CC BY
78
Применение достима для повышения выхода пригодных для пересадки эмбрионов крупного рогатого скота
А.Н. Безин, д.в.н., профессор,
А.А. Романов, аспирант, Уральская ГАВМ
По данным ряда авторов [1, 2], в настоящее время при применении препарата ФСГ-супер (фолликулостимулирующего гормона) выход пригодных для пересадки эмбрионов составляет 4,5 шт., что составляет в среднем 45% от полученного числа эмбрионов. Возникает необходимость повысить процент выхода эмбрионов хорошего качества, не меняя препарат для стимуляции полиовуляции. От количества пригодных к пересадке эмбрионов, получаемых от высокопродуктивных коров-доноров, напрямую зависит выход телят-трансплантантов [1-6].
Современные биохимические, иммунологические методы исследований позволяют накапливать объективные данные и глубже понять процессы, способствующие обеспечению в организме самок половой цикличности и оплодотворяемости [7].
Дальнейшее решение проблемы повышения выхода эмбрионов, которое определяется запросами животноводства, связано с всесторонним изучением динамики клеточных и гуморальных факторов, характеризующих защитные силы организма, и внедрением современных методов стимуляции цикличности и оплодотворяемости коров в молочном скотоводстве. К таким методам относится применение иммуномодулирующих препаратов, в том числе достима.
Целью нашего исследования стало изучение механизмов действия и определение эффективности применения достима для повышения выхода пригодных для пересадки эмбрионов от доноров чёрно-пёстрой породы.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
— изучить иммуно-биохимические показатели крови, характеризующие уровень компенсаторно-приспособительных механизмов на фоне применения достима;
— определить эффективность применения достима в качестве средства, повышающего выход пригодных для пересадки эмбрионов от коров чёрно-пёстрой породы в сочетании с гонадотропным препаратом «ФСГ-супер» и простагландином Ф2-альфа (эстрофаном).
Для решения поставленных задач мы провели исследование животных на базе госплемзавода «Россия» Сосновского района Челябинской области. При постановке опытов сформировали три группы коров чёрно-пёстрой породы по принципу аналогов.
С целью стимуляции суперовуляции животные I опытной группы (п = 5) были обработаны по следующей схеме.
0-й день полового цикла (признаки охоты) — вводили внутримышечно однократно в дозе 15 мл достим, представляющий собой 0,5%-ную супензию очищенного полисахаридного комплекса, имобилизированного в геле.
10-й день полового цикла — ректально диагностировали наличие жёлтого тела полового цикла. При его наличии начинали обработку ФСГ-супер в сочетании с эстрофаном (табл. 1).
1. Схема стимуляции суперовуляции ФСГ-супер (ЕД по Арморовскому стандарту)
День полового цикла ФСГ-супер (50 ЕД по Арм. станд.), 8 инъекций
800 час. 2000 час.
0-й а т * С донора
10-й 8 ЕД 8 ЕД
11-й 7 ЕД 7 ЕД
12-й 6 ЕД 6 ЕД
эстрофан 500 мкг эстрофан 250 мкг
(ОТДЕЛЬНО С ФСГ) (ОТДЕЛЬНО С ФСГ)
13-й 4 ЕД 4 ЕД
Примечание: 1 флакон = 50 ЕД, растворяли в 5 мл растворителя
14-й день (0-й день цикла) — пришедших в охоту осеменяли вечером двухкратной дозой спермы.
15-й день (1-й день цикла) — утром и вечером осеменяли также двукратной дозой спермы.
На 21-й день (7-й день цикла) осуществляли извлечение эмбрионов не хирургическим методом с помощью двухканального катетера.
У животных II опытной группы (п=5) обработка проведена по той же схеме, только достим вводили двукратно в дозе 15 мл через день, т.е. на 0-й и 2-й дни полового цикла.
Для животных III контрольной группы (п=5) использовали общепринятую схему без применения достима.
У всех животных перед применением препаратов обследовались половые органы на гинекологические отклонения.
Для изучения иммуномодулирующих свойств достима проводили иммунобиохимические исследования коров в каждой группе (п=5) до введения и на 14-й день после введения препарата. Основные лабораторные исследования велись на кафедре акушерства и межкафедральной лаборатории УГАВМ, с использованием общепринятых методик [8]. Эмбрионы оценивали морфологическим методом по 5-балльной шкале [1].
