CC BY
18
УДК 576.32/.36+ 616-008.853.3:616.155.392
ПОТРЕБЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ КЛЕТКАМИ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОЛЕЙКОЗОМ, ЛЕЧЕННЫХ ИМАТИНИБОМ (ГЛИВЕКОМ)
Т.В. Сясина 1, А.В. Козлов 1, С.С. Бессмельцев2, В.Ю. Удальева2, А.Ю. Зарицкий3
1 Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова,
Санкт-Петербург, Россия
2 Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии,
Санкт-Петербург
3 Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова,
Россия
GLUCOSE UPTAKE BY CELLS OF BONE MARROW OF PATIENTS CHRONIC MYELOID LEUKEMIA TREATED WITH IMATINIB (GLIVEC)
T.V. Syasina 1, A.V. Kozlov 1, S.S. Bessmeltsev2, V.U. Udalieva2, A.Yu. Zaritzkiy 3 1 North-West State Medical University named after I.I. Mechnikov, Saint-Petersburg, Russia
2 Russian Research Institute of Hematology and Transfusiology, Saint-Petersburg, Russia 3 Sain-Petersburg Pavlov State Medical University, Russia
© Коллектив авторов, 2011
Представлены результаты изучения скорости потребления глюкозы in vitro клетками костного мозга у 63 больных хроническим миелолейкозом. Больные в хронической фазе получали лечение иматинибом (гливеком) в дозе 400 мг/сут. Больные в фазе бластного криза были обследованы до начала терапии гливеком. Потребление глюкозы клетками костного мозга было максимальным в фазе бластного криза. Динамика снижения потребления глюкозы клетками костного мозга от начала лечения до наступления полного гематологического ответа зависела от количества бластных клеток. При достижении частичного цитогенетического ответа скорость утилизации глюкозы определялась количеством клеток, содержащих филадельфийскую хромосому. При достижении больными полного цитогенетического ответа потребление глюкозы клетками костного мозга достигало минимального уровня. Изучение характера потребления глюкозы злокачественными клетками костного мозга больных ХМЛ in vitro может использоваться в качестве одного из подходов к оценке эффективности химиопрепаратов направленного действия.
Ключевые слова: потребление глюкозы, клетки костного мозга, хронический миелолейкоз, иматиниб (гливек).
We present the results of studying in vitro of the rate of glucose uptake by bone marrow cells at 63 patients with chronic myelogenous leukemia. Patients in chronic phase received imatinib (glivec) in a dose of 400 mg/day. Patients in blast crisis phase were surveyed prior the beginning of glivec therapy. Glucose uptake by bone marrow cells was maximal in patients in blast crisis. The dynamics of decrease of glucose uptake by bone marrow cells from an initiation of treatment up to сcomplete hematologic response depended on the number of blast cells. On achievement of the partial cytogenetic response rate of glucose utilization was defined by quantity of the cells with Philadelpfia chromosome.
At the moment of the achievement by patients of the complete cytogenetic response glucose uptake by bone marrow cells reached its minimal level. In vitro study of glucose uptake pattern by malignant cells of bone marrow in patients with chronic myelogenous leukemia can be used as one of approaches to assessment of efficiency of anticancer agents.
Key words: glucose uptake, bone marrow cells, chronic myelogenous leukemia, imatinib (glivec).
Введение
Многие препараты, используемые в настоящее время для лечения злокачественных заболеваний, способны in vitro эффективно подавлять обмен глюкозы в злокачественных клетках, угнетать пролиферативную активность и замедлять их рост. Установлено, что
среди эффектов, которые оказывает иматиниб мезилат (Gleevec или Glivec, ранее известный как STI571) на злокачественные клетки важная роль отводится нарушению процессов поступления глюкозы внутрь клетки, а также её расщепления при участии внутриклеточных ферментных систем [1].
Цель исследования - оценить влияние гливека на процессы поглощения глюкозы клетками костного мозга, выделенных у больных хроническим миелолейкозом, лечившихся иматинибом.
Материалы и методы
Исследование было проведено на клетках костного мозга 63 больных хроническим миелолейкозом (ХМЛ). Больные были разделены на 6 групп, из них четыре группы (42 больных) были включены в исследование в качестве основных и две (21 больной) - в качестве групп сравнения.
