ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВОГРИБКОВЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ЛЕЧЕНИИ МИКРОСПОРИИ И ОСНОВНЫЕ ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ

Алескерова Нармин Захир Кызы; Пашник Татьяна Ивановна; Коломиец Сергей Николаевич; Соничев Борис Евгеньевич

Ветеринарный врач. 2024. № 3. С. 6 - 11 The Veterinarian. 2024; (3): 6 - 11

Научная статья

УДК 615.282: 615.12 (15)

DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_3_6

ПРИМЕНЕНИЕ ПРОТИВОГРИБКОВЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ЛЕЧЕНИИ МИКРОСПОРИИ И ОСНОВНЫЕ ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ

Алескерова Нармин Захир кызы 1, narminalasgar92@mail.ru Пашник Татьяна Ивановна 2, доктор биологических наук, t.i.pashnik@yandex.ru Коломиец Сергей Николаевич 2, доктор биологических наук, colomiez@mail.ru Соничев Борис Евгеньевич 2, кандидат биологических наук, sonichev@biochem.net

1 Азербайджанский государственный аграрный университет, г. Гянджа, Азербайджанская Республика

2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Российский биотехнологический университет (РОСБИОТЕХ)», Москва, Российская Федерация

Автор, ответственный за переписку: Нармин З. Алескерова.

Аннотация. Микроспория - это болезнь, относящаяся к числу дерматомикозов, распространенных среди людей и животных во всех странах мира. Этиологическим фактором заболевания являются Microsporum canis, Microsporum gypseum, Microsporum lanosum. Исключительная роль в распространении микроспории и поддержании эпизоотического очага представляют домашние животные, особенно собаки и кошки. Они нередко также являются источником инфекции для человека. Больные животные загрязняют окружающую среду отпадающими инфицированными чешуйками, корочками, волосами. Инфицированные предметы становятся опасными факторами передачи микроспории. Заражение происходит при прямом контакте здоровых животных с больными, а также через инфицированные предметы ухода, подстилку, спецодежду обслуживающего персонала и т. д. Из-за высокой контагиозности микроспории, для предотвращения передачи болезни другим людям и животным, необходимо проводить своевременное лечение [12]. Основная цель наших исследований - выявить возбудителя, изучить пораженные микроспорией участки кожи, осуществить лечение больных животных, определить действие различных факторов на динамику действия эффективности лечения различных препаратов. Установлено, что шампунь с миконазолом/хлоргексидином два раза в неделю является эффективной местной терапией для лечения генерализованного дерматомикоза у кошек и собак. Шампуни с миконазолом эффективны, но наиболее эффективны в сочетании с хлоргексидином.

Ключевые слова: микроспория, эпидемия, противогрибковые препараты, итраконазол (ИТ), хлоргексидин, миконазол, дерматомикоз, исследования

Для цитирования: Алескерова Н.З., Пашник Т.И. Коломиец С.Н., СоничевБ.Е. Применение противогрибковых препаратов при микроспории и основные факторы, влияющие на эффективность лечения // Ветеринарный врач. 2024. № 3. С. 6-11. DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_3_6

USE OF ANTIFUNGAL DRUGS IN MICROSPORIA AND THE MAIN FACTORS AFFECTING THE EFFECTIVENESS OF TREATMENT

Narmin Z. Aleskerova 1, narminalasgar92@mail.ru Tatiana I.Pashnik 2, doctor of biological sciences, t.i.pashnik@yandex.ru Sergey N. Kolomiets 2, doctor of biological sciences, colomiez@mail.ru Boris E. Sonichev 2, candidate of biological sciences, sonichev@biochem.net

1 The Azerbaijan State Agrarian University, Republik of Azerbaijan Ganja city

2 Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "Russian Biotechnological University", Moscow, Russian Federation

Corresponding author: Narmin Z. Aleskerova.

Abstract. Microsporia is a disease related to dermatomycosis, common among people and animals in all countries of the world. The etiological factor of the disease is Microsporum canis, Microsporum gypseum, Microsporum lanosum. Domestic animals, especially dogs and cats, play an exceptional role in the spread of microsporia and maintenance of the epizootic focus. They are often also a source of infection for humans. Sick animals pollute the environment by falling off infected scales, crusts, and hair. Infected objects become dangerous factors for the transmission of microsporia. Infection occurs through direct contact of healthy animals with sick ones, as well as through infected care items, bedding, overalls of service personnel, etc. Due to the high contagiousness of microsporia, timely treatment is necessary to prevent transmission of the disease to other people and animals [12] . The main goal of our research is to identify the pathogen, study skin areas affected by microsporia, treat sick animals, and determine the effect of various factors on the dynamics of the effectiveness of treatment of various drugs. Miconazole/chlorhexidine shampoo twice weekly has been found to be an effective topical therapy for the treatment of generalized dermatomycosis in cats and dogs. Miconazole shampoos are effective, but are most effective when combined with chlorhexidine.