Изучение содержания белков и белковых фракций в сыворотке крови коров II опытной группы показало повышение концентрации общего белка до 87,3%±3,42 г/л на 14-е сутки, против 69,8±3,20 г/л у коров контрольной группы. Перед началом опыта отмечено снижение содержания альбуминов до 44,6±1,26% против 47,2±0,74% и увеличение а-глобулинов до 26,45+0,82% против 25,7±0,76%. У коров I опытной группы динамика этих показателей имела недостоверный характер. Иммунотропные свойства препарата характеризовались повышением количества лейкоцитов, лимфоцитов и моноцитов и, как результат системных сдвигов в состоянии лейкоцитов, повышалась иммунологическая реактивность организма, что подтверждается качественными и количественными изменениями иммунокомпетентных клеток. Анализ количественного состава отдельных популяций лимфоцитов показал, что увеличение общего содержания лимфоцитов периферической крови во II опытной группе животных по сравнению с фоном и контрольной группой животных происходит за счет Т- и В-популя-ций лимфоцитов к 14-му дню на 13,2 и 16,3% (р<0,01) соответственно.
Содержание молодых незрелых форм лейкоцитов, какими являются О-лимфоциты, на 14-й день у коров контрольной и I опытной групп было стабильным и практически не изменялось по сравнению с исходным показателем, в то время как во II опытной группе наметилась тенденция снижения О-популяций лимфоцитов в течение опыта.
Со стороны гуморального звена иммунной системы также отмечены определённые сдвиги, свидетельствующие об иммуностимулирующем эффекте препарата. При этом у коров II опытной группы отмечено повышение таких показателей, как лизоцим и комплемент, которые превышали
Рис. 1 - Оценка эмбрионов морфологическим методом:
А) эмбрионы, пригодные для пересадки; Б) эмбрион, непригодный для пересадки
исходные показатели на 26,2 и 12% (р<0,01) соответственно. Повышение уровня лизоцима и комплемента отразилось и на общей бактерицидной активности сыворотки крови, показатель которой превышал показатели животных контрольной и I опытной групп, но эти изменения носили недостоверный характер.
Критерием оценки результатов проведённых исследований можно считать количество полученных эмбрионов, пригодных для пересадки (рис. 1).
Вследствие применения предложенных схем стимуляции полиовуляции у коров чёрнопёстрой породы в первой опытной группе животных средний выход эмбрионов составил 8,2±0,58 эмбриона на донора, а пригодных к пересадке — 4,2±0,58 эмбриона (р<0,001). Во второй группе средний выход эмбрионов составил 11, 8 ± 0, 7 3 эмбриона на донора, пригодных — 7,2±0,58 эмбриона (р<0,001). В контрольной группе животных этот показатель составил 7,4±0,92 и 2,8±0,37 соответственно (р<0,002). В процентном отношении выход эмбрионов хорошего качества достиг в I группе 50%, во II группе — 61% и контрольной — 37,9%, т.е. с применением до-стима мы получили во II опытной группе на 23,1% больше эмбрионов, чем в контрольной.
Таким образом, применение достима у коров-доноров по предложенной схеме свидетельствует
о стимуляции иммунобиохимических процессов в организме животных, что является важным звеном в активации их воспроизводительных функций и, как следствие, увеличении выхода эмбрионов.
Литература
1. Мадисон В.Л. Опыт организации трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота // Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных: сборник науч. трудов ГСГЦ. М., 1988. С. 9-14.
2. Методические рекомендации по отбору и использованию высокопродуктивных коров-доноров эмбрионов / ВИЖ; сост.
B.Л. Мадисон, В.И. Лебедев, А.П. Дронин и др. Дубровицы, 1993. 27 с.
3. Бабенков В.Ю. Эффективность использования усовершенствованной технологии трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота: автореф. дисс. ... канд. с.-х. наук. Жодино, БелНИИЖ, 1993. 28 с.
4. Бабенков В.Ю. Биотехнология трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота в Брестской области // Животноводство Брестчины: информ. бюллетень Брестского ГПП, 1998. Июль. С. 27-31.
5. Братанов К., Бальбеж Х., Вежник З. Теория и практика воспроизведения животных. М.: Колос, 1984. 272 с.
6. Рябых В.П. Основные направления повышения эффективности суперовуляции у коров-доноров // Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных: тезисы докладов Всесоюзного совещания, Алма-Ата, 17-20 октября 1989 г. Алма-Ата: Наука, 1989. С. 36.
7. Логвинов А.А., Безбородов Н.Б. Применение иммуномодулятора тимогена для индукции половой цикличности у коров в ранний послеродовой период // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Баумана. Казань: КГАВМ, 2006. Т. 185.
C. 181-186.
8. Кондрахин И.П., Кирилов Н.В., Малахов А.Г. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: справ. изд-е. М.: Агропромиздат, 1985. 408 с.