Больные в хронической фазе (ХФ) ХМЛ составили четыре основных группы. Группу под номером 1 (n = 13) составили больные до начала терапии гливеком. Критериями для включения больных в группы 2, 3 и 4 служили рекомендации European Leukemia Net по лечению ХМЛ иматинибом [2]. Больные в ХФ заболевания с полным гематологическим ответом (ПГО) составили 2-ю группу (n = 4). Больные в ХФ заболевания с ПГО и частичным цитогенетическим ответом (ЧЦО) образовали 3-ю группу (n = 13). В 4-ю группу (n = 12) были включены больные с ПГО и полным цитогенетическим ответом (ПЦО). Диагноз ХМЛ подтверждался результатами исследования периферической крови, пунктата костного мозга, данными цитогенетического и молекулярно-биологического исследования. У больных в хронической фазе при поступлении (до начала лечения) выявлялся лейкоцитоз за счет зрелых форм нейтрофи-лов, число бластных клеток < 5%, определялась базофилия, часто с эозинофилией.
Больные 2-й, 3-й и 4-й групп находились на терапии иматинибом (гливеком) с суточной дозировкой 400 мг/сутки. Больные 4-й группы (ПЦО) получали гливек от 6 до 26 месяцев (в среднем 15,6 мес.), 3-й группы (ЧЦО) - в течение 5-11 мес. (в среднем 9,9 мес.), пациенты 2-й группы (ПГО) - до 2 мес.
Дополнительно были образованы группы с ХФ и малым цитогенетическим ответом (группа МЦО) и с бластным кризом (группа БК). Больные группы МЦО получали препараты интерферона и гидроксимочевины (гидреа) в виде комбинированной терапии в дозе: интерферон 9-24 МЕ/нед в течение 12-40 мес. (в среднем 24,3 мес.), гидреа 0,5-2 г/сут в течение 12-30 мес. (в среднем 20,6 мес.). Больные группы БК были включены в исследование до начала терапии гливеком. При бластном кризе
число бластных клеток в периферической крови и/или костном мозге превышало 20%. У всех больных в фазе бластного криза цитохимически в периферической крови и костномозговом пунктате выявлялись типичные миелобласты с положительной реакцией на пероксидазу и липиды и диффузным распределением PAS-положительного вещества.
Полноту гематологического (ГО) и цитогенетического ответа (ЦО) оценивали по критериям, принятым European Leukemia Net в 2009 г. [3]:
Достижение полного гематологического ответа (ПГО) фиксировали при:
- снижении количества в периферической крови лейкоцитов ниже уровня 10х109/л;
- снижении тромбоцитов - ниже уровня 450х109/л;
- содержании в лейкоцитарной формуле ба-зофилов менее 5%;
- отсутствии в периферической крови миелоцитов, промиелоцитов, миелобластов;
- уменьшении размеров селезенки (при пальпации селезенка не выступала из-под края реберной дуги).
О полноте цитогенетического ответа судили по проценту клеток, содержащих Ph(+) хромосому при анализе не менее 20 метафаз. Выделяли следующие варианты ответа:
- полный цитогенетический ответ (ПЦО) -Ph(+) хромосома не определялась;
- частичный цитогенетический ответ (ЧЦО) - Ph(+) хромосома определялась в пределах
1-35% анализируемых метафаз;
- малый цитогенетический ответ (МЦО) -Ph(+) хромосома определялась в пределах 3665%;
- минимальный цитогенетический ответ (МинЦО) - Ph(+) хромосома определялась в пределах 66-95%;
- цитогенетический ответ отсутствует (ОЦО) - Ph(+) хромосома определялась более чем в 95% анализируемых метафаз.
В таблице 1 представлены данные анализа периферической крови, цитогенетического обследования и определения размеров селезенки при пальпации, использованные для разделения больных на группы.
В качестве объекта исследования служили клетки костного мозга (КМ), выделенные из костномозгового пунктата (1-2 мл) путем центрифугирования в градиенте плотности раствора фиколл-верографин с относительной плотностью 1,077 г/мл [4].
