CC BY
15
2 раза порциями по 5 мл раствором ЫаОН при нагревании. Для анализа берут 5 мл раствора и одновременно готовят стандартную шкалу с содержанием 0—0,2—0,4—0,6—0,8—1 мг тер^фталевой кислоты. Объем доводят 0,1 н. раствором ЫаОН до 5 мл.
Пробирки с растворами погружают на 3—5 минут в баню со льдом и затем подкисляют 10% раствором НС1 до посинения конгорот. Прибавляют по 0,2 мл 1% раствора желатины и через 10—15 минут сравнивают пробы со стандартной шкалой.
ЛИТЕРАТУРА
• _
Бауер К. Анализ органических соединений. М., 1953, стр. 246. — Под редакцией Кузнецова В. И. Химические реактивы и препараты. М.—Л., 1953, стр. 483.
Поступила 25/IV 1961 г.
Ъ Ъ
ПРИМЕНЕНИЕ НОВОГО ТИПА ФИЛЬТРОВ «МИКРОФИЛ» ДЛЯ КОНЦЕНТРАЦИИ И ИНДИКАЦИИ БАКТЕРИЙ ИЗ ВОЗДУХА,
ВОДЫ И ПОЧВЫ
Кандидат медицинских наук В. В. Влодаввц, младший научный сотрудник Е. Ю. Зуйкова, кандидат медицинских наук М. Г. Киченко,
проф. JI. И. Мац, проф. j Г. JI. Натансон , кандидат биологических наук М. И. Перцовская, член-корреспондент АН СССР И. В. Петрянов,
проф. А. С. Разумовкандидат химических наук Б. Ф. Садовский
Из Института общей и коммунальной гигиены имени А. Н. Сысина АМН СССР
и Физико-химического института имени Л. Я. Карпова
• • *
Л
Одним из актуальных вопросов санитарной бактериологии является концентрация бактерий из внешней среды (воздуха, воды и почвы). В последние годы в микробиологической практике для этой цели нашли довольно широкое применение мембранные фильтры из нитроцеллюлозы (К. К. Барсов, 1932; А. С. Разумов, 1932, 1955; Е. Дианова и А. Ворошилова, 1932; М. Г. Киченко, 1936, и др.)- Мембранные фильтры хорошо зарекомендовали себя при бактериологических анализах воды и некоторыми авторами были применены также для изучения микрофлоры воздуха [Я. Б. Резник, (1937), В. Н. Корчак-Чепурковская (1941); Б. Ф. Милявская (1947); Краузе (Kruse, 1948); Гётц (Goetz, 1953); Альбрехт (Albrecht, 1957); Махала и Спурны (Machala a. Spurny, 1959) и др.]. При этом были отмечены недостатки мембранных фильтров при проведении бактериологического исследования воды и воздуха, как, например, большое сопротивление при фильтрации воды, сопротивление току воздуха, хрупкость, затруднение при окраске бактериальных клеток на фильтре, деформация их при стерилизации кипячением и т. п. В этом отношении представляет интерес изучение возможности применения для санитарно-бактериологического анализа новых типов фильтрующего материала, разработанных современной синтетической химией.
Всего в лаборатории санитарной бактериологии Института общей и коммунальной гигиены имени А. Н. Сысина было подвергнуто испытанию 99 образцов фильтров ФП. Контролем служили мембранные фильтры разных номеров. Фильтры ФП, как и мембранные фильтры,— тонкие пластинки белого, сероватого или слегка розового цвета. Большинство образцов ФП очень тонкие (почти просвечивающие), эластичные, с гладкой поверхностью.
4*
51
Другие фильтры из того же материала, сохраняя эластичность и гладкость поверхности, были толстыми или отличались по цвету.
Некоторые образцы фильтров ФП представляли собой толстые белые пластины явно выраженного волокнистого строения, с шероховатой поверхностью, ломающиеся при сгибании. При увлажнении эти фильтры (марки ФПА) расслаиваются на множество тонких пластинок, чего не наблюдалось в работе с другими образцами фильтров.
