Применение гидрозольных препаратов в постановке реакций гидрозольной агглютинации в диагностике туберкулеза Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

Страничка молодого ученого

Д.В. Яговкин

ПРИМЕНЕНИЕ ГИДРОЗОЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ПОСТАНОВКЕ РЕАКЦИЙ ГИДРОЗОЛЬНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ В ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА

Кировская государственная медицинская академия (Представлена проф., д. т. н. Мешандииым А.Г.)

Введение:

Гидрозольные препараты представляют собой коллоидные и полуколлоидные растворы оксидов и гидроксидов «переходных металлов» меди, железа, на поверхности которых адсорбированы биоспецифические компоненты, в частности, антигены, либо комплиментарные им антитела к различным нозологиям. При последующем смешении гидрозолей и биологических жидкостей: сыворотки крови, плазмы, слюны и т.д. - в случае положительной реакции происходит процесс агглютинации, г.е. потеря устойчивости раствора. При отрицательной реакции агглютинации не происходит. В результате достигается возможность бесприборного тестирования тех или иных нозологий (например, туберкулеза) практически в течение 1-3 мин. при низкой цене одного анализа.

Результаты и их обсуждение

Гидрозольные препараты могут применяться прежде всего в задачах охраны окружающей среды выявление аллергенов, в задачах медицинской диагностики различных инфекционных и со\«атически\ заболеваний. Эти препараты могут также использоваться для контроля адекватности лечебных н профилактических назначений. Также возможно применение гидрозольных препаратов в биотехнологии как объектов для контроля качества ферментируемых вакцин, иммуноглобулинов и т.д.

Гидрозольные препараты используются нами на основе коллоидного раствора гексацианоферрата железа (III). 11ри этом коллоидные частицы для усиления связи биолиганда и их поверхности подвергались хемо-сорбционной модификации. После этого проводилась адсорбция биоспецифического лиганда. В предлагаемой информации в качестве специфического лиганда был антиген, выделенный из микобактерии туберкулеза. Иммунологическая активность гидрозоля напрямую зависит от размера его частиц. Нами установлена связь между размерами частиц гексацианоферрата железа (III) и способами их синтеза. Размеры частиц контролировали при помощи электронного микроскопа (JSM 52а)

на базе КГМ А, на кафедре гистологии (зав. каф., д.м.н., проф. Зайцев В.Б.) в качестве фактора, влияющего на размеры частиц и отсюда на стабильность гидрозоля, был выбран температурный режим получения ГЦФЖ (III). В ходе электронно-микроскопического исследования гидрозолей на основе ГЦФЖ (III) выяснили, что оптимальный размер частиц твердой фазы, необходимый для проведения иммунохимического анализа 10 мкм, что достигается при температуре 50°С.

1 (остановка реакции ГА на туберкулез в планшете: используют 10-70 мкл биоматериала и гидрозоля, при этом биоиатериал (сыворотка крови) рассматривалась в планшете, после чего в планшет добавили гидрозоль. Полученные результаты: гидрозоль, на частицы которого сорбирован туберкулезный антиген, выявлял специфические маркеры (антитела) в сыворотке в течение 10-15 мин. Чувствительность метода не превышает 70%, есть небольшой процент ложнопозитивов.

Постановка реакции ГА на туберкулез. Вариант постановки на стекле.

Используется 10-20 мкл биоматериала и 20-30 мкл гидрозоля. Эта методика позволяет в течение 15 сек 2 мин в большинстве случаев выявлять позитивные сыворотки. В постановках были использованы панели сывороток КОТД и КЧК. В ходе проведенных работ была определена чувствительность препарата в пределах 85-90%, ложнопозитив практически не выявлялся. Анализ проводился практически без всяких приборов в условиях самой простой лаборатории, обладает дешевизной, экснрессностью, используются меньшие дозы (количества) биоматериала и гидрозоля.

Это новая методика, представляющаяся перспективной в иммунохимическом выявлении такой нозологии, как туберкулез.

Список литературы:

1. Мешандин А. Г., Орлова О. Ю., Цепелева А. В. Гидрозоли: принципиально новый класс диагностических препаратов для выявления и мониторинга инфекционных и соматических заболеваний // Вятский медицинский вестник. - 1999. №1. С. 37-42.

2. Кислицын Ю. В., Мешандин А. Г. Определение противомозговых антител в крови больных опухолями мозга методом иммуноагглютинации // Неврология и психиатрия. 2000. № 5.

3. Золотарев Ю. В., Мешандин А. Г., Золотарева Л. В. Серологическая диагностика сальмонеллезов // Клиническая лабораторная диагностика. - 2001.

№ 1.

4. Патент РФ №2169924.

5. Патент РФ №2130613.