CC BY
29
© ФРАНЦИЯНЦ Е.М., ГУСЬКОВА Н.К., НЕПОМНЯЩАЯ Е.М., СОРОКИН А.А.
УДК:001.5:612-002.91:616-006.04
ПОТЕНЦИИРУЮЩЕЕ ВЛИЯНИЕ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ НА РОСТ ПЕРЕВИВНЫХ ОПУХОЛЕЙ КРЫС
Е.М. Франциянц, Н.К. Гуськова, Е.М. Непомнящая, А.А. Сорокин
Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, директор -акад. РАН и РАМН Ю.С. Сидоренко, Ростов-на-Дону.
Резюме. Установлена стимуляция пролиферативной активности опухолевых клеток на крысах с перевивным штаммом саркомы С-45 в сочетании с экспериментальной хламидийной инфекцией.
Ключевые слова: саркома С-45, хламидийная инфекция, пролиферация.
Франциянц Елена Михайловна - д.б.н., проф. руководитель гормональной лаборатории ФГУ «РНИОИ Росмедтехнологий»; e-mail: rnioi@list.ru.
Гуськова Наиля Катифовна - к.б.н., руководитель клинической лаборатории ФГУ «РНИОИ Росмедтехнологий», e-mail: rnioi@list.ru.
Непомнящая Евгения Марковна - д.м.н., проф., руководитель патологоанатомического отделения ФГУ «РНИОИ Росмедтехнологий»; e-mail: rnioi@list.ru.
В настоящее время активно обсуждается проблема участия различных инфекционных агентов в промоции и развитии гиперпластических процессов женской половой сферы [4, 8], среди которых одним из наиболее
распространенных признан возбудитель хламидиоза. Проводится аналогия
хламидийной инфекции с вирусом простого герпеса (HSV-2) в отношении частоты распространения инфекций и характером воздействия на инфицированные клетки. Высказано мнение, что хламидии, подобно вирусам, могут иметь отношение к процессам клеточной трансформации [3, 10, 13]. Хламидии также причисляют к кофакторам бактерий, способствующим прогрессированию неопластических процессов [5, 9, 11]. Вместе с тем, ряд авторов ставит под сомнение роль хламидийной инфекции в процессах клеточной трансформации [14]. Малочисленность и противоречивость данных специфичности взаимодействия организма-опухоленосителя с возбудителем хламидиоза, отсутствие объективных данных об особенностях течения злокачественных новообразований на фоне хламидийной инфекции объясняет наш интерес к данной проблеме. Ранее в эксперименте и в клинике нами были показаны изменения параметров иммунного статуса при сочетании злокачественного процесса с хламидийным [3]. В этой связи цель настоящего исследования - изучить морфологические изменения перевивных опухолей, развивающихся на фоне экспериментальной хламидийной инфекции.
Материалы и методы Исследования выполнены на самцах белых нелинейных крыс массой 179-200 г. Индукция опухолевого процесса воспроизводилась путем введения клеток саркомы С-45 под кожу спины дозировано стандартным методом гомогенной взвесью опухолевых клеток в физиологическом растворе (разбавление ткани 1:1). Инфицирование животных осуществляли очищенной хламидийной взвесью Chlamydia trachomatis, штамм Е в клеточной линии МсСоу с титром 106 IFU/мл, полученной роллерным культивированием [2]. Число включений хламидий определяли методом прямой иммунофлюоресценции [6]. Объем вводимой дозы инокулята определялся из расчета 1 мкл на 1 г массы тела [12]. Инфицирование проводили двукратно, чередуя способ введения: интранозально и в половой аппарат. Развитие хламидиоза подтверждалось комплексом лабораторных исследований [12]. С учетом поставленных задач сформировано две группы крыс:
контрольная - животные-опухоленосители С-45 (без инфекционного компонента) - 17 животных;
основная - животные-опухоленосители С-45 с поэтапным введением двух культур - 17 животных.