Некоторые фильтры в процессе изготовления были обработаны раствором, который придавал фильтрам гидрофильные свойства, эти фильтры сравнительно быстро пропитывались водой. Фильтры, не обработанные предварительно смачивающей жидкостью, при опускании в воду практически не смачивались ею.
Изучалась возможность
V
концентрации на фильтрах бактерий из воды, воздуха и почвы в зависимости от структуры, величины и равномерности распределения пор фильтра. Учитывалось число бактерий, задержанных на фильтрах, по числу колоний, образующихся после подращивания, а также характер роста и морфология выросших колоний, сапрофитных и бактерий кишечной группы. Изучалась возможность просветления и окрашивания фильтра веществами, не извлекающими красителей из окрашенных микробных клеток, сконцентрированных на поверхности фильтра, и, наконец, разрабатывались способы стерилизации и подготовки фильтров для отбора проб воздуха и фильтрования воды.
Для решения вопроса о рациональной стерилизации фильтров ФН мы провели работу по применению способов кипячения в воде, обработке растворами разной крепости этилового спирта и парами формалина. Установлено после длительных изысканий, что стерилизация ФП возможна как при обработке раствором этилового спирта от 20% и более, так и парами формалина. Обработка фильтров 20% раствором этилового спирта в течение суток, воздействие парами формалина также в продолжение суток с последующим выветриванием формалина в течение 24 часов сохраняют структуру фильтров, обеспечивают стерильность их и не угнетают роста сапрофитов, кишечной палочки и даже патогенных микробов кишечной группы, в том числе бактерий дизентерии Флекснера и Зонме, брюшного тифа и паратифа. На мембранных фильтрах, обработанных формалином, угнетается рост сконцентрированных на них бактерий кишечной группы (рис. 1).
Для изучения способности фильтров ФП задерживать и концентрировать бактерии и для выявления возможности выращивания на них задержанных бактерий через фильтры разных образцов пропускали по 20 мл стерильной водопроводной воды, зараженной взвесью суточной
/
[ \
Рис. 1. Рост кишечной палочки на фильтрах «микрофил», обработанных парами формалина (/ и 2), и на «мембранных фильтрах», обработанных парами формалина (3), раствором этилового спирта (4) и кипячением (5).
агаровой культуры кишечной палочки. Зате1М фильтры переносили на розоловый агар и выращивали при 37° в течение суток. Для обнаружения влияния фильтров на рост патогенных бактерий кишечной группы стерильные фильтры накладывали на розоловый агар и затем на »их радиально наносили петлей штрихи суточной бульонной культуры: дизентерии Флекснера (2) дизентерии Зонне (3), паратифа А (4), паратифа В (5), Гертнера (6) и штаммов брюшного тифа (7, 8). Сегмент 1 является контролем стерильности фильтра. Посевы выращивали при 37° в течение 24 часов. Оказалось, что некоторые образцы фильтров при фильтрации сильно набухали, расслаивались и давали мелкий, деформированный рост колоний (образцы из ФПА). Другие образцы фильтров по способности задерживать бактерии и по влиянию на рост бактерий кишечной группы оказались также не равноценны.
Скорость фильтрации и полноту задержки фильтрами бактерий кишечной группы проверяли фильтрованием через фильтры ФП и мембранные фильтры '10 мл, 100 мл и 200 мл стерильной водопроводной воды, зараженной одинаковым количеством взвеси суточной агаровой культуры кишечной палочки. Фильтрование проводили при разрежении в 200 мм рт. ст. Время фильтрации заданного объема воды определяли по секундомеру. Фильтрат собирали в стерильную посуду, к »ему добавляли глюкозо-пептонную среду из расчета 1:10 и выращивали при 37° сутки. Фильтры накладывали на розоловый агар и выдерживали также сутки в термостате.
Оказалось, что часть испытуемых фильтров давала нестерильный ' фильтрат независимо от пропущенного объема воды. Хотя все объемы ' воды в каждом опыте заражали одинаковым количеством кишечных -палочек, но колоний этих бактерий на фильтрах образовывалось различное количество даже в тех случаях, когда фильтрат оставался стерильным. Проскоки бактерий в фильтрат не стояли в связи и со скоростью фильтрации воды.
