CC BY
68
635.21:631.527.8:537.6
ПОСЛЕДЕЙСТВИЕ ДЛИТЕЛЬНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КОЛЛЕКЦИИ IN VITRO В ОРИГИНАЛЬНОМ СЕМЕНОВОДСТВЕ КАРТОФЕЛЯ НА ОЗДОРОВЛЕННОЙ ОСНОВЕ
Н.И. ПОЛУХИН, кандидат сельскохозяйственных наук, ведущий научный сотрудник (e-mail: poluhin.n@bk.ru) Г.Х. МЫЗГИНА, старший научный сотрудник, К.А. КОЛОШИНА, старший лаборант Сибирский научно-исследовательский институт растениеводства и селекции - филиал Федерального исследовательского центра «Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук», ул. С-100,21, а/я375, пос. Краснообск, Новосибирский р-он, Новосибирская обл., 630501, Российская Федерация.
Резюме. Исследования проводили с целью определения возможных изменений и отклонений сортовьк признаков при длительном культивировании in vitro для дальнейшего обеспечения стабильности сорта, идентичности линий (клонов) и целенаправленного использовании коллекционных растений в селекции и семеноводстве. Сравнительное изучение одного и того же сорта в клубневом материале (без оздоровления), пробирочном материале и полученных из него миниклубнях дают основание считать, что коллекционные растения, прошедшие этап длительного хранения в условиях in vitro демонстрируют относительно высокую стабильность признаков, присущих исходным растениям по фенологии, идентичности по клубням, морфологии и продуктивности, что подтверждает надёжность технологии хранения пробирочных растений картофеля в культуре in vitro. Отмечено незначительное проявление внутрисортовой изменчивости в материале, выращенном из in vitro растений и из миниклубней, определяющими факторами которой служат последействие оздоровления (увеличение продуктивности почти по всем сортам на 10-360г/растение, или 16-53%); физиологическое состояние растения (гибель пробирочных растений сорта Агата при пересадке в грунт из-за отсутствия корневой системы); полиморфизм или спонтанные мутации от длительного (порядка 15-25лет) пребывания в культуре in vitro (сорт Адретта по форме клубня). Первые два фактора не приводят к изменениям признаков сорта и этот материал вполне может служить источником для селекции и первичного семеноводства. Изменения по форме клубней требуют дальнейшего изучения в последействии и проверки на молекулярно-генетическом уровне. Ключевые слова: линия, пробирочная культура, миниклубни, признаки, сорт, стабильность, исходный материал, продуктивность, фенология, морфология.
Для цитирования: Полухин Н.И., Мызгина Г.Х., Колошина К.А. Последействие длительного культивирования коллекции in vitro в оригинальном семеноводстве картофеля на оздоровленной основе //Достижения науки и техники АПК. 2016. №10. С. 52-55.
При поддержании генетических коллекций и банков сортов картофеля особую актуальность приобретают две главные задачи: абсолютная уверенность в элиминации патогенов и точное генетическое соответствие исходного «материнского» растения генотипу сорта. Однако в процессе оздоровления и длительного нахождения растений в культуре in vitro возрастает вероятность спонтанных мутаций. Растения, регенерированные из эксплантатов, могут иметь значительные морфологические изменения. Более того, длительное депонирование в культуре in vitro, в которой условия развития сильно отличаются от естественных, также может привести к генетическим изменениям из-за соматических мутаций, обусловленных, например, изменением содержания гормонов [1]. Так, Г.Г. Шарафутдинова [2] отмечает, что растения картофеля длительно выращиваемые в условиях in vitro отличаются хорошо развитой надземной частью и корневой системой, однако они теряют способность к росту при автотрофном питании в условиях почвы. Например, через 13 лет культи-
вирования in vitro 95% растений картофеля сорта Невский погибали через 7-8 дней после высадки в грунт. Более того, был обнаружен полиморфизм в рестрикционных профилях митохондриальной ДНК растений, то есть произошло изменение структурной организации митохондриального генома картофеля. Аналогичные результаты были получены Ю.Н. Федоровой [3]. Вместе с тем, многие исследователи уверенны в том, что растения меристемного происхождения гарантируют полное соответствие исходным генотипам [4, 5, 6, 7]. Другие утверждают, что внутрисортовая мериклональная изменчивость сохраняется в клубневых поколениях [8, 9, 10, 11, 12]. С учётом коэффициента размножения оздоровленного материала в лабораториях, наличие растений с отклонениями от исходных генотипов в первичных питомниках может представлять угрозу существованию сортов [13, 14].