Для изучения строения развившихся опухолей всех крыс подвергали эвтаназии. Для гистологического исследования брали продольный и поперечный срезы через весь опухолевый узел с окружающими тканями. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине со стандартной проводкой и заливкой в парафин. Гистологическое исследование осуществляли на светооптическом уровне.
В исследуемых группах определяли количественные характеристики общей структуры опухоли: площадь паренхимы, стромы, некрозов с последующим вычислением их процентного соотношения [1]. Подсчитывали индекс повреждения паренхимы (ИП), митотическую активность клеток опухоли, количество опухолевых клеток с дистрофическими изменениями [7].
Результаты морфометрических подсчетов были обработаны статистически по общепринятым методам. Достоверность различий определяли с использованием критерия Стьюдента и считали значимыми при р<0,05.
Результаты и их обсуждение Микроскопически саркома С-45 была представлена в контрольной группе крыс компактно расположенными, преимущественно, полиморфными веретеновидными клетками, окруженными рыхлой соединительнотканной капсулой. В опухолевой ткани диффузно располагались очаги некрозов, сосуды синусоидного типа. Опухолевые клетки складывались в нечетко контурируемые пучки, расположенные в различных направлениях, местами вихреобразно, часто окружая сосуды в виде муфт. Веретеновидные клетки средних размеров имели центрально расположенные ядра, нередко - крупные округлой, овальной или палочковидной формы. Кариоплазма слабо базофильна, гомогенна, с 1-2 средней величины четкими ядрышками. Хроматин
крупнодисперсный, располагался маргинально. Цитоплазма клеток амфофильна.
Отмечалось большое количество правильных и атипичных митозов (рис. 1 а, б). Встречались резко катаплазированные опухолевые клетки, которые достигали больших размеров, были полиморфны и часто многоядерны. Субкапсулярно определялось значительное количество центров роста, состоящих из скоплений низкодифференцированных мелких клеток с резко гиперхромными ядрами и почти незаметным ободком умеренно базофильной цитоплазмы. Все клетки были окружены тонкими прослойками рыхлой волокнистой соединительной ткани. Некробиотические процессы обнаруживали, преимущественно, в центре опухолевого узла, размеры их значительно варьировали.
Бесструктурные участки с явлениями кариорексиса (хроматиновая пыль) были инфильтрированы полиморфноядерными лейкоцитами и небольшой примесью макрофагов и эозинофилов. Участки экстравазатов из эритроцитов встречались независимо от очагов некроза. Рядом с участками некротизированной ткани располагались скопления дистрофически измененных опухолевых клеток, приобретавших форму эпителиоидных клеток с эозинофильной цитоплазмой и вакуолизированным ядром.
В основной группе животных отмечалась выраженная пролиферация опухолевых клеток. Последние характеризовались уменьшением размеров и более компактным расположением. Цитоплазма клеток становилась более базофильной, гомогенной и уменьшенной в объеме. Форма клеток округлялась, увеличивалась по сравнению со значениями в контрольной группе количество митозов, преимущественно, за счет нормальных (рис. 1 в, г).
Количество очагов некрозов также несколько уменьшалось по сравнению с контролем (р<0,05). Обращает внимание значительное увеличение лимфо-гистиоцитарной инфильтрации в рыхлой соединительной ткани, свидетельствующее об активации клеточного звена иммунологической защиты
организма. В этих очагах строма становилась отечной, с кровоизлияниями и резко выраженными дистрофическими изменениями опухолевых клеток (табл.
1, 2). Вследствие отека и кровоизлияний объем стромального компонента уменьшался по сравнению с таковым у животных контрольной группы (р<0,05). Определялись единичные крупные клетки с уродливыми гиперхромными ядрами и атипичными митозами.
Проведенное морфологическое исследование у животных с опухолевым процессом, развившимся на фоне хламидийной инфекции, показало активацию клеточного звена иммунитета макроорганизма, способствующую его усилению. Структурные характеристики саркомы С-45, развившейся на фоне экспериментальной хламидийной инфекции, также являются отражением активации синтетических и пролиферативных процессов опухолевой ткани.
