CC BY
28
УДК 619:615.37:636
Практическое применение биопрепарата СТФ-1/56 ТиМ в условиях промышленного животноводства
Собещанская Елена Михайловна, ассистент кафедры, Кораблева Татьяна Рафаиловна, доктор вет. наук, профессор,
Академия биоресурсов и природопользования ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И. Вернадского», г. Симферополь, Республика Крым, Россия
E-mail: sobealena@mail.ru
В научно-производственном опыте изучали влияние биопрепарата СТФ-1/56 ТиМ, произведенного на основе живой культуры Enterococcus faecium 1/56, на организм новорожденных телят красной степной породы (с 2-суточ-ного возраста). Животным опытной группы препарат применяли ежедневно с молоком в дозе 5 мг/гол (до 15-суточ-ного возраста) и 10 мг/гол (с 15 до 20-суточного возраста). Животным контрольной группы препарат не назначался. Подсчитывали общее количество эритроцитов, лейкоцитов в счетной камере Горяева В окрашенных мазках по Романовскому-Гимза выводили лейкограмму. Для определения бактерицидной активности крови осуществляли постановку спонтанного и стимулированного теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). На 15 сутки исследований установили статистически достоверные (р<0,001) различия количества эозинофилов 7,09% и палочкоядерных нейтрофилов 13,3% у животных в опыте по сравнению с телятами контрольной группы -4,01% и 7,31% соответственно. Активизировались клеточные факторы защиты. Фагоцитарная активность клеток крови у животных в опыте была на 13,0% выше по сравнению с показателями в контроле: 56,3% против 49,8% соответственно. Одновременно отметили статистически достоверное (р<0,001) увеличение бактерицидной активности нейтрофилов крови 57,09% в опыте против 46,43% в контроле. Показатель резерва бактерицидной активности нейтрофилов крови в опытной группе составил 6,82%, против 4,03% в контроле (р<0,001). Установили, что-бакте-рицидная активность сыворотки крови на 10 и 20 сутки применения биопрепарата была выше-у телят опытной группы и составила соответственно 56,06 и 57,09%, против 42,12 и 46,43% в контроле. Доказано, что применение препарата СТФ-1/56 ТиМ алиментарно телятам новорожденного периода с молоком оказывает статистически значимое влияние на гематологические показатели и иммунологический статус животных, активизирует естественную резистентность и стимулирует механизмы неспецифической защиты.
Ключевые слова: пробиотический препарат, новорожденные телята, естественная резистентность, неспецифическая защита, фагоцитоз, НСТ-тест
Экономически выгодное ведение животноводства возможно только при получении здорового жизнеспособного потомства. Анализ литературных источников показывает, что в условиях современного животноводства большая часть заболеваний новорожденных телят возникает на фоне возрастной иммунной недостаточности [1, 2, 3, 4, 5]. Возрастная иммунная патология телят связана, в первую очередь, с неполноценностью колостральной защиты: гуморальные факторы выражены слабо, а врожденный неспецифический иммунитет определяется в основном фагоцитарной активностью макро- и микрофагов [4, 5]. У новорожденных животных до приема молозива отмечается «критический иммунологический период», в крови мало иммуноглобулинов, лейкоцитов. Следовательно, необходима своевременная выпойка качественного молозива, содержащего в своем составе иммуноглобулины (не менее 60 г/л), белок, витамины и микроэлементы [1, 2, 3, 4, 6]. При этом важно учитывать условия кормления, содержания и эксплуатации коров-матерей в последнюю треть стельности [4, 5]. Недостаточность кормовой базы приводит к патологии обмена веществ в организме маточного поголовья, особенно в стельный период, и, как
следствие, приводит к нарушению роста приплода и рождению телят-гипотрофиков [1, 3]. Молозиво, полученное от коров больных скрытой формой мастита, содержит вдвое меньше блокаторов трипсина, поэтому иммуноглобулины частично разрушаются в кишечнике новорожденного теленка и не адсорбируются на его поверхности [2, 5, 7]. Как следствие, снижение естественной резистентности, угнетение развития в желудочно-кишечном тракте полезной микрофлоры и способности организма сопротивляться при воздействии различных факторов внешней среды [2, 3, 4, 7].
