CC BY
52
УДК 619:576.895.1:636.5
ПОСМЕРТНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕЛЬМИНТОЗОВ КУР ВЫЗВАННЫХ CAPILLARIA SPP
МИХАЙЛЮТЕНКО С.Н.,
кандидат ветеринарных наук, старший преподаватель. КЛИМЕНКО А.С.,
кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, Полтавская государственная аграрная академия, г. Полтава.
Реферат. Приведены литературные сведения о существующих методах посмертной диагностики гельминтозов желудочно-кишечного тракта птицы и их недостатки. Предложен усовершенствованный способ посмертной диагностики капилляриоза кур, который включает в себя выявление нематод со следующим определением интенсивности инвазии. Установлено, что фильтрация и добавления раствора бриллиантового зеленого в качестве красителя, разрешает выявить капиллярий при низкой интенсивности инвазии, хорошо прокрашивает внутренние органы нематод, что дает возможность поставить видовой диагноз. Способ прост в выполнении и сокращает время для проведения и постановки диагноза. Морфологическими исследованиями подтверждено паразитирование нематод: Capillaria obsignata (Madsen, 1945), C. caudinflata (Molin, 1858), C. bursata (Freita sand Almeida, 1934) и C. anatis (Schrank, 1790) в кишечнике кур хозяйств Полтавской области.
Ключевые слова: куры, гельминты, кишечник, капиллярии, посмертная диагностика.
IN POSTMORTEM DIAGNOSIS OF HELMINTHIASIS CSD CAUSED CAPILLARIA SPP
MIHAYLYUTENKO S.N.,
Candidate of Veterinary Sciences, Senior Lecturer.
KLIMENKO A.S.,
Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor, Department of Parasitology and veterinary-sanitary examination of Poltava State Agrarian Academy, Poltava.
Еssay. The literature data on existing methods for post-mortem diagnosis of helminth infections of the gastrointestinal tract of poultry and their shortcomings. An improved method of posthumous diag-nostics capillariasis chickens, which includes the identification of nematodes with the following definition intensively-sti invasion. It is found that filtering and adding a solution as brilliant green dye, allows capillaries to identify low intensity of infestation, nematode well paints over the internal organs, which makes it possible to deliver specific diagnosis. The method is simple to implement and reduces the time and for diagnosis. Morphological studies confirmed nematode parasitism: Capillaria obsignata (Madsen, 1945), C. caudinflata (Molin, 1858), C. bursata (Freita sand Almeida, 1934) and C. anatis (Schrank, 1790) in the intestines of chickens farms of Poltava region.
Keywords: chickens, worms, intestines, capillaries, post-mortem diagnosis.
Постановка проблемы. В условиях интенсивного сельскохозяйственного производства, особое внимание сосредоточенно на устранении факторов инвазионного происхождения, которые влияют на здоровье и производительность птицы. Распространение возбудителей инвазионных болезней птицы постоянно изучают ученые разных стран мира. Установлено, что в структуре пара-зитозов домашней и дикой птицы удельный вес занимают гельминтозы. Довольно часто в организме птицы одновременно обнаруживают паразитирование трематод, цестод и нематод в ассоциации с паразитическими одноклеточными, клещами и насекомыми [5, 6]. Из этого следует, что вопрос диагностики всегда актуален и является решающим в избрании дальнейшей стратегии борьбы с этиологическими.
Анализ основных исследований и публикаций, в которых начато решение проблемы. Большинство публикаций касаются распространения, патогенеза и мероприятий борьбы с нематодозами кур, в частности аскаридиоза и гетеракоза [2, 7].
Литературные данные свидетельствуют, что частные хозяйства Российской Федерации неблагополучны относительно нематодозов кур: экстенсивность аскаридиозной инвазии у кур достигала 86,9 %, при интенсивности инвазии от 2 до 36 екз. /капле. Пораженность гетеракисами кур составляла 66,7 % (11=3-29 екз. /кап.), капилляриями -около 18,6 % (11=2-9 екз. /кап.) [3]. Частные хозяйства
Полтавской области с напольным типом содержанияя кур неблагополучные относительно аскаридиоза кур: интенсивность гельминтозной инвазии колеблется в пределах 1,33-6,33 экземпляров яиц в одной капле исследуемой жидкости, а экстенсивность достигает 100 % [7].
