CC BY
32022, том 25, № 4
УДК 612.117:616.345-006.6 DOI: 10.29039/2070-8092-2022-25-4-37-42
ПРИМЕНЕНИЕ КЛИНОВИДНОЙ ДЕГИДРАТАЦИИ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ У БОЛЬНЫХ
КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ
Линёв К. А.1,2, Торба А. В.1, Тананакина Т. П.1, Долгополов В. В.1
Государственное учреждение Луганской Народной Республики «Луганский государственный медицинский университет имени Cвятителя Луки» 91045, Ленинский район, квартал 50 лет Обороны Луганска, 'г, Луганск, Луганская Народная Республика 2Государственное учреждение Луганской Народной Республики «Луганский республиканский клинический онкологический диспансер» 91047, улица Краснодонская, 8, Луганск, Луганская Народная Республика
Для корреспонденции: Линёв Константин Алексеевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры госпитальной хирургии, урологии и онкологии ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Cвятителя Луки», e-mail: k_linev@mail.ru
For correspondence: Konstantin A. Linyov, PhD, associate professor of the department of hospital surgery, urology and oncology, State Establishment of Lugansk People's Republic Saint Luka Lugansk State Medical University, e-mail: k_linev@mail.ru
Information about authors: Linyov K. A., https://orcid.org/0000-0001-6863-0736 Torba A. V., https://orcid.org/0000-0001-6341-5746 Tananakina T. P., https://orcid.org/0000-0002-0978-6009 Dolgopolov V. V., https://orcid.org/ 0000-0002-2897-817X
РЕЗЮМЕ
Цель исследования - выявить предикторы неблагоприятного прогноза у больных колоректальным раком методом анализа структурных элементов высохшей капли сыворотки крови (фации). Материал и методы. Исследованы фации сыворотки крови 137 пациентов с колоректальным раком, которые ретроспективно были разделены на две группы. В группу № 1 отнесены 105 пациентов, у которых в течение года по данным канцер-регистра не отмечалось летального исхода, группу № 2 составили 32 больных, которые в течение года умерли по причине прогрессирования заболевания и раковой интоксикации. Больные, умершие от ранних послеоперационных осложнений и конкурирующих заболеваний, в исследование не входили. Фации сыворотки крови получали методом клиновидной дегидратации по С. Н. Шатохиной, который заключается в высушивании капли сыворотки крови на предметном стекле. Морфологические элементы изучали путём световой микроскопии микроскопом УМ-401П. Для документирования изображений использовали фотосъёмку через микроскоп. В фациях выделяли центральную, промежуточную и краевую зоны, радиальные трещины, псевдотрещины. Результаты. Выявлено три качественных признака, отличающих фации пациентов с неблагоприятным исходом заболевания, а именно - трёхлучевые трещины, разрушение центральной зоны, отсутствие языковых структур краевой зоны. Обсуждение. Указанные изменения связываем с гипоальбуминемией, качественными изменениями альбумина за счёт связывания его активных центров с токсинами. Заключение. Клиновидная дегидратация позволяет выявить пациентов с неблагоприятным прогнозом заболевания. С помощью полиномиальной логистической регрессии получена формула определения вероятности наступления летального исхода в течение года.
Ключевые слова: колоректальный рак, прогноз заболевания, эндогенная интоксикация, клиновидная дегидратация, фация сыворотки крови.
WEDGE-SHAPED DEHYDRATION APPLICATION FOR COLORECTAL CANCER
PATIENTS PROGNOSIS
Linyov K. A.1,2, Torba A. V.1, Tananakina T. P.1, Dolgopolov V. V.1
'State Establishment of Lugansk People's Republic Saint Luka Lugansk State Medical University. 2State Establishment of Lugansk People's Republic Lugansk Republic Clinic Oncology Center.