Цель исследования - установить возможные изменения и отклонения сортовых признаков картофеля при длительном культивировании коллекционных сортов in vitro для дальнейшего обеспечения стабильности сорта, идентичности линий и целенаправленного использования коллекционных растений в селекции и семеноводстве.
Условия, материалы и методы. Исследования проводили в 2015 г. на опытном поле СибНИИРС - филиал ИЦиГ СОРАН. Почва опытного участка - чернозём выщелоченный среднесуглинистый, рНсол - 5,1-6,2, содержание гумуса (по Тюрину) - 5,8-7,3%, Р2О5 (по Чирикову) - 118-460 мг/кг, Кр (по Чирикову) - 96-257 мг/кг почвы. В опыт включены 9 генотипов картофеля разных групп спелости с различным периодом нахождения в культуре in vitro: ранние - Агата (22 года в коллекции in vitro), Латона (15 лет), Ароза (10 лет); среднеранние - Адретта (25 лет), Лина (10 лет), Свитанок Киевский (22 лет), Сафо (10 лет), Тулеевский (11 лет); среднеспелый - Хозяюшка (10 лет). Посадочный материал всех сортов изучали в форме клубней, миниклубней урожая 2014 г. и пробирочных растений из коллекции:
линия (клон) in vitro коллекции (оздоровленный материал института), используемая для клонирования -пробирочное растение;
клон, поддерживаемый в клубневом материале -клубни (контроль, без оздоровления).
линия (клон), поддерживаемая в миниклубнях -миниклубни.
Изучение проводили по 10 признакам. За основу были взяты признаки, по которым оценивается коллекция по картофелю ВИР [15]. Отмечали наступление фенологических фаз: начало и массовые всходы (у клубней и миниклубней), появление первого листа (у пробирочных растений после посадки в грунт), цветение, отмирание ботвы. Из морфологических показателей учитывали высоту и тип растения, длину, форму, окраску и налет листа, окраску цветка и пыльника, форму цветка и венчика, количество цветков. Определяли сортовые признаки продуктивных органов (форма клубня, окраска кожуры и мякоти, поверхность клубня, глубина и цвет глазков), оценивали хозяйственно-ценные признаки (скороспелость, количество стеблей и клубней на растении, фракционный состав и масса одного клубня, урожай). Для определения причин отсутствия роста корневой системы у пробирочных растений сорта Агата из коллекции
после высадки в поле, их сравнивали с пробирочными растениями этого же сорта, сохраняющимися в коллекции 15 и 5 лет. Математическую обработку полученных результатов проводили по Снедекору [16].
Материал закладывали в 4 повторениях по 5 пробирочных растений, 5 клубней и миниклубней каждой линии. Технология посадки и ухода общепринятая в лаборатории при выращивании первого полевого поколения. Площадь питания 70x25 см.
Вегетационный период 2015 г. был относительно благоприятным. В период с 20 мая по 10 июня выпало 84 мм осадков, температура воздуха соответствовала оптимальным 10-15 °С. Во второй декаде июня, второй и третьей декадах июля отмечали дефицит осадков, по сравнению со среднемноголетними. Их сумма составляла 2,6; 4,8 и 0,0 мм, соответственно.
Результаты и обсуждение. Всходы клубней и миниклубней появились на 10-16 день и значительных различий между ними не отмечали, отклонения в 2-3 дня у сортов Латона, Агата, Ароза и Хозяюшка были не существенны (табл. 1).
Цветение растений из клубневого посадочного материала наступало через 31-45 дней, на 44 день отмечали у сортов Лина, Латона, Агата, Тулеевский и Ароза, причем существенной разницы в наступлении цветения между растениями из клубней и миниклубней не отмечено. Фазу цветения у пробирочных растений в основном наблюдали через 36-50 дней после посадки в грунт. Раньше всех (через 36-38 дней) зацвели сорта Адретта и Сафо, намного позже (через 50 дней) - Лина, Тулеевский, Ароза, Хозяюшка. У сортов Латона и Агата отрастание не наступило вообще, что, вероятно, было обусловлено их реакцией на длительное нахождение в коллекции in vitro.
