Научная статья на тему 'ПРИМЕНЕНИЕ АТОМНО-ЭМИССИОННОЙ СПЕКТРОМЕТРИИ С ИНДУКТИВНО-СВЯЗАННОЙ ПЛАЗМОЙ ДЛЯ АНАЛИЗА ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА В НАСТОЙКАХ'

ПРИМЕНЕНИЕ АТОМНО-ЭМИССИОННОЙ СПЕКТРОМЕТРИИ С ИНДУКТИВНО-СВЯЗАННОЙ ПЛАЗМОЙ ДЛЯ АНАЛИЗА ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА В НАСТОЙКАХ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
302
44
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ТЯЖЕЛЫЕ МЕТАЛЛЫ / ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТИТЕЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ / НАСТОЙКИ / АТОМНО-ЭМИССИОННАЯ СПЕКТРОМЕТРИЯ / НОРМАТИВНАЯ ДОКУМЕНТАЦИЯ / ПИОН УКЛОНЯЮЩИЙСЯ / ВАЛЕРИАНА ЛЕКАРСТВЕННАЯ / ПУСТЫРНИК

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Галенко М. С., Аляутдин Р. Н., Гравель И. В.

Безопасность использования лекарственных растительных препаратов, в частности жидких лекарственных форм, связана с необходимостью контролировать допустимое содержание экотоксикантов, однако методика для определения отдельных элементов в настойках отсутствует. Цель работы: выбор условий пробоподготовки для количественного определения тяжелых металлов и мышьяка в настойках. Материалы и методы: в исследовании использованы настойки пиона уклоняющегося, пустырника и валерианы, реализуемые через аптечную сеть. Пробоподготовку проводили методом микроволнового разложения с предварительным концентрированием образцов. Количественное определение 16 элементов (As, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Sr, Ti, V, Zn, Hg) осуществляли методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Результаты: установлено, что для анализа содержания большинства элементов на этапе пробоподготовки необходимо проводить концентрирование, поскольку чувствительность метода позволяет определять отдельные элементы при их содержании не менее 0,1 мг/кг. Показано, что оптимальным объемом для концентрирования является 25 мл настойки с точки зрения как затрат времени, так и открываемости токсичных элементов. Выводы: предложенная методика показала возможность определения 16 элементов в составе настоек. Концентрации тяжелых металлов и мышьяка в настойках пиона уклоняющегося, пустырника и валерианы не превышали 0,722 мг/кг. В максимальных количествах в изученных образцах настоек обнаружены цинк и марганец.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Галенко М. С., Аляутдин Р. Н., Гравель И. В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

INDUCTIVELY COUPLED PLASMA-ATOMIC EMISSION SPECTROMETRY FOR THE ANALYSIS OF HEAVY METALS AND ARSENIC IN TINCTURES

To ensure the safety of herbal medicinal products, particularly in liquid dosage forms, it is necessary to control environmental toxins to acceptable levels. However, there is no methodology for individual elemental impurities in tinctures. The aim of the study was to select sample preparation conditions for quantitative determination of heavy metals and arsenic in tinctures. Materials and methods: the study used tinctures of anomalous peony, motherwort and valerian sampled from pharmacies. Sample preparation involved microwave-assisted digestion of pre-concentrated aliquots. Quantitative determination of 16 elemental impurities (As, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Sr, Ti, V, Zn, Hg) was carried out using inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry. Results: according to the study results, quantitative analysis of most elemental impurities requires sample concentration at the preparation step. Due to the method sensitivity, direct quantification of individual elements in a sample is possible only at levels of not less than 0.1 mg/kg. The optimal volume of a tincture for concentration is 25 ml, both in terms of time efficiency and recovery of toxic elements. Conclusions: the proposed procedure showed the possibility of quantification of 16 elemental impurities in the tinctures. The concentrations of heavy metals and arsenic in the tinctures of anomalous peony, motherwort and valerian did not exceed 0.722 mg/kg. Zinc and manganese were the most abundant elemental impurities in the studied samples.

Текст научной работы на тему «ПРИМЕНЕНИЕ АТОМНО-ЭМИССИОННОЙ СПЕКТРОМЕТРИИ С ИНДУКТИВНО-СВЯЗАННОЙ ПЛАЗМОЙ ДЛЯ АНАЛИЗА ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА В НАСТОЙКАХ»

главная тема: современные подходы к экспертизе лекарственных

средств растительного происхождения

MAIN TOPIC: CURRENT APPROACHES TO EVALUATION OF HERBAL MEDICINES

УДК 615.07:543.423.1

https://doi.org/10.30895/1991-2919-2022-12-2-173-182 Оригинальная статья | Original article

Ц) Check for updates

C")]

BY 4.0

Применение атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой для анализа тяжелых металлов и мышьяка в настойках

1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051, Российская Федерация

2 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет), Трубецкая ул., д. 8, стр. 2, Москва, 119991, Российская Федерация

Н Галенко Марта Сергеевна; таМа^акпко@таИ ги

Безопасность использования лекарственных растительных препаратов, в частности жидких лекарственных форм, связана с необходимостью контролировать допустимое содержание экотоксикантов, однако методика для определения отдельных элементов в настойках отсутствует. Цель работы: выбор условий пробоподготовки для количественного определения тяжелых металлов и мышьяка в настойках. Материалы и методы: в исследовании использованы настойки пиона уклоняющегося, пустырника и валерианы, реализуемые через аптечную сеть. Пробоподготовку проводили методом микроволнового разложения с предварительным концентрированием образцов. Количественное определение 16 элементов Cd, Со, Сг, Си, Fe, Мп, Мо, М, РЬ, БЬ, Бг, Л, V, Zn, Нд) осуществляли методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Результаты: установлено, что для анализа содержания большинства элементов на этапе пробоподготовки необходимо проводить концентрирование, поскольку чувствительность метода позволяет определять отдельные элементы при их содержании не менее 0,1 мг/кг. Показано, что оптимальным объемом для концентрирования является 25 мл настойки с точки зрения как затрат времени, так и открываемости токсичных элементов. Выводы: предложенная методика показала возможность определения 16 элементов в составе настоек. Концентрации тяжелых металлов и мышьяка в настойках пиона уклоняющегося, пустырника и валерианы не превышали 0,722 мг/кг. В максимальных количествах в изученных образцах настоек обнаружены цинк и марганец.

