Материалы II Национального конгресса бактериологов
Инфекция и иммунитет
ПРИМЕНЕНИЕ СОВРЕМЕННЫХ МЕМБРАННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ И САНИТАРНО-ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ
Т.А. Змеева1, В.В. Малышев1, В.Б. Сбойчаков1, С.С. Котов2
1 Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова, Санкт-Петербург
2 ФГКУ985Центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора МО РФ, Санкт-Петербург
Проблема загрязнения бактериальными и вирусными контаминантами источников водоснабжения носит повсеместный характер. Вопросы, требующие внимания при проведении эпидемиологического обследования очагов острых кишечных инфекций с предположительно водным путем передачи: отсутствие достоверной корреляционной связи заболеваемости ОКИ с обнаружением санитарно-пока-зательных микроорганизмов в пробах воды; влияние химических факторов водных объектов и сопутствующей микрофлоры на санитарно-показательные микроорганизмы; более длительная, чем у бактерий, выживаемость вирусов в водных объектах окружающей среды; большая устойчивость кишечных вирусов к дезинфектантам; невозможность оперативного обнаружения вирусных патогенов классическими методами, в итоге анализ таких результатов носит ретроспективный характер; многие вирусы не культивируются или трудно культивируются на культурах клеток. Значительную роль для достоверности и эффективности исследований санитарно-микробиоло-гического и санитарно-вирусологического контроля воды играет этап пробоподготовки, при этом концентрирование вирусных агентов требует проведения пробоподготовки больших объемов воды (10 л и более). Сегодня возрастают возможности концентрирования бактериальных и вирусных контаминантов воды при помощи мембранных технологий.
Цель нашего исследования состояла в повышении эффективности методов санитарно-микробио-логического и санитарно-вирусологического контроля воды с использованием современных мембранных технологий. Решались задачи: оценить эффективность различных фильтрующих мембран для пробоподготовки воды и изучения концентрирования бактерий в режиме микрофильтрации; изучить эффективность пробоподготовки и детекции возбудителей острых кишечных вирусных инфекций и (или) их маркеров в водных объектах окружающей среды с использованием различных фильтрующих мембран в режиме микрофильтрации. Исследования проводили на модели кишечной палочки E. coli М17-02 и ротавирусов (пул экстрактов антигенположи-тельных фекалий больных ротавирусной инфекцией). Бактериологическую обсемененность проб воды определяли бактериологическим посевом способом мембранной фильтрации. Для детекции вирусных маркеров использовали следующие методы: ОТ-ПЦР в режиме реального времени, иммуноферментный анализ, иммунохроматографический метод, реакцию агглютинации латекса. Для подсчета бактерий в объеме пробы воды применяются фильтрующие мембраны с размером пор > 100 нм (в соответствии со значениями размеров отделяемых частиц в барометрических процессах). Для вирусов высокоэффективны ультрафильтрационные мембраны с размером пор < 100 нм, однако они обладают низкой
производительностью. Нами было показано, что при маленьких размерах пор фильтрация на кишечные вирусы большого объема воды (10 л) занимает несколько суток. Эффективная производительность отмечается только у мембран с размером пор > 200 нм. Опыт применения пористыхфильтрующих мембран с размером пор 200 нм из различного сырья на основе полиэфирсульфона, смеси эфиров целлюлозы, полиамида, капрона с положительным зарядом (экспериментальный материал) показал, что пористые микрофильтрационные мембраны хорошо удерживают вирусные частицы, обладая высоким потоком и большой производительностью. Наибольшая эффективность концентрирования кишечных вирусов нами получена на микрофильтрационных капроновых экспериментальных мембранах с положительным зарядом. При оценке эффективности фильтрующих мембран наибольший «процент извлечения» получен нами при использовании полиамидных и нитратцеллюлозных мембран. Высокий «процент извлекаемости» независимо от посевной дозы наблюдался у нитратцеллюлозных мембран.
Таким образом, существующие системы водо-подготовки, водоочистки и обеззараживания не позволяют полностью исключить загрязнение поверхностной, подземной, питьевой воды кишечными бактериями и вирусами, и это происходит в условиях увеличения микробной и вирусной нагрузки на водные объекты окружающей среды, становится крайне актуальной задача использования выше перечисленных методов пробоподготовки и детекции.