CC BY
18
XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС
ТЕЗИСЫ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
в ткани аденокарциномы желудка разной степени агрессивности
О. И. Кит', Е. И. Сурикова', И.А. Горошинская', Е. М. Фран-циянц', А. А. Маслов', Д.Е. Медведева', Е. В. Шалашная', П. С. Качесова', Л. А. Немашкалова'
Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации e-mail: super.gormon@ya.ru
Цель. Оценка значимости изменений в работе системы глута-тион-зависимых ферментов в ткани аденокарциномы желудка в зависимости от степени дифференцировки опухоли. Материалы и методы. Содержание восстановленного глу-татиона ВГ и активность глутатионпероксидазы (ГПО), глутатионредуктазы (ГР), глутатионтрансферазы (ГТ), супе-роксиддисмутазы (СОД), каталазы (КАТ) определяли общепринятыми спектрофотометрическими методами в образцах опухоли, перитуморальной зоны и условно интактной ткани (взятой по линии резекции), полученных во время операции у 29 первичных больных раком желудка — 13 больных аденокарциномой G1 и G2 (T3-4N0-1M0, II—III st) и 16 больных аденокарциномой G3 степени дифференцировки (T3-4N1-3M0, II—III st). Также были использованы результаты изучения ткани здорового желудка (интактный желудок) 12 случайно погибших людей, полученные в предыдущих исследованиях.
Результаты. Не выявлено значимых различий между исследованными показателями в условно интактной ткани при аденокарциноме G1-G2 и интактным желудком. Найдено только значимое снижение активности КАТ на 27% в ткани опухоли и увеличение активности ГТ в 2,6 раза в ткани перитуморальной зоны по сравнению с здоровой тканью (р<0,05). При аденокарциноме G3 в условно здоровой ткани по сравнению с интактным желудком были значимо увеличены активность ГТ в 2,7 раз и содержание ВГ в 2,3 раза (р<0,05, р<0,01). В ткани опухоли было выявлено значимое снижение активности СОД, ГР и ГТ на 24—44% и содержания ВГ в 2,0 раза, а также а также увеличение активности ГПО на 26% по сравнению с перитуморальной зоной (p<0,05). Перитуморальная зона характеризовалась снижением активности СОД на 44%, ГР на 30% и каталазы на 34%, а также более низким в 1,9 раза содержанием ВГ по сравнению с соответствующей условно здоровой тканью (p<0,05, p<0,01). При этом активность ГТ в условно здоровой ткани была в 3,0 раза выше по сравнению с активностью в ткани аденокарциномы G1-G2 (р<0,01). Заключение. Результаты показали, что при высоко- и умеренно-дифференцированной аденокарциноме желудка изменения происходят в перитуморальной зоне — значительное усиление активности ГТ. При снижении степени дифферен-цировки и усилении агрессивности неоплазмы происходит снижение активности антиоксидантных ферментов в тканях опухоли и перитуморальной зоны и изменение метаболизма GSH-зависимой системы в условно здоровой ткани по сравнению с интактным желудком.
Ключевые слова: аденокарцинома желудка, степень диффе-ренцировки, глутатионзависимая система
Локальный гормональный фон невусов имеет отличия от меланомы кожи
В.А. Бандовкина', Е.М. Франциянц', Ю.А. Погорелова', Н. Д. Черярина'
Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации e-mail: super.gormon@ya.ru
Более чем в 70% случаев меланома кожи возникает на фоне врожденного или приобретенного пигментного невуса. Исследования в сравнительном аспекте локального гормоно-генеза невусов и меланомы кожи не проводятся. Цель. В сравнительном аспекте изучить уровень гормонов в ткани диспластических невусов и меланомы кожи (рТ1-2N0M0).
Методы. Методом ИФА были изучены уровни пролактина (Прл), прогестерона (Р4), тестостерона общего и свободного (Т и св. Т), эстрона (Е1) и эстриола (Е3) и секс-стероид-связывающего глобулина (ССГ) в 17 образцах ткани меланомы кожи рТ1-2N0M0 и 23 образцах диспластических невусов. В качестве контроля использовали интактную кожу (n=15), полученную при оперативном лечении больных без онкопатологии.