Таблица 1
Клинико-лабораторная характеристика групп больных
Клинико- лабораторные показатели Основные группы Группы сравнения
1 группа до лечения (п = 13) 2 группа ПГО (n = 4) 3 группа ЧЦО (n = 13) 4 группа ПЦО (n = 12) Группа МЦО (n = 9) группа БК (n = 12)
Фаза заболевания ХФ ХФ ХФ ХФ ХФ БК
Лейкоциты, х109/л 29,0±9,0 5,8±2,1 5,0±1,7 5,3±1,5 5,3±0,7 60,6 ±21,6
Тромбоциты, х 109/л 419,7 ±34,5 202,5 ±64,7 153,9 ±56 227,3 ±91,9 180,2 ±10,7 166,9 ±81,9
Миелобласты, % 1,1±0,5 0 0 0 0 34,5±8,0
Промиелоциты, % 2,1±0,5 0 0 0 0 7,2±3,1
Миелоциты, % 11,0±2,9 0 0 0 0 5,8±2,1
Базофилы, % 3,5±1,4 0,3±0,5 0,7±0,5 0,6±0,5 0,6±0,5 7,5±4,1
Селезёнка Выступает Не Не Не Не Выступает
при пальпации из-под края выступает выступает выступает выступает из-под края
реберной из-под края из-под края из-под края из-под края реберной дуги
дуги на реберной реберной реберной реберной на 1-6 см
1-3 см дуги дуги дуги дуги
Количество РЬ(+) 100 70-100 7-26 0 35-86 100
позитивных клеток, °/ %
Выделенные клетки (в среднем 4,2х106) инкубировали в 1 мл буферного раствора, содержащего 5,3 ммоль/л глюкозы в течение 18 ч при температуре 37°С. О скорости поглощения глюкозы судили по её убыли в среде инкубации. Содержание глюкозы среде оценивали глюкозооксидазным методом [5]. Результаты представляли в виде количества поглощенной за 18 ч глюкозы (мкмоль/106 клеток костного мозга).
Статистическую обработку проводили с помощью программы «STATISTICA 6.0». В каждой группе рассчитывали средние значения (M), среднее квадратическое отклонение (с) и ошибку среднего (±m). Приведенные в тексте и таблицах значения представлены в виде M±m. Для всех имеющихся выборок данных была проведена проверка нормальности распределения по критерию Колмогорова - Смирнова. В случаях, когда гипотеза нормальности отвергалась, показатель р рассчитывали на основе ранговых непараметрических критериев Вил-коксона и Манна - Уитни. В остальных случаях расчёт проводили с помощью критерия Стьюдента и парного Т-критерия. Выявление связи между параметрами осуществляли на основе линейного корреляционного анализа с расчетом коэффициента корреляции (г). Критический уровень достоверности нулевой
статистической гипотезы р принимался равным 0,05.
Результаты и их обсуждение
Полученные данные представлены в табл. 2.
Максимальное потребление глюкозы клетками КМ было отмечено у больных 1-й группы. Эта группа пациентов отличалась от всех групп и по другим параметрам: количеству бластных клеток и промиелоцитов в костном мозге. В этой группе в 100% случаев была выявлена в клетках РЬ(+) хромосома.
У больных 2-й группы поглощение глюкозы было достоверно ниже по сравнению с 1-й группой и достоверно превышало соответствующий показатель в 3-й и 4-й группах. Содержание бластов и промиелоцитов в КМ больных этой группы не отличалось от показателей в 3-й и 4-й группах. Содержание клеток с РЬ(+) хромосомой колебалось от 70% до 100%.
Больные, составившие 3-ю (ХФ ЧЦО) и 4-ю группы (ХФ ПЦО) не отличались между собой по гематологическим показателям (% бластных клеток и промиелоцитов в КМ), количеству поглощенной клетками глюкозы. Основным отличием явилось различное содержание РЬ(+) позитивных клеток: у больных в 3-й группе оно составило 7-26%, в 4-й группе РЬ(+) хромосома не была обнаружена.