М.С. Галенко12 H , Р.Н. Аляутдин12 , И.В. Гравель2 ©

Ключевые слова: тяжелые металлы; лекарственные растительные препараты; настойки; атомно-эмис-сионная спектрометрия; нормативная документация; пион уклоняющийся; валериана лекарственная; пустырник

Для цитирования: Галенко М.С., Аляутдин Р.Н., Гравель И.В. Применение атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой для анализа тяжелых металлов и мышьяка в настойках. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств. 2022;12(2):173-182. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2022-12-2-173-182

© М.С. Галенко, Р.Н. Аляутдин, И.В. Гравель, 2022

Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectrometry for the Analysis of Heavy Metals and Arsenic in Tinctures

1 Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products, 8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

21.M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University) 8/2 Trubetskaya St, Moscow 119991, Russian Federation

IS Marta S. Galenko; marta.galenko@mail. ru

To ensure the safety of herbal medicinal products, particularly in liquid dosage forms, it is necessary to control environmental toxins to acceptable levels. However, there is no methodology for individual elemental impurities in tinctures. The aim of the study was to select sample preparation conditions for quantitative determination of heavy metals and arsenic in tinctures. Materials and methods: the study used tinctures of anomalous peony, motherwort and valerian sampled from pharmacies. Sample preparation involved microwave-assisted digestion of pre-concen-trated aliquots. Quantitative determination of 16 elemental impurities (As, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Sr, Ti, V, Zn, Hg) was carried out using inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry. Results: according to the study results, quantitative analysis of most elemental impurities requires sample concentration at the preparation step. Due to the method sensitivity, direct quantification of individual elements in a sample is possible only at levels of not less than 0.1 mg/kg. The optimal volume of a tincture for concentration is 25 ml, both in terms of time efficiency and recovery of toxic elements. Conclusions: the proposed procedure showed the possibility of quantification of 16 elemental impurities in the tinctures. The concentrations of heavy metals and arsenic in the tinctures of anomalous peony, motherwort and valerian did not exceed 0.722 mg/kg. Zinc and manganese were the most abundant elemental impurities in the studied samples.

M.S. Galenko12 H , R.N. Alyautdin12 , I.V. Gravel2 ©

Key words: heavy metals; herbal medicinal products; tinctures; atomic emission spectrometry; regulatory documents; anomalous peony; valerian; motherwort

For citation: Galenko M.S., Alyautdin R.N., Gravel I.V. Inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry for the analysis of heavy metals and arsenic in tinctures. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsin-skogo primeneniya. Regulyatornye issledovaniya i ekspertiza lekarstvennykh sredstv = Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. Regulatory Research and Medicine Evaluation. 2022;12(2):173-182. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2022-12-2-173-182

Введение

В настоящее время широкое распространение получают препараты из лекарственного растительного сырья (ЛРС) [1]. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), для лечения и профилактики 75% пациентов целесообразно использовать препараты на растительной основе1. Среди лекарственных растительных препаратов (ЛРП), находящихся в обращении на фармацевтическом рынке, второе место после комбинированных ЛРП занимают экстракционные препараты [2-4]. Одной из наиболее используемых лекарственных форм в данной

группе являются настойки за счет широты их ассортимента, удобства применения и доступной цены. Настойки производят из ЛРС методами мацерации или перколяции, затем проводят очистку и контроль качества [5].

ЛРС и ЛРП не должны содержать опасных для здоровья экотоксикантов (пестицидов, радионуклидов, тяжелых металлов (ТМ)). К числу наиболее опасных относятся ТМ. Они накапливаются в разных частях растений из окружающей среды [6-11]. При производстве ЛРП токсичные соединения могут переходить из ЛРС в готовые лекарственные формы. Согласно принципу

1 Монографии ВОЗ о лекарственных растениях, широко используемых в Новых независимых государствах (ННГ). Всемирная организация здравоохранения; 2010.

сквозной стандартизации, в фармацевтической практике принято нормировать их содержание на всех этапах производства [12], поэтому изучение закономерностей перехода токсикантов из сырья в препараты актуально. В настоящее время в литературе имеются данные о содержании ТМ в ЛРС и ЛРП на его основе [11, 13-16], однако систематические исследования по этому вопросу весьма немногочисленны.

Согласно Государственной фармакопее Российской Федерации XIV изд. (ГФ РФ XIV) в ЛРС регламентировано определение ТМ, остаточных пестицидов, радионуклидов и микробиологической чистоты2. Указаны нормы содержания, приведены методики пробо-подготовки и количественного определения свинца, кадмия, ртути и мышьяка в ЛРС и ЛРП3. Однако для большинства лекарственных форм согласно ГФ РФ XIV содержание ТМ в ЛРП определяется методом, основанным на образовании окрашенных сульфидов4, в частности суммарное содержание тяжелых металлов в настойках, определенное колориметрическим методом, нормируется на уровне 10 мг/кг (0,001%)5.

На территории Европейского союза, а также ряда других стран содержание ТМ в ЛРП регламентировано в соответствии с требованиями монографии «Herbal drugs» и включает в себя пределы содержания свинца, кадмия и ртути. Методики пробоподготовки и количественного определения отдельных элементов описаны в монографии 2.4.27. «Heavy metals in herbal drugs and herbal drug preparations»6.