Таким образом, результаты проведенного исследования показали, что хламидийная инфекция способствует опухолевому росту и усиливает пролиферативную активность опухолевых клеток саркомы С-45.
POTENTIATING INFLUENCE OF CHLAMYDIA INFECTION TO TRANSPLANTED-TUMOR GROWTH IN RATS
E. M. Frantziyantz, E. M. Nepomnyashaya, N. K. Guskova, A. A. Sorokin Federal State Institution “Rostov Cancer Research Institute of Russian Medical
Technologies”
Abstract. We found out the stimulation of proliferation activity of tumor cells in rats with strain C-45 transpanled-tumor sarcoma in combination with experimental Chlamydia infection.
Key words: sarcoma C-45, Chlamydia infection, proliferation.
Литература
1. Автандилов Г.Г. Морфология в патологии. - М.: Медицина, 1973. -277 с.
2. Бартенева Н.С., Фуэнтес В., Деева А.В. и др. Индукция тумор-некротического фактора хламидиями // Актуальные микробиологические и клинические проблемы хламидийных инфекций. - М., 1990. - С. 30-32.
3. Гуськова Н.К., Златник Е.Ю., Смирнова Л.А. и др. Показатели клеточного иммунитета как отражение потенцирующего действия экспериментальной хламидийной инфекции на перевивную саркому у крыс // Аллергология и иммунология. - М.: Медицина, 2000. - Т. 1, №1. - С. 215221.
4. Кисина В.И., Новикова У.Г., Михалко О.Е. и др. Роль инфекционных агентов в патологии шейки матки // Рос. онколог. журн. - 2000. - №2. - С. 1824.
5. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий. Руководство для врачей. - СПб., 2000. - 571 с.
6. Кутлин А.Б., Дробышевская Э.И., Шаткин А.А. Получение антихламидийных моноклональных антител // Актуальные микробиологические и клинические проблемы хламидийных инфекций. - М., 1990. - С. 23-25.
7. Лавникова Г.А. Некоторые закономерности лучевого патоморфоза
опухолей человека и их практическое использование // Вестн. АМН СССР. -1976. - №6. - С. 13-19.
8. Шипицына Е.В., Бабкина К.А., Оржесковская Е.А. и др.
Папилломавирусная инфекция: факторы риска цервикальной
неопластической прогрессии // Журн. акушерства и женских болезней. -2004. -Т. ЬШ, вып. 3. - С. 38-45.
9. Anttila T.I. Serological evidence of an association between chlamydial infections and cancer // Acta Universitatis Ouluensis. PhD Thesis. University of Oulu. Finland. - 2000. - P. 572.
10. Koskela P., Anttila T., Bjorge T. Chlamydia trachomatis infection as a risk factor for invasive cervical cancer // Int. J. Cancer. - 2000. - Vol. 85, № 1. - P. 35-39.
11. Paavonen J. Сervical Cancer a Potential Long-Term Sequelae of Chlamydial Infection // Am. J. Obstet. Gynecol. - 2003. - Vol. 189. - Р. 1287- 1292.
12. Pal S., Peterson E.M. de la Maza L.M. New murine model for the study of Chlamydia trachomatis genitourinary tract infections in males // Infection and Immunity. - 2004. - Vol. 72, №7. - P. 4210-4216.
13. Samoff E., Koumans E.N., Markowitz L.E. et al. Association of Chlamydia trachomatis with persistence of high-risk types of human papillomavirus in a cohort of female adolescents // Am. J. Epidemiol. - 2005. -Vol. 162, № 7. - Р. 668-675.
14. Takac I., Gorisek B. The frequency of Chlamydia trachomatis infection in women with intraepithelial neoplasia of the uterine cervix. // Eur. J. Gynaecol. Oncol. - 1998. - Vol.19, №5. - Р. 492-494.