Таблица 2
Потребление глюкозы (мкмоль/106кл) клетками костного мозга в группах больных ХМЛ
Клинико-лабораторные показатели Основные группы больных
1-я группа до лечения (п = 13) 2-я группа ПГО (п = 4) 3-я группа ЧЦО (п = 13) 4-я группа ПЦО (п = 12)
Потребление глюкозы клетками (мкмоль/106кл) 0,62±0,082-4 0,40±0,041, 3, 4 0,16±0,021, 2 0,15±0,031' 2
Количество РЬ(+) позитивных клеток (%) 100 70-100 7-26 0
Бластные клетки (%) 2,4±0,32-4 1,0±0,8 1,2±0,7 0,8±0,6
Промиелоциты (%) 7,0±1,62-4 2,9±2,2 2,0±0,9 2,1±1,0
Примечание:1 2 3 4 - наличие достоверных различий при сравнении групп (< 0,05).
Анализ данных, полученных при исследовании клеток КМ основной группы больных (1-4) позволяет высказать предположение о роли различных клеток в поглощении глюкозы. На первый взгляд высокое потребление глюкозы клетками КМ до достижения ПГО связано с повышенным количеством бластов и промиелоцитов, тем более что данное заключение согласуется с современными представлениями о том, что злокачественные клетки характеризуются высоким потреблением глюкозы.
Для более подробного анализа взаимосвязи между потреблением глюкозы и количеством бластных клеток было проведено сравнение скорости потребления глюкозы клетками КМ у больных 1-й группы и больных, находящихся в фазе БК с высоким содержанием бластных клеток (группа БК).
% 50 45 40 35 30 25 20 15 10
0
А
. і
§ 0,9
£ 0,8
0
1 0,7
Е 0,6
| 0,5
2 0,4 I 0,3
1 0,2
Ф
3 0,1
о
ЕЕ 0
Б
Группа БК (п = 12)
1-я группа до лечения (п = 13)
і Промиелоциты,%
Группа БК (п = 12)
1-я группа до лечения (п = 13)
Рис.1. Потребление глюкозы клетками КМ и содержание бластов и промиелоцитов у больных ХМЛ в ХФ до лечения и БК:
А - количество бластов и промиелоцитов в КМ, %;
Б - потребление глюкозы клетками КМ, мкмоль/106 кл
Как следует из представленных на рисунке 1 данных, сравнимое по количеству потребленной глюкозы клетками КМ (0,66 и
0,62 мкмоль/106 кл) обнаруживается на фоне резкого отличия по количеству бластных клеток (47,1 и 2,4%) при сравнимом по числу промиелоцитов (7,3 и 7,0%). Это указывает на то, что наличие большого количества бластов в КМ не является единственной причиной высокого потребления глюкозы клетками КМ.
После достижения стадии ПГО нам удалось установить зависимость между потреблением глюкозы и количеством РЬ(+) позитивных клеток.
Поскольку больные, получающие гливек, быстро минуют не только стадию ПГО, но и МЦО, мы сравнили потребление глюкозы клетками КМ в группе больных ХМЛ, достигшими МЦО на фоне терапии интерфероном и гидреа.
Количество бластов и промиелоцитов в группе МЦО достоверно не отличалось от значений
2-й и 3-й групп и составило 1,1±0,5% и 2,6±0,8% соответственно. По достижении ПГО потребление глюкозы клетками КМ снижалось, в среднем, на 35%. Дальнейшее достоверное снижение скорости потребления глюкозы клетками КМ наблюдалось в 3-й группе больных, у которых элиминация патологической РЬ(+) хромосомы превышала уровень 65%. Это подтверждалось наличием корреляционной связи (г = 0,77) между скоростью потребления глюкозы и количеством РЬ(+) клеток при сравнении группы МЦО и 3-й группы (рис. 2).