Согласно Фармакопее США (USP) содержание ТМ в ЛР должно соответствовать требованиям монографии 561 «Articles of botanical origin»7. В отличие от фармакопей других государств, согласно требованиям USP предпочтительно нормируются наиболее токсичные формы мышьяка и ртути, но допускается определение их валового содержания (при отсутствии надлежащего

лабораторного обеспечения). Пробоподготовка образцов проводится в соответствии с монографиями 233 «Elemental impurities-procedures» и 2232 «Elemental contaminants in dietary supplements».

В Японской фармакопее8 для ЛРП нормы представлены в частных статьях в разделе «Purity», в одних случаях - отдельно содержание мышьяка и свинца, в других - общее содержание ТМ. Суммарное содержание ТМ полуколичественным методом определяют в соответствии с монографией 1.07 «Heavy metals limit test», содержание мышьяка - 1.11 «Arsenic limit test».

Согласно Индийской фармакопее9 определяется суммарное содержание ТМ в ЛРП в соответствии с разделом «Limit test for heavy metals» полуколичественным методом с реактивом, содержащим сульфид-ион. Для производителей ЛРС нормы содержания ТМ установлены в соответствии со схемой добровольной сертификации продукции10 и составляют: Pb - 10 ppm, Cd - 0,3 ppm, As - 3 ppm, Hg - 1 ppm.

В Китайской фармакопее11 методика определения суммарного содержания ТМ в ЛРП описана в монографии «Limit test for heavy metals»; селективное определение содержания отдельных ТМ описано в монографии IX B «Determination of lead (Pb), cadmium (Cd), arsenic (As), mercury (Hg) and copper (Cu)».

Согласно требованиям Фармакопеи Евразийского экономического союза (ЕАЭС) содержание отдельных элементов в ЛРС и ЛРП определяют методом атомно-абсорбционной спектроскопии (ААС)12.

Наряду с ЛРП в лечебных и профилактических целях применяются биологически активные добавки (БАД), их качество и безопасность регламентированы согласно требованиям СанПиН13. В данном документе указаны нормы токсичных элементов для жидких БАД на растительной

2 0ФС.1.5.1.0001.15 Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции растительного происхождения. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.

3 0ФС.1.5.3.0009.15 Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.

4 0ФС.1.2.2.2.0012 Тяжелые металлы. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 1. М.; 2018.

5 0ФС.1.4.1.0019.15 Настойки. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2. М.; 2018.

6 European Pharmacopoeia. 10th ed. Strasbourg: EDOM; 2020.

7 USP44-NF39. Rockville, MD; 2020.

8 Japanese Pharmacopoeia. XVII ed. Tokyo; 2016.

9 Indian Pharmacopoeia. 7th ed. Ghaziabad; 2015.

10 Voluntary certification scheme for AYUSH products. Certification criteria https://www.qcin.org/documents/Certification_Scheme_AYUSH/

11 Pharmacopoeia of the People's Republic of China. Beijing; 2010.

12 ОФС 2.1.4.21 Тяжелые металлы и мышьяк в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах. Фармакопея Евразийского экономического союза. 2021.

13 СанПиН 2.3.2.1078-01. Продовольственное сырье и пищевые продукты. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. Санитарно-эпидемические правила и нормативы. М.: Минздрав России, 2002.

основе, таких как эликсиры, бальзамы, настойки. Количественное содержание ТМ определяется в соответствии с ГОСТ 26929-94 «Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов» и ГОСТ 30178-96 «Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсичных элементов».

Результаты сравнительного анализа норм и требований к содержанию ТМ в ЛРП и БАД представлены в таблице 1.

Согласно ГФ РФ XIV в общих и частных фармакопейных статьях, регламентирующих качество настоек, в настоящее время отдельные токсичные элементы не нормируются. Однако при использовании полуколичественного метода определяется весь спектр тяжелых металлов, включая эссенциальные, а не только токсичные (свинец, ртуть, висмут, сурьма, олово, кадмий, серебро, медь, молибден, ванадий, рутений, платина, палладий)14. Степень извлечения каждого элемента различается, поэтому невозможно дать заключение по содержанию каждого из нормируемых элементов. Современные подходы к оценке безопасности ЛРП предполагают количественное определение отдельных токсичных элементов в различных лекарственных формах.

Цель работы - выбор условий пробоподготовки для количественного определения тяжелых металлов и мышьяка в настойках.

Материалы и методы

Объектами исследования были настойки: пиона уклоняющегося (ООО «Тульская фармацевтическая фабрика», серия 40620), валерианы (ЗАО «Ярославская фармацевтическая фабрика», серия 40421) и пустырника (АО «Флора Кавказа», серия 10221), реализуемые через аптечную сеть.

За основу для исследования была взята методика определения содержания ТМ и мышьяка методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (АЭС-ИСП) [17]. Для этого на первом этапе исследования к 1 мл настойки в сосуд для минерализации прибавляли 10 мл азотной кислоты концентрированной (Fisher Chemical) и проводили минерализацию в системе микроволнового разложения при максимальной температуре 175 °С и мощности 1800 Вт в течение 30 мин. Далее минера-лизат фильтровали через фильтр «синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили

объем раствора водой деионизованной до метки. Количественное определение содержания 16 элементов проводили на атомно-эмиссион-ном спектрометре с индуктивно связанной плазмой Optima 8300 (PerkinELmer, США) при длинах волн (нм): As - 197,197; Cd - 226,502; Co - 230,786; Cr - 357,869; Cu - 327,393; Fe - 234,349; Mn -260,568; Mo - 203,845; Pb - 220,353 и 261,418; Sb - 206,836; Sr - 421,55; Ti - 334,940; V -292,402; Zn - 213,857; Hg - 184,886 и 253,652. Параметры измерений: мощность высокочастотного генератора плазмы - 1500 Вт, поток плазменного газа (аргон) - 15 л/мин, поток газа распылителя (аргон) - 1,0 л/мин, скорость подачи пробы - 0,10 об./мин.