Результаты. В ткани невусов, по сравнению с интактной кожей, установлено повышение в 1,4 раза уровня Т, и в 8,7 раз свТ, на фоне снижения в 1,9 раза концентрации ССГ. Выявлено повышение в 1,6 раз уровня Е3 на фоне нормального содержания Е1. Концентрация ПРЛ в невусах снижена в 1,4 раза. При рТ1-2N0M0 в опухоли, по сравнению с кожей отмечен локальный андрогеновый дисбаланс: уровень Т снизился в 1,8 раз, в то время как св. Т превысил норму в 1,8 раза, на фоне повышенного в 6 раз ССГ. В 1,6 раза возросло содержание Е1 и в 2,8 раза снизилась концентрация Е3. Коэффициент Е1 /Е3 в ткани невусов был снижен в 1,6 раз, а в меланоме повышен в 4,4 раза. Соотношение Т/Е1 в невусах повышено в 1,4 раза, в меланоме снижено в 2,8 раза соответственно. Не обнаружено достоверных различий по содержанию ПРЛ и Р4 в тканях меланомы, невусов и интакной кожей. Заключение. Отличительной особенностью меланомы, обуславливающей злокачественную трансформацию меланоци-тов, оказалась гиперэстрогения, за счет повышения уровня Е1, на фоне низкого содержания Е3. Вероятнее всего, в меланоме св. Т расходуется на синтез эстрона, о чем свидетельствует повышение Е1/Е3 и снижение Т/Е1. Повышенный синтез Е1 может способствовать осуществлению генотоксическому воздействию эстрогенов. В ткани невусов эти механизмы не реализуются. Гиперандрогения в ткани невусов возможно препятствует злокачественной трансформации в силу низкой активности ароматазы.
Ключевые слова: невусы, меланома, гормональный фон
Повышение степени злокачественности меланомы на фоне хронической боли у самок мышей
И. М. Котиева', Е. М. Франциянц', И. В. Каплиева', Л. К. Тре-питаки', В.А. Бандовкина', Н. Д. Черярина', Ю.А. Погорелова', Л. Я. Розенко', И. В. Нескубина' Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации e-mail: super.gormon@ya.ru
Цель. Изучение влияния хронической боли на рост меланомы В16/F10 у самок мышей линии С57ВL/6. Материалы и методы. Работа выполнена на 64 мышах-самках линии С57ВL/6. После наступления медикаментозного сна в стерильных условиях выделяли седалищный нерв, наклады-
Злокачественные опухоли
www.malignanttumours.org
Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017
Malignant Tumours
www.malignanttumours.org
XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС
ТЕЗИСЫ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
вал на него лигатуру, ушивал рану послойно и обрабатывал шов 5% спиртовым раствором йода. Через 2 недели после заживления операционной раны подкожно вводили 0,5 мл взвеси опухолевых клеток мышиной меланомы B16/F10 в физиологическом растворе в разведении 1:10. Результаты. Средняя продолжительность жизни для мышей основной группы (ОГ, 64 штук) составила 19,17±1,35 дней, максимальная — 24 дня. В контрольной группе (КГ, без боли, 22 мыши) — первая смерть наступила на 24 сутки, средняя продолжительность их жизни составила 30,25±1,67 дня, максимальная — 36 дней.
У мышей ОГ, средний размер опухоли на 2 неделе эксперимента был в 1,9 раза больше, чем у мышей КГ в это же время, а на 3 неделе — достоверно не отличался от нее. Минимальный размер впервые зафиксированных подкожных опухолей у мышей ОГ на 1 неделе был в 2 раза больше, чем у КГ на 2 неделе, в то время как максимальный размер опухоли на 3 неделе эксперимента у мышей из КГ был в 2,3 раза больше, чем у мышей с болью. При этом у большинства мышей ОГ 3 неделя — предтерминальный период, а у мышей из КГ — нет. Несмотря на то, что у мышей ОГ объем опухоли нарастал менее активно, у значительного количества мышей на разных этапах исследования, начиная уже с 1 недели, отмечался ее 2-фокусный рост. Кроме того, поверхностный некроз опухоли появлялся на неделю раньше и у большего количества животных, чем в КГ.