Бласты, %
(n = 4)
(n = 9)
‘ Содержание Ph(+) позитивных клеток, %
(n = 13)
Потребление глюкозы
Рис. 2. Корреляционная зависимость между потреблением глюкозы и количеством РЬ(+) позитивных клеток в костном мозге больных по достижении МЦО
В многочисленных исследованиях, начиная с момента открытия Варбургом (1920) феномена ускорения гликолиза в опухолевой клетке в присутствии кислорода, получившего название «аэробный гликолиз», или эффект Варбурга, и по сегодняшний день, отмечается, что одним из ключевых механизмов в усилении пролиферации злокачественных клеток является ускорение процессов потребления глюкозы опухолевыми клетками [6]. Считают, что высокое потребление глюкозы клетками при ХМЛ связано с усиленным ее потреблением для других процессов, таких как синтез липидов, нуклеиновых кислот, детоксикация свободных радикалов кислорода [7]. При всей кажущейся ясности вопроса взаимосвязи между интенсивностью метаболизма глюкозы и степенью злокачественности опухолевой клетки, связанной с эффектом Варбурга, многие аспекты данной проблемы остаются неизученным [8]. До конца не выяснены механизмы, способствующие снижению потребления глюкозы при лечении иматинибом. Его объясняют угнетением гликолиза [9], нормализацией процессов обмена глюкозы в клетке в результате перестройки работы митохондрий [10], блокадой активности ферментов гликолиза [11] и замедлением поступления глюкозы внутрь клетки за счет уменьшения количества переносчиков глюкозы ОЬиТ1 на мембране [12]. Кроме того, при работе со смешанной культурой клеток низкое потребление может быть объяснено гибелью части клеток в результате процессов апоптоза [13].
Так, установлено, что иматиниб эффективно подавляет метаболизм глюкозы, замедляет рост злокачественных клеток и угнетает их пролиферативную активность [14, 15] за счет апоптоза опухолевых клеток, которые активно экспрессируют белок Всг-ЛЫ. Было установлено, что чем продолжительнее период инкубации культуры клеток в присутствии иматиниба, тем интенсивнее снижается потребление глюкозы как
в условиях гипоксии [16], так и при условии отсутствия интерлейкина-3 [17]. По данным К. Barnes и соавт., данный феномен у больных хроническим миелолейкозом, во многом, связан с уменьшенной экспрессией переносчика глюкозы GLUT1, за счет чего замедляется поступление глюкозы в клетки [17].
Изучение процессов потребления глюкозы злокачественными клетками в последние годы в основном проводят на культивируемых линиях клеток человека Bcr-Abl позитивных CML-T1 и K-562 и Bcr-Abl негативных HC-1 [1, 12,
16, 18]. Скорость ее потребления оценивают по накоплению в среде инкубации конечного продукта гликолиза - лактата [19], отношению концентрации внеклеточной и внутриклеточной глюкозы в клетках [1], скорости поглощения глюкозы клетками в ходе инкубации [20], поглощению меченой [1-13C] глюкозы [21] , количеству переносчиков глюкозы GLUT1 [12, 22]. В нашей работе мы использовали показатель - потребление глюкозы клетками КМ, (мкмоль/106 кл).
Анализ результатов, полученных в условиях in vitro, указывает на то, что после инкубации в присутствии иматиниба в течение 4 часов Bcr-Abl позитивных клеточных линий скорость поглощения глюкозы клетками из среды значительно снижается, что приводит к увеличению концентрации глюкозы в среде и повышению отношения внеклеточная глюкоза / внутриклеточная глюкоза [1]. Сообщают, что после инкубации с иматинибом потребление глюкозы чувствительными Bcr-Abl позитивными клетками снижено по сравнению с резистентными клетками за счет изменения локализации переносчиков глюкозы. Основная их масса перераспределяется во внутриклеточное пространство, и число уменьшается не только на мембране, но и внутри клетки. В клетках, резистентных к воздействию иматиниба расположение переносчиков глюкозы GLUT1 при сравнении с клетками, инкубированными без иматиниба, практически не меняется и ограничивается только цитоплазматической мембраной [12]. Потребление глюкозы клетками гастроинтестинальной стромальной опухоли при экспозиции с иматинибом в течение 18 ч достоверно снижалось на 20-40% по сравнению с клетками, инкубированными без него [23].
Следует учитывать, что в злокачественных клетках потребление глюкозы нарастает при их попадании в стрессовые условия, а также при стимуляции пролиферации клеток факторами роста [24-27].