На втором этапе эксперимента в процесс пробоподготовки включили концентрирование образцов, чтобы повысить открываемость элементов. Для этого выбранные аликвоты настоек (8-50 мл) помещали в химические стаканы, проводили дополнительный контроль по массе и упаривали при температуре 105 °С до массы не более 1 г. Полученный концентрат разводили 10 мл азотной кислоты концентрированной четырехкратно порциями по 2,5 мл, переносили в тефлоновый сосуд и проводили минерализацию, затем анализ по указанным выше параметрам. Определение проводили в трех параллельных образцах каждого объекта, показания для которых снимали на приборе в пяти повторностях.

На третьем этапе эксперимента подбирали объем разведения. Концентрации ТМ в растворах рассчитывали по градуировочному графику, для построения которого использовали Мультиэлементный стандарт качества (PerkinELmer) с содержанием (мкг/мл): As - 101, Be - 101, Ca - 101, Cd - 101, Co - 101, Cr - 101, Cu - 99,9, Fe - 101, Li - 101, Mg - 101, Mn -101, Mo - 101, Ni - 101, Pb - 101, Sb - 101, Se - 101, Sr - 101, Ti - 101, TL - 101, V - 101, Zn - 101. Калибровку проводили в диапазоне 0,5-1,5 от предельно допустимой концентрации (ПДК) каждого элемента, значения меньше нижнего предела калибровочного диапазона приведены как информационные. Статистическую обработку полученных результатов проводили в программе Microsoft Office Excel.

Результаты и обсуждение

Подбор объема пробы осуществляли в 2 этапа. Сначала на примере настойки пиона уклоняющегося были проанализированы пробы малых объемов (8-15 мл). Результаты исследования

14 ОФС.1.2.2.2.0012 Тяжелые металлы. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 1. М.; 2018.

Таблица 1. Нормы содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственных растительных препаратах и биологически активных добавках на растительной основе

Table 1. Standards for heavy metals and arsenic in herbal medicines and dietary supplements

Нормативный документ Regulatory document Определяемые элементы Determinable elements Нормы содержания Limits

Государственная Фармакопея Суммарное содержание тяжелых металлов Total content of heavy metals Все лекарственные препараты - не более 0,01% Настойки - не более 0,001% Other herbal medicinal products: no more than 0.01% Tinctures: no more than 0.001%

Российской Федерации XIV изд. Pb 6,0 мг/кг / 6.0 mg/kg

State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV Cd 1,0 мг/кг / 1.0 mg/kg

As 0,5 мг/кг / 0.5 mg/kg

Hg 0,1 мг/кг / 0.1 mg/kg

Европейская фармакопея 10.3 European Pharmacopoeia 10.3 Cd, Cu, Fe, Pb, Ni, Zn, Hg, As Pb - 5 ppm Cd - 1 ppm Hg - 0,1 ppm

As (неорганический) As (inorganic) 2 мкг/г 2yg/kg

Pb 5 мкг/г / 5 yg/kg

Фармакопея США USP44-NF39 Hg (общая) Hg (total) 1 мкг/г 1 yg/kg

Cd 0,5 мкг/г / 0.5 yg/kg

Метилртуть Methylmercury 0,2 мкг/г 0.2 yg/kg

Японская фармакопея XVII Japanese Pharmacopoeia XVII Суммарное содержание тяжелых металлов Total content of heavy metals 5-40 ppm

As 2-10 ppm

Суммарное содержание тяжелых металлов Total content of heavy metals 5-40 ppm

Cu 20 ppm

Китайская фармакопея, X Chinese Pharmacopoeia X As 2-10 ppm

Pb 5 ppm

Cd 0,3 ppm

Hg 0,2 ppm

Индийская фармакопея, 8 Indian Pharmacopeia 8 Суммарное содержание тяжелых металлов Total content of heavy metals 10-30 ppm

Фармакопея Евразийского экономического союза Pharmacopoeia of the Eurasian Economic Union Cd, Cu, Fe, Pb, Ni, Zn, Hg, As Pb - 6,0 мг/кг / 6.0 mg/kg Cd - 1,0 мг/кг / 1.0 mg/kg As - 0,5 мг/кг / 0.5 mg/kg Hg - 0,1 мг/кг / 0.1 mg/kg

Pb 0,5 мг/кг / 0.5 mg/kg

СанПиН 2.3.2.1078-01 As 0,05 мг/кг / 0.05 mg/kg

Sanitary and epidemiological rules and regulations 2.3.2.1078-01 Cd 0,03 мг/кг / 0.03 mg/kg

Hg 0,01 мг/кг / 0.01 mg/kg

Примечание. 1 мг/кг = 1 мкг/г = 1 ppm = 0,0001%. Note. 1 mg/kg = 1 yg/g = 1 ppm = 0.0001%.

показали, что для определения содержания ТМ непосредственно в настойках недостаточно объема 1 мл, так как концентрация в таких образцах для большинства искомых элементов ниже предела обнаружения метода [18, 19]. Обнаружено, что концентрирование повышает возможность детектирования большинства элементов. В пробах малых объемов определялись элементы с концентрацией более 0,1 мг/кг (цинк, марганец, медь, никель, стронций) (табл. 2). При проведении концентрирования часть мышьяка и сурьмы теряется. Среди анализируемых элементов не были обнаружены свинец, титан и железо. Независимо от объема пробы хорошо определялись стронций и марганец. Для обнаружения кадмия и цинка достаточно использовать аликвоту настойки 15 мл. Проведенные исследования показали, что в пробах объемом 15 мл металлы определены в диапазоне 0,0010,421 мг/кг.

