста - G-CSF, TGF-fi, FGF-fi, VEGF-A, VEGF-C, а так же концентрацию растворимых форм рецепторов цитокинов - ИЛ-2, ИЛ-4 и VEGF.
Выводы. Проведенный анализ показал сохранение у пациентов, перенесших внебольничную пневмонию статистически значимого повышения продукции ИЛ-2, -13, -18, -19, -21, -23, -24, FGF-p, а так же растворимой формы рецептора I-типа к VEGF и ИЛ-4.
Установлено активирующее действие низкоинтенсивной микроволновой терапии, реализуемой с помощью аппарата «Акватон», на продукцию клетками цельной крови факторов роста (VEGF-A, VEGF-C, TGF-в) и цитокинов (ИЛ-21, ИЛ-22, ИЛ-15, ИЛ-12, ИЛ-28А). Спустя 3 часа после воздействия отмечено угнетение продукции ИЛ-2, ИЛ-19 и ИЛ-13. Показано, что эффекты облучения проявляются спустя 3 часа и регистрируются в течение суток после прекращения облучения.
Ключевые слова: пневмония, цитокины, факторы роста, микроволновое излучение.
CYTOKINES PRODUCTION BY WHOLE BLOOD CELLS IN POST-CLINICAL PHASE OF COMMUNITY-ACQUIRED PNEUMONIA UNDER THE INFLUENCE OF LOW-INTENSITY MICROWAVE RADIATION WITH A FREQUENCY OF 1 GHZ
S.S. BONDAR*, I.V. TEREKHOV*, A.A. VOEVODIN**
'Tula State University, Prospekt Lenina 92, Tula, Russia, 300012; "Russian Military Medical Academy, Akademika Lebedeva street, 6, Saint-Petersburg, Russia, 194044
Abstract. The research purpose was to study the cytokine profile in persons with subclinical immune inflammatory process on the example of recovery of community-acquired pneumonia with the study of the biological effects of irradiation of whole blood cells by low-intensity microwave radiation using the apparatus physiotherapy "Aquaton".
Methods. By ELISA in cell culture supernatants of cells of whole blood of convalescents community-acquired bacterial pneumonia (14-20 day of the disease) it was determined the level of interleukin (IL): (IL-2, IL-4, IL-11, IL-12 (P40 and P70), IL-13, IL-15, IL-17A, IL-18, IL-19, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-28A), growth factors (G-CSF, TGF-p, FGF-p, VEGF-A, VEGF-C) and the concentration of soluble forms of receptors of cytokines (IL-2, IL-4 and VEGF).
Results. It was revealed the activating action of low-intensity microwave therapy using the apparatus "Aquaton", on products cells whole blood growth factors (VEGF-A, VEGF-C, TGF-p) and cytokines (IL-21, IL-22, IL-15, IL-12, IL-28A). In irradiated cultures 3 hours after irradiation of the marked inhibition of the
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
production of IL-2, IL-19, IL-13 by 3 hours after irradiation. It was shown that the effects of exposure of cells occur after 3 hours after exposure and continue for days after cessation of exposure.
Conclusion. Low-intensity microwave radiation allows to modulate the functional activity of whole blood cells by enhancing production of cytokines that activates innate protection of epithelial tissues and to stimulate the repair and regeneration of tissues by increasing production of growth factors.
Key words: cytokines, subclinical inflammation, community-acquired pneumonia, growth factors, microwave radiation.
Межклеточное информационное взаимодействие, осуществляемое посредством сигнальных молекул - цитокинов является решающим в формировании саногенетической реакции и репарации повреждений клеток и тканей после перенесенного заболевания [7,17,23]. При этом в ряде случаев, формированию адекватной реакции организма в ответ на антигенную нагрузку препятствует дизрегуля-ция внутриклеточных сигнальных путей, сопровождающаяся нарушением продукции ци-токинов и факторов роста [13].
Развитие патологического процесса, приводящего к формированию внутриклеточных нарушений, модифицируя межклеточный информационный обмен, нередко сопровождается переходом патологического процесса в хроническую форму, а так же развитием аллергических и аутоиммунных нарушений, что требует применения как медикаментозных, так и немедикаментозных методов коррекции и молекулярной реабилитации таких больных [6,13,1922].
Коррекция патологических нарушений при формировании дизрегуляции требует системного подхода и локального воздействия на звенья патогенеза, вместе с тем, корригирующее воздействие должно являться системообразующим, не приводить к дальнейшей разба-лансировке молекулярной системы [3].
Одним из таких факторов, позволяющих обеспечить системный подход к коррекции и нормализации молекулярных взаимодействий, является низкоинтенсивное микроволновое излучение частотой 1 ГГц. Данный фактор, позволяя нормализовать молекулярно-волновое состояние водных и водосодержащих сред, обеспечивает нормализацию биохимических процессов в клетках [9,19]. Проведенные исследования показали, что воздействие на клетки микроволнами резонансной частоты - 1 ГГц, приводит к изменению внутриклеточного уровня регуляторных белков MAPK/SAPK, JAK/STAT, AKT/mTOR-сигнальных путей, содержания в
клетке транскрипционных факторов и адап-торных протеинов [8-11,15,16,18]. При этом влияние микроволн в отдельных случаях проявляется в течение нескольких минут изменением продукции вазоактивных молекул [14].
Цель исследования - оценка цитокиново-го профиля у лиц с субклиническим иммуно-воспалительным процессом на примере рекон-валесцентов внебольничной пневмонии с изучением биологического эффекта облучения клеток цельной крови низкоинтенсивным микроволновым излучением с помощью аппарата низкоинтенсивной физиотерапии «Акватон».
Материалы и методы исследования. Обследовано 30 пациентов мужского пола с внебольничной бактериальной пневмонией (ВП) нетяжелого течения в стадии реконвалесценции (14-20 сутки ВП) в возрасте 20-35 лет и 15 здоровых мужчин, сопоставимых основной группе по возрасту.
Путем разделения пробы венозной крови от каждого больного на две части, формировали основную группу. Первая (I) подгруппа основной группы включала необлученные образцы крови больных ВП (и=30), II-я - образцы, подвергнутые воздействию микроволн в течение 45 минут (и=30). При работе с образцами, включая облучение и культивирование, использовали наборы «Цитокин-Стимул-Бест» производства ЗАО «Вектор Бест».