Одним из факторов повышения сопротивляемости и укрепления здоровья является введение в рацион новорожденных телят про-биотических препаратов [4, 8]. Применение живых штаммов микроорганизмов в животноводстве способствует усовершенствованию методов профилактики кишечных заболеваний крупного рогатого скота новорожденного периода. Нами была предложена схема выпойки препарата СТФ-56 ТиМ новорожденным телятам. Анализ современных и доступных источников литературы показал, что подобные схемы применения пробиотического препарата предложены не были.
Цель исследований - определение влияния на организм новорожденных телят биопрепарата СТФ-1/56 ТиМ, применяемого по предложенной схеме выпойки. Препарат производства ООО «Биотехагро» (г. Тимашевск, Краснодарский край). В состав пробиотического препарата входит живая культура Enterococcus faecium 1/56. По внешнему виду — это гомогенная взвесь светло-коричневого цвета с приятным молочным запахом. Биопрепарат безвреден для животных и человека, а также не содержит генетически модифицированных организмов [4].
Материал и методы. Научно-производственные опыты проводили в весенне-летний период 2016 года на базе Учебного научно-технологического животноводческого центра (с. Солнечное Симферопольского района) и в лаборатории микробиологии, паразитологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Академии биоресурсов и природопользования (структурного подразделения ФГАОУ ВО «КФУ им В.И. Вернадского»). Объект исследования: клинически здоровые, хорошо развитые телята новорожденного периода красной степной породы. Для установления влияния биопрепарата на организм животных были сформированы две группы по принципу аналогов в возрасте 2 суток по 7 голов в каждой. Кормление и условия содержания телят в обеих группах были одинаковыми. Телятам опытной группы задавали препарат с молоком в утреннее поение в дозе 5 мл/гол. ежедневно до 15-суточного возраста, с 15 до 20-суточного - в дозе 10 мл/гол. в течение 5 суток. Животным контрольной группы препарат не назначался.
В ходе производственного испытания проводили морфологические и иммунологические исследования крови и сыворотки крови животных в обеих группах. Подсчитывали общее количество эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере Горяева. В окрашенных мазках по Ро-мановскому-Гимза при помощи 12-клавишного счетчика выводили лейкограмму. Для определения бактерицидной активности крови осуществляли постановку спонтанного и стимулированного теста восстановления нитросинего тетраз-олия (НСТ-тест). Для оценки функциональной активности состояния фагоцитов проводили опсонофагоцитарную реакцию. В качестве стимуляции и объекта фагоцитоза использовали инактивированную нагреванием агаровую культуру Staphylococcus aureus — штамм 209P. Определяли показатель резерва (ПР) бактерицидной активности нейтрофилов крови, используя фор-
мулу: ПР = НСТсп./ НСТстим., где НСТсп. -спонтанный, а НСТстим. — стимулированный [9]. Измерения показателя бактерицидной активности крови проводили на фотометре КФК-3 «ЗОИЗ». Для определения статистически достоверных различий между двумя средними величинами использовали ^критерий Стьюдента при р<0,05; р<0,01; р<0,001 [10].
Кровь для исследований отбирали из яремной вены, за час до кормления телят. Взятие крови проводили до применения пробиоти-ка, а также на 10 и 15 сутки после введения.