В то же время вопрос капилляриоза остается малоизученным. Исследователями выявлено, что в прицехо-зяйствах центрального региона Украины регистрируется капилляриоз кур с экстенсивностью инвазии от 20 до 100 % и часто зависит от сезона года [4]. Однако по структуре яиц видовой диагноз установить тяжело, а новые отечественные литературные данные отсутствуют [1, 9, 10]. Из этого следует, что окончательное решение этого вопроса остается за посмертными методами диагностики. Капиллярии и аскаридии локализуются в тонком кишечнике, часто в виде полииннвазии, но внимание исследователя во время патологоанатомического разреза трупов птицы сосредоточенная в первую очередь на больших нематодах - аскаридиях, а сотни мелких капил-лярий остаются вне поля зрения. Гельминты рода СарШапа - нитевидные тонкие, белого цвета нематоды, невооруженным глазом их очень тяжело заметить. И, вдобавок,с в случае некротических изменений или воспаления слизистая оболочка превращается в аморфную массу серо-белого цвета, что усложняет диагностику.
Поэтому целью наших исследований, было усовершенствовать посмертный способ диагностики капилля-
риоза кур и определить доминирующие виды в хозяйствах Полтавской области. В задачу исследований входило исследовать материал методом неполного гельминтологического вскрытия по Скрябину К. И., подвергнуть испытанию предложенные нами модификации, установить вид капиллярий.
Материалы и методы исследований. Исследования проводили в течение летне-осеннего периода 2015 года на базе научной лаборатории кафедры паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы факультета ветеринарной медицины Полтавской государственной аграрной академии и хозяйств Полтавской области, неблагополучных относительно гельминтозов кур. Материалом для исследования были фекалии и тонкий кишечник птицы, пораженный капилляриями. Фекалии исследовали стандартизированным методом по Г.А. Котельникову и В. М. Хренову (1981). После положительного результата проводили исследования методом неполного гельминтологического вскрытия по К. И. Скрябину [8]. Кишечник птицы вскрывали в кювете с небольшим количеством воды. Разрез делали ножницами по стороне, противоположной брыжейки. Первой модификацией (экспресс-диагностика) предметным стеклышком делали соскоб со слизистой оболочки, к которому прибавляли 50 % водный раствор глицерина. Полученную смесь накрывали покровным стеклышком и исследовали при малом увеличении микроскопа или с помощью МБС-10. По другой модификации содержимое смывали водопроводной водой, фильтровали через пластмассовое сито (размер отверстий 2 мм) в кювет. Полученную жидкость отстаивали на протяжении 30 минут, сливали поверхностный слой и снова прибавляли воду. Процедуру последовательных смывов повторяли два раза. Затем надоса-дочную жидкость сливали, а к осадку прибавляли несколько капель 1 % спиртового раствора бриллиантового зеленого, выдерживали 5 минут и исследовали под микроскопом.
Результаты исследований. Компрессорный метод состоял в исследовании слизистой оболочки тонкого кишечника после освобождения его от содержимого и промывания водопроводной водой. Компрессорный метод разрешал выявить капиллярий лишь при высокой интенсивности инвазии, поэтому некоторые отобранные образцы соскобов не содержали гельминтов. Однако в положительных случаях этот способ позволял быстро поставить диагноз и может с уверенностью претендовать как экспресс-диагностика капилляриоза (рисунок 1).
Рисунок 1 - Капиллярии, обнаруженные способом компрессорного исследования соскоба слизистой оболочки курицы (х150)
Другой предложенный способ посмертной диагностики паразитозов кур разрешал точно определить интенсивность инвазии и установить вид капиллярий. Суть модифицированного способа состояла в добавле-
нии к осадку раствора бриллиантового зеленого как красителя: после последовательного промывания со-скобов слизистой оболочки. Следует отметить, что фильтрация содержимого кишечника через пластиковое сито разрешает освободить его от посторонних примесей, в частности, от слизистых сгустков, непереваренных остатков и жировых включений (рисунок 2).