Для проведения исследования 1 мл цельной крови вносили во флакон, содержащий 4 мл среды DMEM, гепарин (2,5 ЕД/мл), гента-мицин (100 мкг/мл) и L-глютамин (0,6 мг/мл). Подготовленные таким образом образцы облучали в течение 45 минут аппаратом микроволновой терапии «Акватон-02» (ООО «ТЕЛЕМАК», г. Саратов), на частоте 1,0±0,03 ГГц (плотность потока энергии 50 нВт/см2) [5,14]. После облучения флаконы с образцами крови помещались на 24 часа в термостат при 37 0С. Подсчет клеток и анализ жизнеспособности осуществляли с помощью счетчика TC20 (BioRad, США). Жизнеспособность клеток подготовленных культур составляла не менее 90%.
10ШМАЬ ОБ ШШ МБЭТСАЬ ТБСНМОШСТББ - 2016 - V. 23, № 3 - Р. 112-121
Таблица 1
Концентрация исследованных факторов в группах
Фактор Группа контроля Основная г руппа
х ц25 Ме ц75 х 2 Ме ц75 Д,%
ИЛ-2 0,89 0,81 0,89 0,98 1,82 1,32 1,73 2,18 103,4
рИЛ-2 1,22 0,65 1,23 1,78 1,32 1,03 1,18 1,67 8,6
ИЛ-4 1,12 0,69 1,1 1,54 1,65 0,75 1,83 2,21 48,3
рИЛ-4 0,72 0,68 0,72 0,76 2,32 1,83 2,23 3,1 222,7
ИЛ-11 1,58 1,27 1,58 1,9 2,11 0,98 2,47 3,46 33,7
ИЛ-12р40 0,6 0,5 0,62 0,7 1,93 1,16 1,78 2,23 221,2
ИЛ-12р70 0,69 0,64 0,7 0,74 1,84 1,35 1,73 2,45 167,1
ИЛ-13 0,9 0,82 0,92 0,99 1,73 0,96 1,83 2,27 91,8
ИЛ-15 0,79 0,72 0,79 0,86 1,32 0,58 1,14 1,75 68,0
ИЛ-17А 1,67 1,45 1,67 1,89 1,49 1,09 1,35 1,88 -10,7
ИЛ-18 0,72 0,66 0,73 0,79 1,71 1,13 1,76 2,24 136,6
ИЛ-19 0,75 0,69 0,76 0,8 1,95 0,97 2,14 2,71 161,4
ИЛ-21 0,71 0,65 0,73 0,78 1,88 1,02 1,45 2,67 164,1
ИЛ-22 1,12 1,06 1,15 1,18 1,78 1,1 1,26 2,77 59,5
ИЛ-23 0,83 0,7 0,83 0,95 1,66 0,85 1,78 2,3 101,3
ИЛ-24 0,98 0,91 0,98 1,04 2,47 2,16 2,3 2,73 152,9
ИЛ-28А 1,03 1,0 1,04 1,06 1,11 0,84 1,1 1,26 7,6
в^вЕ 4,66 3,54 4,66 5,79 4,61 3,53 4,44 5,75 -1,1
твт-рг 0,95 0,77 0,96 1,14 1,5 1,01 1,37 1,84 57,1
ЕвЕ-р 0,87 0,8 0,87 0,95 1,96 1,09 2,14 2,73 124,8
УЕвГ-А 1,27 0,99 1,28 1,55 0,93 0,71 0,91 1,07 -26,6
УЕв¥-С 1,03 0,92 1,03 1,15 1,49 0,97 1,08 2,27 44,9
УЕвЕ-Ы 0,85 0,79 0,87 0,91 1,81 1,17 1,83 2,47 113,6
%р130 2,16 2,06 2,15 2,26 2,09 1,91 2,13 2,26 -3,1
Примечание: А - различие средних значений концентраций в группах (%)
Таблица 2
Оценка статистической значимости межгрупповых различий
Фактор ^-критерий Z-критерий Уровень значимости, p
ИЛ-2 1,0 -4,26 0,0000
рИЛ-2 101,0 -0,68 0,52
ИЛ-4 60,0 -2,15 0,03
рИЛ-4 8,5 -3,99 0,0000
ИЛ-11 99,5 -0,73 0,47
ИЛ-12р40 0,0 -4,3 0,0000
ИЛ-12р70 2,0 -4,23 0,0000
ИЛ-13 23,5 -3,46 0,0002
ИЛ-15 64,5 -1,99 0,045
ИЛ-17А 91,5 1,02 0,31
ИЛ-18 9,5 -3,96 0,0000
ИЛ-19 1,0 -4,26 0,0000
ИЛ-21 15,0 -3,76 0,0000
ИЛ-22 68,5 -1,84 0,06
ИЛ-23 41,0 -2,83 0,003
ИЛ-24 0,0 -4,3 0,0000
ИЛ-28А 90,0 -1,07 0,3
ЯР130 99,5 0,73 0,47
в-свг 115,5 0,16 0,87
ТвЕ-в 42,0 -2,79 0,004
ЕвЕ-в 23,0 -3,47 0,0002
УЕвЕ-А 55,5 2,31 0,02
УЕвЕ-С 92,5 -0,98 0,33
УЕвЕ-Ш 3,0 -4,19 0,0000
Оценка гуморальных факторов, проводилась методом иммуноферментного анализа (ИФА) и включала определение в клеточном супернатанте концентрации интерлейкинов ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-11, ИЛ-12 (р40 и р70), ИЛ-13, ИЛ-15, ИЛ-17А, ИЛ-18, ИЛ-19, ИЛ-21, ИЛ-22, ИЛ-23, ИЛ-24, ИЛ-28А, С^Г, ТСГ-р, ГСГ-р, УЕСГ-А, УЕСГ-С, растворимой формы рецепторов к ИЛ-2, ИЛ-4, УЕСГ 1 типа (УЕСГ^1), а так же гликопротеина gp130.
Статистическую обработку проводили в программе Statistica 7,0. В ходе исследования рассчитывалось среднее значение показателя (х), медиана (Ме), а так же 25 и 75% процентили выборки (ц25; ц75). Статистическую значимость (р) межгрупповых различий в несвязанных выборках оценивали с помощью ^-критерия Вил-коксона (однофакторного дисперсионного анализа), в зависимых - с использованием критерия знаков [21].
Результаты и их обсуждение. Концентрация исследованных факторов представлена в табл. 1.
Результаты проведенного исследования, представленные в табл. 1, свидетельствуют о том, что реконвалесценция ВП, сопровождающаяся сохранением минимального числа клинических проявлений и лабораторных признаков, относящихся преимущественно к функциональным нарушениям, протекает на фоне выраженных нарушений цитокинового профиля. В частности, у реконвалесцентов ВП отмечается значительное повышение сывороточной концентрации ИЛ-2, растворимой формы рецептора к ИЛ-4, -13, -18, -19, -21, -23, -24, ГСГ-р, а так же растворимой формы УЕСГ-К1. При этом у обследованных пациентов имеет место снижение уровня растворимой формы gp130, ИЛ-17А, С-CSГ и УЕСГ-А в сравнении с группой контроля.