Результаты и их обсуждение. Проведенные исследования показали, что введение пробиотика СТФ-1/56 ТиМ в основной рацион новорожденных телят способствует увеличению эритропоэза. Так, на 10 сутки после начала дачи препарата у животных в опыте количество эритроцитов возросло на 72% (р<0,01), а количество лейкоцитов на 29% (р<0,05) по сравнению с контрольными аналогами (табл. 1). На 15 сутки исследований установили статистически достоверные (р<0,001) различия количества эо-зинофилов 7,09% и палочкоядерных нейтрофи-лов 13,3% у животных в опыте по сравнению с телятами контрольной группы — 4,01 и 7,31% соответственно.
Следует отметить, что морфологические показатели у опытных животных на фоне применения пробиотического препарата находились в пределах физиологической нормы.
Полученные результаты могут свидетельствовать о том, что пробиотический препарат благоприятно влияет на гематологический статус новорожденных животных. На 10 сутки мы установили увеличение количества эритроцитов, что вероятно связано со стимулирующим влиянием препарата на кроветворную функцию красного костного мозга. Изменения относительного количественного состава лейкоцитов могут свидетельствовать о стимуляции клеточного звена иммунитета и активизации фагоцитарной реакции. Данные заключения согласуются с результатами иммунологических исследований, которые представлены в таблице 2.
Анализ данных таблицы 2 показывает, что наиболее существенные изменения иммунологических показателей отмечаются у животных, рацион которых включал препарат СТФ-1/56 ТиМ. На 15 сутки исследований активизировались клеточные факторы защиты. Фагоцитарная активность клеток крови у животных в опыте на 13% выше по сравнению с показателями в контроле: 56,3 против 49,8% соответствен-
но. Одновременно отмечается статистически до- против 46,43% в контроле. Показатель резервных
стоверное (р<0,001) увеличение бактерицидной возможностей в опытной группе составил 6,82%,
активности нейтрофилов крови 57,09% в опыте против 4,03% в контроле (р<0,001).
Таблица 1
Морфологические показатели крови телят, %
Срок исследования Показатель Опыт Контроль
До введения препарата Эритроциты 7,9±0,21 7,3±0,31
Лейкоциты 11,03±1,08 9,12±0,46
Палочкоядерные нейтрофилы 5,67±0,24 7,25±0,12
Сегментоядерные нейтрофилы 20,85±2,11 23,15±0,22
Эозинофилы 6,09±0,33 2,05±0,58
Лимфоциты 60,14±1,34 60,02±2,37
Моноциты 7,33±0,96 7,01±0,49
На 10 сутки после введения препарата Эритроциты 12,6±1,35** 7,33±0,05
Лейкоциты 11,8±1,38*** 9,17±1,25
Палочкоядерные нейтрофилы 9,07±0,5 9,9±0,24
Сегментоядерные нейтрофилы 18,17±1,36 15,6±0,05
Эозинофилы 4,32±1,02 5,21±1,3
Лимфоциты 65,39±1,52 65,26±2,38
Моноциты 2,86±0,7 4,9±0,01
На 15 сутки после введения препарата Эритроциты 6,98±0,38 9,3±0,27
Лейкоциты 10,6±1,03 10,8±0,14
Палочкоядерные нейтрофилы 13,3±0,05* 7,31±0,05
Сегментоядерные нейтрофилы 20,01±1,08 22,3±1,02
Эозинофилы 7,09±0,04* 4,01±0,02
Лимфоциты 57,04±1,2 61,18±0,17
Моноциты 2,01±0,02 3,12±2,05
Примечание: достоверно при * р<0,001; ** р<0,01; ***р<0,05 по сравнению с группой контроля
Таблица 2
Иммунологические показатели крови телят, %
Срок исследования Показатель Опыт Контроль
До введения препарата Бактерицидная активность сыворотки 52,17±1,26 54,01±1,02
Показатель резерва 5,9±1,24 5,71±0,14
Фагоцитарная активность 55,5±1,01 56,04±0,12
На 10 сутки после введения препарата Бактерицидная активность сыворотки 56,06±0,04** 42,12±2,45
Показатель резерва 6,02±0,07 5,18±0,11
Фагоцитарная активность 55,8±0,22 56,09±1,02
На 20 сутки после введения препарата и 5 сутки после вакцинации Бактерицидная активность сыворотки 57,09±0,05* 46,43±1,09
Показатель резерва 6,82±0,47* 4,03±0,41
Фагоцитарная активность 56,3±0,13* 49,8±0,14
Примечание: достоверно при * р<0,001; ** р<0,01 по сравнению с контролем
Выводы. Результаты научно-производственного опыта доказывают, что применение препарата СТФ-1/56 ТиМ алиментарно телятам новорожденного периода с молоком оказывает статистически значимое влияние на гематологические показатели и иммунологический статус животных. Установлено, что под воздействием препарата активизируются естественная резистентность и стимулируются механизмы неспецифической защиты: у телят в опыте на 23% выше показатель бактерицидной активности сыворотки крови, одновременно фагоцитарная активность клеток крови у животных в опыте на 13% выше по сравнению с показателями у животных в контроле.