Рисунок 2 - Соскобы со слизистой оболочки курицы до (А) и после фильтрации материала (В)
Рисунок 3 - СарШапа 5рр.: А рии, В - увеличение (х150)
общий вид капилля-
Рисунок 4 - СарШапа &рр.: без окраски (А, х300), после окраски (В, С - х300, Б - х450)
Раствор бриллиантового зеленого, примененный в качестве красителя, добавляет контраста во время исследования, поэтому возрастает вероятность выявления паразитов (рисунки 3, 4). Вместе с тем хорошо прокрашиваются внутренние органы, в частности половой систе-
мы: спикулы, участок вагины, матка с яйцами, что позволяет поставить видовой диагноз при капилляриозе.
Волосовидные нематоды длиной 11-35 мм, которых обнаруживали на слизистой оболочке тонких кишок и слепых отростков кур, принадлежали к роду СарШапа.
Тело капиллярий имеет утонченный передний конец, на котором заметны глотка, пищевод и утолщенный хвостовой конец, с терминально расположенным анальным отверстием (рисунок 5).
Рисунок 7
Capillaria spp
Головной и хвостовой концы самца
Рисунок 5 - Передний и хвостовой концы самки
СарШапа &рр
Следует отметить особое строение стенки пищевода капиллярий, она состоит из комплекса клеток, которые обеспечивают пищеводу вид исчерченной трубки, которые достигают у самца 1/2,23, а у самок 1/2,99 к общей длине тела (рисунок 6).
Рисунок 8
Capillaria spp
Яйца в матке самок гельминтов
А*. В
С
Рисунок 6 - Четкообразные клетки пищевода
СарШапа &рр
У самцов одна цилиндрическая спикула, длинная, плотная, хорошо заметная по всей длине хвостового конца. Анус расположен терминально или субтерминально. Спикулярное влагалище без шипов на поверхности, длинная, гофрированная, почти в два раза шире чем диаметр спикулы, поскольку она эластичная, поэтому очень часто оказывается вывернутой и значительно извлеченной (рисунок 7).
У самок вульва расположенная позади места перехода пищевода в кишечник и часто имеет выступающую мембрану. Вульва прямая, иногда слабо извилистая.
Яйца имеют форму лимона с пробочками на полюсах, оболочка их гладкая или со своеобразной орнаментацией (рисунок 8).
Выкрашенных нематод дифференцировали на виды по морфологическим особенностям, а именно: учитывали длину гельминтов, структуру хвостовой бурсы самцов, размеры спикул и вульвы самок. Полученные данные свидетельствовали, что у кур исследуемых хозяйств паразитируют капиллярии следующих видов: Capillaria obsignata (Madsen, 1945), C. caudinflata (Molin, 1858), C. bursata (Freitas and Almeida, 1934), C. anatis (Schrank, 1790).
Capillaria bursata локализовалась чаще на слизистой оболочке тонкого кишечника, имела нежное тонкое тело белого цвета, гладкую кутикулу. Это наиболее длинный вид капиллярий травного канала кур. Длина тела самцов варьировала в пределах 11-20 мм, самок -16-35 мм (рисунок 5). Спикулы у самцов не имели поперечной исчерченности, длиной - 1,1-1,6 мм. Хвостовая бурса округлая и имела два дорзальных и два вентральных валика. У самки половое отверстие расположено на уровне конца пищевода. Вульва имела два полукруглых клапана, а у некоторых самок рядом были расположены боковые наплывы кутикулы (рисунок 9.
Яйца нематод длиной 51-62 мкм, шириной 22-24 мкм, имели хорошо развитую оболочку с широкими и удлиненными пробками.
Capillaria obsignata - нитевидная тонкая нематода белого цвета, хвостовой конец был сужен и резко заканчивался. Данный вид паразитировал на слизистой оболочке в тонких кишках и верхушках слепых отростков. Длина самцов колебалась в пределах 7-13 мм, хвостовая бурса имела випячивание в виде четырех долей разделенных тоненькой кутикулярной мембраной.
Длина спикул составляла 1,1-1,5 мм, спикулярная бурса покрыта поперечными складками без шипов. Самки имели длину 10-18 мм. Отверстие вульвы у самок регистрировали в виде едва заметной поперечной щели. Вагина имела толстые стенки с извилистой структурой (рисунок 10).
