CC BY
118
Раздел I.
БИОЛОГИЯ СЛОЖНЫХ СИСТЕМ. ФИЗИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ И МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ОРГАНОВ И СИСТЕМ ЧЕЛОВЕКА
УДК 616-003.215; 616.15
ПОСТОЯНСТВО НЕПОСТОЯННОГО В ТЕЗИОГРАММАХ ПРЕПАРАТОВ КРОВИ (К СТАНДАРТИЗАЦИИ ИССЛЕДОВАНИЙ КРИСТАЛЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ)
В.Н. КИДАЛОВ, А.А. ХАДАРЦЕВ, Ш.М. БАГАУТДИНОВ,
А.В. ЧЕЧЕТКИН*
Метод кристаллизации как способ исследования стал развиваться с начала 19 века, когда Т.Е. Ловиц (1804) предложил способ «выветренных налетов солей». Кристаллография определила своим предметом - кристаллы, а специфическим методом - оценку симметрии. Эта наука опиралась на математику, физику и химию. В 20 веке накопились данные об общности ряда законов кристаллизации, свойственных для органического и неорганического мира.
Начались широкие исследования неорганических кристаллических и жидкокристаллических материалов, являющихся упрощенными моделями органического мира [11, 21, 34]. Визуальное исследование и описание свойств кристаллов биологических жидкостей (БЖ) - тезиография в последнее время привлекла внимание биологов и медиков как перспективное направление для выявления и идентификации заболеваний человека, животных и растений [4, 8, 12]. При кристаллизации БЖ реализуются сложные процессы, в числе которых - высокоселективный химический процесс, являющийся проявлением одной из эффективных природных нанотехнологий. Появление и развитие электронно-оптических систем открывает новые возможности оценки кристаллизации БЖ в препаратах-подложках. Для обозначения этого удобно использовать термин - тезиограмма (ТЗГ).
ТЗГ БЖ представляет собой комплексную структуру - биокристаллоиды (или кристаллиты, по определению Финеана [24]). Это химеры из кристаллов и околокристаллической среды, а также собственно кристаллы в препаратах жидких биологических сред, сформировавшихся, например, после дегидратации БЖ вследствие испарения воды [3, 15]. Многокомпонентные БЖ, как и растворы солей в процессе дегидратации претерпевают ряд закономерных изменений по типу информационных паттернов самоорганизации и структурирования. Кристаллизация БЖ является неким ключом изменчивых связей между самими биологическими средами, органами и системами организма [21, 28, 30]. Глубокое изучение механизмов кристаллизации БЖ до сих пор сдерживается отсутствием систематизации и одних и тех же элементов, формирующихся в ТЗГ-препаратах. D медицинской и биологической практике при изучении сыворотки крови людей можно встретить описания основных и дополнительных структур кристаллизации в виде морщин, бляшек, языков, ядер, спиралей и т.д. [2, 11, 27]. Во многих публикациях медицинские и биологические описания кристаллизации БЖ нередко страдает аллегоричностью, тогда как физики и кристаллографы давно пользуются в отношении кристаллизации из раствора установившимися терминами и научными дефинициями [7, 26, 28].
Среди способов кристаллизации БЖ относительно прост и наименее затратен способ кристаллизации из раствора [25, 29]. Фактически это способ системной кристаллографии, т.к. в капле крови и других БЖ имеется сложный солевой и органический компонент [1, 3, 11]. Существует несколько разновидностей этого способа [10, 22]: фоновая ТЗГ используется при нанесении на подложку для предварительной кристаллизации раствора фонового вещества с последующим нанесением биологической жидкости и ее кристаллизацией; постдегидратационная ТЗГ, при которой вначале на подложке дегидратируется образец БЖ, а затем на этот препарат наносится раствор другого вещества (реагента, красителя, раствора антител, флуорохромов и т.д.) При этом кристаллизация БЖ и ее составных частей имеют существенные особенности по сравнению с кристаллизацией солевых растворов, поскольку основные эффекты, наблюдаемые при
* Санкт-Петербург, Тула
высыхании биологических жидкостей, типичны для коллоидных растворов [5, 14, 23]. Обладающая жидкокристаллическими свойствами плазма крови при кристаллизации ведет себя подобно жидкому раствору, который в отличие от чистой жидкости не отвердевает целиком при постоянной температуре. Испарение воды с поверхности препарата сопровождается охлаждением жидкости капли до некой температуры, называемой температурой начала кристаллизации, при которой начинают формироваться первые (аутозатравочные) кристаллы. По мере кристаллизации концентрация раствора в препарате возрастает, а формирование кристаллов последующих порций происходит при более низкой температуре растворителя [22, 30]. Установленным фактом является зависимость характера протекания процесса кристаллизации тезиографических препаратов от парциального давления насыщенного пара растворителя (воды) над раствором [21, 35].
При внедрении в организм и появлении в плазме крови сторонних частиц или частиц аутологичного происхождения внутренняя среда организма реагирует на это изменениями пространственного порядка своих химических связей. Такие изменения носят специфический качественный характер, они имеет определённые количественные пределы. При этом любое изменение физико-химического состояния внутренней среды организма находит своё отражение в специфическом изменении формообразования её структур. Анализ формы образующихся структур используют для определения патологических отклонений в системе и устойчивости физиологических процессов организма, поскольку структура БЖ запечетлевает в себе сжатую информацию о состоянии организма [16, 34]. Однако, не смотря на многочисленные оценки кристаллообразования БЖ при различных заболеваниях и воздействиях на организм внешних факторов [21,
27, 31], исследования ТЗГ цельной крови и ее жидкой части плазмы, а также тромбоконцентратов (ТК) все еще не вышли за рамки экспериментальных. Результаты исследований, которые предлагаются для диагностики заболеваний, также не получили официального признания и широкого распространения вследствие изменчивости тезиографических картин БЖ. Другой причиной медленного внедрения ТЗГ является то, что в ряде выдвинутых гипотез и интерпретаций процесса кристаллизации БЖ, вместе с обоснованными терминами и понятиями («дегидратаци-онная самоорганизация биологических жидкостей»), применяются слабо научно обоснованные дефиниции и гипотезы (гипотеза об «аутоволновых ритмах», «калибровочной синхронизации», «борьбе осмотических и онкотических сил»). Последние гипотезы едва ли могут быть признаны удовлетворительными [22, 33]. Кроме того, поскольку микроскопическая картина пленки (или фации), образующейся при высыхании БЖ, у больных людей существенно отличается от таковой у здоровых, появляются рассуждения об изменениях фаций по реактивному, депрессивному и упорядоченному (с тенденцией к радиальной симметрии) типам [2, 34]. Мы наблюдали чрезвычайную чувствительность процесса самоорганизации БЖ при формировании ТЗГ к факторам внешней среды и к составу кристаллизующейся жидкости [12, 15, 16]. К сожалению, в доступных исследовательских работах практически не встречаются оценки изменений структуры ТЗГ БЖ при смене ритмов дня и ночи, изменениях ритмики выполнения работы индивидом, характера питания, при воздействии на организм холода и высоких температур, различных излучений и т.д.). Также недостаточно изучено значение внутренних (по отношению к организму) факторов: особенности газообмена, водного обмена и обмена других веществ, наличие или отсутствие патологических изменений в регулирующих системах организма и др. Возникла необходимость таких исследований в отношении крови, каждая функция которой обеспечивается естественными природными бионанотехнологиями, в числе которых кристаллизационной очевидно принадлежит немаловажная роль. С помощью таких природных технологий обеспечивается согласованность в работе большого числа типов
клеток, тесное взаимодействие между клетками, межклеточной средой и плазмой крови.