Keywords: microsporia, epidemic, antifungal preparations, itraconazole (IT), chlorhexidine, miconazole, dermatomycosis, research

Введение. Микроспория относится к числу дерматомикозов, распространенных среди людей и животных во всех странах мира. Этиологическим фактором заболевания являются Microsporum canis, Microsporum gypseum, Microsporum lanosum. Домашние животные, особенно собаки и кошки, играют исключительную роль в распространении микроспории от инфицированных животных к здоровым. Заболевание встречается у людей и животных преимущественно в осенний, зимний и весенний периоды года. Установлено широкое распространение дерматомикозов в западных регионах Турции среди собак в зимне-весенние периоды года, а среди кошек болезнь чаще регистрировалась весной, летом и осенью. Распространенность заболевания может значительно варьировать в зависимости от географического положения и других эпидемиологических факторов (например, возраста, пола и времени года; например, установлено, что у лиц старше 16 лет -женщины заражаются чаще чем мужчины [3, 14]. У самцов молодых собак и кошек чаще развиваются клинические поражения в зависимости от породы животного [2, 5, 7]. Заражение микроспорией происходит при непосредственном контакте с клинически больными или животными с бессимптомным течением заболевания, как правило, больными кошками, либо с артроспорами возбудителя, сохраняющими жизнеспособность во внешней среде до 18 месяцев [15]. Часто сообщалось о передаче инфекции от человека к человеку. Основной причиной заболевания примерно 50 % инфицированных людей, являются животные с бессимптомно протекающим заболеванием [10]. Поскольку клинические признаки, возникающие при микроспориозе, наблюдаются и при других дерматомикозах, для профилактики, лечения и борьбы с микроспориозом требуется специальная, правильная и точная диагностика. Из-за высококонтагиозной природы микроспории использование терапевтических средств является обязательным для предотвращения передачи заболевания другим людям и животным [1, 12]. Существуют различные пероральные противогрибковые препараты, применяемые при лечении микроспории, такие как гризеофульвин (ГРИ), тербинафин (ТЕР), итраконазол (ИТ) и флуконазол(ФЛЗ), широко используемых для лечения микроспории у людей и животных. Однако у 25-40 % больных, принимающих указанные препараты, возникали рецидивы заболевания или лечение оказалось неэффективности [4, 6]. Анализ противогрибковых препаратов in vitro может помочь нам исследовать случаи резистентности возбудителя к применяемому препарату и подобрать более эффективную терапию для больных.

Материалы и методы. Исследования проводились в Центральной референс-лаборатории 3-го уровня биобезопасности НИИ ветеринарии и на кафедре «Эпизоотологии, микробиологии и паразитологии» Азербайджанского государственного аграрного университета. В ходе исследования использовались микологические методы исследования. Материалом для исследования служили соскобы кожи и волосы из периферических частей пораженных участков поверхности кожи больных собак и кошек.

Правила биобезопасности и биозащиты. Сбор, упаковку и транспортировку образцов осуществляли в соответствии с рекомендациями по биобезопасности и биозащите. (Глава 1.1.4 Биобезопасность и биозащита: Стандарт управления биологическим риском в ветеринарной лаборатории и виварии).

Этический отчет: Образцы патологического материала от животных были собраны в соответствии с биоэтическими и стандартными процедурами Комитета по биоэтике Национальной академии наук Азербайджана.

Основной целью нашего исследования явилось выявление возбудителя заболевания, с помощью соответствующих методов исследования: получение чистой культуры возбудителя болезни, более глубокое изучение соскобов кожи и волосы из периферических частей пораженных участков при микроспории с помощью лампы Вуда; лечение больных животных противогрибковыми препаратами; использованием различных факторов, влияющих на динамику действия препаратов и эффективность лечения. Соскобы кожи, чешуйки и образцы волос, взятые у 94 больных и подозреваемых в заражении микроспорией животных (рисунки 1 и 2) исследовали на основании микроскопических и люминесцентных методов.

Рисунок 1 - Больное животное, зараженное Рисунок 2 - Поражения на поверхности кожи

микроспорией кошки, зараженной микроспорией

Обследование с помощью лампы Вуда (Wood). Лампа Вуда - это диагностический метод, при котором кожа или волосы исследуются под воздействием черного света, излучаемого лампой Вуда. Черный свет невидим невооруженным глазом, потому что он находится в ультрафиолетовом спектре, длина волны которого немного короче, чем у фиолетового цвета. Светло-фиолетовые волосы в темноте лампы светятся.