Наиболее важная характеристика сорта картофеля - клубень. Мы практически не обнаружили отличий от исходных клубней ни в потомстве от миниклубней, ни в потомстве от пробирочных растений. Исключение составляет
Таблица 1. Продолжительность межфазных периодов у коллекционных образцов в зависимости от периода нахождения в коллекции in vitro, СибНИИРС -филиал ИЦиГ СО РАН, 2015 г. (дата посадки 8 июня)
Сорт (лет в коллекции) Посадочный материал Продолжительность периода от посадки, дн.
до всходов до цветения
Адретта клубни 10 37
(25) миниклубни 10 37
пробирочные растения - 36
Свита- клубни 10 31
нок Ки- миниклубни 10 36
евский (22) пробирочные растения - 44
Лина клубни 10 44
(19) миниклубни 10 44
пробирочные растения - 50
Латона клубни 14 44
(15) миниклубни 16 44
пробирочные растения - -
Агата клубни 10 45
(22) миниклубни 14 44
пробирочные растения - -
Тулеев- клубни 10 32
ский (11) миниклубни 10 44
пробирочные растения - 50
Ароза клубни 10 44
(10) миниклубни 14 44
пробирочные растения - 50
Сафо клубни 10 32
(10) миниклубни 14 35
пробирочные растения - 38
Хозяюш- клубни 14 36
ка (10) миниклубни 12 44
пробирочные растения - 50
изменение формы клубня у сорта Адретта: у растений в контроле она была округлой, в остальных вариантах (мини-клубни, пробирочные растения) - удлиненной (табл. 2).
Таблица 2. Характеристика сортовых признаков исходных клубней и их аналогов в зависимости от длительности культивирования в культуре in vitro.
Сорт (лет в Посадочный мате- Форма Окраска клубня Поверхность Глазки клубня
коллекции) риал клубня кожуры мякоти клубня глубина цвет
Адретта (25) клубни округлая желтая желтая сетчатая поверхностные желтый
миниклубни удлиненная + + + + +
пробирочные растения удлиненная + + + + +
Свитанок Ки- клубни овальная красная желтый гладкая поверхностные красный
евский (22) миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Лина (19) клубни овальная желтая желтая гладкая средней желтый
глубины
миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Латона (15) клубни округлая желтая желтая гладкая поверхностные белый
миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Агата (22) клубни удлиненная желтая желтая гладкий поверхностные желтый
миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Тулеевский клубни удлиненная желтая желтая сетчатая поверхностные белый
(11) миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Ароза (10) клубни овальная красная желтая гладкая глубокие белый
миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Сафо (10) клубни овальная белая белая гладкая средней глубины белый
миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Хозяюшка клубни овальная красная белая сетчатая поверхностные красный
(10) миниклубни + + + + + +
пробирочные растения + + + + + +
Оценка морфологических признаков позволяет выбраковывать линии, отличающиеся от исходных растений, пораженные вирусными, грибными и бактериальными болезнями. Кроме того, её результаты дают возможность определить степень адаптивности линий к условиям региона и её продуктивности. В наших исследованиях нахождение сортов картофеля в коллекции in vitro практически не оказало влияния на морфологические признаки. Растения, выращенные из пробирок и миниклубней, соответствовали исходным линиям.
Анализ сортов по хозяйственно-ценным признакам показал высокую стабильность в отношении групп спелости. Все линии, сохраняемые в миниклубняхи пробирочныхрастени-ях, соответствовали исходным генотипам по датам начала клубнеобразования. То же самое относится и к другим показателям. Различия по количеству и массе клубней (табл. 3) между растениями из миниклубней (6,2-14,0 шт. и 340-1000 г) и контролем (5,5-12 шт. и 320-780 г) можно объяснить результатом оздоровления. Значительное уменьшение массы клубней и количества стеблей у пробирочных растений некоторых сортов, по сравнению с полевыми аналогами, также закономерно и понятно. Они ограничены в сроке вегетации и в полевых условиях не формируют столько стеблей, сколько характерно для растений из клубня, поэтому практически весь урожай формируется на основном стебле.
