CC BY
3Понижение экспрессии микроРНК 148a-3p ассоциировано с развитием резистентности к химиотерапии доцетакселом при раке
предстательной железы
Авторы
Пудова Е.А., pudova_elena@inbox.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Катунина И.В., i.katunina125@gmail.com, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Кобеляцкая А.А., kaa.chel@mail.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Федорова М.С., fedorowams@yandex.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Павлов В.С., vladislav1pavlov@gmail.com, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Краснов Г.С., gskrasnov@mail.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Савватеева М.В., msavv@mail.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Кудрявцева А.В., rhizamoeba@mail.ru, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Ключевые слова:
микроРНК, экспрессия, рак предстательной железы, лекарственная резистентность, клеточная линия, до-цетаксел
Актуальность
Кастрационно-резистентный рак предстательной железы (КРРПЖ) представляет собой прогностически неблагоприятную форму заболевания, которая существенно ухудшает качество жизни больных. Стандартным методом лечения для данной категории пациентов является химиотерапия с применением таксанов, однако у пациентов происходит неизбежное развитие резистентности, что представляет собой серьезную проблему в области онкоурологии. Таким образом, крайне актуальным является идентификация информативных маркеров для мониторинга развития резистентности к терапии у пациента. В настоящее время перспективные прогностические маркеры могут быть идентифицированы на основе экспрессии микроРНК.
Цель
Ранее нами было обнаружено, что дифференциальная экспрессия микроРНК 148а-3р в плазме крови пациентов с КРРПЖ статистически значимо ассоциирована с развитием прогрессии на фоне химиотерапии доцетакселом. Целью настоящего исследования является оценка относительной экспрессии данной микроРНК при развитии резистентности к препарату доцетаксел на андроген-независимой клеточной линии рака предстательной железы РС3.
Материалы и методы
Культивирование РС3 клеток проводилось в среде RPMI-1640 с добавлением 10% фетальной
бычьей сыворотки (FBS), 100 Ед/мл пенициллина и 100 мг/мл стрептомицина при 37 °C с 5% содержанием CO2. Получение резистентной подлинии PC3 было проведено на основе ступенчатого повышения концентрации доцетаксела (Sigma, США) в культуральной среде. После культивирования клеток при концентрации доцетаксела 10 нМ, клетки считали резистентными. В качестве контроля была использована клеточная линия PC3 аналогичных пассажей. Тотальная РНК из клеток была получена с использованием набора MagNA Pure Compact RNA Kit (Roche, Швейцария) на приборе MagNA Pure Compact System (Roche). Получение кДНК по матрице микроРНК было выполнено с использованием набора TaqMan Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit (Thermo Fisher Scientific, США). Количественная полимеразная цепная реакция (кПЦР) была проведена в трех технических повторах на приборе Applied Biosystems 7500 (Thermo Fisher Scientific). В качестве контроля использована микроРНК 28-3p. Для анализа полученных данных использован метод AACt, а также парный t-критерий Стьюдента.
Результаты
В результате проведенного анализа относительной экспрессии методом кПЦР при развитии резистентности клеточной культуры PC3 к доцетакселу было обнаружено статистически значимое понижение экспрессии микроРНК 148а-3р до 6 раз (p — значение парного /-критерия Стьюдента <0,01).
Выводы
Таким образом, было показано, что понижение экспрессии микроРНК 148а-3р статистически значимо ассоциировано с развитием резистентности к
Список литературы
препарату доцетаксел на клеточной линии РС3. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 22-24-01093).
Особенности клинической картины BRCA-ассоциированных форм рака молочной железы и рака яичников
Авторы
Смирнов С.Ю., rustledeath24@gmail.com, РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Скачкова В.О., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Чекун О.В., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Ходасевич В.М., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Карпейчик Ю.В., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Гутковская Е.А., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Пашкевич А.М., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Трухан А.В., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Субоч Е.И., Helen_suboch@mail.ru, РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Мавричев С.А., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Портянко А.С., РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова, Минск
Ключевые слова:
BRCA1, BRCA2, рак молочной железы, рак яичников
Актуальность
В Республике Беларусь BRCA-ассоциированные формы злокачественных новообразований составляют до 10% всех случаев рака молочной железы (РМЖ) и до 25% всех случаев рака яичника (РЯ). Особенности функциональной активности различных мутантных форм белков BRCA1/2 могут оказывать неравнозначное влияние на риск развития опухолей в рамках наследственного синдрома.
Цель
Определить клинические особенности заболевания у пациентов с различными патогенными вариантами генов BRCA1/2.
Материалы и методы
Материалом для исследования послужили результаты молекулярного тестирования, а также данные медицинской документации пациентов с BRCA-ассоциированным РМЖ (п = 205) и РЯ (п = 110). Наличие первично-множественных опухолей подтверждено у 42 пациентов.
Результаты
При РМЖ частота встречаемости патогенных вариантов генов BRCA1/2 с «эффектом основателя» в белорусской популяции составила: 5382^С — 65,9%, 4153delA — 20,0%, 300Т^ — 12,7%, 1854delAG — 1,5%. BRCA-ассоциированный РЯ
характеризовался следующим спектром нарушений: 5382^С — 53,6%, 4153delA — 33,6%, 300Т^ — 9,1%, 1854delAG — 0,9%, 6174delT — 2,7%. Статистический анализ показал преобладание варианта 4153delA при РЯ (р = 0,0061). Средний возраст пациентов с BRCA-ассоциированным РМЖ на момент постановки диагноза варьировал от 40 до 42 лет при любом из генетических нарушений. Наследственные формы РЯ возникали в более позднем возрасте: 5382^С — 48 лет, 4153delA — 49 лет, 300Т^ — 55 лет, 6174delT — 58 лет. Значимых различий в указанных подгруппах не выявлено. Наличие первично-множественного процесса подтверждено у 35 пациентов с РМЖ (17,1%) и в 7 случаях РЯ (6,4%), синхронные опухоли обнаружены у 3 и 1 женщин соответственно. При РМЖ вторая опухоль развивалась в оставшейся молочной железе в 60,0% случаев. При стратификации результатов по типу патогенного варианта частота метахронного РЯ составила 85,7% у пациентов с мутацией 4153delA (6/7) и 28,0% в группе 5382^С (7/25) (р = 0,0102). Медиана времени до развития метахронной опухоли составила 6,5 года в группе пациентов с РМЖ и 6,1 года в группе пациентов с РЯ при отсутствии статистически значимых различий.
Выводы
Полученные нами данные подтверждают наличие ассоциативной связи варианта 4153delA с ри-