Для того чтобы расширить спектр объектов исследования, на следующем этапе эксперимента использовали настойку пустырника. Использовали пробы с объемом в диапазоне от 20 до 50 мл (табл. 3). Установлено,

что большинство элементов определялись в аликвоте 25 мл. Увеличение объема проб до 50 мл нецелесообразно. В пробах объемом 20 мл кобальт, титан и ртуть не обнаружены, остальные элементы определялись в диапазоне 0,001-0,211 мг/кг. В максимальных концентрациях в настойке пустырника присутствовали медь и цинк (0,1-0,3 мг/кг). Абсолютное содержание ТМ и мышьяка в данном объекте исследования оказалось ниже, чем в других настойках, что согласуется с данными литературы [20].

На следующем этапе исследования на примере настойки валерианы был проведен выбор оптимального объема разведения минерали-зата (рис. 1, 2). Непосредственно в минерали-зате определение проводить невозможно, так как в анализе используется азотная кислота концентрированная. Поэтому необходимо подобрать минимальный объем разведения, при котором концентрации всех определяемых элементов укладывались бы в аналитический диапазон методики. Оптимальным был выбран объем 25 мл, что позволяло количественно без потерь перенести полученный минерали-зат в мерную колбу и уменьшить концентрацию

Таблица 2. Содержание тяжелых металлов и мышьяка в настойке пиона уклоняющегося Table 2. Contents of heavy metals and arsenic in the tincture of anomalous peony

Элемент Element Содержание тяжелых металлов и мышьяка (мг/кг) в аликвоте для концентрирования: Contents of heavy metals and arsenic (mg/kg) in aliquots for concentration:

1 мл / mL 8 мл / mL 10 мл / mL 15 мл / mL 20 мл / mL 25 мл / mL

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

As 0,025 ± 0,011 0,027 ± 0,011 ^^./LoD 0,005 ± 0,002 0,013 ± 0,004 0,007 ± 0,002

Cd ^^./LoD ^.о./LoD ^^./LoD 0,001 ± 0,001 0,001 ± 0,001 0,001 ± 0,001

Co ^^./LoD 0,005 ± 0,002 0,005 ± 0,002 0,005 ± 0,002 0,004 ± 0,002 0,004 ± 0,002

Cr ^^./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD 0,001 ± 0,0001 0,001 ± 0,0001

Cu <п.о./LoD ^.о./LoD ^^./LoD 0,187 ± 0,052 0,053 ± 0,014 0,053 ± 0,015

Fe <п.о./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD

Mn 0,428 ± 0,149 0,305 ± 0,098 0,352 ± 0,032 0,428 ± 0,134 0,420 ± 0,101 0,420 ± 0,098

Mo 0,026 ± 0,011 ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD 0,001 ± 0,0005 0,001 ± 0,0003

Ni ^^./LoD 0,070 ± 0,028 ^^./LoD 0,024 ± 0,007 0,070 ± 0,026 0,070 ± 0,025

Pb ^^./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD

Sb 0,125 ± 0,043 0,011 ± 0,004 0,010 ± 0,004 0,007 ± 0,002 0,001 ± 0,0004 0,001 ± 0,0003

Sr 0,149 ± 0,048 0,150 ± 0,047 0,119 ± 0,032 0,129 ± 0,035 0,126 ± 0,037 0,126 ± 0,036

Ti <п.о./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD <п.о./LoD ^.о./LoD

V ^^./LoD 0,001 ± 0,0007 <п.о./LoD ^.о./LoD 0,001 ± 0,0004 0,001 ± 0,0003

Zn 0,077 ± 0,038 0,092 ± 0,041 0,285 ± 0,099 0,421 ± 0,126 0,471 ± 0,127 0,471 ± 0,098

Примечание. <п.о. - ниже предела обнаружения метода. Note. <LoD-below the detection limit of the method.

Таблица 3. Содержание тяжелых металлов и мышьяка в настойке пустырника Table 3. Contents of heavy metals and arsenic in the tincture of motherwort

Элемент Содержание тяжелых металлов и мышьяка (мг/кг) в аликвоте для концентрирования: Contents of heavy metals and arsenic (mg/kg) in aliquots for concentration:

Element 20 мл / mL 25 мл / mL 35 мл / mL 50 мл / mL

As 0,054 ± 0,003 0,008 ± 0,003 0,006 ± 0,002 0,001 ± 0,0001

Cd 0,001 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,002 ± 0,0006 0,004 ± 0,0008

Co <n.o./LoD 0,001 ± 0,006 0,002 ± 0,0005 0,001 ± 0,0004

Cr 0,002 ± 0,0005 0,002 ± 0,0006 0,003 ± 0,001 0,001 ± 0,0004

Cu 0,133 ± 0,049 0,154 ± 0,069 0,171 ± 0,046 0,165 ± 0,041

Fe 0,154 ± 0,082 0,088 ± 0,031 0,036 ± 0,015 0,084 ± 0,036

Mn 0,047 ± 0,016 0,048 ± 0,021 0,038 ± 0,015 0,050 ± 0,014

Mo 0,001 ± 0,0005 0,001 ± 0,0005 0,001 ± 0,0004 0,001 ± 0,0004

Ni 0,033 ± 0,006 0,032 ± 0,006 0,056 ± 0,006 0,036 ± 0,006

Pb 0,003 ± 0,0014 0,005 ± 0,0017 0,002 ± 0,0006 0,004 ± 0,0003

Sb 0,003 ± 0,0007 0,003 ± 0,0007 0,002 ± 0,0005 0,003 ± 0,0006

Sr 0,012 ± 0,004 0,011 ± 0,004 0,007 ± 0,002 0,011 ± 0,003

Ti <n.o./LoD 0,004 ± 0,0012 0,005 ± 0,0018 0,005 ± 0,002

V 0,001 ± 0,0004 0,001 ± 0,0003 0,002 ± 0,0005 0,001 ± 0,0003

Zn 0,192 ± 0,0745 0,183 ± 0,064 0,211 ± 0,072 0,198 ± 0,081

Hg <n.o./LoD 0,003 ± 0,001 0,003 ± 0,001 0,003 ± 0,001

Примечание. <п.о. - ниже предела обнаружения метода. Note. <LoD - below the detection limit of the method.