Результаты исследований и их обсуждение. В результате исследования у 94 больных собак (36) и кошек (47) была диагностирована микроспория с помощью лампы Вуда у 83 животных (рисунки 3 и 4). Патологический материал, полученный на основании соскобов и образцов шерсти, взятых у больных собак и кошек, культивировали в термостате при 25° С в течение двух недель. В результате посева проб из патологического материала на декстрозный агар Сабуро, появились белые, мягкие, хлопковидные, характерные для возбудителя колонии (декстрозный агар Сабуро, гранулированный GM063-500 G medium/, поставляется фирмой (HIMEDIA) (рисунок 5).

Рисунок 3 - Подтверждение диагноза больного Рисунок 4 - Обнаружение микроспории с

животного с помощью лампы Вуда помощью лампы Вуда

Рисунок 5 - Колонии, образованные M. canis на декстрозном агаре Сабуро

Итраконазол с 2 % хлоргексидином и шампунь с 2 % миконазолом (Итраконазол+Миконазол/Хлоргексидин, в составе 2 % Миконазол 2 % хлоргексидин), которые достаточно широко используются и обладают высокой эффективностью. Итраконазол вводили перорально в дозе 10 мг/кг живой массы. (Итраконазол 10 мг/кг SID) два раза в неделю в течение 3 месяцев с шампунем с 2 % хлоргексидином и 2 % миконазолом. А при лечении больных животных, которых мы разделили на две группы животным 1 -й группы вводили перорально только Итраконазол в дозе 10 мг/кг на массу тела (Итраконазол 10 мг/кг SID), а больным собакам и кошкам, находящихся во 2-й группе Итраконазол давали перорально каждому животному в дозе 10 мг/ кг живой массы (Итраконазол: 10 мг/кг/SID) вместе с 2 % хлоргексидином и 2% шампунем с миконазолом два раза в неделю в течение 3 месяцев. Реакция животных второй группы на лечение заметно отличалась от реакции животных первой группы. В ходе нашего исследования в 1-й группе перорально назначали только Итраконазол в дозе 10 мг/кг живой массы (итраконазол 10 мг/кг однократно) лечение не было эффективным, отмечалось, что клинические признаки заболевания сохраняются. Однако у животных 2-й группы лечение было достаточно эффективным. Среднее клиническое выздоровление составило в среднем шесть недель, микологическое выздоровление, т.е. результаты всех микологических анализов в среднем были отрицательными в течение 6 недель.

После демонстрации эффективности комбинированного шампуня миконазол-дотексид при лечении дерматомикозов два исследования in vitro показали, что миконазол, хлоргексидин или оба препарата эффективны против Microsporum spp. и Trichophyton spp. хлоргексидин, миконазол и хлогексидин минимальные ингибирующие концентрации (МИК) хлоргексидина, миконазола и хлоргексидинмиконазола составляли 12,5-25 мкл/мл, 0,29-1,17 мкл/мл соответственно колебалсяпо сравнению с диапазоном от 0,14 до 0,39 мкл/мл. Для 9 из 10 изолятов комбинация миконазола и хлоргексидина была более эффективной против обоих патогенов, либо синергически (n=5 изолятов), либо аддитивно (n=4 изолята). Этот протокол исследования был повторен снова, но на этот раз эти инфекционные агенты оценивались в отношении T. mentagrophytes (n=9), T. erinacei (n=9) и M. persicolor (n=5) МИК хлоргексидина, миконазола и миконазола хлоргексидина составляет 12,5-50 мкл/мл соответственно, он варьировал от 0,24-1,56 мкл/мл до 0,11-1,66 мкл/мл.

Среднее значение МИК существенно не отличались среди трех тестируемых видов дерматомикозов, но МИК для T. erinacei в комбинации с миконазолом так и хлоргексидином были значительно выше по сравнению с T. mentagrophytes и M. persicolor. 15 из 23 протестированных изолятов имели наблюдаемый синергический или аддитивный эффект.

Заключение. В результате проведенных исследований у 83 из 94 больных животных диагностирована микроспория, 36 из них - собаки и 47 кошки. Кошек и собак лечили перорально итраконазолом (ИТ) и миконазол/хлоргексидиновым шампунем для местного применения, а подстилку и другие материалы, находившиеся в контакте с больными животными, дезинфицировали механической стиркой. Контаминацию отслеживали с течением времени, и процедуру очистки прекращали, когда микологические тесты давали отрицательный результат. Средняя продолжительность клинического и микологического выздоровления составила шесть недель.

Установлено, что применение шампуня с миконазолом/хлоргексидином два раза в неделю является эффективной местной терапией для лечения кошек и собак с генерализованным дерматомикозом. Хорошая эффективность использования шампуни показана с миконазолом, однако наиболее эффективны они в сочетании с хлоргексидином.

Список источников

1. Иванюк, В. П. Диагностический подход при исследовании поверхностных микозов животных / В. П. Иванюк, Г. Н. Бобкова // Вестник Брянской государственной сельскохозяйственной академии. - 2020. - № 4(80). - С. 15-19.