В пределах жидкой ткани, которой является кровь, действуют тесные прямые и обратные связи между функциями, выражающиеся в том, что активация или торможение одной из них сопровождаются изменениями других функций и ультраструк-турными изменениями составных частей крови, включая клеточные элементы. Общепризнано, что кровь наиболее быстро и тонко реагирует на любые физические и химические воздействия со стороны внешней и внутренней сред организма [2, 13]. В условиях мало физиологичного образа жизни современного человека с его гиподинамией, информационными перегрузками, стрессовыми ситуациями, нарушениями эндоэкологии организма реактивность системы крови и ее жидкостного и клеточных компонентов возрастает [21]. Выраженное влияние на структуру ТЗГ крови может оказывать также введение в организм лекарственных и нелекарственных биологически активно действующих веществ. В работе [27] показано, что аскорбат сукцинат, аскор-бат, олигохит сукцинат и др. препараты в экспериментах на крысах улучшают картину фации сыворотки животных с опухолями, по сравнению с неопухолевыми крысами, и приближают ее картину к таковой интактных крыс. При исследовании ТЗГ биологических жидкостей у людей страдающих паразитозами, установлена возможность нормализации тезиокристаллоскопических «паттернов» под влиянием лечения [8]. Эти и многочисленные другие примеры убеждают в том, что исследования ТЗГ крови могут быть перспективными для решения общебиологических задач сохранения здоровья человека, профилактики актуальных заболеваний и их лечения. Однако, как правило, во многих исследованиях, статьях и диссертациях не исключены методологические недоговоренности и недостатки, которые, сдерживают включение ТЗГ-исследований в стандарты Минздравсоцразвития по обследованию больных. Метод кристаллографического исследования для оценки канцероматозного процесса имеет недостатком тот факт, что в данном случае исследуется непосредственно материальная субстанция опухоли или кровь больного, а истинную картину канцероматозного процесса выявить невозможно, хотя последний и проявляется в первую очередь на информационном, а не на физическом уровне [10, 27].
Такое состояние кристаллографических исследований БЖ для диагностических целей привело к тому, что ТЗГ крови, мочи, слюны, синовиальной жидкости, ликвора, спермы, сока простаты, конденсата выдыхаемого из легких воздуха и т.д. более часто (и не всегда оправданно) используются преимущественно в частных лабораториях и лечебных учреждениях.
Материалы, методы исследований и аппаратура. Работа проводилась при исследовании 68 образцов крови практически здоровых мужчин среднего возраста (доноров крови, тромбоцитов), а также анализировалась кровь небольшой группы больных мужчин терапевтического профиля (10 чел). Детали методов, используемых для постановки и оценки ТЗГ, отражены в публикациях [15, 16, 21]. При оценке БЖ учитывалось, что они, как и растворы солей в процессе дегидратации претерпевают ряд закономерных изменений, носящих характер информационных паттернов самоорганизации и структурирования с формированием в ТЗГ любой БЖ своеобразного «кристаллографического портрета». В процессе кристаллизации БЖ сферический сегмент формы капли сохраняется и долго не исчезает в процессе высыхания, поскольку является энергетически наиболее выгодной при отсутствии центровой кристаллизации (или пиннинга). В препаратах БЖ круглой формы в структуре ТЗГ [13] выделялись три основные зоны: краевая (периферийная), средняя и центральная. Они отличаются по условиям формирования ТЗГ [12]. При постановке ТЗГ-теста на стекле частичное обезвоживание органических составных частей плазмы крови приводит к формированию в первой и второй зонах препарата продольно вытянутых биокристаллоидных структур из биомолекул, которым в жидком состоянии присущи свойства жидких кристаллов. После испарения основной части свободной воды начинает активизироваться процесс «борьбы субстратов» за связанную воду и воду, заключенную в замкнутых микропространствах формирующихся линейных элементов ТЗГ. В результате, вытянутые по продольной оси белково-липидно-солевые молекулярные ассоциаты раскалываются в продольном направлении. Ретракция этих структур в дальнейшем приводит к приобретению ими вида «каналов» или «трещин».
В препаратах разных кристаллизующихся жидких сред выделялись общие и особые черты (рис. 1). Среди них к наиболее устойчиво встречающимся элементам отнесены наличие концентрического кругового пояска (полосы) по краю ТЗГ. Появление этой структуры отражает характер начальной кристаллизации жидкости. Ход последующей кристаллизации запечатлевается в упомянутых трехзональной структуре ТЗГ, в формировании линейных биокристаллоидных протяженныхструктур - кристаллитов 1-3 порядка (К1, К2, К3) и участков фации БЖ, заключенных между этими структурами (полигональные пластины - ПП), а также в появлении в локальных участках фации вторичных кристаллов и биокристаллоидов. В дублирующих препаратах ТЗГ обращали внимание на форму и характер расположения ранних, обычно вытянутых дугообразно кристаллоидных структур - К1
Рис. 1. Устойчивые элементы ТЗГ БЖ (световая микроскопия, ув. х. 15 - х 25). А - краевая зона кольцевой ТЗГ; 1 - светлая краевая полоса ТЗГ плазмы крови, 2 - формирующиеся ранние биокристаллоиды краевой зоны - К1 ; Б : 3 - центростремительные биокристаллоиды 2-го порядка -К 2, 4 - биокристаллоиды 3-го порядка - К3, 5 - участок фации, заключенный между К1 и К2- полигональная пластина (ПП), 6 - центральная зона тезиографического препарата - схождение кристаллитов в одну точку
Число ПП на протяжении К2 характеризует степень ячеистости ТЗГ. Этот показатель подсчитывается от периферии к центру по нескольким радиусам препарата и вычисляется средняя величина на препарат. Предположительно она характеризует наличие белков со слабой способностью к удержанию гидратной оболочки и связанной воды, т. е., отражает их различие по степени гидрофильности. Число ПП может отражать присутствие липофильных компонентов в водном растворе биосреды.