кислоты в растворе. При использовании объема разведения 20 мл результат определения ТМ изменялся в пределах ошибки метода. Отдельный

выпадающий результат был зарегистрирован для Sr, что требует дальнейшего изучения. Среди определяемых элементов в настойке

* £

§ с-

^ .о

х с

ш а

и U

X С

о о

^ о

0,018 0,016 0,014 0,012 0,01 0,008 0,006 0,004 0,002 0

As

Cd

Co

Cr

I I_I

Fe Mo Элементы Elements

Pb

Sb

Рис. 1. Содержание кадмия, кобальта, хрома, железа, молибдена, свинца, стронция, титана, ванадия и мышьяка в настойке валерианы (объем аликвоты - 25 мл)

Fig. 1. Contents of cadmium, cobalt, chromium, iron, molybdenum, lead, strontium, titanium, vanadium and arsenic in the tincture of valerian (the aliquot volume is 25 mL)

V

z w

- £

S С

3- .О

CD ^

О. ¡3

!= h

x С

(D IS

и u

X С

о ,o

^ о

0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0

Cu

Mn

Zn

Ni

Элементы Elements

Таблица 4. Убывающие ряды элементов в настойках

Table 4. Elements in the tinctures, listed in descending order of quantity

Наименование лекарственного растительного препарата Herbal medicinal product name Убывающий ряд элементов Elements in descending order

Настойка пиона уклоняющегося Anomalous Peony Tincture Zn>Mn >Sr> Ni> Cu> As>Co>Cd>Mo>Sb>Cr>V

Настойка пустырника Motherwort Tincture Zn>Cu>Fe>Mn>Ni>Sr>As>Pb> Sb>Hg>Cr>Mo>Cd>Co>V

Настойка валерианы Valerian Tincture Mn>Zn>Cu>Ni>Co> Cr>Sr>As>Ti>Pb>V

Рис. 2. Содержание меди, марганца, цинка и никеля в настойке валерианы (объем аликвоты - 25 мл)

Fig. 2. Contents of copper, manganese, zinc and nickel in the tincture of valerian (the aliquot volume is 25 mL)

валерианы не были обнаружены кадмий и железо, что подтверждается данными литературы [21]. Концентрации кобальта, мышьяка, титана и свинца оказались выше, чем в других исследованных настойках [20]. В настойке валерианы содержание ТМ и мышьяка находились в диапазоне 0,001-0,722 мг/кг.

Проведенный анализ позволил составить последовательности уменьшения концентраций элементов в изученных ЛРП (табл. 4).

Отмечено, что во всех изученных настойках в максимальных количествах содержатся эс-сенциальные элементы (цинк, марганец, медь), в минимальных - ванадий. В настойку валерианы в высоких количествах переходит марганец [20], железо обнаружено только в настойке пустырника. В настойке пиона не обнаружены титан и свинец, в настойке валерианы - кадмий, молибден и сурьма.

Предложенная методика после валидации может быть использована для определения содержания ТМ в настойках. Этап концентрирования образцов при проведении пробоподготовки

позволяет повысить открываемость элементов, а метод АЭС-ИСП обладает высокой чувствительностью в сравнении с полуколичественным методом и ААС, которые регламентированы действующей нормативной документацией.

Выводы

1. Установлено, что объем испытуемого образца настойки 25 мл достаточен для проведения анализа. Концентрирование этого количества пробы позволяет определить в настойках 15 тяжелых металлов и мышьяк методом АЭС-ИСП.

2. Определены диапазоны содержания 16 элементов (РЬ, As, Cd, Нд, Со, Сг, Си, Fe, Мп, Мо, Sb, Sr, Д V, Zn) в настойках пиона уклоняющегося (0,001-0,421 мг/кг), пустырника (0,0010,211 мг/кг) и валерианы (0,001-0,722 мг/кг). В максимальных количествах в настойках пиона и пустырника находился цинк, в настойке валерианы - марганец.

3. Концентрации токсичных элементов (РЬ, Cd, Нд) в изученных настойках составляли 0,0010,054 мг/кг, что не превышало уровни ПДК в лекарственных растительных препаратах и жидких БАД на растительной основе. В отдельных пробах концентрация мышьяка превышала нормы СанПиН, что требует более подробного изучения.

ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES

1. Бойко НН, Бондарев АВ, Жилякова ЕТ, Писарев ДИ, Новиков ОО. Фитопрепараты, анализ фармацевтического рынка Российской Федерации. Научный результат. Медицина и фармация. 2017;3(4):30-8. [Boyko NN, Bondarev AV, Zhilyakova ET, Pisa-rev DI, Novikov OO. Phytodrugs, analysis of Russian Federation pharmaceutical market. Nauchny rezul'tat. Meditsina i farmatsiya = Research Result.

Medicine and Pharmacy. 2017;3(4):30-8 (In Russ.)] https://doi.org/10.18413/2313-8955-2017-3-4-30-38 2. Сергиенко ОМ, Жигунова АК. Роль и место фитотерапии в лечении состояний, сопровождающихся продуктивным кашлем. Украiнський медичний часо-пис. 2013,(1):77-80. [Sergienko OM, Zhigunova AK. The role and place of herbal medicine in the treatment of conditions involving a productive cough.