Результаты анализа статистической значимости выявленных различий представлены в табл. 2.
Проведенный анализ свидетельствует о существенных различиях продукции цитокинов у больных ВП, сохраняющихся в фазу реконва-лесценции. Так, из 27 исследуемых медиаторов, продукция 9 провоспалительных цитокинов в фазу реконвалесценции соответствует значени-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
ям группы контроля. При этом у обследованных пациентов отмечается повышение более чем в два раза продукции ИЛ-2, -12, -18, -19, -21, -23, -24, FGF-fî, на фоне увеличения продукции растворимой формы рецептора ИЛ-4 в 3,2 раза, а VEGF-RI в 2,2 раза. Уровень VEGF-A у реконва-лесцентов при этом отличается статистически значимым снижением в сравнении с группой контроля. Умеренное повышение продукции (на 33-90%) характерно для ИЛ-4, -11, -13, -15, -22, TGF-в, VEGF-C. Концентрация ИЛ-28А и растворимой формы рецептора ИЛ-2 характеризовалась минимальными различиями с группой контроля. При этом у реконвалесцен-тов ВП наблюдалось более выраженное повышение уровня ИЛ-13, в сравнении с ИЛ-4. Соотношение ИЛ-4/ИЛ-12р70 отражающее баланс активности хелперов Тх2/Тх1-типа, у реконва-лесцентов ВП статистически значимо снижено с 1,6 до 0,9 ед. (р=0,013).
Таким образом, у обследованных больных наблюдается нормализация продукции регулятора активации, T-клеточной экспрессии и секреции - G-CSF, ИЛ-11, -17А, -22, -28А, растворимых рецепторов ИЛ-2 и VEGF-С, а так же растворимой формы gp130.
С учетом выявленных особенностей содержания в межклеточной жидкости исследованных цитокинов, можно полагать, что постклиническое течение ВП характеризуется отсутствием миграционной стимуляции клеток крови и восстановлением исходной активности сигнального пути транслирующего сигналы цитокинов ответа острой фазы, в том числе, семейства ИЛ-6 [7]. Проведенный анализ так же показал, что у реконвалес-центов ВП имеет место высокая активность моно-цитарно-макрофагального клеточного пула и Т-хелперов 1 типа. Кроме того, саногенетический характер изменений у обследованных больных проявляется активацией В-клеток, а так же стимуляцией репарации соединительной ткани и сосудистого эндотелия.
Результаты оценки эффектов воздействия на культуры клеток цельной крови микроволн частотой 1 ГГц спустя 3 часа после облкчения представлены в табл. 3.
Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что однократное облучение культуры клеток цельной крови спустя 3 часа после воздействия приводит к активации клеток, сопровождающейся модификацией установив-
шейся цитокиновой сети. Так, установлено, что под воздействием микроволн уровень ИЛ-12р70 в культуре возрастал на 38,7%, при вдвое меньшем повышении (19,2%,) его функционального антагониста - ИЛ-4, что определяло смещение поляризации наивных Т-хелперов в направлении Тх1-типа.
Таблица 3
Продукция исследованных факторов спустя 3 часа после облучения (пг/мл)
Фактор Подгруппы основной группы Д,%
I II
х Q25 Ме Q75 х Q25 Ме Q75
gp130 2,6 2,26 2,41 3,05 2,67 2,32 2,5 3,14 2,6
G-CSF 4,99 4,12 5,48 5,97 5,18 4,3 5,64 6,32 3,8
ИЛ-23 1,87 1,36 1,64 2,39 1,95 0,88 2,81 2,96 4,3
рИЛ-2 1,81 1,14 2,15 2,46 2,0 1,78 2,05 2,24 10,5
FGF-ß 1,58 0,87 1,22 2,26 1,78 1,02 1,46 2,45 12,7
ИЛ-4 1,93 1,44 2,15 2,46 2,3 2,02 2,12 2,65 19,2
TGF-ß1 0,88 0,59 0,84 1,17 1,05 0,76 0,97 1,31 19,3
ИЛ-11 2,05 1,24 2,34 2,81 2,45 2,21 2,3 2,7 19,5
VEGF-RI 1,08 0,85 1,0 1,24 1,31 1,03 1,24 1,52 21,3
VEGF-A 0,67 0,27 0,39 1,17 0,84 0,47 0,57 1,31 25,4
ИЛ-28А 0,72 0,28 0,79 1,17 0,91 0,83 0,93 1,07 26,4
ИЛ-18 1,83 1,26 1,84 2,51 2,48 2,15 2,23 2,97 35,5
VEGF-C 0,55 0,41 0,47 0,73 0,75 0,62 0,72 0,97 36,4
ИЛ-12р70 1,86 1,34 1,67 2,46 2,58 2,43 2,56 2,78 38,7
ИЛ-21 1,83 0,93 1,18 2,81 2,59 2,25 2,74 2,96 41,5
ИЛ-22 0,67 0,27 0,39 1,17 1,04 0,81 0,98 1,29 55,2
ИЛ-15 2,21 1,38 2,01 2,75 3,48 2,38 3,18 3,91 57,5
ИЛ-12р40 1,69 0,87 2,19 2,42 2,67 1,97 2,9 3,07 58,0
рИЛ-4 0,73 0,27 0,79 1,17 2,49 2,07 2,38 2,94 241,1
ИЛ-2 2,13 1,24 2,34 3,12 1,51 1,37 1,53 1,56 -29,1
ИЛ-19 2,55 2,22 2,49 2,63 2,29 1,9 2,43 2,54 -10,2
ИЛ-13 2,6 1,87 2,43 2,76 2,43 2,13 2,53 2,75 -6,5
ИЛ-24 1,98 0,93 2,63 2,84 1,86 0,76 2,26 2,94 -6,1
ИЛ-17А 2,84 1,54 2,13 3,89 2,73 2,28 2,61 3,14 -3,9
Примечание: А - различие концентраций до и после облучения (%)
Так же об активации клеточного иммунного ответа свидетельствует увеличение продукции ИЛ-21, продуцируемого активированными CD4 Т-лимфоцитами, действующего синергич-но с ИЛ-15 и активирующего как наивные Т-клетки, так и клетки памяти, несущие маркер цитотоксических клеток - CD8.
Стимуляция продукции ИЛ-22, подавляющего продукцию ИЛ-4 и ограничивающего гуморальный ответ, обеспечивает усиление синтеза компетентными клетками ряда защитных факторов, таких как дефензины, белок S100 и ряда других и может быть связано с последующим повышением фагоцитарной активности клеток крови, что наряду с повышением про-
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2016 - Т. 23, № 3 - С. 112-121 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
дукции матриксных металлопротеиназ, включая ММП-3 и -13 способно приводить к ускорению резорбции макрофагами продуктов воспаления.