К лабильным и высокоизменчивым элементам радиальнокольцевых ТЗГ БЖ (рис. 2) нами отнесен следующий ряд показателей: число линейных биокристаллоидов и характер фрактали-зации (дихотомии) этих структур-химер, способных к продольному растрескованию; характер расположения К2 и. КЗ в центре препарата; вид поздних кристаллов солей и пескообразных включений и величину занимаемых ими площадей в препарате либо в выбранном числе ПП; скопления клеточных элементов в ПП различных зон ТЗГ. Оценка последних актуальна при исследовании цельной крови и тромбоконцентратов; выраженность; выраженность краевой, промежуточной и центральной зон ТЗГ; ден-ситометрическая оценка равномерности и плотности фации в этих же 3-х зонах ТЗГ; коэффициент поясности (число циркулярных компонентов в ТЗГ, фиксирующий характер распространения волн Жаботинского в период кристаллизации).
Ш ОК
ГДЕ Рис. 2. Лабильные элементы радиально-кольцевых ТЗГ (световая микроскопия, ув. х 15 -х40). А - различия по направлению, числу и величине К1; Б - изменения по конфигурации и площади полигональных пластин; В -изменение характера слияния кристаллитов в центре препарата; Г - изменение формы, размеров и характера фрактализации К2 и К3. Д - появление дополнительных включений, изменение структуры и содержимого ПП, изменения их формы.Е - появление в ТЗГ кристаллов различных солей и изменения их внутренней структуры
Часть исследований микропрепаратов тезиограмм биологических жидкостей цельной крови, сыворотки или плазмы, а также жидкой взвеси стандартно приготовленного тромбоконцентрата (ТК) здоровых доноров проводили в динамике методом кри-
а
сталлоскопии в дневном и УФ-свете', на тщательно обезжиренн-ное, промытое и просушенное предметное стекло наносили полученные образцы биологического материала в стандартных объемах - 0,05-0,02-0,01 мл. Для получения ТЗГ при 18-20°С, влажности 60-80% производилась дегидратация микропрепарата до появления начальной ТЗГ, как правило, не позже, чем через 30 мин после формирования тезиографической структуры.
В ряде экспериментов использовался модифицированный метод кристаллизации в потоке теплого воздуха сверху с расстояния 30 см при температуре 40-50°С и влажности 38-40%). При дублировании препаратов все парные ТЗГ располагались на одних и тех же тщательно обезжиренных, расположенных горизонтально предметных стеклах. Для визуализации ТЗГ использовалась электронно-оптическая система структурного светового и люминесцентного анализа исследуемых объектов, позволившая сформировать базу электронных файлов тезиограмм БЖ (рис.3).
выверка горизонтальности основной плоскости препарата по осям х и у по отношению к сторонам света (рис. 5).
Рис. 3. Электронно-оптическая система для структурного анализа ТЗГ БЖ на основе инвертированного люминесцентного микроскопа.
При оценке позднего постдегидратационного периода ТЗГ (при ее «старении») оценивалась степень деструкции фации в определенном промежутке времени, при этом, подсчитывалось число выкрошившихся ПП, косвенно отражающая скорость самоорганизации и дегидратации препарата. Это показатель является результирующей влияния внешних и внутренних условий, важных для кристаллогенеза БЖ. Отмечались характер и скорость деструкции дендритных кристаллов, скорость образования и структуризации кристаллов солей. Исходя из факта широкой представленности паттернов «золотой» пропорции и чисел ряда Фибоначчи в естественных неживых и живых системах, включая организм человека, и его систему крови проводился анализ сходства показателей ТЗГ с числами ряда Фибоначчи [17] . Для статистической оценки результатов применяли непараметрические критерии и и Q [6].
Результаты. С физических позиций начальный препарат ТЗГ может быть с достаточной степенью точности описан сегментом шара, в котором основание или срез сегмента контактирует с подложкой (например, с предметным стеклом). В воздушной среде капля жидкости, помещенная на стекло, особенно кровь и ее плазма, сразу превращается в особую динамичную систему, ритмично и быстро меняющуюся в течение короткого времени. После испарения большей части воды и формирования первичной ТЗГ, тот же препарат затем претерпевает растянутые по времени изменения, в основе которых лежат процессы окончательного формирования и старения кристаллов. Вследствие этого фактор времени при оценке ТЗГ следует считать принципиально значимым. На результаты исследования существенное влияние могут оказывать и ряд других факторов, в их числе:
а) Влияние настройки оптической системы микроскопа. При исследовании влияния внешних факторов на процесс кристаллизации во время анализа опытного и контрольного образца, чтобы не допустить оценочных ошибок и ошибок в измерениях, следует добиваться фиксации результатов на одной и той же глубине фокусирования (рис. 4).
В
Рис. 4. Изменение видеокартины краевой зоны ТЗГ ТК при изменении глубины резкости (от перефокусировки - А, оптимальной фокусировки -Б, до недофокусировки - В и Г)
При необходимо использовать разовые прецизионные пипетки и подложки (стекла). В случае смешения следов сывороток или ТК разных проб, ТЗГ может резко измениться вследствие иммунного взаимодействия [29]. Обязательно должна проведена
А Б
Рис. 5.Изменение характера краевой кристаллизации сыворотки крви и эритроцитарной фильтрованной взвеси при несоблюдении горизонтальности расположения препарата. А - в присутствии солей хрома:1 - увеличение ширины и плотности краевой полоски на препарате справа; 2 - уменьшение ширины и плотности краевой полоски ТЗГ на препарате слева. Б -неравномерность кристаллизации центральной зоны ТЗГ-препарата эрит-роцитарной фильтрованной взвеси донора
Выделение твердой фазы и снижение концентрации веществ в формирующейся ТЗГ при кристаллизации может идти двумя путями: образованием новых кристаллических зародышей или отложением твердой фазы на поверхности уже имеющихся кристаллов с взаимным проникновением одних растущих дендритных кристаллов в другие дендриты. Это предъявляет требование тщательной обработки подложки для ТЗГ-теста. Начавшийся на возникших зародышах процесс кристаллизации идет неравномерно по времени (волнообразно), то замедляясь, то, через некоторое время, ускоряясь до лавинообразной кристаллизации. При этом быстро растущая верхушечная часть зародыша растет в зоне наибольшей локальной концентрации растворенных ионов и присутствующих в среде биологических молекул. Одновременно наблюдается отток вещества из толщи растворителя к периферии.
б) Учет индивидуальных особенностей биообъекта при исследовании ТЗГ группы людей или животных. Ранее были установлены видовые особенности ТЗГ биожидкостей животных [13]. Однако ТЗГ разных здоровых животных и людей полученные в одинаковых условиях кристаллизации также могут иметь индивидуальные структурно-морфологические отличия (рис. 6).