Список литературы
1. Кондрахин И.П. Перспективы профилактики и лечения постнатальной токсической диспепсии у телят: Материалы международной научно-практической конференции. Воронеж, 2002. С. 31-35.
2. Терехов В.И. Проблемы острых кишечных болезней молодняка сельскохозяйственных животных и пути их решения: Материалы межд. на-учн.-практ. конфер. Воронеж, 2002. С. 74-78.
3. Sandy Stüttgen. Vaccination to Improve Calf Health in Wisconsin Beef Cattle Herds. University of Wisconsin, 2013. Р. 2-3.
4. Временное наставление по применению препарата СТФ-1/56 ТиМ жидкого. Тимофеевск, 2013. 2 с.
5. Левченко B.I., Влiзло В.В., Кондрахш I. П. и др. Ветеринарна клшчна бiохiмiя. Белая Церковь, 2002. С. 62-65.
6. Алексеев А.И., Волков А.М., Иванова Р.И. и др. Опыт выращивания телят с применением про-биотика Споробактерин // Аграрный вестник Урала.
2015. №2 (132). С. 12-15.
7. Собещанская Е.М., Лизогуб М.Л., Пла-хотнюк Е.В. Влияние качества молозива на сохранность новорожденных телят // Известия Тавриды.
2016. №8(171). С. 95-99.
8. Кораблева Т.Р., Сенчук И.В. Влияние про-биотика Пролам на показатели естественной резистентности и метаболический статус новорожденных телят // Аграрная наука Евро-Северо-Востока. 2016. №4(56). С. 53-57.
9. Чумаченко В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных. Киев: Урожай, 1990. С. 63-102.
10. Лапин Г.Ф. Биометрия: учебное пособие для биол.спец. вузов. М.: Высшая школа, 1990. 325 с.
Научно-исследовательская работа финансировалась за счет средств государственного заказа Министерства образования и науки Российской Федерации
Practical application of the STF-1/56 TiM biomedication in industrial animal husbandry Sobeschanskaya E.M., assistant of the cathedra, Korableva T.R., DSc in Veterinary, Professor
Academy of Life and Environmental Sciences of «V.I. Vernadsky Crimean Federal University»>, Republic of Crimea, Simferopol, Russia
During scientific-industrial experiment influence of biopreparation STF 1/56 Tim made on the basis of life culture Enterococcus faecium 1/56 on newborn calves of red steppe bred was studied since 2-day age. Animals of test group take preparation daily with milk at doze of 5 ml/head (up to 15-day age) and 10 mg/head (15...20-day age). Animals of control group do not take a preparation. Total amount of eritrocites, leukocites in Goryaev's count camera. Leucogram was get in smears stained after Romanovsky-Gimza. To determine the bactericidal activity of blood was performed staging of spontaneous and stimulated recovery test nitro blue tetrazolium (NBT-test). At 15-th day of study there were statistically significant (р < 0.001) differences in number of eosinophils (7.09%) and stab neutrophils (13.3%) in animals of experiment group in comparison with calvel of control group (4.01 and 7.31% respectively). Cell protection factors get active. Phagocytic activity of blood cells in the experiment animal was 16.5% higher in compare with control: 56% versus 49.8% respectively. Simultaneously, a statistically significant (p < 0.001) increase in blood neutrophil bactericidal activity was indicated of 57.09% in the experiment versus 46.43% in the control. Indicator of reserve capacity of bactericidal activity in the experimental group was 6.82% against 4.03% in the controls (p < 0.001). It was established that under the influence of probiotic ALS blood on the 10 and 20 day of use of a biological product was higher in calves of the experimental group and was equal to 56.06% and 57.09% against 42.12% and 46.43% in control, respectively. Conducted research and production experience, and the results obtained show that the use of the drug STF 1/56 TiM alimentary to calves of newborn period with milk has a statistically significant effect on hematologic and immunologic status of the animals.