Полученные нами данные о потреблении глюкозы клетками КМ, непосредственно выделенных у больных ХМЛ в целом, согласуются с результатами других авторов, обнаруживших высокую скорость потребления глюкозы злокачественными клетками КМ [1, 20, 30-32].
Выводы
По нашим данным, полученным на смешанной культуре клеток костного мозга, потребление глюкозы напрямую не связано с количеством бластных клеток в КМ при ХМЛ. По мере элиминации бластных клеток и по мере достижения ПЦО и ЧЦО удается выявить факт значительного уменьшения потребления клетками КМ глюкозы, что даёт основание предполагать, что высокое потребление глюкозы связано с клетками, содержащими Ph(+) хромосому. Это ставит вопрос о необходимости дальнейшего изучения особенностей метаболического фенотипа клеток, обладающих Ph(+) хромосомой.
Следует согласиться с мнением E.F. Mason и соавторов, U.G Sattler и соавторов и C. Tarn и соавторов, что подавление обмена глюкозы может увеличить эффективность направленных молекулярных методов лечения злокачественных опухолей [23, 28, 29].
Мы согласны с мнением D.J. Kominsky и соавторов, что определение скорости потребления глюкозы клетками может использоваться в качестве дополнительного маркера для раннего обнаружения прогрессии заболевания и развития резистентности к иматинибу в BCR-ABL-положительных клетках [12].
Кроме того, полученные нами данные указывают на то, что изучение особенностей потребления глюкозы злокачественными клетками КМ in vitro у больных ХМЛ может оказать существенную помощь в поиске направленных эффективных препаратов, пригодных для лечения злокачественных заболеваний.
Литература
1. Gottschalk, S. Imatinib (STI571)-mediated changes in glucose metabolism in human leukemia BCR-ABL-positive cells / S. Gottschalk [et al.] // Clin Cancer Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 66616668.
2. Baccarani, M. Evolving concepts in the management of chronic myeloid leukemia: Recommendations from an expert panel on behalf of the European Leukemia Net / M. Baccarani [et al.] // Blood. - 2006. - Vol.108. - P. 1809-1820.
3. Baccarani, M. Chronic Myeloid Leukemia: An Update of Concepts and Management Recommendations of European Leukemia Net / M. Baccarani [et al.] // J. Clin Oncol. - 2009. -Vol. 27. - P. 6041-6051.
4. Черныш, Н.Ю. Особенности связывания акридин оранжа клетками костного мозга больных множественной миеломой : автореф. дисс. ... канд. мед. наук / Н.Ю. Черныш. - СПб., 2002. -22 с.
5. Зимина, В.А. Особенности апоптотической активности клеток костного мозга у больных не-ходжкинскими злокачественными лимфомами : дисс. ... канд. мед. наук / / В.А. Зимина. - СПб., 2003. - С. 61-62; 78-79.
6. Koppenol, W.H. Otto Warburg’s contributions to current concept of cancer metabolism / W.H. Koppenol, PL. Bounds, C.V. Dang [et al.] // Nat Rev Cancer. - 2001. - Vol.11, № 5. -P. 325-337.
7. Wittig, R. The role of glucose metabolism and glucose-associated signaling in cancer / R. Wittig, J.F. Coy // Perspect Medicin Chem. - 2008. -Vol. 1. - P. 64-82.
8. Kirschner, M.W. The meaning of systems biology / M.W. Kirschner // Cell. - 2005. -Vol. 121, № 4. - P. 503-504.
9. Elstrom, R.L. Akt stimulates aerobic glycolysis in cancer cells / R.L. Elstrom [et al.] // Cancer Res. - 2004. - Vol. 64. - P. 3892-3899.
10. Kroemer G. Mitochondria in cancer // Oncogene. - 2006. - Vol. 25. - P. 4630-4632.
11. Pelicano, H. Glycolysis inhibition for anticancer treatment / H. Pelicano [et al.] // Oncogene. - 2006. - Vol. 25. - P. 4633-4646.
12. Kominsky, D.J. Abnormalities in glucose uptake and metabolism in imatinib-resistant human BCR-ABL positive cells / D.J. Kominsky [et al.] // Clin Cancer Res. - 2009. - Vol. 10. -P. 3442-3450.