У мышей ОГ меланома В16 вела себя более агрессивно, поскольку метастазировала чаще, иногда в несколько органов и имела нетипичные для себя зоны метастазирования. Метастазы у мышей основной группы регистрировались уже через неделю после перевивки, а у мышей КГ — через 4 недели. У мышей ОГ опухоль метастазировала, кроме типичных мест (печень, селезенку, легкие), в нетипичные — сердце, матку. Предтерминальное состояние у мышей ОГ регистрировалось на 1 неделе после перевивки, с развитием процесса количество животных увеличивалось. В КГ предтерминальное состояние мышей регистрировалось, начиная с 3 недели. Заключение. Хроническая боль уменьшает продолжительность жизни самок мышей и делает метастазирование мела-номы B16/F10 у них более агрессивным. Ключевые слова: хроническая боль, меланома, мыши, VEGF
Гипометилирование LINE-1 в аденокарциномах толстой кишки
Н. Н. Тимошкина', М. А. Кожушко', Ю. А. Геворкян', Д. И. Водолажский'
Место работы: 'ФГПУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону e-mail: molcancer@yandex.ru
Метилирование ДНК является распространенным механизмом эпигенетической регуляции экспрессии генов, который активно используется при разработке моделей канцерогенеза, рассматривающих аберрантное метилирование как причину подавления активности генов-супрессоров опухолей или активации онкогенов. Уровни метилирования повторяющихся мобильных элементов, в частности ретротранспо-зонов LINE-1 (Long interspersed nuclear element или длинные диспергированные повторы), играют важную роль в поддержании геномной стабильности и используются для оценки статуса метилирования генома в целом. Цель. Оценка статуса метилирования LINE-1 при колорек-тальном раке (КРР) в зависимости от клинико-патологических
характеристик, наличия мутаций гена KRAS, метилирования промоторных областей онкосупрессоров. Материалы и методы. Метод пиросеквенирования (система анализа PyroMark Q24, Qiagen, Germany) был использован для количественного определения уровня метилирования CpG-сайтов LINE-1 и 6-ти генов-онкосупрессоров (APC, CDH13, MLH1, MGMT, P16 и RASSF1A) в опухолях и нормальной ткани 50-ти пациентов с диагнозом КРР различных TNM-стадий. Статус гена KRAS оценивали методом прямого секвенирования по Сэнгеру (АВ 3500, Life Technologies, USA). Вычисления статистических показателей и достоверности различий проведены в пакете IBM SPSS Statistics v. 23.0. Результаты. Уровень метилирования LINE-1 в опухолях составил 66,8+0,89%, что достоверно ниже (р=0,0013) уровня, определяемого в условно нормальных тканях 72,5+0,45%. Изменение метилирования LINE-1 не было связано с возрастом пациентов (в отличие от гена MGMT), стадией заболевания, степенью дифференцировки и локализацией опухоли. Некоторое снижение метилирования мобильных элементов в опухолях с активирующими мутациями в гене KRAS (64,9% против 68,5%, соответственно) также не было статистически значимым. Отмечена достоверная отрицательная корреляция уровня метилирования локусов LINE-1 и CDH13 (r=-0,427, p<0,05). Использованная панель маркеров-онкосупрес-соров позволила дискриминировать опухоли дистального и проксимального отдела толстой кишки (р=0,041), при этом в последних достоверно чаще встречался статус гиперметилирования CDH13 (p=0,004). Деметилирование мобильного элемента коррелировало с прогрессией TNM-стадий опухоли (r=0,606, p<0,001). Кроме того, в выборке КРР с метастазами чаще отмечали случаи CpG-метилирования LINE-1 ниже 70% (%2=3,83 при р=0,045). Исследованные онкосупрессоры генов были гиперметилированы в 70% случаев аденокарцином толстой кишки, в 90% случаев отмечалось деметилирование LINE-1 в КРР-опухоли по сравнению с условно нормальным эпителием толстой кишки.
Заключение. Анализ CpG-метилирования позволяет идентифицировать различные подгруппы КРР. Настоящее исследование продемонстрировало ассоциацию метилирования LINE-1 с TNM-стадией опухоли, что вместе с оценкой гиперметилирования онкосупрессоров может быть полезным маркером для ранней диагностики и прогноза течения спорадического КРР.
Влияние доксорубицина на экспрессию генов и микроРНК EGFR-сигнального пути в культуре клеток линии HeLa
Д.И. Водолажский, А.А. Пушкин, Н.Г. Васильченко, С.Б. Пан-ченко, Н. Н. Тимошкина
Место работы: ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону e-mail: molcancer@yandex.ru
Химиопрепарат доксорубицин (Adriamycin, DXR) — известный ДНК-интеркалирующий цитостатик, используемый при лечении различных видов опухолей. Ключевым механизмом ответа опухолевых клеток на действие DXR является активация про-апоптотического пути [Tomankova et al., 2015]. Показано, что DXR стимулирует экспрессию генов некоторых сигнальных путей, например, транскрипционных факторов STAT1,2, N-myc, каспазы-1 в клетках цервикального рака HeLa [Hussner J et al., 2012].
Злокачественные опухоли
www.malignanttumours.org
Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017
Malignant Tumours
www.malignanttumours.org