А Б В Г
Рис. 6. Различия во фрактализации протяженных кристаллитов - К2 и К3 и в формировании полигональных пластин фаций средней зоны ТЗГ ТК. А -К2, К3 и ПП у донора №.217; Б - то же у донора № 218; В - кристаллизация центральной зоны ТЗГ №217; Г - центральная зона ТЗГ № 218
в) Влияние объема и формы препарата (капли БЖ) на структуру ТЗГ. Объем капли обусловливает скорость формирования ТЗГ в обратной пропорции. Испарение жидкости в препарате характеризуется движением межфазовой границы раствор-воздух и раствор-подложка, постепенным уменьшением высоты капли и повышением концентрации ее содержимого. В этот период в ТЗГ крови, ТК или другой БЖ нарастает онкотическое и осмотическое давление и возникает существенное изменение структуры и функции клеток. В частности, часть эритроцитов подвергается лизису или локальному диерезу. Кроме того, начинается осмотическая активация тромбоцитов. Когда объем капли уменьшается настолько, что концентрация достигает предела насыщения, начинается формирование кристаллов и кристаллоподобных, более несолевых, структур-химер (кристаллитов). Поскольку центральная по отношению к капле область подложки остается жидкой или жидкокристаллической долгое время, процесс кристаллизации здесь протекает дольше, чем на периферии и в иных условиях. В препаратах цельной крови или ТК к его центру сдвигается основная масса клеток и выражено гидрофильных молекул. Поэтому в центральных областях слой осажденного вещества толще, чем по краям, а структура центра препарата морфологически отличается от средней и краевой зоны.
Кристаллизация БЖ на подложке может объясняться рядом механизмов, однако наиболее весомыми являются следующие механизмы [23, 30]: механизм диффузионно-ограниченной агрегации, когда в зоне локальной флуктуации концентрации идет образование зародыша, а затем развивается фрактальный кластер, размер которого зависит от скорости кристаллизации в растворе,
времени высыхания этой области и от взаимодействия с подложкой; центрованный механизм кристаллизации веществ, не образующих ионы в растворе (тиомочевина и др.). Для таких малоактивных в растворе молекул для начала кристаллизации (образования зародышей) обязательно возникновение пресыщения раствора,возможного на поздней стадии кристаллизации, когда большая часть растворителя испаряется. В крови, сыворотке и ТК возможно параллельное развитие этих и других процессов.
Рис. 7. Особенности кристаллизации хлорида натрия в зависимости от объема препарата. А, Б, В - последовательная кристаллизация изотонического раствора натрия хлорида малая по объему капля (0,005 мл), Г, Д, Ж, З - то же, в препарате большего объема капли (0,01 мл); Е - образование крупных кристаллов соли на периферии этого же препарата, К - то же в его средней зоне.
ТЗГ-препарат сразу после нанесения капли на подложку имеет куполообразный вид. В его приповерхностных областях на границе жидкость - воздух, особенно в краевой области капли, формируется зона, обогащенная растворенным веществом. На подложке первые зародыши кристаллов (биокристаллоидов, кристаллитов) появляются именно в краевой зоне, по периферии препарата. Это связано как с локальным пресыщением раствора в приграничной области, так и с адсорбцией растворенного вещества подложкой. В малых по объему препаратах кристаллизация может начаться по мере испарения растворителя, и в то время, когда раствор еще не достиг состояния пресыщения во всей капле. Это происходит за счет локальных (волновых) флуктуаций концентрации веществ в периферической зоне ТЗГ, а также за счет таких флуктуаций на дефектах рельефа подложки. Приводим наблюдение особенностей кристаллизации хлорида натрия в зависимости от объема препарата (рис. 7). В обычных условиях формирование ТЗГ из малой капли (до 0,005 мл) происходит в течение нескольких (не более 10) минут, препараты большого объема кристаллизуется значительно дольше (30 мин и более).
г) Влияние формы капли на подложке на характер тэ-лементов ТЗГ. При постановке ТЗГ-теста следует добиваться однотипной конфигурации препарата. Иначе формирующиеся ТЗГ-элементы могут приобретать существенные отличия (рис. 8).
Рис. 8. Препараты ТК одного объема в форме круга (А) и эллипса (Б). А: К2 загибаются и не достигают центра препарата; Б : К2 доходят до центра препарата, а их слияние напоминает структуру забора. Одновременно изменяется ширина и форма ПП.
д) Изменения ТЗГ при изменении химического состава
БЖ. При дополнительном внесении в препарат БЖ растворов солей структура препарата претерпевает изменения. Степень этих изменений зависит от соотношения: раствор соли — биологическая жидкость. При введении в БЖ различных слабо концентрированных солей (до достижения 1% концентрации р-ра), как и при формировании ТЗГ БЖ на подложке с предварительной кристаллизацией на ней соли, изменяется характер ТЗГ-картины. При этом выявляется закономерность: если концентрация и гидрофильность вносимой или «внешней» соли невысокая, то в ТЗГ на фоне дополнительных «внешних» солевых кристаллов преобладают характерные элементы ТЗГ плазмы или сыворотки
крови (либо иной БЖ). Если же концентрация и гидрофильность «внешней» соли выше, чем плазмы, то в ТЗГ преобладают элементы ТЗГ внесенной извне соли (рис. 9). Тезиограмма ТК с мурексидом сохраняет типичную для чистого ТК структуру, хотя добавление химиката изменяет расположение, углы бифуркаций и толщину линейных биокристаллоидов (А и Б). Появление кристаллов мурексида в центральной зоне ТЗГ явно не влияет на характер кристаллизации ТК в этой зоне (В). Добавление родамина к ТК в той же пропорции меняет структуру ТЗГ в краевой и средней зонах препарата (Г). Сама жидкая среда ТК ускоряет образование кристаллов родамина в центральной зоне тезио-граммы (Д), вероятно, за счет собственных исходных жидкокристаллических свойств среды.
Рис. 9. ТЗГ тромбоконцентрата с добавлением до 0,1% от массы ТК раствора мурексида (А, Б, В) и родамина (Г, Д)
Формирование концентрической трехзональной ТЗГ не означает полного прекращения процесса кристаллизации. Это лишь окончание первой быстрой фазы динамичного процесса самоорганизации, характеризующееся удалением из препарата большей части жидкости. В последующих замедленных фазах изменения ТЗГ в биокристаллоидах и кристаллах идут процессы освобождения из их каналоподобных структур (К1, К2 , К3) остатков воды и газов, достраивания граней кристаллов, затем наблюдается растрескивание вдоль продольной оси кристаллитов, а также распад некоторых кристаллов сложного состава.