SUMMARY
The purpose of the study was to identify poor prognosis predictors in colorectal cancer patients by analyzing the structural elements of a dried blood serum drop (facies). Material and Methods. The blood serum facies of 137 colorectal cancer patients were studied, which were retrospectively divided into two groups. Group No. 1 included 105 patients who did not have a lethal outcome during the year according to the cancer registry, group No. 2 consisted of 32 patients who died during the year due to disease progression and cancer intoxication. Patients who died from early postoperative complications and competing diseases were not included in the study. Serum facies were obtained by the method of wedge dehydration according to S. N. Shatokhina, which consists in drying a drop of blood serum on a glass slide. Morphological elements were studied by light microscopy with a UM-401P microscope. Microscopic photography was used to document the images. In facies central, intermediate and marginal zones, radial cracks, pseudocracks were distinguished. Results. Three qualitative features were identified that distinguish the facies of patients with an unfavorable outcome of the disease, namely, three-ray cracks, central zone destruction, and the absence of flame structures in the marginal zone. Discussion. These changes
are associated with hypoalbuminemia, qualitative changes in albumin due to the binding of its active centers with toxins. Conclusion. Wedge-shaped dehydration makes it possible to identify patients with an unfavorable prognosis of the disease. Using polynomial logistic regression, a formula was obtained for determining the probability of a fatal outcome during the year.
Key words: colorectal cancer, disease prognosis, endogenous intoxication, wedge-shaped dehydration, blood serum facies.
По данным канцер-регистра в Луганской Народной Республике в 2020 г. заболеваемость раком ободочной кишки составила 24,0, раком прямой кишки - 19,1 на 100 тысяч населения. При сложении этих показателей колоректальный рак (КРР) занял первое место в структуре онкологической заболеваемости. В Российской Федерации сформированы и регулярно обновляются клинические протоколы диагностики и лечения КРР [1; 2], но актуальной задачей является стратификация пациентов в зависимости от тяжести состояния для определения возможности проведения оперативного лечения, лучевой и химиотерапии. Выработка тактики лечения конкретного пациента осуществляется комиссионно в зависимости от стадии заболевания, наличия осложнений, сопутствующей патологии, клинико-биохимиче-ских показателей, возраста пациента, возможностей лечебного учреждения и, наконец, личного опыта врача. Необходим объективный, легко воспроизводимый и документируемый метод оценки тяжести состояния пациента, его возможности перенести агрессивные методы лечения.
Тяжесть состояния пациента - вероятность наступления летального исхода [3]. Для оценки тяжести состояния пациента в анестезиологии используется шкала анестезиологического риска ASA. В онкологии используются шкала ECOG и аналогичная шкала Карновского. Все указанные классификаторы имеют большое практическое значение, но достаточно условны. Так шкала анестезиологического риска классифицирует в зависимости от наличия или отсутствия сопутствующей патологии, что для пациентов пожилого и старческого возраста является очень расплывчатым. Шкалы ECOG и Карновского определяются способностью больного выполнять работу, его способностью к самообслуживанию и длительностью пребывания в постели в течение суток, что зависит от многих факторов, не только от раковой интоксикации.
Эндогенная интоксикация по своей сущности заключается в повышении концентрации в крови молекул средней массы [4]. При этом отмечено изменение функциональных свойств альбумина, в частности, при онкологических заболеваниях [5]. Клиновидная дегидратация изучает морфологические свойства кристаллопротеомы - сухого остатка высохшей капли биологических жидкостей [6]. Клиновидная дегидратация сыворотки
крови, желчи и других биологических жидкостей позволяет установить признаки наличия злокачественного новообразования [7]. Выражаясь более точно, клиновидная дегидратация устанавливает признаки эндогенной интоксикации [8], которая сопровождает онкологическое заболевание, определяет тяжесть состояния пациента, приводит к летальному исходу.
Целью исследования было выявление предикторов летального исхода больных КРР в структурных элементах фации сыворотки крови (ФСК) путём их сравнительного анализа.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Забор крови для получения ФСК у больных КРР производили при их поступлении в стационар - проктологическое отделение Луганского республиканского клинического онкологического диспансера. Для дальнейшего ретроспективного анализа были сформированы группы пациентов с учетом критериев включения и исключения.
