CC BY
16
medical news of north caucasus
2021. Vоl. 16. Iss. 4
© Коллектив авторов, 2021
УДК 612.071.1:616.833-053.3
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2021.16083
ISSN - 2073-8137
ПОЛИМОРФНЫЕ МАРКЕРЫ ГЕНОВ РЕЦЕПТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА У НОВОРОЖДЕННЫХ С ГИПОКСИЧЕСКИ-ИШЕМИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ЦНС
А. С. Идрисова 1, Л. Ю. Барычева 2, Е. С. Кузьмина 3, К. С. Межидов 1, О. В. Агранович 2, М. В. Голубева 2
1 Республиканская детская клиническая больница им. Е. П. Глинки, Грозный, Российская Федерация
2 Ставропольский государственный медицинский университет, Российская Федерация
3 Краевая детская клиническая больница, Ставрополь, Российская Федерация
POLYMORPHIC MARKERS OF INNATE IMMUNITY RECEPTOR GENES IN NEWBORNS WITH HYPOXIC-ISCHEMIC CNS DAMAGE
Idrisova A. S. 1, Barycheva L. Yu. 2, Kuzmina E. S. 2, Mezhidov K. S. 1, Agranovich O. V. 2, Golubeva M. V. 1
1 E. P. Glinka Republican Children's Clinical Hospital, Grozny, Russian Federation
2 Stavropol State Medical University, Russian Federation
3 Children's Regional Clinical Hospital, Stavropol, Russian Federation
Обследованы 32 доношенных новорожденных с ГИЭ 2 степени и 13 - с ГИЭ 3 степени. Неблагоприятные неврологические последствия сформировались у 47,4 % детей. Вероятность тяжелой формы церебральной ишемии возрастала у резидентов гомозиготного генотипа по минорному аллелю Т745Т (OR=4,60, С1: 0,82-70,16), неблагоприятных исходов ГИЭ - у обладателей мажорного аллеля TLR2 2258G (OR=6,50, С1: 0,746-56,64) и гомозиготных генотипов ^2 G2258G ^=7,60, С1: 0,82-70,16) и ^6 Т745Т ^=4,25; С1: 0,947-19,07). Высокие показатели сывороточных интерлейкинов М-р, ^-6 у детей с ГИЭ ассоциированы с генотипами G2258G и T745Т.
Ключевые слова: гипоксически-ишемическая энцефалопатия, рецепторы врожденного иммунитета, генный полиморфизм
We examined 32 full-term newborns with grade 2 HIE and 13 with grade 3 HIE. Adverse neurological consequences were formed in 47.4 % of children. The probability of severe cerebral ischemia increased in residents of the homozygous genotype for the minor allele TLR6 T745T (OR=4.60, CI: 0.82-70.16), unfavorable HIE outcomes - in owners of the major allele TLR2 2258G (OR=6.50, CI: 0.746-56.64) and homozygous genotypes TLR2 G2258G (OR=7.60, CI: 0.82-70.16) and TLR6 T745T (OR=4.25; CI: 0.947-19.07). High levels of serum interleukins IL1-P, IL-6 in children with HIE are associated with genotypes G2258G and T745T.
Keywords: hypoxic-ischemic encephalopathy, innate immunity receptors, gene polymorphism
Для цитирования: Идрисова А. С., Барычева Л. Ю., Кузьмина Е. С., Межидов К. С., Агранович О. В., Голубева М. В. ПОЛИМОРФНЫЕ МАРКЕРЫ ГЕНОВ РЕЦЕПТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА У НОВОРОЖДЕННЫХ С ГИ-ПОКСИЧЕСКИ-ИШЕМИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ЦНС. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2021;16(4):349-354. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2021.16083
For citation: Idrisova A. S., Barycheva L. Yu., Kuzmina E. S., Mezhidov K. S., Agranovich O. V., Golubeva M. V. POLYMORPHIC MARKERS OF INNATE IMMUNITY RECEPTOR GENES IN NEWBORNS WITH HYPOXIC-ISCHEMIC CNS DAMAGE. Medical News of North Caucasus. 2021;16(4):349-354. DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2021.16083 (In Russ.)
БИ - благоприятный исход
ГИЭ - гипоксически-ишемическая энцефалопатия ЗПМР - задержка психомоторного развития BE - дефицит оснований
DAMP - эндогенные молекулы, сигнализирующие о повреждении
DQ - коэффициент интеллектуального развития IL - интерлейкин
MQ - коэффициент моторного развития OR - анализ шансов
РАМР - патогенассоциированные молекулярные паттерны рН - водородный показатель, кислотность SNP - полиморфизм одиночных нуклеотидов TLR - рецепторы врожденного иммунитета
ORiGiNAL RESEARCH
Pediatrics
Перинатальная гипоксически-ишемическая энцефалопатия (ГИЭ) является одной из самых актуальных причин инвалидности и смертности среди новорожденных и серьезным бременем для общества [1-3]. Около 40 % детей, перенесших ГИЭ, не выживают в неонатальном периоде, у 30 % - развиваются стойкие неврологические расстройства, такие как церебральный паралич, нарушение зрения, судороги, эпилепсия, умственная отсталость и неспособность к обучению [1-4]. Существенную роль в патогенезе ги-поксически-ишемической травмы играет вторичное повреждение головного мозга, обусловленное воспалением и иммунными реакциями [2-5]. Значительный интерес в связи с этим представляет функциональный полиморфизм генов рецепторов врожденного иммунитета (TLR) [6]. Генетически детерминированные различия сигнальных каскадов TLR приводят к увеличению продукции интерлейкинов и могут модифицировать иммунный ответ, способствовать апоптозу олигоден-дроцитов, дегенерации нейронов и прогрессиро-ванию заболевания [6, 7].