Цейтраферная съемка формирования ТЗГ-картины, наглядно демонстрирует, что кристаллизация БЖ представляет собой неравномерно-динамичный процесс, начинающийся с формирования линейных и дендритных (фрактальных) кристаллоидных образований и заканчивающийся формированием кристаллов и разрушением препарата вследствие осыпания сформировавшихся элементов. Сказанное выше свидетельствует, что фактор времени чрезвычайно важен при оценке ТЗГ-теста.
Влияние времени просмотра препарата и объема кристаллизующейся жидкости на результат ТЗГ иллюстрируют наблюдения в одни и те же временные интервалы за динамикой изменения ТЗГ ТК. При росте разницы в объемах препаратов уменьшается скорость формирования ТЗГ (1 фаза). При этом может сохраняться (рис. 10) схожесть ТЗГ ТК в крупных элементах, при одновременном появлении отличий в мелких деталях.
Рис 10. Временная зависимость тезиографической картины формирующейся ТЗГ ТК. А - ТЗГ тромбоконцентрата сразу после нанесения капли объемом 0,02 мл на подложку; Б - то же через 5 мин; В - через 10 мин; Г - через 15 мин; Д - через 20 мин; Е - через 35 мин.
е) Воспроизводимость результатов. При выдаче заключений в любом тезиографическом исследовании всегда возникает вопрос о повторяемости результатов. Чтобы результаты ТЗГ-теста были воспроизводимы, следует при их оценке не выбирать изменчивые показатели, а делать упор на более стабильные и регулярно проявляющиеся признаки и показатели. Это иллюстрирует наблюдение воспроизводимости результатов тезиографии ТК (рис. 11) в препаратах среднего объема (0,0 1 мл).
Рис. 110. Воспроизводимость ТЗГ в параллельно поставленных препаратах одного и того же ТК здорового донора (представлены краевые, средние и частично центральные зоны препаратов)
При исследовании 20 однотипных препаратов установлено, что для каждого из них характерно наличие узкой краевой полосы, арочный характер К1, центростремительный характер К2, а также и широкая центральная зона сетчатого типа со скоплением большого количества тромбоцитов. В такой выражено структурированной ТЗГ наиболее легким для подсчета показателем оказалось число полигональных пластин фации плазмы (ПП) между двумя соседним и центростемительными К2 (табл.).
Таблица
Результаты анализа 20 дубль-препаратов ТЗГ здорового донора объемом 0, 1 мкл
Показатель ТК х -10-1 мм Числа ряда Фибоначчи Разница между х ТК и числом Фибоначчи
Ширина светлой краевой полосы, мкм 2,2 ±0.03 2 0,2
Ширина краевой зоны, ограниченная арочными К1, мкм 3,12±0.03 3 0,12
Ширина средней зоны, в которой формируются К2, мкм 20,7±3 21 0,3
Ширина центральной сетчатой зоны ТЗГ, мкм 36,0 + 2,2 34 2,0
Число полигональных пластин между двумя соседними К2 в среднем составляло 8 (Я=6-10). Эти данные позволяют полагать, что при формировании ТЗГ ТК выявляется формирование гармоничного паттерна, оперирующего числами ряда Фибоначчи.
Кристаллизация БЖ привлекает внимание ученых разных специальностей. В динамике кристаллизации БЖ важное значение имеют два процесса: 1 - адсорбционный процесс, определяющий рост кристаллов, 2 - диффузионный процесс (молекулярная диффузия, режимы естественной и /или вынужденной конвекции), обеспечивающий массоперенос к растущему кристаллу, сопровождающийся рассеянием теплоты кристаллизаци-ии. Для получения сравниваемых и воспроизводимых результатов при постановке ТЗГ-теста следует придерживаться самых возможно точных правил приготовления и формирования препаратов. При этом необходимо иметь в виду существенные различия в формировании ТЗГ из капель малого и большого объемов.
В малых по объему и площади препаратах существенно снижается число случайных флуктуаций контролируемых параметров, и наоборот, повышается взаимная обусловленность поведения частей и элементов ТЗГ, поскольку в их формировании роль капиллярных сил и поверхностного натяжения становится ключевой. Высокая скорость высыхания микрокапли по сравнению с раствором той же концентрации в макрообъеме приводит к появлению выраженной неравновесности системы в процессе дегидратации, и в то же время к быстрому (почти мгновенному) пресыщению раствора. Быстрая кристаллизация крови обеспечивает значительно меньшие изменения в живых клетках БЖ. Большие по объему и площади капли (объемом около 50 мкл и более) в нормальных условиях могут кристаллизоваться в течение десятков минут, они представляют собой иные, более неравновесные системы, обеспечивающие новые варианты кристаллизации веществ по сравнению с каплями меньших объемов. В зависимости от свойств подложки получившаяся капля может быть как гидрофильного (малые краевые углы, большое растекание по подложке), так и гидрофобного типа (большие краевые углы, малое растекание), следовательно, выбор подлоржки для ТЗГ-теста также имеет значение. Исследования кристаллизации
БЖ позволяют заключить [22, 33], что различия в ТЗГ БЖ не надо объяснять «аутоволновыми ритмами», «калибровочной синхронизацией» (ранние гипотезы Шатохиной С.Н. и др.), поскольку эти объяснения лишь внешне логичны. Процессу кристаллизации из раствора ближе модель, описывающая влияние диффузии на процесс пространственного перераспределения компонентов БЖ в методе дегидратации (процесс аутофореза).
Как известно [11, 26, 36], в процессе кристаллизации из раствора происходят изменения всех пяти проявляющихся в кристаллах связей (ковалентных, ионных, металлических, водородных, вандерваальсовских). Эти изменения проходят в условиях поступательных и колебательных движений молекул при формировании ТЗГ с постепенным уменьшением процентного отношения поступательного и увеличением доли колебательных движений, которые в кристаллах становятся преобладающими. За счет упорядочения частиц и компенсации химической связи, а также за счет перемешивания частиц из-за теплового движения в формирующемся препарате происходит снижение свободной энергии. При этом сложность состава кристаллизующихся БЖ позволяет формироваться кристаллам ТЗГ, в которых определяются точечные, одномерные, двух и трехмерные дефекты.