Критерии включения: 1) наличие КРР (адено-карцинома); 2) на момент получения фации пациент был опухоленосителем, т.е. подлежал специфическому или симптоматическому лечению; 3) тяжесть состояния больных определялась раковой интоксикацией, конкурирующих заболеваний не было, сопутствующие - были в стадии компенсации или ремиссии. Критерии исключения - умершие от ранних послеоперационных осложнений, умершие от осложнений инфекции COVID-19, нековидной пневмонии.
Согласно цели исследования пациенты, включенные в ретроспективное исследование, были разделены на две группы. Группу № 1 составили 105 больных (50 мужчин и 55 женщин, средний возраст 67,8±2,8 лет), у которых по данным канцер-регистра в течение последуещего года не произошло летального исхода. В группу № 2 вошло 32 пациента (16 мужчин и 16 женщин, средний возраст 64,3±3,5 лет), которые умерли в течение года, причина смерти - раковая интоксикация на фоне КРР.
ФСК готовились по С. Н. Шатохиной [9]. Забор крови из вены в количестве 5 мл выполняли утром натощак. Образцы крови центрифугировали с частотой 1000 оборотов в минуту (450g) в течение 10 минут для получения сыворотки. При помощи пипетки сыворотку крови наносили на новое предметное стекло таким образом, чтобы
2022, том 25, № 4
получилась капля диаметром 5-7 мм. Из одного образца сыворотки выполнялось 3 капли. Предметные стёкла помещались в сушильный шкаф на время высыхания капли (3-5 часов) при температуре 22-25 С и относительной влажности воздуха 65-75% без выраженных воздушных потоков. Структура полученных фаций изучалась при помощи светового микроскопа УМ-401П с увеличением 20х-160х, выполнялись фотографии фотоаппаратом "Olympus".
Анализировались следующие признаки - сохранение/разрушение центральной зоны, наличие/отсутствие трёхлучевых трещин, наличие/ отсутствие токсических бляшек, наличие/отсутствие расщепления краевой конкреции в виде языковых структур. Все указанные признаки были качественными. Определялась достоверность отличия процента качественного признака в группах с определением %2 Пирсона. Данные, полученные при анализе ФСК пациентов группы № 1 и группы № 2, были использованы как группы обучения, с помощью полиномиальной логистической регрессии выведена формула определения prognosis letalis, то есть вероятность принадлежности пациента к группе № 2:
Z=B+bx+bx+b3x3+...+b x
11 22 33 nn
где p - вероятность наступления события в интервале от 0 до 100%; е - основание натуральных логарифмов - 2,71; b - канонические коэффициенты; х - независимые переменные; B - свободный член. Коэффициенты B и b вычисляются программой в зависимости от распределения качественных признаков х в группах обучения.
Определение %2 и полиномиальная логистическая регрессия выполнены при помощи пакета программ «SPSS Statistics».
РЕЗУЛЬТАТЫ
Три фации одного образца сыворотки имели сходный вид, одинаковые структурные элементы. В исследовании учитывалась одна фация от одного больного.
В группе № 1 у 86 (81,9%) больных отмечался радиальный тип строения фации с сохранением её центральной зоны. При этом радиальные трещины сходились к центру или в центральной зоне (рис. 1а), разделяя фацию на отдельности. Внутри отдельностей имелись псевдотрещины, образующие поперечную исчерченность, гранулярные, глобулярные структуры. Псевдотрещины были уже радиальных трещин, поэтому не нарушали радиальный скелет фации.
В группе № 2 центральная зона фаций была разрушена у 30 (93,75%) пациентов (рис. 1б), представлена грубым узором с трёхлучевым типом растрескивания. Трёхлучевой узор располагался на однородном фоне или определялись «случайные» пятна, не зависимые от ячеек (рис. 4б). При разрушении центральной зоны псевдотрещины в ней отсутствовали. Радиальные трещины сохранялись в краевой и промежуточной зонах фации.
Рис. 1. а) ФСК с сохранённой центральной зоной; б) ФСК с разрушенной центральной зоной.