2. Кривко, А. С. Сравнение эффективности схем лечения микроспории у кошек / А. С. Кривко // Международный научно-исследовательский журнал. - 2023. - № 12(138).

3. Микроспория: современное представление о проблеме (описание клинических случаев и обзор литературы) / Т. В. Медведева, Л. М. Леина, Г. А. Чилина [и др.] // Проблемы медицинской микологии. - 2020. - Т. 22, № 2. - С. 12-21.

4. Шадская, А. В. Комплексная терапия мелких домашних животных при дерматомикозах, как метод профилактики этих заболеваний у людей / А. В. Шадская // Вестник аграрной науки. -2021. - № 6(93). - С. 48-52.

5. Bourguignon, E., Dermatology in Dogs and Cats / E. Bourguignon // Diegues Guimaraes L., Sell Ferreira T., Silva Favarato E. // In: Payan-Carreira R., editor. Insights from Veterinary Medicine. 1st ed. Volume 1. InTech; London, UK. - 2013. - pp. 3-34.

6. Bueno, J. G. In vitro activity of flucon-azole, itraconazole, voriconazole and terbinafine against fungi causing onychomycosis / J. G. Bueno, C. Martinez, B. Zapata, G. Sanclemente, M. Gallego, A. C. Mesa // Clin. Exp. Dermatol. - 2010. - №35. - P. 658-663.

7. Cafarchia, C. Isolation of Microsporum canis from the hair coat of pet dogs and cats belonging to owners diagnosed with M. canis tinea corporis / C. Cafarchia, D. Romito, M. Sasanelli, R. Lia, G. Capelli, D. Otranto // Vet. Dermatol. - 2006. - №17. - P. 327-331.

8. Cafarchia, C. The epidemiology of canine and feline dermatophytoses in southern Italy / C. Cafarchia, D. Romito, M. Sasanelli, R. Lia, G. Capelli, D. Otranto // Mycoses. - 2004. - №47. - P. 508-513.

9. Elewski, B. E. Onychomycosis: Pathogenesis, diagnosis, and management / B. E. Elewski // Clin. Microbiol. Rev. - 1998. - №11. - P. 415-429.

10. Mancianti, F. Environmental detection of Microsporum canis arthrospores in the households of infected cats and dogs / Mancianti F., Nardoni S., Corazza M., D'achille P., Ponticelli C. // J. Feline Med. Surg. 2003. - №5. - P. 323-328.

11. Matsuda, Y. Efficacy coefficients determined using nail permeability and antifungal activity in keratin-containing media are useful for predicting clinical efficacies of topical drugs for onychomycosis / Matsuda Y., Sugiura K., Hashimoto T., Ueda A., Konno Y., Tatsumi Y. // PLoS ONE. - 2016. - №11. -P. e0159661.

12. Moriello, K. A. Diagnosis and treatment of dermatophytosis in dogs and cats / K. A. Moriello, Coyner K., S. Paterson, B. Mignon // Vet. Dermatol. - 2017. - №28. - P. 266-268.

13. Norris, H. A. Optimal growth conditions for the determination of the antifungal susceptibility of three species of dermatophytes with the use of a microdilution method / H. A. Norris, B. E. Elewski, M. A. Ghannoum // J. Am. Acad. Dermatol. - 1999. - № 40. - P. 9-13.

14. Seebacher, C. Updates on the epidemiology of dermatophyte infections / C. Seebacher, J.P. Bouchara, B. Mignon // Mycopathologia. - 2008. - № 166. - P. 335-352.

15. Sparkes, A. H. Microsporum canis: Inapparent carriage by cats and the viability of arthrospores / A.H. Sparkes, G. Werrett, C. R. Stokes, T. J. Gruffydd-Jones // J. Small Anim. Pract. - 1994. - №. 35. - P. 397-401.

References

1. Ivanyuk, V.P. Diagnostic approach to the study of superficial mycoses in animals / V.P. Ivanyuk, G.N. Bobkova // Bulletin of the Bryansk State Agricultural Academy. - 2020. - №. 4(80). - P. 15-19.

2. Krivko, A. S. Comparison of the effectiveness of treatment regimens for microsporia in cats / A. S. Krivko // International Scientific Research Journal. - 2023. - №. 12 (138).

3. Microsporia: modern understanding of the problem (description of clinical cases and literature review) / T. V. Medvedeva, L. M. Leina, G. A. Chilina [et al.] // Problems of medical mycology. - 2020. - T. 22, №. 2. - P. 12-21.

4. Shadskaya, A. V. Complex therapy of small domestic animals for dermatomycosis, as a method of preventing these diseases in people / A. V. Shadskaya // Bulletin of Agrarian Science. - 2021. - №. 6 (93). - P. 48-52.