Очевидно существенное влияние на формирование ТЗГ-картин препаратов БЖ относительной влажности воздуха, так как испарение капли представляет собой диффузионный процесс перехода молекул поверхности жидкости в воздух, т.е. переход в пар кристаллизующейся жидкости. До тех пор, пока объем жидкой фазы уменьшается, а парциальное давление пара над каплей меньше давления насыщенного пара при данной температуре может идти формирование ТЗГ. Поскольку в БЖ растворителем является вода, то скорость испарения ограничивается относительной влажностью воздуха. В процессе формирования ТЗГ БЖ экспериментатор наблюдает динамические изменения захватывающие три классических зоны изменения концентрации: лабильную, метастабильную и область насыщения раствора, при этом движущей силой кристаллизации, очевидно, является степень отклонения кристаллизующейся БЖ от равновесия. Градиент концентраций играет менее значительную роль в отношении диффузии, нежели химический потенциал, зависящий от температуры (явление термодиффузии — COPE). В таких поликомпо-нентных системах, как БЖ, химический потенциал является функцией температуры, давления и концентрации и существенно зависит от наложения гравитационного, электрического и других внешних полей. Процесс формирования ТЗГ идет в сторону уменьшения химического потенциала системы (уменьшения ее свободной энергии), вплоть до выравнивания химических потенциалов [28]. Частицы из раствора при формировании ТЗГ оказываются в сфере электрических сил поверхностных частиц формирующегося кристалла. Частица из раствора притягивается к поверхности кристалла и присоединяется к ней, либо флуктуирует и мигрирует по поверхности. Такие частицы могут десорбироваться, и в этот период кристалл не растет. Ионным частицам энергетически выгодно присоединяться к вершине или излому растущего кристалла, ибо на гладкой плоскости кристалла активнее и, менее энергетически затратно протекают процессы десорбции. При большом пресыщении появление на кристалле дислокации вызывает бурный рост кристалла именно в этом направлении. Очевидно, так формируются ветви дендритов.
Сохранность в препаратах ТЗГ части воды можно объяснить известным кристаллографам фактом плотной адсорбции молекул растворителя на гранях в виде «шубы». В зоне выраженного пресыщения при наличии сформировавшихся кристаллов возможна электрокристаллизация на бездислокационных гранях кристаллов. Полиморфизм кристаллов ТЗГ БЖ можно объяснить и тем, что адсорбция на поверхность кристалла той или иной примеси (даже в ничтожных концентрациях в среде) способно специфически изменить рост граней и облик (скульптуру) кристалла. При этом проявляется закономерность Панета: на кристалл наиболее хорошо адсорбируются те ионы, которые образуют с ионами кристалла наименее растворимое соединение. Нечетное количество электронов в молекуле (часто у красителей) также обеспечивает повышенную адсорбционную способность. Отсюда становится понятным влияние рН среды на характер кристаллизации БЖ. Кроме того, наличие в БЖ аномально подвижных ионов Н+ и ОН- способно существенно увеличивать скорость диффузии. Если в процессе кристаллизации БЖ протекает химическая реакция, то кристаллизация может протекать в
условиях встречной диффузии веществ, а это может вести к формированию веществ с существенно различающейся растворимостью и скоростью кристаллизации. В БЖ с примесью клеток (эритромасса, тромбоконцентрат и др.) при их плотном расположении может изменяться величина диэлектрической постоянной воды, что будет влиять на кристаллизацию: возможно проявление правила Palmet (1952): диэлектрическая постоянная воды при комнатной температуре ~80, а между пластинами пленок она может снижаться до 8 раз, что ведет к возникновению упорядоченности молекул воды, как у льда.
ТЗГ изменяется с изменением состава БЖ. В плазме крови, помимо различных солей металлов, растворенных газов (углекислый газ, кислород, азот, водород), неметаллов (сера, фосфор, йод), других микро- и макроэлементов, содержится большое количество веществ, имеющих свойства жидких кристаллов. Эти вещества представлены альбумином и глобулинами, белками свертывающей системы, липопротеидами, металлопротеинами, фосфопротеинами, хромопротеинами гликопротеинами, нуклео-протеинами и т. п. Вся эта группа веществ обеспечивают быструю структуризацию кристаллизующейся БЖ. Внешняя симметрия формирующихся кристаллов ТЗГ может выражено зависеть от диффузионных процессов, и не соответствовать симметрии структуры этих кристаллов. Здесь проявляется принцип Кюри, согласно которому объект сохраняет только те элементы своей собственной симметрии, которая совпадает с элементами симметрии среды. Вместе с тем от наличия и состава примесей зависит характер излома граней кристалла и общий характер кристаллизации (явление гетерометрии). Обычно белки плазмы связаны с ионами, токсичными в свободном состоянии (железо, медь). Такая связь обеспечивает их безопасный перенос к органам, где они используются в процессах биосинтеза [3, 18]. В результате обмена веществ, в плазме крови всегда в том или ином количестве присутствуют продукты распада и денатурации не только белков собственно крови, но и тканевые продукты распада коллагена, фиброина, фосфопротеины, хромопротеины и др. Количество этих продуктов может увеличиваться при воздействии на организм различных физических, химических и биологических (микробных) факторов [2, 12, 16, 20, 22]. На характер формирования кристаллов обязательно существенное влияние оказывает гравитация. Известен эксперимент отечественных ученых в космосе по кристаллизации алюмокалиевых квасцов из водного раствора (эксперимент «Кристалл») с затравкой, которая вводилась в раствор. Установлено, что полученные в космосе образцы по внешнему виду отличаются от земных аналогов; наиболее характерным отличием было наличие значительного количества газожидкостных включений. Гравитация используется в известном способе ускорения кристаллизации с помощью центрифуг.
Процесс формирования ТЗГ из высыхающей микрокапли оперирует уникальной информацией о ходе нестационарной кристаллизации, начинающейся на наноуровне в условиях появления пересыщенного раствора и появления порядка, вначале всего лишь в расположении нескольких атомов. При методически одинаковых условиях проведения тезиогоафического теста на картине ТЗГ не могут не сказаться сложные биохимические изменения внутренних жидких сред организма. Щербатюк Т.Г. и соавт. (2005) подтвердила наши наблюдения [13, 15], что в ТЗГ БЖ здоровых животных и человека краевая зона закономерно характеризуется большим числом аркообразных и радиальных прямых элементов (К1 и К 2 ), а в промежуточной и центральной зонах препарата наблюдаются дендритные и аморфные отложне-ния. В случаях физиологических и патологических изменений в организме, сопровождающихся отклонениями от нормы биохимических констант внутренней среды, регистрируются существенные изменения процессов самоорганизации БЖ. Так, при развитии опухоли в организме, в краевых зонах ТЗГ плазмы крови выявляется большое число прямых и аркообразных трещин и игольчатых кристаллов, стирается четкость картины кристаллизации в средней и центральной зонах ТЗГ [27]. Изменения в ТЗГ цельной крови (тест Болена) нами выявлялись у людей со сниженным и повышенным по сравнению с нормой числом эритроцитов. Появление во внутренней среде организма «непривычных» веществ, введенных извне или образовавшихся в организме при заболевании либо стимулирует, либо замедляет кристаллизацию БЖ. Смолы при их введении в малой концентрации в кристаллизующиеся растворы могут тормозить, образование зародышей кристаллов.