Ув.х40.
Трёхлучевые трещины в группе № 1 встречались только в 19 случаях (18,1%) в промежуточной зоне фации, у большинства больных - не встречались (рис. 2б). В группе № 2 трёхлучевые трещины встречались в 27 (90,0%) случаев, подменяли промежуточную и центральную зону фации, многие заканчивались слепо (рис. 2а).
Рис. 2. а) наличие трёхлучевых трещин; б) трёхлучевые трещины отсутствуют. Ув.х40.
В краевой зоне фации определялись токсические бляшки - дугообразные или волнистые растрескивания из одной точки. Токсические бляшки связаны с периферическим кольцом фации (рис. 3 а). В нашем исследовании токсические бляшки не оправдали своего названия. В группе № 2 более тяжёлых пациентов они встречались реже, чем в группе № 1, без статистической достоверности (табл.).
Краевые конкреции расщеплялись на языковые структуры - языки Арнольда, ковры Сер-
jy
а б
Рис. 3. а) 1 - токсические бляшки (линии Вал-нера), 2 - краевая конкреция не расщеплена Ув.х100; б) расщепление краевой конкреции с образованием фрактальных языковых структур. Ув.х80.
Рис. 4. а) наличие языковых структур, ув.х100;
б) 1 - языковые структуры отсутствуют; 2 -разрушенная центральная зона, «случайные» пятна, псевдотрещины отсутствуют, ув.х20.
пинского, перевёрнутые языковые структуры, языковые структуры в форме короны. Между указанными структурами мы не делали различия, поскольку встречались разные языковые структуры в пределах одной фации и даже в пределах одной отдельности. Существенным является то, что они идентифицируются как производные краевой конкреции (рис. 3б).
Языковые структуры были у 94 (89,5%) больных группы № 1 (рис. 4а). Тогда как у большинства больных (26 - 81,25%) группы № 2 - языковые структуры отсутствовали (рис. 4б).
Сопоставление числовых значений частоты изучаемых признаков в исследуемых группах представлено в табл. 1.
Из четырех приведенных в таблице качественных признаков - три статистически значимо чаще отмечались у пациентов группы № 2. Наличие токсических бляшек было выражено одинаково в обеих группах. Следовательно, можно утверждать, что разрушение центральной зоны, наличие трёхлучевых трещин, отсутствие языковых структур могут служить кристаллографическими признаками эндогенной интоксикации.
Используя функцию полиномиальной логистической регрессии в программе "SPSS Statistics", для определения вероятности летального исхода в течение года больного КРР по его ФСК получили следующую формулу:
Таблица 1
Частота структурных признаков ФСК в исследуемых группах
Название признака Группа № 1 - абс. (%), n=105 Группа № 2 - абс. (%), n=32 х2 Р
Разрушение центральной зоны 19 (18,1%) 30 (93,75%) 61,108 <0,001
Трёхлучевые трещины 19 (18,1%) 27 (90,0%) 48,308 <0,001
Токсические бляшки 20 (19,0%) 4 (12,5%) 0,728 0,394
Отсутствие языковых структур 11 (10,5%) 26 (81,25%) 62,317 <0,001
р =-х 100 %
1 + 2,71"
2=-1,621+2,134ДЦР+1,754ТТ+2,78ОЯС,
где ДЦР - деструкция центральной зоны, ТТ - трёхлучевые трещины, ОЯС - отсутствие языковых структуры. При наличии признака присваивали значение «1», при его отсутствии - «0», слагаемое выпадало.
Пример 1.
У больного КРР в ФСК имеются языковые структуры, сохранена центральная зона, трёхлучевые трещины отсутствуют. 2= -1,621+2,134*0+1,754*0+2,78*0. Вероятность летального исхода в течение года р=16,6%.
Пример 2.
У больного КРР в ФСК разрушена центральная зона, имеются трёхлучевые трещины и отсутствуют языковые структуры. 2= -1,621+2,134х1+1,754х1+2,78х1. В таком случае вероятность летального исхода в течение года р=99,35%.