Ukrains'kiy medichny chasopis = Ukrainian Medical Journal. 2013,(1):77-80 (In Russ.)]

3. Bhardwaj S, Verma R, Gupta J. Challenges and future prospects of herbal medicine. Int Res Med Health Sci. 2018; 1(1):12-5. https://doi.Org/10.36437/irmhs.2018.1.1.D

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

4. Самбукова ТВ, Овчинников БВ, Ганапольский ВП, Ятманов АН, Шабанов ПД. Перспективы использования фитопрепаратов в современной фармакологии. Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. 2017;15(2):56-63. [Sambukova TV, Ovchinnikov BV, Ganapolsky VP, Yatmanov AN, Shabanov PD. Prospects for phyto-preparations (botanicals) use in modern pharmacology. Obzory po klinicheskoy farmakologii i lekarst-vennoy terapii = Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. 2017;15(2):56-63 (In Russ.)] https://doi.org/10.17816/RCF15256-63

5. Каухова ИЕ. Новая методика получения растительных препаратов. Фармация. 2006;(1):37-9. [Kaukhova IE. A new method for obtaining herbal medicinal products. Farmatsiya = Pharmacy. 2006;(1):37-9 (In Russ.)]

6. Акамова АВ, Немятых ОД, Наркевич ИА. Многовекторный маркетинговый анализ российского рынка фитопрепаратов. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017;(4):276-80. [Aka-mova AV, Nemyatykh OD, Narkevich IA. Multiple view marketing analysis of the Russian plant-based drugs market. Razrabotka i registratsiya lekarstven-nykh sredstv = Drug Development and Registration. 2017;(4):276-80 (In Russ.)]

7. Izzo AA, Hoon-Kim S, Radhakrishnan R, Williamson EM. A critical approach to evaluating clinical efficacy, adverse events and drug interactions of herbal remedies. Phytother Res. 2016;30(5):691-700. https://doi.org/10.1002/ptr.5591

8. Булаев ВМ, Ших ЕВ, Сычев ДА. Безопасность и эффективность лекарственных растений. М.: Практическая медицина; 2013. [Bulaev VM, Shikh EV, Sychev DA. Safety and efficacy of medicinal plants. Moscow: Prakticheskaya meditsina; 2013 (In Russ.)]

9. Filipiak-Szok A, Kurzawa M, Sztyk E. Determination of toxic metals by ICP-MS in Asiatic and European medicinal plants and dietary supplements. J Trace Elem Med Biol. 2015;30:54-8. https://doi.org/10.1016/jjtemb.2014.10.008

10. Kumar N, Kulsoom M, Shukla V, Kumar D, Kumar PS, Tiwari J, Dwivedi N. Profiling of heavy metal and pesticide residues in medicinal plants. Environ Sci Pollut Res Int. 2018;25(29):29505-10. https://doi.org/10.1007/s11356-018-2993-z

11. Yang CM, Chien MY, Chao PC, Huang CM, Chen CH. Investigation of toxic heavy metals content and estimation of potential health risks in Chinese herbal medicine. J Hazard Mater. 2021;412:125142. https://doi.org/10.1016/jjhazmat.2021.125142

12. Марахова АИ, Сорокина АА, Станишевский ЯМ. Применение принципа сквозной стандартизации в анализе флавоноидов травы пустырника и препаратов на его основе. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2016;(1):150-4. [Marakhova AI, Sorokina AA, Stanishevskiy YaM. Application of through standardization principle in the analysis of flavonoids mоtherwort (Leonurus L.)

herb and it's preparation. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv = Drug Development and Registration. 2016;(1):150-4 (In Russ.)]

13. Suchacz B, Weselowski M. The analysis of heavy metals content in herbal infusions. Open Medicine. 2012;7(4): 457-64. https://doi.org/10.2478/s11536-012-0007-y

14. Субботина НС, Дмитрук СЕ, Бабешина ЛГ, Келус НВ, Никифоров ЛА, Носкова ГН, Тартынова МИ. Исследование исходного сырья и экстрактов на содержание тяжелых металлов. Вестник НГУ. Серия: Биология, клиническая медицина. 2010;8(3):92-7. [Subbotina NS, Dmitruk SE, Babeshina LG, Kelus NV, Nikiforov LA, Noskova GN, Tartynova MI. The heavy metals content of raw materials and extracts research. Vestnik NGU. Seriya: Biologiya, klinicheskaya meditsina = Vestnik NSU. Series: Biology and Clinical Medicine. 2010;8(3):92-7 (In Russ.)]

15. de Oliveira Lopes AM, Chellini PR, de Sousa RA. Cadmium and chromium determination in herbal tinctures employing direct analysis by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GF-AAS). Analytical Letters. 2020;53(13):2096-110. https://doi.org/10.1080/00032719.2020.1729169

16. Zitkevicius V, Savickiene N, Abdrachmanovas O, Ryselis S, Masteikova R, Chalupova Z, et al. Estimation of maximum acceptable concentration of lead and cadmium in plants and their medicinal preparations. Medicina (Kaunas). 2003;39:117-21. PMID: 14617871

17. Щукин ВМ, Северинова ЕЮ, Кузьмина НE, Яшкир ВА, Меркулов ВА. Усовершенствование методики про-боподготовки при количественном определении тяжелых металлов в цветках ромашки аптечной (matr^na chamomilla) методом ИСП-АЭС. Успехи современного естествознания. 2016;(6):53-8. [Shchukin VM, Severinova EYu, Kuz'mina NE, Yash-kir VA, Merkulov VA. Improvement of the method of sample preparation for the quantitative determination of heavy metals in flowers of chamomile (Matricaria chamomilla) by the ICP-AES method. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya = Advances in Current Natural Sciences. 2016;(6):53-8 (In Russ.)]