Рисунок 9 - Capillaria bursata: А, В - х450, С - х300
Яйца размером 44-46 х 22-29 мкм, внешняя оболочка относительно тонкая, имела ярко выраженный сетчатый узор, воротничок развит слабо, пробочки узкие.
Рисунок 10 - Capillaria obsignata (окраска раствором бриллиантового зеленого, х300)
Гельминты СарШапа саипЖА^а имели тонкое длинное, суженное до головного конца тело. Наибольшей ширины нематоды достигали в средней части. Хвостовой конец был слегка суженный и тупо обрезанный. Кутикула со слабой поперечной исчерченностью. Паразитировали нематоды на слизистой оболочке всей длины тонкого кишечника. Самцы длиной 9-18 мм имели хорошо выраженные боковые кутикулярные крылья на хвостовом конце (рисунок 11). Спикулы длиной 0,7-1,2 мм, спикулярная бурса иногда имела редко расположенные шипы. Проксимальная часть хвостового конца половой бурсы поддерживалась двумя Т-подобными ребрами жесткости.
Рисунок 11 - Латеральные кутикулярные крылья на хвостовом конце самца С. caudinflata
Длина самок варьировала от 12 до 25 мм, возле вульвы находился большой кутикулярный клапан, который выступал на поверхность тела самки (рисунок 12).
Рисунок 12 - Capillaria caundiflata (надвульварний клапан, х 300)
Яйца данного вида имели размеры 47-58 х 20-24 мкм и тонкую, но хорошо выраженную оболочку, на полюсах заметно выступающие широкие пробочки.
Capillaria anatis (Schrank 1790, Travasos 1915) обнаруживали в слепых кишках, значительно реже на слизистой оболочке тонких кишок кур. Длина самцов колебалась от 8 до 16 мм, спикула длиной 0,7-1,9 мм. Спикулярная бурса вооружена редко расположенными мелкими шипами. Хвостовой конец заканчивался двумя расширенными долями. Самки длиной 11 -28 мм, анус расположен терминально, а половое отверстие без клапанов.
Яйца размером 46-67 х 22-29 мкм с толстой бугристой внешней оболочкой, воротничок крупный, пробочки большие, выступающие (рисунок 13).
Полученные данные свидетельствуют, что в кишечнике кур частных хозяйств Полтавской области регистрируется четыре вида капиллярий: Capillaria obsignata, C. caudinflata, C. bursata и C. anatis. С целью посмертной диагностики капилляриоза рекомендовано использовать метод неполного гельминтологического вскрытия по К. И. Скрябину с добавлением к осадку содержимого кишечника раствора бриллиантового зеленого для окраски гельминтов.
Рисунок 13 - Capillaria anatis (матка с яйцами, х300)
Перспективы дальнейших исследований состоят в разработке мероприятий борьбы с их внедрением в частных птицеводческих хозяйствах Полтавской области.
Выводы
1. С целью посмертной диагностики капиллярио-за кур рекомендовано использовать метод неполгоно гельминтологического вскрытия по К. И. Скрябину с исследованием соскобов или смывов со слизистой оболочки кишечника.
2. Экспресс-метод компрессорного исследования соскоба со слизистой оболочки кишечника птицы дает возможность выявить капиллярий при высокой интенсивности инвазии.
3. Усовершенствованный способ обеспечивает сохранность целостности исследуемого материала, позволяет выявить капиллярий при низкой интенсивности инвазии и разрешает выучить морфологию гельминтов для постановки видового диагноза.
4. Морфологическими исследованиями подтверждено паразитирование нематод: Capillaria obsignata (Madsen, 1945), C. caudinflata (Molin, 1858), C. bursata (FreitasandAlmeida, 1934) и C. anatis (Schrank, 1790) в кишечнике кур птицехозяйств Полтавской области.
Список использованных источников
1. Экология паразитарных болезней домашней птицы / М. В. Богач, В. Г. Склярук, О. Г. Манько и др. // Одесса «Образование Украины». - 2013. - 288 с.