ОБСУЖДЕНИЕ
Матрикс ФСК представляет собой кристал-лопротеому, макроскопический портрет которой зависит от свойств агрегатов, состоящих из белковых молекул. Изменением конформации белковых молекул и связыванием активных центров альбумина молекулами средней массы можно объяс-
2022, том 25, № 4
нить трёхлучевое растрескивание. Этими же феноменами объясняют появление токсических бляшек, при котором конгломераты из изменённого альбумина образуют трещины перпендикулярно основному фронту сжатия-растрескивания [9].
Относительно происхождения языковых структур результат данного исследования несколько противоречит устоявшейся концепции. Общепринятым считается тот факт, что языки Арнольда и ковры Серпинского являются признаками воспаления [9; 10]. В нашем исследовании, наоборот, их отсутствие было характерно для больных группы № 2 при тяжёлом состоянии пациента. Данное явление предположительно связано с диспротеинемией и гипоальбуминемией при выраженной эндогенной интоксикации [11]. Очевидно, при низком содержании сывороточного альбумина языковые структуры не образуются, также не образуются и токсические бляшки.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
По структурным элементам ФСК можно судить о тяжести состояния пациента как вероятности летального исхода. Кристаллографическими предикторами неблагоприятного прогноза заболевания больных КРР были трёхлучевые трещины, разрушение центральной зоны, отсутствие языковых структур краевой зоны.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гришко П. Ю., Балясникова С. С., Самсонов Д. В., Мищенко А. В., Карачун А. М., Право-судов И. В. Современный взгляд на принципы диагностики и лечения рака прямой кишки по данным МРТ (обзор литературы). Медицинская визуализация. 2019;2:7-26. doi:10.24835/1607-0763-2019-2-7-26.
2. Шелехов А. В., Дворниченко В. В., Мун-куев А. В., Расулов Р. И., Радостев С. И., Зубков Р. А. Лечение рака прямой кишки и ректосигмоидно-го отдела толстой кишки, осложненных опухолевым кровотечением, методом рентген-эндоваску-лярного гемостаза. Сибирский онкологический журнал. 2016;15(5):55-59. doi:10.21294/1814-4861-2016-15-5-55-59.
3. Пчелинцева Ф. А., Петрова М. В., Шмыр И. С., Миронов К. А., Гамеева Е. В. Объективные методы оценки тяжести состояния пациентов в отделении реанимации онкохирургического профиля. Исследования и практика в медицине. 2020; 7(2): 116-128. doi:10.17709/2409-2231-2020-7-2-11.
4. Акименко М. А., Колмакова Т. С., Оксе-нюк О. С., Калмыкова Ю. А., Смирнова О. Б. Осо-
бенности развития эндогенной интоксикации при экспериментальной обструкции мочевыводящих путей. Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. 2019;23(3):297-307. doi:10.22363/2313-0245-2019-23-3- 297-307.
5. Schnurr K., Waterstradt K., Matthes G., Дмитриев П. Н. Применение метода эпр-спектроскопии для диагностики и прогноза онкологических заболеваний. Морская медицина. 2017;3(4):95-103. doi:10.22328/2413-5747-2017-3-4-95-103.
6. Высоцкая А. Г., Щербатюк Т. Г. Свободно-радикальная активность и морфология слюнной жидкости студентов разных этнических групп в условиях психоэмоционального стресса. Экология человека. 2016;23(6):21-25. doi:10.33396/1728-0869-2016-6-21-25
7. Обухова Л. М., Алясова А. В., Конторщи-кова К. Н., Терентьев И. Г., Горшкова Т. Н., Никифорова О. Н. Структурные и биохимические характеристики плазмы крови человека при эпителиальных злокачественных опухолях. Вестник новых медицинских технологий. 2011;13(4):27-30.
8. Маркевич В. Э., Кириленко Е. А., Петра-шенко В. А., Заблоцкая Т. Ю., Билоконь М. А. Методы клиновидной дегидратации биологических жидкостей. Morphologia. 2014;8(1):113-117.