Снижение продукции ИЛ-19 и ИЛ-13, а так же рост концентрации растворимых форм рецепторов к ИЛ-4 свидетельствуют об угнетении функциональной активности Т-хелперов 2 типа и торможении гуморального иммунного ответа. При этом очевидно, что активированные антигенпрезентирующие клетки продуцируют значительные количества цитокинов способствующих поляризации Т-клеток в направлении Т-хелперов 2 типа, что позволяет говорить о последующей активации гуморальных иммунных реакций у реконвалесцентов ВП [3,7].
Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что эффекты микроволн частотой 1 ГГц, регистрируемые спустя 3 часа после облучения, могут быть
ранжированы в следующую последовательность по мере возрастания их величины: ^130 ^ С-СББ ^ ИЛ-17А ^ ИЛ-24 ^ ИЛ-23 ^ ИЛ-13 ^ ИЛ-19 ^ рИЛ-2 ^ РСР-(3 ^ ИЛ-4 ^ ТСР-р1 ^ ИЛ-11 ^ УЕСБ-Ы ^ УЕСБ-А ^ ИЛ-28А ^ ИЛ-2 ^ ИЛ-18 ^ УЕСБ-С ^ ИЛ-12р70 ^ ИЛ-21 ^ ИЛ-22 ^ ИЛ-15 ^ ИЛ-12р40 ^ рИЛ-4.
Проведенное исследование свидетельствует о снижении клетками, подвергнутыми облучению продукции ИЛ-2, -13, -17А, -19 и -24. Инги-бирующее влияние микроволн на продукцию данных цитокинов составляло от 6,1 до 29,1%.
Оценка межгрупповых различий средних значений исследуемых цитокинов проводилась с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Результаты анализа представлены в табл. 4.
Проведенный анализ показал, что однократное воздействие на культуру клеток цельной крови микроволн частотой 1 ГГц спустя 3 часа после облучения, проявляется статистически значимыми эффектами в отношении продукции клетками важнейших цитокинов. в частности ИЛ-2, -12, -15, -18, -21, -22, УЕСЕ-С. В этих случаях продукция цитокинов существенно превышает индивидуальные групповые различия их исходных концентраций. Вместе с тем, проведенный анализ показал, что проводимое воздействие не сопровождается статистически значимым изменением продукции отдельных цитокинов, уровень которых после облучения возрастал всего на 3-7%.
Однако клетки, для которых изучаемые факторы являются информационными сигналами, способны улавливать различия их концентраций менее 1%, что позволяет говорить о том, что биологическое действие облучения может проявляться в отсутствие статистически значимых различий их концентраций, которые могут отсутствовать по причине недостаточной статистической мощности используемых математических критериев либо небольшой численности наблюдений.
Результаты оценки динамики продукции цитокинов клетками цельной крови спустя 24 часа после облучения представлены в табл. 5.
Tаблица 4
Оценка статистической значимости выявленных различий спустя 3 часа после облучения
Фактор SS Effect MS Effect SS Error MS Error F-критерий p
ИЛ-2 2,9 2,9 13,7 G,49 5,9 G,G2
рИЛ-2 G,29 G,29 9,4 G,34 G,9 G,36
ИЛ-4 1,G2 1,G2 7,67 G,27 3,7 G,G6
рИЛ-4 23,2 23,2 6,69 G,24 97,1 G,GG
ИЛ-11 1,2 1,2 14,1 G,5 2,4 G,13
ИЛ-12р40 7,25 7,25 14,9 G,53 13,7 G,GG
3,92 3,92 6,85 G,24 16,G G,GG
ИЛ-1З G,21 G,21 21,6 G,77 G,3 G,6
ИЛ-15 12,1 12,1 43,7 1,7 7,7 G,G1
ИЛ-17А G,1 G,1 42,9 1,53 G,G6 G,8
ИЛ-18 3,12 3,12 1G,1 G,36 8,7 G,G1
ИЛ-19 G,53 G,53 5,3 G,19 2,8 G,1
ИЛ-21 4,28 4,28 22,1 G,79 5,4 G,G3
ИЛ-22 1,G5 1,G5 3,79 G,14 7,7 G,G1
ИЛ-2З G,G6 G,G6 22,4 G,8 G,G7 G,79
ИЛ-24 G,1 G,1 31,1 1,11 G,G9 G,77
ИЛ-28А G,27 G,27 3,2 G,ll 2,4 G,14
G-CSF G,25 G,25 44,3 1,58 G,16 G,69
TGF-ß1 G,21 G,21 2,77 G,1 2,1 G,16
FGF-ß G,29 G,29 18,3 G,65 G,44 G,51
VEGF-A G,22 G,22 5,19 G,19 1,2 G,28
VEGF-C G,31 G,31 1,14 G,G4 7,6 G,G1
sVEGF-RI G,4 G,4 3,G5 G,ll 3,7 G,G7
gp130 G,22 G,22 44,6 1,6 G,15 G,71
Примечание: SS Effect - сумма квадратов факторов (эффектов); df Effect - число степеней свободы фактора (эффекта); MS Effect - средний квадрат фактора (эффекта); SS Error - сумма квадратов (ошибки); df Error - число степеней свободы (ошибки); MS Error - оценка дисперсии (остаточная дисперсия); F - значение статистики Фишера; p - статистическая значимость (вероятность принятия нулевой гипотезы)
10ШМАЬ ОБ ШШ МБЭТСАЬ ТЕСНМОБОСТЕБ - 2016 - V. 23, № 3 - Р. 112-121
Таблица 5
Продукция исследованных факторов спустя 24 часа после облучения (пг/мл)
Фактор Подгруппы основной группы Д,%
I II
х Я25 Ме Я75 х Я25 Ме Я75
в-СБЕ 4,62 3,53 4,44 5,76 4,68 3,59 4,47 5,84 1,3
ИЛ-2 1,62 1,01 1,43 2,14 1,66 1,06 1,47 2,17 2,3
ЯР130 2,10 1,94 2,13 2,26 2,18 2,0 2,21 2,33 3,6
ЕвЕ-в 1,73 0,93 1,18 2,31 1,79 1,02 1,25 2,36 3,6
ТвЕ-в1 1,38 0,99 1,16 1,73 1,44 1,04 1,23 1,78 4,0
УЕвЕ-Ш 1,61 0,96 1,19 2,24 1,69 1,07 1,25 2,31 4,9
УЕвЕ-С 1,39 0,94 1,08 1,88 1,47 1,03 1,14 1,95 5,3
УЕвЕ-А 1,0 0,77 0,96 1,13 1,06 0,81 1,04 1,17 5,8
рИЛ-4 1,98 0,78 2,16 2,75 2,12 0,84 2,24 2,94 7,2
рИЛ-2 1,3 0,98 1,18 1,76 1,39 1,04 1,31 1,83 7,4
ИЛ-11 2,0 1,1 1,87 2,84 2,18 1,23 1,97 3,03 9,1
ИЛ-19 1,69 0,86 1,16 2,32 1,86 1,01 1,43 2,56 9,8
ИЛ-18 1,5 0,77 1,42 1,99 1,65 0,84 1,73 2,07 9,9
ИЛ-12р40 1,65 0,92 1,45 2,2 1,82 1,13 1,61 2,41 10,4