Встречалось и такое явление, когда через фильтры одного и того же образца одна и та же вода не проходила в объеме. 10 и 100 мл, тогда как большие объемы фильтр свободно пропускал. Это указывало на нестандартность фильтров. Для определения стандартности фильтров и установления предельного объема воды, который проходит через один фильтр, в опыт брали по 3—5 фильтров одного и того же образца и через каждый фильтр пропускали стерильную водопроводную воду, зараженную, как и в других опытах, кишечной палочкой. Секундомером отмечали время фильтрации при одном и том же разрежении в 200 мм рт. ст.
Полученные данные показали нестандартность разных фильтров даже одного образца. Выяснилось, что некоторые фильтры могли пропустить в течение нескольких минут 300 мл воды с полной задержкой бактериальных клеток. Другие фильтры того же образца пропускали такой объем воды за более долгий срок, иногда фильтрование прекращалось на объеме воды, меньшем чем 100 мл.
В результате длительного изучения разных образцов фильтров типа ФП было установлено, что фильтры образца ФПП-5 «микрофил» являются вполне пригодными для бактериологических исследований воды, почвы и воздуха. По фильтрующей способности и по отсутствию влияния их на рост и характер формирования колоний как сапрофитных бактерий, так и патогенных микробов кишечной группы — тифа, паратифа, дизентерии, они не уступают мебранным фильтрам. Основой для приготовления фильтра «микрофил» служит материал ФПП-5-8. Фильтр (изготовлен из волокон диаметром 0,5 \х) имеет аэродинамическое сопротивление 8 мм вод. ст. при удельной скорости 1 см3/сек на 1 см2. Этот фильтр в определенных условиях отпрессован и обработан 0,5—2% раствором ОП-7 для придачи ему гидрофильных свойств. «Микрофил»
• •
имеет толщину 25—35 ¿д, характеризуется равномерным распределением пор по поверхности со средним диаметром 0,7 |ы и большой эластичностью. По своим техническим свойствам «микрофил» приближается к мембранным фильтрам № 3.
Для определения числа микробов в воде прямым микроскопическим методом также были испытаны фильтры ФПП-5 «микрофил» под контролем мембранных фильтров. Через фильтры пропускали водопроводную воду, зараженную взвесью чудесной палочки, кишечной палочки, вегетативными формами Вас. Муамс^э и дрожжами типа Тоги1а. Затем подсушенные фильтры окрашивали карболовым эритрозином и просветляли канадским бальзамом, смесью канадского бальзама с гвоздичным маслом и др.
Проделанная работа показала возможность использования фильтров образца «микрофил», окрашенных водным эритрозином без фенола или 4% водным раствором метиленового синего, или фуксином Пфейффера и просветленных канадским бальзамом, содержащим 10% гвоздичного масла, или смесью иммерсионного масла с гвоздичным маслом в отношении 1:1.
-Фильтры «микрофил» по сравнению с мембранными фильтрами сильнее обесцвечивались, но все же оставались слегка окрашенными. Применение голубого светофильтра улучшало условия просмотра препаратов — окрашенных фильтров — и подсчета на них микробных клеток. Фильтры «микрофил» были испытаны и при исследовании взвеси почвы, отобранной на полях орошения, и почвы, искусственно зараженной кишечной палочкой. Через фильтры ФПП-5 и параллельно через мембранные фильтры № 3 фильтровали почвенную суспензию в количестве 1 мл основного разведения и по 1 мл ее десятикратных разведений. Для задержки взвеси почвенную суспензию предварительно фильтровали через стерильный планктонный или бумажный фильтр. Время фильтрации через испытуемые и контрольные фильтры было одинаково. Фильтры переносили на розоловый агар и среду Эндо и подращивали при 37° в течение суток, после чего подсчитывали число колоний кишечной палочки. Полученные результаты показали, что на испытуемых фильтрах рост в большинстве случаев был аналогичен росту на контрольных мембранных фильтрах.