9. Шатохина С. Н., Шабалин В. Н. Морфология биологических жидкостей - новое направление в клинической медицине. Альманах клинической медицины. 2003;6:404-420.
10. Шихлярова А. И., Шейко Е. А., Куркина Т. А., Розенко Л. Я., Крохмаль Ю. Н. Морфологические маркеры патологических процессов сыворотки крови больных раком полости рта. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2016;9:409-413.
11. Забелин А. С., Брылев И. А., Семёнов С. А. Синдром эндогенной интоксикации у больных флегмонами лица и шеи. Вестник экспериментальной и клинической хирургии. 2012;2(5):398-400.
REFERENSES
1. Grishko P. Yu., Balyasnikova S. S., Samsonov D. V., Mishchenko A. V., Karachun A. M., Pravosudov I. V. Contemporary view to the principles of rectal cancer diagnostics and treatment according to MRI (literature review). Medical Visualization. 2019;2:7-26. (In Russ.). doi:10.24835/1607-0763-2019-2-7-26.
2. Shelekhov A. V., Dvornichenko V. V., Munkuev A. V., Rasulov R. I., Radostev S. I.. Zubkov R. A. Treatment of rectal and rectosigmoid cancer complicated by tumor bleeding using the method of x-ray-endovascular hemostasis. Siberian journal of oncology. 2016;15(5):55-59. (In Russ.). doi:10.21294/1814-4861-2016-15-5-55-59.
3. Pchelintseva F. A., Petrova M. V., Shmyr I. S., Mironov K. A., Gameeva E. V. Objective methods for assessing the severity of patients condition in a surgical intensive care unit. Research and Practical Medicine Journal. 2020;7(2):116-128. (In Russ.). doi:10.17709/2409-2231-2020-7-2-11.
4. Akimenko M. A., Kolmakova T. S., Oksenjuk O. S., Kalmykova Yu. A., Smirnova O. B. Development Features of the Endogenous Intoxication During Experimental Obstruction of the Urinary Tracts. RUDN Journal of Medicine. 2019;23(3):297-07. (In Russ.). doi:10.22363/2313-0245-2019-23-3-297-307.
5. Schnurr K., Waterstradt K., Matthes G., Dmitriev P. N. Application of ESR-spectroscopy for diagnosis and prognosis of cancer. Marine Medicine. 2017;3(4):95-103. (In Russ.). doi:10.22328/2413-5747-2017-3-4-95-103.
6. Vysotskaya A. G., Shcherbatyuk T. G. Free radical activity and morphology of the salivary fluid in students from different ethnic groups in emotional stress conditions. Ekologiya cheloveka (Human Ecology). 2016;23(6):21-25. (In Russ.). doi:10.33396/1728-0869-2016-6-21-25.
7. Obuhova L. M., Aljasova A. V., Kontorschikova K. N., Terentjev I. G., Gorshkova T. N., Nikiforova O. N. Structural and biochemical characteristics of human blood plasma in epithelial malignant tumors. Journal of new medical technologies. 2011;18(4):27-30. (In Russ.).
8. Markevich V. E., Kirilenko E. A., Petrashenko V. A., Zablotskaya T. U., Bilokon T. A. Methods of wedge dehydration of biological fluids. Morphologia. 2014;8(1):113-7. (In Russ.).
9. Shatohina S. N., Shabalin V. N. Morfologiya biologicheskih zhidkostey - novoye napravleniye v klinicheskoy medicine. Almanac of Clinical Medicine. 2003;6:404-420. (In Russ.).
10. Shihlyarova A. I., Sheiko E. A., Kurkina T. A., Rozenko L. J., Krokhmal Yu. N. Morphological markers of pathological processes of the blood serum of patients with cancer of the oral cavity. International journal of applied and fundamental research. 2016;9:409-413. (In Russ.).
11. Zabelin A. S, Brilev I. A., Semenov S. A. Endogenic intoxication syndrome in patients with phlygmons. Bulletin of experimental and clinical surgery. 2012;2(5):398-400. (In Russ.).