18. Щукин ВМ, Жигилей ЕС, Ерина АА, Швецова ЮН, Кузьмина НЕ, Лутцева АИ. Валидация методики определения ртути, свинца, кадмия и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах на его основе методом масс-спектро-метрии с индуктивно-связанной плазмой. Химико-фармацевтический журнал. 2020;54(9):57-64. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2020-54-9-57-64 [Shchukin VM, Zhigilei ES, Erina AA, Shvetsova YuN, Kuz'mina NE, Luttseva AI. Validation of an ICP-MS method for the determination of mercury, lead, cadmium and arsenic in medicinal plants and related drug preparations. Pharm Chem J. 2020;54(9):968-76] https://doi.org/10.1007/s11094-020-02306-8

19. Полякова ЕВ, Номероцкая ЮН, Сапрыкин АИ. Определение примесного состава цинка методом атомно-эмиссионной спектрометрии с микроволновой плазмой. Журнал аналитической химии. 2019;74(7):534-41. https://doi.org/10.1134/ S0044450219070089 [Polyakova EV, No-merotskaya YuN, Saprykin AI. Determination of zinc impurity composition by microwave plasma atomic

emission spectrometry. J Anal Chem. 2019;74(7):693-700] https://doi.org/10.1134/S1061934819070074

20. Плетенева ТВ, Потапова НИ, Скальный АВ, Елисеева ЮА, Самылина ИА, Сыроешкин АВ. Тяжелые металлы и стандартизация настоек. Фармация. 2004;(4):9-10. [Pleteneva TV, Potapova NI, Skalny AV, Eliseeva YuA, Samylina IA, Syroeshkin AV. Heavy metals and tincture standardization. Farma-tsiya = Pharmacy. 2004;(4):9-10 (In Russ.)]

21. Матвейко НП, Брайкова АМ, Бушило КА, Садовский ВВ. Инверсионно-вольтамперометрический

Вклад авторов. М.С. Галенко - участие в разработке дизайна исследования, определение содержания элементов методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой, интерпретация результатов исследования, сбор, анализ и систематизация данных научной литературы, написание и редактирование текста рукописи, работа с табличными материалами, ответственность за все аспекты работы, связанные с достоверностью данных; Р.Н. Аляутдин - участие в обсуждении материалов и окончательного варианта статьи для публикации; И.В. Гравель - разработка дизайна исследования, решение вопросов, связанных с достоверностью данных и целостностью всех частей статьи, ответственность за все аспекты работы, написание текста рукописи, критический пересмотр ее содержания, утверждение окончательного варианта статьи для публикации.

Благодарности. Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00001-22-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121021800098-4). Авторы выражают благодарность сотрудникам лаборатории спектральных методов анализа ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России А.А. Ериной, Е.С. Жигилей, Ю.Н. Швецовой, Е.А. Хорольской и начальнику лаборатории Н.Е. Кузьминой за помощь в выполнении экспериментальных исследований. Конфликт интересов. И.В. Гравель является членом редакционной коллегии журнала «Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств». Остальные авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, требующего раскрытия в данной статье.

ОБ АВТОРАХIAUTHORS

Галенко Марта Сергеевна.

ОRCID: https://orcid.org/0000-0002-9050-5947 [email protected]

Аляутдин Ренад Николаевич, д-р мед. наук, профессор. ОRCID: https://orcid.org/0000-0002-4647-977X [email protected]

Гравель Ирина Валерьевна, д-р фарм. наук, профессор. ОRCID: https://orcid.org/0000-0002-3735-2291 [email protected]

Статья поступила 09.12.2021 После доработки 11.05.2022 Принята к печати 07.06.2022

контроль содержания тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье и препаратах на его основе. Вестник Витебского государственного технологического университета. 2016;(1):82-9. [Matveyko NP, Braykova AM, Bushilo KA, Sadov-sky VV. Stripping voltammetric control of the content of heavy metals in medicinal plant raw materials and preparations based on it. Vestnik Vitebskogo gosudarstvennogo tekhnologicheskogo universiteta = Bulletin of Vitebsk State Technological University. 2016;(1):82-9 (In Russ.)]

Authors' contributions. Marta S. Galenko - participation in the study design elaboration, quantification of elemental impurities by inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry, interpretation of the study results, collection, analysis and systematisation of scientific literature data, drafting and editing of the manuscript, preparation of the tables, responsibility for all aspects of the work related to data reliability; Renad N. Alyautdin - participation in material discussion and revision of the final version of the article for publication; Irina V. Gravel - elaboration of the study design, addressing of the questions of data reliability and paper integrity, responsibility for all aspects of the work, drafting and critical revision of the manuscript and approval of the final version of the article for publication.

Acknowledgements. The study reported in this publication was carried out as part of publicly funded research project No. 056-00001-22-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. 121021800098-4). The authors express their gratitude to A.A. Erina, E.S. Zhigiley, Yu.N. Shve-tsova, E.A. Khorolskaya, the staff of the laboratory of spectral methods of analysis of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products, and to N.E. Kuzmina, the head of this laboratory, for their help in performing experimental studies. Conflict of interest. Irina V. Gravel is a member of the Editorial Board of Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. Regulatory Research and Medicine Evaluation. The other authors declare no conflict of interest requiring disclosure in this article.

Marta S. Galenko.

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9050-5947

[email protected]

Renad N. Alyautdin, Dr. Sci. (Med.), Professor.

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-4647-977X

[email protected]

Irina V. Gravel, Dr. Sci. (Pharm.), Professor.

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3735-2291

[email protected]

Article was received 9 December 2021

Revised 11 May 2022

Accepted for publication 7 June 2022

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.