13. Haberkorn, U. Glucose transport and apoptosis after gene therapy with HSV thymidine kinase / U. Haberkorn [et al.] // Eur J Nucl Med. - 2001. - Vol. 28. - P. 1690-1696.
14. Giuntoli, S. Glucose availability in hypoxia regulates the selection of chronic myeloid leukemia progenitor subsets with different resistance to Imati-nib-mesylate / S. Giuntoli [et al.] // Haematolo-gica. - 2011. - Vol. 96, № 2. - P. 204-212.
15. Cullinane, C. An in vivo tumor model exploiting metabolic response as a biomarker for targeted drug development / C. Cullinane [et al.] // Cancer Res. - 2005. - Vol. 65, № 21. -P. 9633-9636.
16. Giuntoli, S. Hypoxia suppresses BCR/Abl and selects Imatinib-insensitive progenitors within clonal CML population / S. Giuntoli [et al.] // Leukemia. - 2006. - Vol. 20, № 7. - P.1291-1293.
17. Barnes, K. Chronic myeloid leukaemia: an investigation into the role of Bcr-Abl induced abnormalities in glucose transport regulation / K. Barnes [et al.] // Oncogene. - 2005. - Vol. 24. -P. 3257-3267.
18. Giuntoli, S. Severe hypoxia defines heterogeneity and selects highly immature progenitors within clonal erythroleukemia cells / S. Giuntoli [et al.] // Stem Cells. - 2007. - Vol. 25, № 5. -P. 1119-1125.
19. Boros, L.G. A metabolic hypothesis of cell growth and death in pancreatic cancer / L.G. Boros [et al.] // Pancreas. - 2002. - Vol. 24. - P. 26-33.
20. Bentley, J. Glucose transport regulation by p210 Bcr-Abl in a chronic myeloid leukaemia model / J. Bentley [et al.] // Br J Haematol. -2001. - Vol. 112, № 1. - P. 212-215.
21. Merz, A.L. Use of nuclear magnetic resonance-based metabolomics in detecting drug resistance in cancer / A.L. Merz, N.J. Serkova // Biomark Med. - 2009. - Vol. 3, № 3. - P. 289-306.
22. Zhao, Y. Mechanisms and methods in glucose metabolism and cell death / Y. Zhao [et al.] // Methods Enzymol. - 2008. - Vol. 442. -P. 439-457.
23. Tarn, C. Therapeutic effect of imatinib in gastrointestinal stromal tumors: AKT signaling
dependent and independent mechanisms / C. Tarn [et al.] // Cancer Res. - 2006. - Vol. 66, № 10. -P. 5477-5486.
24. Rathmell, J.C. Akt-directed glucose metabolism can prevent Bax conformation change and promote growth factor-independent survival / J.C. Rathmell [et al.] // Mol Cell Biol. - 2003. -Vol. 23. - P. 7315-7328.
25. Ward, M.W. Mitochondrial and plasma membrane potential of cultured cerebellar neurons during glutamate-induced necrosis, apoptosis, and tolerance / M.W. Ward [et al.] // J Neurosci. -2007. - Vol. 27. - P. 8238-8249.
26. Zhao, Y. Glycogen synthase kinase 3alpha and 3beta mediate a glucosesensitive antiapoptotic signaling p athway to stabilize Mcl-1 / Y. Zhao [et al.] // Mol Cell Biol. - 2007. - Vol. 27. -P. 4328-4339.
27. Zhou, R. Genotoxic exposure is associated with alterations in glucose uptake and metabolism / Zhou R. [et al.] // Cancer Res. - 2002. -Vol. 62. - P. 3515-3520.
28. Mason, E.F. Aerobic glycolysis suppresses p53 activity to provide selective protection from apoptosis upon loss of growth signals or inhibition of BCR-Abl / E.F. Mason [et al.] // Cancer Res. 2010. - Vol. 70, № 20. - P. 8066-8076.
29. Sattler, U.G. Manipulation of glycolysis in malignant tumors: fantasy or therapy? / U.G. Sattler [et al.] // Curr Med Chem. - 2010. -Vol. 17, № 2. - P. 96-108.
А.В. Козлов