Отдельно следует обсудить ситуацию с сортом Агата из пробирочных растений. Он долго не приживался, оставаясь
Таблица 3. Оценка хозяйственно-ценных признаков сортов картофеля в зависимости от периода нахождения их в коллекции in vitro
Сорт (лет в коллекции) Материал Количество, шт./растении Масса, г
стеблей клубней клубней 1 растения 1 клубня
Адретта (25) клубни 5,0 5,5 320 58,2
миниклубни 7,0 7,0 380 54,3
пробирочные растения 2,0 8,3 340 44,7
среднее 4,7 6,9 347 52,4
Свитанок Киев- клубни 2,0 7,0 380 54,3
ский (22) миниклубни 8,0 9,5 650 68,4
пробирочные растения 2,0 6,2 290 54,8
среднее 4,0 7,6 440 59,1
Лина (19) клубни 2,0 10,0 430 43,9
миниклубни 7,0 12,5 500 40,0
пробирочные растения 3,0 7,4 440 33,2
среднее 4,0 9,9 390 38,7
Латона (15) клубни 7,0 12,0 780 65,0
миниклубни 3,0 10,2 650 63,7
пробирочные растения 1,0 7,6 300 40,2
среднее 3,7 9,9 576 56,3
Агата (22) клубни 3,0 9,0 400 44,4
миниклубни 2,0 9,2 750 81,5
пробирочные растения - - - -
среднее 2,5 9,1 575 63,0
Тулеевский (11) клубни 5,0 8,5 600 70,6
миниклубни 2,0 10,8 620 57,4
пробирочные растения 3,0 15,5 350 23,7
среднее 3,3 11,6 523 53,5
Ароза (10) клубни 7,0 5,8 320 55,2
миниклубни 3,0 7,8 680 87,2
пробирочные растения 4,0 7,7 380 48,6
среднее 4,7 7,1 460 63,7
Сафо (10) клубни 3,0 9,8 750 76,5
миниклубни 9,0 14,0 1000 71,4
пробирочные растения 2,0 4,9 330 69,3
среднее 4,7 9,6 693 72,4
Хозяюшка (10) клубни 4,0 8,0 400 50,0
миниклубни 2,0 7,2 650 90,2
пробирочные растения 2,0 7,0 190 23,6
среднее 2,7 7,4 413 54,6
ошибка (%) 0,5 1,0 0,07
НСР05 фактор А (посадочный материал) 0,5 0,9 64,0
НСР05 фактор Б (сорт) 0,7 1,6 111,0
в том же состоянии, в котором был высажен в открытый грунт, и в последствии погиб. По результатам осмотра все, что находилось на поверхности почвы выглядело нормально, растения хотя и отставали в росте, точнее, не росли, но имели зеленый цвет листьев, сохраняли исходный габитус. Однако, когда мы решили исследовать корневую систему, на что нас натолкнула работа Шарафутдиновой Г.Г.[2], оказалось, что корни практически отсутствовали.
Пробирочные растения, находившиеся 22 года в коллекции in vitro, имели один кореньпервого порядкадлиной 0,3 см, дальнейшего его ветвления не наблюдали. У растений этого же сорта, сохранявшихся в коллекции 15 и 5 лет, корни второго порядка присутствовали, а общая их длина достигала 24,6 и 115,2 см, соответственно (табл. 4).
В целом наблюдения за коллекционными растениями, прошедшими этап длительного хранения в условиях in vitro (10-25 лет) и их аналогами позволили обнаружить, дифференцировать и охарактеризовать изменения и отклонения признаков сортов по физиологическим параметрам, последействию оздоровления, самоклональ-ной вариации и дать заключение о целесообразности использования этого материала в семеноводстве.
Хранение пробирочных растений сорта Агата, которые находились в коллекции 22 года, привело к физиологической перестройке, с одной стороны, формирование корневой системы ограничилось образованием корневых бугорков, с другой, шло нарастание клеток, которые
древеснели и образовывали плотную массу. Это возможно, когда нарушается диферен-циация меристемы кончика корня вследствие отсутствия давления на него [17]. Однако продуктивность миниклуб-ней сорта Агата, полученных от пробирочных растений, находящихся в коллекции 22 года, была выше исходных в 1,9 раза. К последействию оздоровления мы отнесли изменение продуктивности, которая в варианте с мини-клубнями (материал первого полевого поколения после оздоровления) по всем сортам, за исключением сорта Латона, была достоверно выше, чем у исходных растений (от клубневого материала, не прошедшего оздоровление), на 10-360 г/растение, или 16-53% и не зависела от срока хранения в коллекции.