ИЛ-21 1,64 0,77 1,35 2,62 1,84 0,82 1,54 2,87 12,3
ИЛ-13 1,56 0,94 1,15 2,25 1,75 1,06 1,35 2,42 12,5
ИЛ-24 2,15 1,84 2,23 2,72 2,43 1,96 2,65 2,93 12,9
ИЛ-4 1,54 0,75 1,61 2,14 1,75 1,03 1,76 2,23 13,5
ИЛ-17А 1,53 1,13 1,47 1,88 1,75 1,35 1,58 2,02 14,3
ИЛ-22 1,64 1,1 1,19 1,84 1,87 1,22 1,47 1,95 14,3
ИЛ-12р70 1,6 0,78 1,48 2,35 1,84 1,17 1,78 2,66 14,8
ИЛ-15 1,21 0,68 0,89 1,63 1,41 0,86 1,03 1,82 16,4
ИЛ-23 1,48 0,78 1,34 2,23 1,74 0,94 1,63 2,62 16,9
ИЛ-28А 1,09 0,96 1,04 1,17 1,32 1,1 1,23 1,53 20,9
Примечание: А - различие концентраций до и после облучения (%)
Анализ результатов исследования свидетельствует о биотропных свойствах микроволн частотой 1 ГГц, проявляющихся ростом продукции клетками цельной крови иммунорегу-ляторных цитокинов. Максимум эффекта облучения отмечается в отношении продукции ИЛ-15, ИЛ-23 и ИЛ-28А, модулирующих активность врожденного иммунного ответа, в частности противовирусной защиты. Кроме этого, уровень ИЛ-4, ИЛ-12, ИЛ-17А, регулирующих адаптивные иммунные реакции, в частности поляризацию Т-хелперов, так же существенно увеличивается под влиянием облучения.
Рассматривая динамику продукции цито-кинов спустя 3 часа после облучения клеток и спустя сутки после воздействия, можно отметить минимальный уровень стимуляции облучением продукции клетками ростовых факторов, хемокинов, а так же растворимых рецепто-
ров цитокинов.
Проведенный анализ показал, что, несмотря на снижение в течение 24-ти часов после однократного воздействия концентрации цитокинов, в обследованных культурах активационный импульс облучения отчетливо просматривается на протяжении суток после его прекращения. Вместе с тем, полученные данные относительно влияния облучения на средние значения концентрации исследованных цитокинов не в полной мере отражают особенностей данного воздействия.
Анализ биологических эффектов облучения с учетом характера статистического распределения концентрации конкретного цитокина в экспериментальной группе и группе сравнения свидетельствует, что в ряде случаев такой эффект существенным образом определяется исходной концентрацией цитокина в супернатанте, т.е. его исходной продукцией клеткой, а значит ее функциональным состоянием.
Так, влияние однократного СВЧ-облучения культуры цельной крови на среднее значение концентрации в супернатанте ИЛ-4 составило 13,6%. Однако, сравнение статистического распределения концентрации ИЛ-4 до и после воздействия свидетельствует о том, что уровень ИЛ-4 находящийся в границах 1 квартиля (0,75 пг/мл), под влиянием облучения возрос на 37,3%, соответствующий медиане выборки (1,61 пг/мл) - на 9,3%, 4-му квартилю (2,14 пг/мл) - всего на 4,0%. Таким образом, облучение в большей степени способствует росту продукции ИЛ-4 и приближению минимальных его значений продукции к среднему значению. Подобный характер воздействия так же показателен для ИЛ-12 р70 (50; 20,3 13,2)%, ИЛ-15 (26,5; 15,7; 11,7)%, ИЛ-17А (19,5; 7,5; 7,4)%, ИЛ-19 (17,4; 23,3; 10,3)%, ИЛ-22 (10,9; 23,5; 6,0)%, ИЛ-28А (14,6; 18,3; 30,8)%, ГСГ-р (9,7; 5,9; 2,2)%, УЕСГ-Ш1 (11,5; 5,0;3,1)%.
Полученные результаты свидетельствует о том, что облучение, не увеличивая абсолютных значений продукции соответствующих цито-кинов, влияет на индивидуальную реактивность клеток таким образом, чтобы обеспечить наиболее оптимальное функционирование клеточной системы вокруг некоторого «средового по-пуляционного оптимума». В том случае, если клетка в нем уже пребывает, облучение не приводит к существенным изменениям продукции, если же клетка отстоит от него, то облучение
1ОШМАЬ ОБ ШШ МЕЭ1САЬ ТЕСНМОЬОИЕБ - 2016 - V. 23, № 3 - Р. 112-121
способствует приближению клетки к некоторому целевому уровню секреции цитокина, являющегося следствием происходящих в клетке изменений реактивности на окружающие ее стимулы, включая концентрацию цитокинов.
Анализ результатов показывает, что воздействие СВЧ-облучения сопровождается изменением средних значений продукции исследуемых цитокинов и их концентрации в супер-натанте в пределах 10-20%, при этом эффект облучения возрастает в следующей последовательности: ИЛ-12р40 ^ ИЛ-21 ^ ИЛ-13 ^ ИЛ-24 ^ ИЛ-4 ^ ИЛ-17А ^ ИЛ-22 ^ ИЛ-12р70 ^ ИЛ-15 ^ ИЛ-23 ^ ИЛ-28А. Эффекты облучения в диапазоне 5-10% были выявлены в отношении следующих медиаторов: УЕСГ-С ^ УЕСГ-А ^ рИЛ-4 ^ рИЛ-2 ^ ИЛ-11 ^ ИЛ-19 ^ ИЛ-18. Группу хемоаттрактантов и факторов роста, в которой изменение концентрации составило менее 5%, можно представить следующим образом: ССГ ^ ИЛ-2 ^ ГСГ-р ^ ТСГ-^1 ^ УЕСГ-Ш1. Проведенный анализ указывает на повышение чувствительности продукции исследованных хемокинов и факторов роста под влиянием микроволн. Однако влияние излучения на продукцию клетками ростовых факторов, в целом, существенно ниже, чем цитоки-нов, регулирующих активность иммунокомпе-тентных (не гемопоэтических) клеток.
