Получение моноклональных антител, специфичных к рекомбинантному циклофилину А человека Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Ключевые слова

солидные опухоли, микроокружение опухоли, ибрутиниб, тирозинкиназа Брутона Актуальность

Ингибиторы тирозинкиназы Брутона (BTK) — класс препаратов, показавших свою высокую эффективность при лечении ряда В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. У ингибиторов BTK выявлен также широкий иммуномодулирующий эффект на различные субпопуляции иммунных клеток, отличных от B-лимфоцитов, проявляемый за счет ингибирования специфических иммунных рецепторов, включая рецептор Т-клеток и Toll-подобные рецепторы [1].

Цель

Провести систематический обзор данных о воздействии BTK на клетки микроокружения солидных опухолей.

Материалы и методы

Систематический обзор был выполнен с применением поиска в электронных базах данных (Scopus, PubMed, Web of Science, ScienceDirect) с использованием ключевых слов: tumor microenvironment, BTK, ibrutinib, solid tumor. Поиск исследований проводился с момента появления первого препарата ингибитора BTK (Ибрутиниб) в 2009 г. до декабря 2022 г.

Результаты

В прогрессирование опухоли вовлечены присутствующие в ее микроокружении супрессорные клетки миелоидного происхождения (MDSC), которые оказались чувствительны к действию ингибиторов BTK. Так, ибрутиниб уменьшает опосредованное MDSC подавление цитотоксичности CD8+ Т-лимфоцитов, что приводит к повышению эффективности лечения рака молочной железы ингибиторами контрольных точек. В микроокружении солидных опухолей поддерживаются условия хронического воспаления, неоангиогенеза и активации M2-мaкрофaгов, что способствует прогрессии опухоли [2]. Применение ингибиторов BTK у мышей с солидными опухолями подавляет продукцию миелоидными клетками фактора некроза опухоли-a и активных форм кислорода [3]. Ибрутиниб снижает высвобождение зрелого интерлейкина-lß макрофагами солидных опухолей и ингибирует секрецию ими хемокина CXCL13, что снижает мобильность опухолевых клеток [4]. Имеются свидетельства, что терапия ибрутинибом уменьшает склонность макрофагов к М2-фенотипу. Также показано, что ибрутиниб может изменять дифференцировку и функцию Т-клеток, повышая их противоопухолевую активность (увеличивая количества Т-клеток памяти, поляризацию Th1, снижая экспрессии ингибирующих рецепторов и улучшая образования иммунных синапсов между Т-клетками и клетками опухоли) [5].

Выводы

Широкое участие BTK в иммунологических процессах дает обоснование для комбинирования BTK с ингибиторами иммунных контрольных точек и может обеспечить усиление противоопухолевых иммунных реакций за счет модификации активности иммунных клеток в микроокружении опухоли.

Список литературы

1. Wang H, Guo H, Yang J, et al . Exp Hematol Oncol . 2022 Sep 22;11(1):60.

2 . Gunderson A, Kaneda M, Tsujikawa T et al . Cancer Discov. 2016;6:270-85 .

3 . Stiff A, Trikha P, Wesolowski R, et al . Cancer Res . 2016 Apr 15;76(8):2125-36 .

4 . Ping L, Ding N, Shi Y et al . Oncotarget . 2017; 8(24):39218-39229 .

5 . Mhibik M, Wiestner A, Sun C . et al . Int J Mol Sci . 2019;21(1):68.

Получение моноклональных антител, специфичных к рекомбинантному циклофилину А человека

Авторы:

(1) Хромых Людмила Менделевна, lkhromykh@list.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(2) Калинина Анастасия Андреевна, aakalinina89@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(3) Замкова Мария Анатольевна, zamkovam@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(4) Персиянцева Надежда Александровна , nadushka99@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(5) Самойлова Дарья Викторовна, dashasam@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(6) Ковалева Ольга Владимировна, ovkovaleva@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(7) Грачев Алексей Николаевич, alexei.gratchev@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

(8) Казанский Дмитрий Борисович, kazansky1@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Ключевые слова

циклофилин А, моноклональные антитела, терапия

Актуальность

Циклофилин А (ЦфА,18 кДа) — многофункциональный белок, являющийся провоспалительным фактором и фактором патогенеза различных заболеваний (онкологические заболевания, ревматоидный артрит, сахарный диабет, онкологии различной локализации и др.), что делает данный белок потенциальной терапевтической мишенью. Получение моноклональных антител (МАт) для нейтрализации ЦфА как фактора патогенности является разработкой одного из терапевтических подходов и поможет получить инструмент для борьбы с данными заболеваниями. Создание гибридомы, продуцирующей МАт к ЦфА человека, и оценка терапевтического действия этих антител в лечении аутоиммунных и других заболеваний тем более актуально, что практически подтверждено и уже активно используется в клинике лечебное действие МАт против фактора некроза опухоли альфа как другого основного фактора патогенности [1].

Цель

Создание гибридомы, продуцирующей моноклональные антитела (МАт) к рекомбинантному ЦфА человека (рчЦфА).

Материалы и методы

Вследствие того что ЦфА человека и мыши имеют практически полную гомологию, для получения антител к данному белку использовали полимерную фракцию рчЦФА, которую перед иммунизацией обрабатывали ультразвуком. Для создания гибридомы применяли стандартную технологию [2]. Специфичность антител оценивали иммуноферментным анализом (ELISA).

Результаты

Были получены три вида гибридом, вырабатывающих Мат, специфичные к рчЦфА. МАт выделяли из асцитной жидкости и конъюгировали с пероксидазой хрена. Методом ELISA была показана следующая чувствительность антител: 3С4 — 40-80 нг/мл; 6G2 — 40-80 нг/мл; 4H4 — 60-80 нг/мл. Показано, что полученные антитела относятся к IgG 2a подкласса.

Выводы

Получены и охарактеризованы три гибридомы, продуцирующие МАт мыши к рчЦфА.

Список литературы

1. M . Feldmann, R . N . Maini .Anti-TNFtherapy of rheumatoid arthritis: what have we learned . Annu Rev. Immunol . 2001. 19:16396 .

2 . Nelson PN, Reynolds GM, Waldron EE, Ward E, Giannopoulos K, Murray PG . Monoclonal antibodies . Mol Pathol . 2000

Jun;53(3):111-7. DOI: 10 ,1136/mp . 53 . 3 .111. изучены и охарактеризованы три гибридомы, продуцирующие МАт мыши

к рчЦфА .