Key words: probiotic preparation, newborn calves, natural resistance, non-specific defense, phagocytosis, NBT test
References
1. Kondrakhin I.P. Perspektivyprofilaktiki i lech-eniyapostnatal'noy toksicheskoy dispepsii u telyat: Ma-terialy mezhdunarodnoy nauchno-prakticheskoy kon-ferentsii. [Prospects for the prevention and treatment of postnatal toxic dyspepsia in calves: Proceedings of the international scientific-practical conference]. Voronezh, 2002. pp. 31-35.
2. Terekhov V.I. Problemy ostrykh kishechnykh bolezney molodnyaka sel'skokhozyaystvennykh zhivot-nykh i puti ikh resheniya: Materialy mezhdu-narodnoy nauchno-prakticheskoy konferentsii. [Problems of acute intestinal diseases of young farm animals and their solutions: Proceedings of the international scientific-practical conference]. Voronezh, 2002. pp. 74-78.
3. Sandy Stüttgen. Vaccination to Improve Calf Health in Wisconsin Beef Cattle Herds. University of Wisconsin, 2013. pp. 2-3.
4. Vremennoe nastavlenie po primeneniyu prepa-rata STF-1/56 TiM zhidkogo. [Temporary instruction on the use of STF 1/56 TiM liquid formulation]. Timo-feevsk, 2013. 2 p.
5. Levchenko V.I., Vlizlo V.V., Kondrakhin I.P. e.a. Veterinarna klinichna biokhimiya. [Veterinary clinical biochemistry]. Belaya Tserkov', 2002. pp. 62-65.
6. Alekseev A.I., Volkov A.M., Ivanova R.I. e.a. Opyt vyrashchivaniya telyat s primeneniem probiotika Sporobakterina. [The experience of growing calves with probiotic Sporobacterin]. Agrarnyy vestnik Urala. 2015. no. 2 (132). pp. 12-15.
7. Sobeshchanskaya E.M., Lizogub M.L., Plak-hotnyuk E.V. Vliyanie kachestva moloziva na sokhran-nost ' novorozhdennykh telyat. [Influence of colostrum
quality on the safety of newborn calves]. Izvestiya Tav-ridy. Simferopol', 2016. no. 8(171). pp. 95-99.
8. Korableva T.R., Senchuk I.V. Vliyanie probiotika Prolam na pokazateli estestvennoy rezistentnosti i metabolicheskiy status novorozhdennykh telyat. [Influence of Prolam probiotic on parameters of natural resistance and metabolic status of newborn calves]. Agrar-naya nauka Evro-Severo-Vostoka. 2016. no. 4(56). pp.53-57.
9. Chumachenko V.E. Opredelenie estestvennoy rezistentnosti i ob-mena veshchestv u sel'skokhozyay-stvennykh zhivotnykh. [Determination of natural resistance and metabolism in farm animals]. Kiev: Urozhay, 1990. pp. 63-102.