Таким образом, наименьшее влияние облучения, из спектра исследованных медиаторов, отмечено в отношении продукции ростовых факторов, включая С-CSГ, ИЛ-2, ГСГ-р, ТСГ-р1, УЕСГ-С, УЕСГ-А. Вместе с тем, наиболее выражено под влиянием микроволн менялась продукция цитокинов, регулирующих адаптивный иммунный ответ, в частности, Т/В-клеточную кооперацию - ИЛ-4, -17А, -22, -12, -15, -23, -28А.
Результаты анализа межгрупповых различий средних значений исследуемых цитокинов в группах представлены в табл. 6.
Применение для оценки статистической значимости межгрупповых различий критерия знаков, обеспечивающего проверку нулевой гипотезы о различии медиан двух выборок, путем оценки знака разницы двух повторных наблюдений позволило установить наличие эффекта обработки (облучения) спустя 24 часа после однократного воздействия на клетки микроволн частотой 1 ГГц. Данный критерий не
учитывает величину имеющегося эффекта, отмечая лишь его фактическое наличие, что в целом, учитывая дополнительные результаты, полученные в настоящем исследовании, достаточно для надежного подтверждения влияния микроволн на функциональную активность клеток цельной крови.
Таблица 6
Оценка статистической значимости выявленных различий
Цитокин Z-критерий Уровень значимости, р
ИЛ-2 3,1 0,002
рИЛ-2 3,6 0,0003
ИЛ-4 3,6 0,0003
рИЛ-4 3,6 0,0003
ИЛ-11 3,6 0,0003
ИЛ-12р40 3,6 0,0003
ИЛ-12р70 3,6 0,0003
ИЛ-13 3,6 0,0003
ИЛ-15 3,6 0,0003
ИЛ-17А 3,6 0,0003
ИЛ-18 3,6 0,0003
ИЛ-19 3,6 0,0003
ИЛ-21 3,6 0,0003
ИЛ-22 3,6 0,0003
ИЛ-23 3,6 0,0003
ИЛ-24 3,6 0,0003
ИЛ-28А 3,6 0,0003
в-СБЕ 3,6 0,0003
ТвЕ-в1 3,6 0,0003
ЕвЕ-в 3,6 0,0003
УЕвЕ-А 3,6 0,0003
УЕвЕ-С 3,6 0,0003
зУЕвЕ-Ш 3,6 0,0003
ЯР130 3,6 0,0003
Результаты проведенного анализа показали, что однократное низкоинтенсивное СВЧ-воздействие на культуры клеток цельной крови сопровождается существенными изменениями внутриклеточной активности, о чем свидетельствует полученная динамика продукции цито-кинов. Динамика представленных эффектов позволяет утверждать, что в течение 3-х часов после воздействия низкоинтенсивного микроволнового излучения частотой 1 ГГц происходит активация молекулярных систем мононук-леарных клеток (преимущественно моноцитов и дендритных клеток, а так же В1 -лимфоцитов) с повышением их функциональной активности в виде продукции цитокинов, приводящей в конечном итоге к активации адаптивного иммунного ответа и усилением дифференцировки Т-хелперов 1 типа. Спустя сутки после однократного воздействия формируются условия
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2016 - Т. 23, № 3 - С. 112-121 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
для активации гуморального звена иммунной регуляции и увеличения продукции В1-лимфоцитами низкоаффинных иммуноглобулинов, а так же дифференцировки В-лимфоцитов в плазматические клетки [18].
Результаты проведенного исследования позволяют говорить о том, что важным молекулярным механизмом изменения в межклеточной жидкости уровня цитокинов, является изменение их продукции в виду изменения активности транскрипционных факторов, в частности ядерного фактора транскрипции NF-kB [11,18]. Кроме того, изменение функциональной активности клеток, наблюдающееся под влиянием микроволн, очевидно, является следствием изменения активности, т.е. уровня фос-форилирования адапторных протеинов связанных с мембранными рецепторами, в частности, рецептора ИЛ-1, а так же компонентов JAK/STAT-сигнального пути [4,17]. При этом важными компонентами рецепторных сигнальных путей, активность которых изменяется под влиянием облучения - являются терминальные протеинкиназы MAPK/SAPK-сигнального пути и сигнальные трансдукторы и активаторы транскрипции (STAT-белки), обеспечивающие активацию немедленных генов предранней реакции, а также быстрое изменение реактивности клеток цельной крови в отношении таких цитокинов, как ИЛ-4, ИЛ-12, интерфероны I и III типа [1-4,12].
Таким образом, резонансное излучение молекул воды частотой 1 ГГц при воздействии на водосодержащие среды в условиях дизрегу-ляции молекулярных процессов способствует восстановлению нормальных биофизических параметров внутренней среды, тем самым приводя к развитию биологических эффектов, проявляющихся нормализацией и гармонизацией межклеточных взаимодействий [6,10,11,12,14,
Литература
18]. Коррекция молекулярного состояния рецептор-зависимых сигнальных путей опосредованная нормализацией биофизических параметров внутренней среды облученных клеток обеспечивает формирование саногенетических реакций на уровне ткани и целостном организме, определяя молекулярную реабилитацию как важный компонент в спектре терапевтических методов при самом широком диапазоне патологических процессов [6,10,19,20].
Выводы:
1. Постклиническая стадия ВП отличается нормализацией продукции ИЛ-11, ИЛ-28А, УЕСР-С, рИЛ-2. При этом у таких больных имеет место сохранение высокой продукции ИЛ-2, ИЛ-12, ИЛ-13, ИЛ-19, ИЛ-24, ИЛ-21, ИЛ-19, рИЛ-4, РСР-р, УЕСР-К1. Продукция УЕСР-А, ИЛ-17А, С-СБР, gp130 у реконвалесцентов ВП, отличалась тенденцией к снижению в сравнении с практически здоровыми лицами.
2. Низкоинтенсивное воздействие на клетки цельной крови микроволнами частотой 1 ГГц спустя 3 часа после облучения способствовало снижению продукции ИЛ-2, ИЛ-13, ИЛ-17А, ИЛ-19, ИЛ-24, а так же повышению уровня ИЛ-12, ИЛ-15, ИЛ-18, ИЛ-21, ИЛ-22. Спустя 24 часа наблюдался рост продукции всех исследованных цитокинов, в особенности ИЛ-28А. Указанное обстоятельство свидетельствует о способности микроволн стимулировать процессы репарации и регенерации, а так же процессы физиологического ремоделирования ткани легких.
Низкоинтенсивное микроволновое излучение частотой 1 ГГц для клеток цельной крови является значимым экзоэкологическим фактором, характеризующимся длительным периодом последействия после однократного кратковременного облучения.