Установленный в настоящих и других исследованиях ряд технологических требований к проведению тезиографического теста в зависимости от целей исследования может расширяться и ужесточаться, особенно, если речь будет идти об исследовании или трансформации природных нанотехнологий самоорганизации кристаллов БЖ. Для того чтобы научиться управлять этими процессами необходимо в ближайшее время решить вопрос об автоматизации микродозирования рабочих объемов БЖ, создании автоматически задаваемых и поддерживаемых режимов температуры и скорости движения воздуха в камерах, где формируется препарат или на предметном столе микроскопа. На очереди разрешение и уточнение вопросов химических характеристик анализируемых жидкостей, как в исходном состоянии, так и в динамике кристаллизации. Необходим контроль за изменениями рН кристаллизующихся БЖ. Это связано с тем, что основная среда (повышение концентрации щелочи) стимулирует формирование ажурных дендритных образований, при этом кристаллизация (например, тиомочевины) происходит при меньших скоростях роста кристалла. [21]. В отличие от традиционного механизма диффузионно-ограниченной агрегации (собирание кластера около выделенного центра), в этом случае зародыши образуются на окружности с непрерывно уменьшающимся радиусом, а дендритная структура возникает в точках подложки, через которые эти окружности проходят по мере уменьшения радиуса.
Способы и приемы расшифровки ТЗГ также требуют дальнейшего исследования, так как при оценке кристаллограмм возможен учет большого числа самых разнообразных показателей. Наряду с подсчетом числа центров кристаллизации и их размеров, оценкой характера лучей биокристаллоидов (кристаллитов), их толщины, наличия вторичных центров кристаллизации, следует учитывать характер общего рисунка препарата. Анализ центров и зон кристаллизации нецелесообразно проводить с помощью описательных терминов, таких как «бахрома», «ожерелье», «листья» и указания их размеров только по длинни-ку. Существует огромное число «листьев», «бахромы», и т.п., что размывает диагностическую значимость этих понятий. Важно оценить число и характер вихреподобных структур (звезды, восьмерки, свастики и др.), структур фрактального характера, наблюдаемых во всей фации препарата или в определенном числе ПП. Необходим учет числа и размеров часто встречающиеся оформившихся кристаллов солей и неоформленных глыбчатых формирований, наблюдаемых в ТЗГ при интоксикациях организма чужеродными веществами [23].
Перспективна динамическая оценка тезиографии, идущей последовательно от образования гелевой матрицы до кристаллизации с последующими медленными изменениями, деструкцией препарата вплоть до его распада. Определенный интерес может представлять гармонический анализ ТЗГ, поскольку при их формировании из БЖ наблюдаются элементы структуризации в соответствии с паттернами Фибоначчиева ряда чисел [17]. Наблюдения показывают, что формирование ТЗГ реализуется в соответствии с осуществлением самоорганизующейся системой препарата поиска энергетической и функциональной оптимальности. В основу этого поиска Природа положила операции с числами ряда Фибоначчи. Это согласуется с ранними наблюдениями о том, что в системе крови широко представлены проявления «золотой пропорции» или Phi (число Фидия). По подсчетам около 60% сухого веса ТЗГ составляют белки, а их соотношение с другими веществами также приближается к числу Фидия. Наблюдающиеся in vivo паттерны «золотой пропорции» в ритмике двигательных реакций, в ритмах функций головного мозга, сердечной, локомоторной, выделительной и гемоиммунной системы, а также в ТЗГ крови делает очевидным высказанное ранее [9], предположение, что для проведения поиска минимума затрат свободной энергии живая система пользуется числами производными от «золотого сечения». Действующие в живой системе разноуровневые паттерны «золотой пропорции» могут эволюционировать в паттерны самоорганизации БЖ, причем у здоровых эти паттерны близки к «золотым», а при заболеваниях и других экстремальных состояниях самоорганизация БЖ вне организма может избирать и другие паттерны, в которых проявления золотой пропорции (Phi) менее очевидны.
Выводы. В основе формирования ТЗГ БЖ лежат процессы кристаллизации из раствора всей совокупности неорганических и органических ее составных частей, фазовые переходы биополимеров (липидов, белков, нуклеиновых кислот и др.) со свойства-
ми жидких кристаллов (находящихся в плазме крови и в ультра-структурных кооперативных системах - фосфолипидных мембранах, субклеточных биологических структурах), а также кон-формационные изменения биомолекул. Во время роста кристаллов в ТЗГ, в соответствии с правилом Гиббса, кристалл стремится принять равновесную форму, а следовательно формирование его скульптуры подвержено действию ряда внутренних (средовых) и внешних факторов, при этом осуществляется поиск состояния с минимумом затрат свободной энергии. Процесс формирования ТЗГ БЖ имеет быструю фазу формирования концентрической ТЗГ и медленную фазу созревания и старения кристаллов и кристаллитов, с последующим распадом ТЗГ. Раз ТЗГ отражает свойство природной нанотехнологии, проведение тестов по кристаллизации БЖ и оценка ТЗГ требует применения современного оборудования и способов исследования, позволяющих добиваться высокой воспроизводимости результатов. В зависимости от целей работ и уровня анализа могут выбираться разные характеристики и маркеры кристаллизации БЖ из раствора.
Литература
1Андреева Л.В. и др. // Ж. техн. физики.- 2007.- Т. 77, Вып. 203.- С. 5-12 .
2Аюпова А.К. и др. // ВНМТ.- 2005 , Т. XII, № 3-4.- С. 64.
3.Бандел Т., Джонсон П. Кристаллография белка / Пер.с англ.- М.: Мир, 1979.- 620 с.
4.Васильев Е.А., Гамалей Ю.В. // Цитол.- 1975.- Т.17,№ 4.-С. 371-380.
5.Веригин А.Н. Кристаллизация в дисперсных системах.-М., 1986.- 248 с.
6.Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях.-Л.: ВМедА.- 1973.- 147 с.
7.Есин В.О.,Тарабаев Л.П. Механизм и форма роста кристаллов. 1. Рост слоя.- Свердловск, ВИНИТИ.- 1983.- 37 с.
8Жданова О.Б., Мартусевич А. К. // Тез. докл. V научн. конф. Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике».- Сыктывкар, 2006.- С. 148-151.
9.Игнатьев В. В. //Тр. междун. науч. конф «Измерительные и информационные технологии в охране здоровья - МЕТРОМЕД-2007».- СПб.: СПб ГПУ.- С . 86-87.
10.Камакин Н.Ф., Матусевич А.К. // Бюлл. сибирской медицины.- 2005.- Т. 4. Прилож. 1 .- С. 183.
