УДК 636.32/.38.082.2
Влияние фолликулостимулирующих гормонов пролонгированного действия на эффективность полиовуляции у овец-доноров
Л.С. Малахова, к.с-х.н.
М.М. Айбазов, д.с-х.н.
К.К. Ашурбегов, с.н.с.
Одной из важных проблем биотехнологии воспроизводства животных, в частности трансплантации эмбрионов, является разработка эффективной технологии вызывания множественной овуляции.
Существующие схемы индукции полиовуляции у овец-доноров применением фолликулостимулирующих гормонов (ФСГ) трудоемки и требуют больших затрат времени ( количество внутримышечных инъекций ФСГ составляет 8-10 в течение 4-5 дней с интервалом 12 часов), вследствие быстрой инактивации (в течение 6-8 часов) экзогенных гонадотропинов в крови животных.
В последующем проявление стрессс-чувствительности у 25-30% доноров при извлечении эмбрионов снижает показатель общего количества получаемых эмбрионов, что приводит к потере ценного генетического материала.
Поэтому как научный, так и практический интерес представляют исследования, направленные на упрощение схем гормональной индукции полиовуляции с использованием веществ, обладающих способностью связываться с фолликулостимулирующими гормонами и поддерживать их концентрацию в крови животного длительное время. Разработка таких схем вызывания полиовуляции будет способствовать более широкому применению метода трансплантации эмбрионов в селекционных программах разведения овец.
В связи с этим цель наших исследований заключалась в изучении влияния ФСГ- препаратов пролонгированного действия на уровень полиовуляции, количество и качество эмбрионов у овец-доноров.
Исследования проведены на опытной станции института. В качестве
доноров использовали 30 нормально циклирующих высокоценных овцематок. Животные были разбиты на 6 групп по 5 голов в каждой. Овцам первой группы на 12 день полового цикла вводили фолликулостимулирующий гормон питуитарный производства США (ФСГ-п ) в течение 4-х дней, утром и вечером с интервалом 12 часов, в общей дозе 24 мг. Для обработки животных второй и третьей опытных групп использовали ФСГ-п с пролонгатором. В качестве пролонгатора применяли высокомолекулярный углевод полиглюкин в 3%-ной концентрации.
Животным 2 и 3 опытных групп препарат вводили по 4-дневной схеме в той же дозе, что и животным 1 группы, только интервал между введениями составлял 24 и 48 часов соответственно.
Для гормональной обработки животных 4, 5, 6 групп использовали препарат фоллитропин (Литва) в общей дозе 600 ед. Овцам 4-ой группы на 12 день полового цикла вводили фоллитропин в течение 4-х дней утром и вечером с интервалом 12 часов.
Животным 5 и 6 опытных групп вводили фоллитропин с пролонгатором по 4-дневной схеме в той же дозе, что и животным 4 группы, только интервал между введениями составлял 24 и 48 часов соответственно. Через 48 часов от начала гормональной обработки животным всех опытных групп инъецировали препарат простагландина (ПГФ-2 альфа) с коммерческим названием “Эстрофан” в дозе 125 мкг (по активно действующему веществу клопростенолу), а по прихождению в охоту-1000 ед. хорионгонадотропина (ХГ). Овец осеменяли двукратно свежеполученной спермой с активностью не ниже 8 баллов. Результаты опыта представлены в таблице.
Из данных таблицы видно, что как при восьмикратной обработке ФСГ-п, так и при четырех- и двукратной реакция на гонадотропин была отмечена у 80% доноров. Во всех группах 20% доноров имели по 3 желтых тела в яичниках и не подвергались вымыванию эмбрионов. Процент пригодных к пересадке эмбрионов был достаточно высоким и составил по группам соответственно 64,6; 69,2 и 68,8%. Не отмечено существенных различий между группами по
Влияние ФСГ - препаратов пролонгированного действия на уровень множественной овуляции, _____________________количество и качество эмбрионов у овец-доноров_____________________
ФСГ-п, 24 мг Фоллитропин ,600 ед.
Показатели 1 группа, восьмикратная обработка 2 группа, четырехкратная обработка 3 группа, двукратная обработка 4 группа восьмикратная обработка 5 группа, четырехкратная обработка 6 группа, двукратная обработка
Обработано овец-доноров 5 5 5 5 5 5
Ответило полиовуляцией, п\% 4\80 4\80 4\80 5\100 5\100 5\100
Овулировало фолликулов, всего Получено эмбрионов: 59 52 50 60 50 55
в среднем на одного донора из них: 14,7+1,12 13,0+1,18 12,5+1,09 12,0+1,15 10,0+1,14 11,0+1,12
пригодных к пересадке 9,5+1,19 9,0+1,21 8,6+1,24 8,0+1,14 7,0+1,19 7,0+1,18
дегенерированных 3,0±0,65 2,0±0,68 1,9+0,72 2,0+0,68 1,0+0,64 2,0+0,75
неоплодотворенных яйцеклеток 2,2±0,89 2,0±0,92 2,0+0,90 2,0+0,91 2,0+0,93 2,0+0,90
выходу неоплодотворенных яйцеклеток. Количество дегенерированных эмбрионов во второй и третьей группах было ниже, чем в первой группе, на 5,1 и 5,3% соответственно. Разница математически не достоверна.
При всех видах обработки фоллитропином реакция на гонадотропин была отмечена у 100% доноров. Процент пригодных к пересадке эмбрионов составил по группам 66,7; 70,0 и 63,6% соответственно. Существенных различий между группами по выходу дегенерированных и неоплодотворенных яйцеклеток не обнаружено.
Таким образом, использование пролонгированных форм ФСГ
для вызывания множественной овуляции у доноров позволяет получать сравнительно высокие количественные и качественные показатели эмбриопродукции при одновременном сокращении числа инъекций гормонов и уменьшении трудозатрат на обработку.