References
1. Бондарь С.С, Логаткина А.В., Терехов И.В. Зависи- Bondar' SS, Logatkina AV, Terekhov IV. Dependence of
мость содержания отдельных молекул в агрануло- the content of individual molecules in agranucocytes of
цитах цельной крови при ишемической болезни whole blood at coronary heart disease from the level of
сердца от уровня фосфорилирования протеинкина- phosphorylation of protein kinase r 38 in terms of low
зы р38 на фоне низкоинтенсивно- го свч-облучения intensity microwave radiation. Vestnik novykh medit-
// Вестник новых медицинских технологий. Элек- sinskikh tekhnologiy (Elektronnyy zhurnal) [Internet].
тронное издание. 2016. №1. Публикация 2-6. URL: 2016 [cited 2016 Feb 10];4:[about 4 p.]. Russian. Availa-
http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2016-1/2- ble from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/
6.pdf (дата обращения: 10.02.2016). DOI: E2016-1/2-6.pdf. DOI: 10.12737/18561. 10.12737/18561.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
2. Бондарь С.С., Терехов И.В. Влияние низкоинтенсивного микроволнового излучения частотой 1 ГГц на функциональное состояние мононуклеарных лейкоцитов цельной крови у практически здоровых молодых лиц // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2016. №4-6. С. 1083-1087.
3. Бондарь С.С., Терехов И.В. Продукция цитокинов и активность фагоцитирующих клеток цельной крови в условиях субклиничского воспаления и их коррекция в эксперименте // Международный научно-исследовательский журнал. 2016. №4-5. С. 52-57.
4. Бондарь С.С., Терехов И.В. Состояние Ш/ТОГХ,-сигнального пути в мононуклеарных лейкоцитах в постклиническую фазу острого инфекционно-воспалительного процесса нижних отделов респираторного тракта под влиянием низкоинтенсивного излучения частотой 1 ГГц // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2016. №4-6ю С. 1088-1093.
5. Власкин С.В., Терехов И.В., Петросян В.И. Способ терапевтического воздействия на биологические объекты электромагнитными волнами и устройство для его осуществления: Патент Российской Федерации RU 2445134. 2006.
6. Еськов В.М., Зилов В.Г., Хадарцев А.А. Новые подходы в теоретической биологии и медицине на базе теории хаоса и синергетики // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2006. 5 (3).
C. 617-622.
7. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. СПб: ООО «Издательство Фолиант», 2008.
8. Логаткина А.В., Бондарь С.С., Терехов И.В., Собчен-ко А.А. Метаболические эффекты низкоинтенсивной дециметровой физиотерапии при артериальной гипертонии // Вестник новых медицинских технологий. 2015. Т. 22, №2. С. 71-77.
9. Петросян В.И. Резонансное излучение воды в радиодиапазоне // Письма в ЖТФ. 2005. Т. 31, №23. С. 29-33.
10. Петросян В.И., Синицын Н.И., Ёлкин В.А. Роль мо-лекулярно-волновых процессов в природе и их использование для контроля и коррекции состояния экологических систем // Биомедицинская радиоэлектроника. 2001. №5-6. С. 62-129.
11. Солодухин К.А., Никифоров В.С., Громов М.С., Терехов И.В. Влияние низкоинтенсивного СВЧ-облучения на внутриклеточные процессы в моно-нуклеарах при пневмонии // Медицинская иммунология. 2012. Т. 14, №6. С. 541-544.
12. Терехов И.В., Бондарь С.С. Особенности биологического действия низкоинтенсивного СВЧ-излучения на состояние противовирусной защиты клеток цельной крови при внебольничной пневмонии и у здоровых лиц // Вестник новых медицинских технологий. 2015. Т. 22, №2. С. 55-60.
13. Терехов И.В., Громов М.С. Характеристика систем-
Bondar' SS, Terekhov IV. Effect of low-intensity microwave radiation at 1 GHz on a functional condition mononuclear leukocytes whole blood from healthy young people. Mezhdunarodnyj zhurnal prikladnyh i fundamental'nyh issledovanij. 2016;4-6:1083-87. Russian.
Bondar' SS, Terekhov IV. Cytokine production and activity of phagocytic cells in the whole blood subklinich-skogo inflammatory conditions and their correction in the experiment. Mezhdunarodnyj nauchno-issledovatel'skij zhurnal. 2016;4-5(46):52-7. Russian. Bondar' SS, Terehov IV. Sostojanie IL1/TOLL-signal'nogo puti v mononuklearnyh lejkocitah v post-klinicheskuju fazu ostrogo infekcionno-vospalitel'nogo processa nizhnih otdelov respiratornogo trakta pod vlijaniem nizkointensivnogo izluchenija chastotoj 1 GHz [Status IL1 / TOLL-signaling pathway in mono-nuclear leukocytes in Postclinical phase of acute infectious inflammation of the lower respiratory tract under the influence of low-intensity radiation at 1 GHz]. Mezhdunarodnyj zhurnal prikladnyh i fundamen-tal'nyh issledovanij. 2016;4-6:1088-1093. Russian. Vlaskin SV, Terehov IV, Petrosjan VI. Sposob terapevti-cheskogo vozdejstvija na biologicheskie ob#ekty jelek-tromagnitnymi volnami i ustrojstvo dlja ego osush-hestvlenija. Russian Federation patent RU 2445134. 2006. Russian.
Es'kov VM, Zilov VG, Hadarcev AA. Novye podhody v teoreticheskoj biologii i medicine na baze teorii haosa i sinergetik [New approaches in theoretical biology and medicine based on the chaos theory and synergetics]. Sistemnyj analiz i upravlenie v biomedicinskih siste-mah. 2006;5(3):617-22. Russian.
Ketlinskij SA, Simbircev AS. Citokiny. Saint Peterburg: OOO «Izdatel'stvo Foliant»; 2008. Russian. Logatkina AV, Bondar' SS, Terekhov IV, Sobchen-ko AA. Improving the effectiveness of drug therapy for hypertension in men with combined use of low intensity uhf physiotherapy. Vestnik novyh medicinskih tehno-logij. 2015;22(2):1-7. Russian.
Petrosyan VI. Resonance RF Emission from Water [Resonant emission of water in the radio]. Technical Physics Letters. 2005;31(12):1007-8. Russian. Sinitsyn NI, Yolkin VA, Gulyaev YuV. Special function of the "millimeter wavelength waves - aqueous medium" system in nature. Critical Reviews in Biomedical Engineering. 2000;28(1-2):269-305. Russian.