11.Кафаров В.В. Системный анализ процессов химической технологии. Процессы массовой кристаллизации из растворов и газовой фазы.- М.: 1983.- 369 с.
12.Кидалов В.Н., Лысак В.Ф. //Тез. Докл. Конф.- Л.: Лен.обл. совет ВОИР и др.- 1989.- С.54-57.
13.Кидалов В.Н. и др. // Проблемы донозологической гигиенической диагностики: Матер. науч. конф. 23-25 мая 1989 .Л.: Наука.- 1989.- С. 76-77.
14.Кидалов В.Н., Лысак В.Ф. Новый способ оценки тезио-граммы биологических жидкостей в эксперименте // Усовершенствование методов, аппаратуры, применяемых в учебном процессе, медико-биологических исследованиях и клинической практике.- Сб. изобретений и рац. предложений.- Л.:ВМедА.- Вып. 20.1989.- С. 66.
15.Кидалов В. Н. и др. // ВНМТ.- 2004.- Т. XI, №1-2.- С.23.
16.Кидалов В.Н.. Макеев Б.Л. Способ определения индивидуальной магниточувствительности человека. // Усовершенствование методов, аппаратуры, применяемых в учебном процессе, медико-биологических исследованиях и клинической практике.-Сборник изобретений и рац. предложений.- Л. /ВМедА.- Вып.
26.- 1995.- С. 42.
17.Кидалов В. Н. и др. Паттерны крови и код Фибоначчи // Вестник Рос. Военно-медакадемии.- 2007.- №4.- С. 32-33.
18.Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. — М.: Высшая школа, 1998.
19.Общая органическая химия / Под ред. Д. Бартона, У.Д. Оллиса. Нуклеиновые кислоты, аминокислоты, петиды, белки.-М.: Химия, 1986.
20.Львович Я.Е. и др. // ВНМТ.- 2004.- № 1-2.- С. 52.
21Мартюшев Л.М. и др. // Письма в ЖТФ, 1997,.- Т 23, № 13.- С. 1-5.
22. Тарасевич Ю.Ю., Православнова ДМ. // Ж. техн. физики.- 2007.- Т. 77, Вып. 2, С. 17-21.
23.Тахтаев Ф.Х., ТахтаеваД.Ф. Патент № 2108580: Способ определения токсичности крови рыб // Изобретения: Офиц. бюлл. 1998.- № 10, ч. 11.- С. 298.
24. Финеан Дж. Биологические ультраструктуры / Пер. с англ.- М.: Мир.- 1970.- 325 с.
25.Чашечкин Ю.Д. // Морфология биологических жидкостей в диагностике и контроле эффективности лечения: сб. науч. тр.- М., 2001.- С. 5-7.
26.Щеголева Т.Ю. // Биофизика, 1983.- Т.28, Вып.6.- С.937.
27. Щербатюк Т. Г. и др. //
http://meddostavka.ru/inform.php4?II=205.
28.Laudise R.A., Parker R.L. // National Bureau of Standar / Washington DC.- N.Y.- L.: Academic Press., 1970.- 506 p.
29.Якименко Б.И., и др. // Актуальные вопросы иммунодиагностики и иммунорегуляции.- Таллин , 1982.- С. 102-103.
30.Яхно Т.А. и др. // Ж. техн. физики.- 2004.- Т. 74, Вып. 8, С. 100-108.
31.Яхно Т.А. и др. // Ж. техн. физики, 2003.- Т. 73. Вып.4, С. 23-27.
32.top://epizodsspace.testpilot.ru/bibl/getlend/24.html.
'}i'}i.http://mathmod.a$pu.ru/SiU=U&.sub_id=U-
34htp://www.scenar.com.ru/science/sborniki/pdf/shac_8.pdf
35.Galenko P.K., Zhuravlev V.A. Physics of Dendrites. London-Singapore, Word Scientific, 1994.- 180 p.
36.Handbook of Crystal Growth /Ed. by D.T.J Hurle. Nortn-Holknd, 1993 - 1995.- Vol. 1: Fundamentals (Parts A and B); Vol. 2: Bulk Crystal Growth (Parts A and B); Vol. 3: Thin Films and Epitaxy (Parts A and B).
CONSTANCY CHANGEABLE IN TESIOGRAMMS PREPARATIONS OF BLOOD (TO STANDARDIZATION OF RESEARCHES OF CRYSTALLIZATION OF BLOOD)
V.N. KIDALOV, A.A. KHADHARTSEV, SH. BAGAUTDINOV,
A.V. TSHETSHETKIN
Summary
The true work is devoted to consideration of principal causes and the factors rendering nonspecific influence on tesiographic picture of integral blood, its whey, plasma, and also concentrate of plates of blood. Factors obligatory for the account are allocated at carrying out tesiographic tests. The analysis of the constants, few varying elements of tesiogramm, and also its dynamical elements is lead. Influence of some physical, chemical factors and methodical features t of tests for structural features of received preparations is appreciated, factors capable to change a degree of repeatability of tesiographic researches are determined. It is shown, that ignoring of the conditions influencing on tesiographic picture, can lead to occurrence of conclusions hasty and distinguished by small reliability. At use of tesiogramm in the research purposes scrupulous observance of some conditions of carrying out of the experience, capable is essential to affect realization natural nanotechnology of crystallization from a solution.
Key words: tesiographic tests, integral blood
УДК 616.1:612.014.426
ОЦЕНКА ЗАВИСИМОСТИ РЕОЛОГИЧЕСКИХ И ГЕМОСТАТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ОТ ИЗМЕНЕНИЙ ГЕЛИОГЕОФИ-ЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ В СОВРЕМЕННЫХ МЕГАПОЛИСАХ
Е.В. СЕВОСТЬЯНОВА*
Изучены корреляционные связи реологических и гемостатических параметров крови с космо-гелиогеофизическими факторами в фоновых условиях и после 30-минутной экспозиции образцов крови в ги-погеомагнитной среде. Выявлена зависимость реологических и ге-мостатических свойств крови от изменений гелиогеофизической среды.
Геоэкологические и космо-гелиогеофизические факторы оказывают мощное регуляторное влияние на жизнедеятельность человека. [1]. В процессах приспособления организма человека к изменению космо-гелиогеофизической среды первостепенное значение имеет оптимальный уровень кровообращения. Кровообращение в организме определяется функцией сердца, состоянием сосудистого русла и реологическими свойствами крови. Реологические свойства крови оказывают существенное влияние на объемный и линейный кровоток, определяя величины общего периферического сопротивления и минутного объема кровообращения [2]. Одной из важнейших реологических характеристик крови является ее вязкость. На преодоление вязкого сопротивления теряется значительная часть механической энергии, генерируемой сердцем. Повышенная вязкость крови является независи-
* ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск, 630017, ул. ак. Тимакова, 2