Отклонения по форме клубней сорта Адретта в пробирочных растениях и растениях от миниклубней, на наш взгляд, следует отнести к проявлению самоклональ-ной вариации, вызванной длительным нахождением в культуре in vitro [18]. Удлиненная форма клубня, проявляющаяся стабильно как в урожае пробирочных растений, так и в миниклубнях на протяжении 2 лет ставит под
Таблица 4. Развитие корневой системы пробирочных растений картофеля сорта Агата в зависимости от времени нахождения в коллекции in vitro.
Лет в коллек ции Воз- Корни
душно- 1 порядка 2 порядка 3 порядка всего
сухая число, длина, число, длина, число, длина, число, дли-
масса, г шт. см шт. см шт. см шт. на, см
5 0,0055 10 68,0 37 47,2 - - 47 115,2
15 0,0042 5 19,0 3 5,6 - - 8 24,6
22 0,0008 1 0,3 - - - - 1 0,3
сомнение возможность использования этого материала в семеноводстве. Для проверки гипотезы о характере такого отклонения можно было бы использовать результаты молекулярно-генетического мониторинга сортовой типичности образцов на основе исследования запасных белков клубней как генетических маркеров. Такая процедура должна быть составной частью методики оценки и отбора линий тождественных признакам выходных сортов.
Выводы. Результаты наблюдений за коллекционными растениями после длительного хранения в условиях in vitro и их аналогами показали относительно высокую ста-
бильность признаков, присущих исходным генотипам и подтвердили надёжность технологии хранения пробирочных растений картофеля как источника исходного материала для первичного семеноводства.
Гибель пробирочныхрастений сорта Агата не следует связывать с гено- и феноти-пической изменчивостью из-за длительного нахождения в коллекции in vitro (22 года), факт отсутствия корневой системы у растений этого сорта объясняется физиологическим состоянием черенка, нижняя часть которого вместо корней имеет одревесневший клеточный наплыв.
Отклонение по форме клубня у сорта Адретта проявляется стабильно и в урожае от пробирочных растений, и в урожае от миниклубней, что может служить признаком полиморфизма или мутаций от долгого нахождения в культуре in vitro.
Литература.
1. Дементьева З.А. Белковые маркеры в идентификации генотипов картофеля//Картофель и овощи. 2006. №7. С.30.
2. Сравнительный анализ гормонального баланса растений картофеля различной длительности культивирования in vitro/Г.Г. Ша-рафутдинова, А.Г. Мардамшин, А.Р. Мустафина, Г.Р. Кудоярова//Вестник Башкирского университета. 2001. №2(II). C. 133-135.
3. Федорова Ю.Н. Особенности семеноводства картофеля при длительном культивировании в условиях in vitro //Аграрная наука. 2014. №7. С. 21-22.
4. Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений. М.: «Наука», 1983. 97 с.
5. Бутенко Р.Г. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М.: «Агропромиздат», 1990, 384 с.
6. Калинин Ф.Л., Кушнир Г.П., Сарнацкая В.В. Технология микроклонального размножения растений. Киев: «Наукова думка», 1992. 56 с.
7. Биотехнологические методы получения и оценки оздоровленного картофеля: рекомендации / Л.Н. Трофимец, В.В. Бойко, Б.В. Зейрук, В.П. Анисимов, Б.А. Писарев. М.: Агропромиздат, 1988. 37с.
8. Майщук З.Н. Влияние культуры меристемы и термотерапии на изменчивость признаков и семенные качества картофеля // Современные проблемы семеноводства картофеля на безвирусной основе: сборник. научных трудов. Владивосток: «ДВНЦ АНСССР», 1985. С. 8-10.
9. Юрьева Н.О. Изучение влияния длительности культивирования на частоту отклонений по хозяйственно-ценным и морфологическим признакам у картофеля // Использование клеточных технологий в селекции картофеля. Научные труды. М.: ВНИИКХ, 1987. С.11-19.
10 Технология производства семенного материала картофеля/ А.И. Адамова, С.А. Банадысев, А.О. Бобрик, Г.И. Коновалов // Картофелеводство. Минск: изд. «Мерлинг», 2002. С. 187-225.