10. Lapin G.F. Biometriya: uchebnoe posobie dlya biol.spets. vuzov. [Biometrics: a tutorial for the Biol.univer]. Moscow: Vysshaya shkola, 1990. 325 p.
УДК 619:615
Исследование химического состава и токсических свойств фитокомплекса, содержащего биологически активные вещества Латушкина Наталья Александровна, мл. научный сотрудник, Ивановский Александр Александрович, доктор вет. наук, зав. лабораторией, Тимкина Елена Юрьевна, кандидат с.-х. наук, ученый секретарь ФГБНУ НИИСХ Северо-Востока, г. Киров, Россия
E-mail: timkina.elena@mail.ru Цель исследований заключалась в изучении химического состава и токсических свойств фитокомплекса растений, обладающих наиболее выраженными адаптогенным свойствами. Объект исследования: фитокомплекс включающий в себя левзею сафлоровидную (Rhaponticum carthamoides), серпуху венценосную (Serratula coronata), лабазник вязолистный (Filipendula ulmaria). Первоначально у отобранных растений определяли химический состав, а затем извлеченный из фитокомплекса спиртовой экстракт испытывался на токсичность на белых мышах Исследование токсичности экстракта изучаемого фитокомплекса проводили на мышах, распределённых на 2 опытные и 2 контрольные группы (n = 5 в группе), которым его вводили парентерально и интрагастрально однократно в объёме 0,5 мл/мышь, максимальная доза экстрактивных веществ фитокомплекса составляла 2,5 г/кг массы тела в пересчете на сухое вещество. В контроле в таком же объеме однократно вводили физиологический раствор. В течение 10 дней отслеживали клиническое состояние животных. Перед началом и по окончании эксперимента исследовали кровь на количество эритроцитов, лейкоцитов и концентрацию гемоглобина. Результаты исследований фитокомплекса, содержащего водно-спиртовые экстракты трав Rhaponticum carthamoides, Serratula coronata, Filipendula ulmaria, показали, что из биологически активных веществ в нём превалируют аминокислоты: аспарагиновая (3,5-3,9 г/100 г), глутаминовая (2,5-3,0 г/100 г), лейцин (1,9-2,0 г/100 г), тирозин (1,2-1,4 г/100 г), лизин (1,6 г/100 г); витамины: С (62,0-77,0мг/%), Е (6,2 мг/%), каратиноиды (65,0-113,0мг/%), РР (11,5мг/%), экдистероиды (418,0-2170мг/кг) и флавоноиды (3,0-7,2% от сухого вещества). Все травы фитокомплекса содержат в своем составе протеин, сахара, витамины, аминокислоты, дубильные вещества и флавоноиды. При интрагастральном и интраперитонеальном введении фи-токомплекса белым мышам зафиксировано отсутствие токсических свойств.
Ключевые слова: лабазник вязолистный, левзея сафлоровидная, серпуха венценосная, экдистероиды, белые мыши, аминокислоты, витамины
В настоящее время с целью повышения тивность в отношении респираторных и желу-экономической эффективности отрасли живот- дочно-кишечных болезней на 10-12% [1, 2]. новодства большой интерес представляет ис- Однако сочетание экдистероидсодержа-
пользование в качестве кормовых и биологиче- щих трав с другими видами растений, не соски активных добавок фитокомплексов. держащими экдистероиды, но обладающими Ранее проведенными исследованиями в иммуннотропным действием на организм мле-2011-2015 гг. на телятах и поросятах-отъёмы- копитающих, не изучалось. шах установлено, что применение препаратов Химический состав и иммунотропные биоинфузин и ФАНТПЛЮС, содержащих эк- свойства левзеи сафроловидной, лабазника вя-дистероиды левзеи, в сочетании с пробиотика- золистного и серпухи венценосной изучались ми повышает у них профилактическую эффек- рядом учёных [3, 4, 5, 6, 7]. В результате уста-