Эффективность улавливания бактерий из воздуха фильтрами ФП «микрофил» сравнивалась с эффективностью улавливания бактерий мембранными фильтрами и прибором Кротова. И при исследовании воздуха фильтры типа «микрофил» оказались вполне пригодными, хотя несколько уступали по эффективности мембранным фильтрам (рис. 2).
Однако при разработке ускоренного определения бактериального аэрозоля в виде распыленного в экспериментальной камере белого стафилококка и Вас. Мусо1с1е5 и микрофлоры воздуха лаборатории применение фильтров «микрофил» позволило ускорить ориентировочный бактериологический анализ воздуха до 4 часов 20 минут. Продолжительность такого же анализа, произведенного с помощью мембранных фильтров, б—7 часов. Ускорение анализа обусловливается большей
Рис. 2. Посев 50 л воздуха на мембранный фильтр (/) и фильтр типа «микрофил». (2).
ЛИТЕРАТУРА
Барсов К. К. Микробиология, 1932, в. 4, стр. 422. — О н же. Там же, 1937, в. 6, стр. 912. — Дианова Е., Ворошилова А. Там же, 1932, в. 3, стр. 271.— Осадчих И. П. Лабор. практика, 1939, № 12, стр. П. —Разумов А. С. Микробиология, 1932, в. 2, стр. 176.— Он же. Там же, 1955, в. 2, стр. 234. — Р е з н и к Я. Б. Гиг. труда, 1937, № 2, стр. 51. —Руки на Е. А.,'Б и р ю з о в а В. И. Там же, 1952, в. 1, стр. 60.— Albrecht J., Arch. hyg. (Berl.), 1957, Bd. 141, S. 210. —Goetz A., Am. J. publ. Hlth, 1953, Bd. 43, S. 150.— Kruse H, Gesundhei. Ingr., 1948, Bd. 69, S. 199. —Macha la O., Spumy K., Folia microbiol. (Praha), 1959, т. 4, стр. 240.— Sery V., Z оv á H. G., Csl. Epidem., 1955, т. 4, стр. 219.
Поступила 19/VI 1961 г.
ft ft ft
О МЕТОДИКЕ ИЗМЕРЕНИЯ ШУМА ГОРОДСКОГО
ПАССАЖИРСКОГО ТРАНСПОРТА
Кандидат технических наук С. Д. Ковригин
Из Московского инженерно-строительного института имени В. В. Куйбышева
До настоящего времени в нашей стране отдельные исследования и измерения шума городского пассажирского транспорта проводились по разнообразным методикам, поэтому результаты их почти не сопоставимы.
Можно установить следующие основные факторы, влияющие на показатели измерения шума, вызываемого снаружи транспортом: а) скорость движения транспорта; б) режим работы двигателя и вспомогательных электрических механизмов; в) количество пассажиров; г) наличие отражающих звук объектов; д) характер дорожного покрытия или пути; е) уровень шумовых помех; ж) положение измерительного микрофона; з) кривые коррекции частотной характеристики шумомера {шкалы шумомера С, В и А).
простотой окраски микроколоний после 4-часового роста бактерий на «микрофиле» и продолжительностью окраски всего в течение 20 минут, тогда как для окраски мембранных фильтров требуется Р/г—2 часа. При этом микроколонии на фильтрах «микрофил» яркие, контрастные, что значительно облегчает их обнаружение, хотя волокнистосетчатая и недостаточно гладкая поверхность фильтров «микрофил» иногда обусловливали распределение клеток по ходу волокон и не в одной плоскости (рис. 3).
Следовательно, и для исследования любой фазы аэрозоля фильтры типа «микрофил» вполне пригодны, особенно при необходимости получить быструю, ориентировочную оценку бактериального загрязнения воздуха.
Таким образом, проделанная работа показала возможность использования фильтров типа ФПП-5 «микрофил» из новых синтетических материалов для санитарно-
бактериологических исследований Рис- 3- Микроколония на «микрофиле». ВОДЫ, воздуха И ПОЧВЫ. Подращивание 4 часа X 100.