2. Кувшин М.В., Стибель В.В. Мониторинг епизоотической ситуации относительно кишечных инвазий кур птицеводческих хозяйств Ивано-Франковской области // Ветеринарная медицина: межвед. темат. наук. сб. - Х., 2010. - Вып. 93. - С. 113-117.
3. Забашта А. П. Смешанные паразитозы кур в условиях Кубани // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 3. - С. 35-36.
4. Заикина Г. В., Маршалкина Т. В. Эпизоотическая ситуация относительно желудочно-кишечных инвазий сельскохозяйственной птицы центрального региона Украины // Ветеринарная медицина. - 2015. - № 5 - С.13-15.
5. Кибакин В. В. Основные гельминтозы кур и меры борьбы с ними в условиях Алтайского края и Восточной Сибири: дис. ... доктора вет. наук: спец. 03.00.l9. - Красноярск, 2005. - 245 с.
6. Куприенко С. П. Микстинвазии кур и меры борьбы с ними: дис. ... канд. вет. наук: 03.00.19 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», спец: 16.00.03 «Паразитология». - Н. Новгород, 2005. - 115 с.
7. Михайлютенко С. М., Клименко О.С. Проблема распространения и актуальность лечения аскаридиоза кур в частных хозяйствах Полтавской области // Вестник ЖНАУ. - Житомир, 2015. - Вып. 1 (49). - Т.3. - С. 105-109.
8. Скрябин К. И. Метод полных гельминтологических вскрытий позвоночных, включая человека. - Г.: Изд-во 1-го Моск. гос. ун-та, 1928. - 43 с.
9. Dorny P., Berghen P., Vercruysse J. Morphological changes in Capillaria obsignata (Nematoda: Trichuridae) eggs after treatment with cambendazole. Pararasitol Res. 1987, - № 74. - С. 196-197.
10. Friedhoff K., Ehlers-Bhodigen S. On the diagnosis and epizootiology of Capillaria infections in domestic chickens. DTW,1965. - № 72(20) - С. 470-478.
List of sources used
1. Ecology of parasitic diseases of poultry / M.V. Bogach, V.G. Sklyaruk, O.G. Manko and others // Odessa "Education of Ukraine". - 2013. - 288 p.
2. Kuvshin M.V., Stibel V.V. Monitoring the situation regarding epizooticheskoy intestinal infestations chickens poultry Ivano-Frankivsk region // Veterinary Medicine: interagency. thematic. Sciences. Sat. - H., 2010. - Vol. 93. - P. 113-117.
3. Zabashta A.P. Mixed parasitosis chickens under Kuban // Veterinary agricultural Ms-mals. - 2008. - № 3. - S. 35-36.
4. Zaikina G.V., Marshalkin T. Epizootic situation with respect to gastrointestinal infestations of poultry in the central region of Ukraine // Veterinary Medicine. - 2015. - № 5 - S.13-15.
5. Kibakin V.V. main helminth infections of chickens and their control in conditions of Altai territory and the Eastern Siberia: Dis. ... Doctor vet. Sciences: spec. 03.00.19. - Krasnoyarsk, 2005. - 245 c.
6. Kuprienko S.P. mikstinvazii chickens and their control: dis. ... Cand. vet. Sciences: 03.00.19 "Veterinary microbiology, virology, epizootiology, mycology and immunology with mikotoksikologiey" special: 16.00.03, "Parasitology". - N. Novgorod, 2005. - 115 p.
7. Mihaylyutenko S.M., Klimenko O. Common problems and the urgency of treatment ascaridosis hens on private farms of Poltava region // Herald ZHNAU. - Zhitomir, 2015. - Vol. 1 (49). - V.3. - S. 105-109.
8. K.I. Skryabin method helminthological complete autopsies of vertebrates, including humans. - G .: Publishing House of the 1st Mosk. state. University Press, 1928. - 43 p.
9. Dorny P., Berghen P., Vercruysse J. Morphological changes in Capillaria obsignata (Nematoda: Trichuridae) eggs after treatment with cambendazole. Pararasitol Res. 1987, - № 74. - S. 196-197.
10. Friedhoff K., Ehlers-Bhodigen S. On the diagnosis and epizootiology of Capillaria infections in domestic chickens. DTW, 1965. - №72 (20) - P. 470-478.