Soloduhin KA, Nikiforov VS, Gromov MS, Terekhov IV. Vlijanie nizkointensivnogo SVCh-obluchenija na vnutrikletochnye processy v mononuklearah pri pnev-monii. Medicinskaja immunologija. 2012;14(6):541-4. Russian.
Terekhov IV, Bondar' SS. Features of biological action of microwave radiation on the antiviral defense of whole blood in community-acquired pneumonia and in the healthy people. Vestnik novyh medicinskih tehno-logij. 2015;22(2):55-60. Russian.
Terekhov IV, Gromov MS. Harakteristika sistemnogo
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 112-121
ного воспалительного ответа у больных внебольнич-ной пневмонией в динамике при помощи активной СВЧ-радиометрии // Казанский медицинский журнал. 2010. Т. 91, №5. С. 611-614.
14. Терехов И.В., Громов М.С., Дзюба М.А. Влияние сверхвысокочастотного излучения нетепловой интенсивности на выраженность адреналинового отека легких и выживаемость крыс в эксперименте // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. 2011. №1. С. 117-122.
15. Терехов И.В., Солодухин К.А., Ицкович В.О., Никифоров В.С. Особенности биологического действия низкоинтенсивного СВЧ-излучения на продукцию цитокинов клетками цельной крови при внеболь-ничной пневмонии // Цитокины и воспаление. 2012. Т. 11, №4. С. 67-72.
16. Терехов И.В., Солодухин К.А., Никифоров В.С. Исследование возможности использования нетеплового СВЧ-излучения в реабилитационном периоде у больных внебольничной пневмонией // Физиотерапевт. 2011. №4. С. 12-17.
17. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Бондарь С.С. Состояние рецепторзависимых сигнальных путей в аграну-лоцитах периферической крови реконвалесцентов внебольничной пневмонии под влиянием микроволнового излучения // Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2016. Т. 93, №3. С. 23-28. DOI: 10.17116/kurort2016323-28.
18. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Никифоров В.С., Бондарь С.С. Функциональное состояние клеток цельной крови при внебольничной пневмонии и его коррекция СВЧ-излучением // Фундаментальные исследования. 2014;10(4):737-741.
19. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Никифоров А.А., Бондарь С.С. Продукция цитокинов клетками цельной крови реконвалесцентов внебольничной пневмонии под влиянием низкоинтенсивного СВЧ-облучения // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2014. №1. Публикация 2-57. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2015-1/4815.pdf (дата обращения: 30.06.2014).
20. Фудин Н.А., Кидалов В.Н., Наумова Э.М., Валентинов Б.Г. Саногенез с клеточных позиций // Вестник новых меди- цинских технологий. Электронное издание. 2015. №4. Публикация 2-15. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2015-4/5316.pdf (дата обращения: 30.11.2015). DOI: 10.12737/17081
21. Хадарцев А.А., Еськов В.М., Хадарцев В.А., Иванов Д.В. Клеточные технологии с позиций синергетики // Вестник новых медицинских технологий.
2009. №4. С. 7-9.
22. Хромушин В.А., Хадарцев А.А., Бучель В.Ф., Хро-мушин О.В. Алгоритмы и анализ медицинских данных: учебное пособие. Тула: Тульский полиграфист,
2010. 123 с.
23. Kolls JK, McCray PB, Chan YR. Cytokine-mediated regulation of antimicrobial proteins // Nature Rev. Immunol. 2008. №8. Р. 829-835.
vospalitel'nogo otveta u bol'nyh vnebol'nichnoj pnev-moniej v dinamike pri pomoshhi aktivnoj SVCh-radiometrii. Kazanskij medicinskij zhurnal. 2010; 91(5):611-4. Russian.
Terekhov IV, Gromov MS, Dzjuba MA. Vlijanie sverh-vysokochastotnogo izluchenija neteplovoj intensivnosti na vyrazhennost' adrenalinovogo oteka legkih i vyzhi-vaemost' krys v jeksperimente. Vestnik Nizhegorods-kogo universiteta im. N.I. Lobachevskogo. 2011;1:117-22. Russian.
Terekhov IV, Soloduhin KA, Ickovich VO, Nikiforov VS. Osobennosti biologicheskogo dejstvija nizkointen-sivnogo SVCh-izluchenija na produkciju citokinov kletkami cel'noj krovi pri vnebol'nichnoj pnevmonii. Citokiny i vospalenie. 2012;11(4):67-72. Russian.
Terehov IV, Soloduhin KA, Nikiforov VS. Issledovanie vozmozhnosti ispol'zovanija neteplovogo SVCh-izluchenija v reabilitacionnom periode u bol'nyh vnebol'nichnoj pnevmoniej. Fizioterapevt. 2011;4:12-7. Russian.
Terehov IV, Hadarcev AA, Bondar' SS. Sostojanie re-ceptorzavisimyh signal'nyh putej v agranulocitah peri-fericheskoj krovi rekonvalescentov vnebol'nichnoj pnevmonii pod vlijaniem mikrovolnovogo izluchenija. Voprosy kurortologii, fizioterapii i lechebnoj fizicheskoj kul'tury. 2016;93(3):23-8. DOI: 10.17116/kurort2016323-28.
Terekhov IV, Hadarcev AA, Nikiforov VS, Bondar' SS. Funkcional'noe sostojanie kletok cel'noj krovi pri vne-bol'nichnoj pnevmonii i ego korrekcija SVCh-izlucheniem. Fundamental'nye issledovanija. 2014;10(4):737-41. Russian.
Terekhov IV, Khadartsev AA, Nikiforov AA, Bondar' SS. Cytokine production by whole blood cells of the reconvalescents of community-acquired pneumonia under the influence of low-intensity Microwave irradiation. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie [internet]. 2014[cited 2014 Jun 30];1[about 6 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/
VNMT/Bulletin/E2015-1/4815.pdf.
Fudin NA, Kidalov VN, Naumova JeM, Valentinov BG. Sanogenez s kletochnyh pozicij [The sanogenesis from cell positions]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhno-logiy (Elektronnyy zhurnal) [Internet]. 2015 [cited 2015 Nov 30];4:[about 4 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2015-4/5316.pdf. doi: 10.12737/17081.
Hadarcev AA, Es'kov VM, Hadarcev VA, Ivanov DV. Cell' technologies from synergy point of vien. Vestnik novyh medicinskih tehnologij. 2009;4:7-9. Russian.
Khromushin VA, Khadartsev AA, Buchel' VF, Khromu-shin OV. Algoritmy i analiz meditsinskikh dannykh [Algorithms and analysis of medical data]: uchebnoe posobie. Tula: Tul'skiy poligrafist; 2010. Russian. Kolls JK, McCray PB, Chan YR. Cytokine-mediated regulation of antimicrobial proteins. Nature Rev. Immunol. 2008;8:829-35.