11. Ланеева И.И. Фено- и генотипическая изменчивость мериклонов картофеля в процессе оздоровления методом апикальной меристемы: автореферат диссертации на соискание ученой степени к.с-х.н. М., 1993. 18 с.
12. Симаков Е.А. Размножение перспективных гибридов и новых сортов в системе оригинального семеноводства картофеля //Достижения науки и техники АПК. 2009. №7. С. 35-37.
13. Сидоров В.А. Биотехнология растений: Клеточная селекция. Киев: Изд. «Наукова Думка», 1990. 716 с.
14. Тимошенко И.И., Завирюха П.Д., Майщук З.М. Проблемы и перспективы селекции и развитие картофелеводства в Западном регионе // Вестник Аграрной науки. 2001. спец.выпуск. С. 73-77.
15. Изучение и поддержание образцов мировой коллекции картофеля: методические указания. Л.: ВИР,1986. 23 с.
16. Снедекор Д.У. Статистические методы в применении к исследованиям в сельском хозяйстве и биологии. М. Изд. «Сельскохозяйственная литература», 1961, 505 с
17. Шарафутдинова Г.Г. Влияние длительности вегетативного размножения высших растений на генотипическую стабильность на примере Solanum tuberosum L: автореферат на соискание ученой степени к.б.н. Уфа, 2000. 103 с.
18. Полухин Н.И., СафоноваА.Д., Мызгина Г.Х. Индукция фенотипической изменчивости в зависимости отметодов получения само-клональной вариации в культуре in vitro и использование ее в селекции картофеля// Тезисы докладов проблемного совета по растениеводству, селекции и семеноводству сельскохозяйственных культур Сибири. Новосибирск: РАСХН. Сиб.отд.-ние, 1994. С. 19-21.
AFTEREFFECT OF PROLONGED IN VITRO CULTIVATION OF COLLECTIONS IN THE ORIGINAL SEED-GROWING OF POTATO ON THE IMPROVED BASE
N. I. Poluhin, G.Kh. Myzgina, K.A. Koloshina
Siberian Research institute of plant production and Breeding - Branch of the Federal Research Central Institute of Siberian Branch of Russian Academy of Sciences, ul. C-100, 21, P.Box 375, pos. Krasnoobsk, Novosibirskii r-on, Novosibirskaya obl., 630501, Russian Federation Summary. The studies were carried out in order to identify possible changes of potato varietal characteristics in long-term in vitro cultivation of the collection of potato varieties to further provision of variety stability, the identity of lines/clones and purposeful use of collection plants in breeding and seed production. We compared the same variety in the tuberous material (without improvement), test-tube material and minitubers, derived from it. This comparison gives the reason to consider that collection plants, which passed the stage of prolonged storage under in vitro condition, demonstrates relatively high stability of signs, inherent in the initial plants in phenology, identity on tubers, morphology and productivity. This confirms the reliability of the storage technology of potato test-tube plants in vitro culture. It was registered insignificant intravariety variability in the material, grown from in vitro plants and from minitubers. The determinant factors for it are the aftereffect of improvement (increase in productivity for almost all varieties by 10-360 g/plant, or 16-35%), physiological state of plants (tube plants of the Agata variety died after transplantation into the ground due to the lack of root system), polymorphism or spontaneous mutation because of the long (15-25 years) in vitro cultivation (the Adretta variety changed the shape of tubers). The first two factors do not change the characteristics of the variety, and the material may be used in plant breeding and seed production. The changes in the tuber shape should be further studied and checked at the molecular and genetic level. Keywords: line, test tube culture, minitubers, signs, variety, stability, source material, productivity, phenology, morphology. Author Details: N.I. Poluhin, Cand. Sc. (Agr.), leading research fellow (e-mail: poluhin.n@bk.ru); G.Kh. Myzgina, senior researcher fellow; K.A. Koloshina, senior lab. assist.
For citation: Poluhin N. I., Myzgina G. Kh., Koloshina K.A. Aftereffect of Prolonged in Vitro Cultivation of Collections in the Original Seed-Growing of Potato on the Improved Base. Dostizheniya nauki i tekhnikiAPK. 2016. V.30. No. 10. Pp. 52-55 (in Russ.).