Цель исследования - определение патогенетического значения генного полиморфизма рецепторов врожденного иммунитета у детей с перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатией.
Материал и методы. Обследованы 45 детей с гипоксически-ишемической энцефалопатией 2 и 3 степени, рожденных в ГБУ «Республиканский перинатальный центр», г. Грозный, в 2019-2020 гг. Проведен проспективный когортный анализ одно-нуклеотидных полиморфизмов (SPN) TLR2 G2258A и TLR6 C745T и уровней провоспалительных цитокинов в сыворотке крови у новорожденных. В исследование включены дети с умеренной и тяжелой гипоксически-ишемической энцефалопатией, гестационным возрастом более 36 недель, весом более 2000 г. Из исследования исключены новорожденные с признаками внутриутробной инфекции, внутричерепными кровоизлияниями, пороками развития, ранним неонатальным сепсисом, некротизирующим энтероколитом.
При установлении диагноза ГИЭ учитывали наличие у новорожденного как минимум трех признаков: симптомы дистресса плода, респираторную поддержку методом ИВЛ не менее 5 минут, оценку по шкале Апгар 0-3 балла на 1-й минуте, показатели pH<7,1 и/или BE<-16 - при первом анализе КОС в артериальной крови, а также клинические симптомы неонатальной энцефалопатии и признаки полиорганной недостаточности [8]. В соответствии с критериями шкалы H. B. Sarnat и M. S. Sarnat [9] в группу ГИЭ 2 ст. вошли 32 ребенка, ГИЭ 3 ст. - 13. В качестве контрольной группы обследованы 50 новорожденных, сопоставимых с больными детьми по массе тела и ге-стационному возрасту. Работа одобрена локальным этическим комитетом. Родители детей подписывали информированное согласие на исследование.
Дети наблюдались неврологом в неонатальном и младенческом периодах, в дальнейшем - в амбула-торно-поликлинических условиях и стационаре с периодичностью 1 раз в 1-3 месяца в зависимости от степени тяжести ГИЭ. Оценку резидуальных неврологических исходов проводили в возрасте 18 месяцев на базе неврологического отделения младшего возраста Республиканской детской клинической больницы им.Е. П.Глинки. Динамику психомоторного развития оценивали с помощью коэффициентов моторного развития - MQ (Motor quotient) и интеллектуального
развития ребенка - DQ (Developmental quotient) [9]. Из 45 новорожденных, включенных в исследование, резидуальные исходы удалось оценить у 38 детей. Трое детей умерли, четверо оказались недоступными для наблюдения. В зависимости от клинического исхода пациенты были разделены на группы: БИ - благоприятный исход, НИ - неблагоприятный неврологический исход или смерть. Под неблагоприятным неврологическим исходом понимали задержку психомоторного развития с показателями DQ<75 %, MQ<70 %, развитие микро- или гидроцефалии, глухоты, слепоты, эпилепсии, детского церебрального паралича.
Исследование полиморфизма генов TLR выполняли в Ставропольском противочумном институте. Кровь транспортировали в течение 24-36 ч. Выделение геномной ДНК и получение ее оптимальной концентрации осуществляли с помощью реагентов «ДНК-экспресс-кровь» и наборов «Quant-iT dsDNA asay kit». Генотипирование SNP - TLR2 2258 G>A и TLR6 745 С>Т проводили методом Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP analysis) в 96-луночном формате с использованием многоканального амплификатора «Терцик» (ООО «ДНК-Технология», Россия) и диагностических тест-систем «SNP-экспресс» ООО НПФ «Литех» (Москва). Для разделения продуктов амплификации использовали метод горизонтального электрофореза в 3 % агарозном геле, с электрофоретиче-ской детекцией («BioRad Laboratories», США).
Количественное определение цитокинов ILip, IL8, IL17, IL10 в сыворотке крови осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием коммерческих тест-систем «Вектор-Бест» в соответствии с инструкцией производителя. Образцы крови собирали в течение 4-96 часов после рождения, центрифугировали 10 минут при 3000 об/ мин. Супернатанты хранили при -20 °С.
Анализ результатов выполняли с помощью программ Attestat 10.5.1, Statistica SPSS. Количественные значения данных представляли в виде медианы и интерквантильного (25 и 75 процентили) размаха (Me (Q1-Q)). Для оценки межгрупповых различий количественных признаков применяли критерий Манна - Уитни. Статистическую значимость различий в частотах аллельных вариантов и генотипов определяли с помощью критерия х2 Пирсона. Степень риска развития событий оценивали по величине отношения шансов (OR) с расчетом доверительного интервала CI. Статистически значимыми считали различия при p<0,05.
Результаты и обсуждение. У 39,3 % детей с ГИЭ 2 ст. и у 70 % с ГИЭ 3 ст. отмечалась задержка психомоторного и речевого развития. У 3,6 % детей с ГИЭ 2 ст. сформировалась гидроцефалия, у 3,6 % микроцефалия, у 13,6 % - эписиндром. В группе ГИЭ 3 ст. распространенность неблагоприятных неврологических исходов была выше - число больных с гидроцефалией составило 20,0 %, судорожным синдромом -30,0 %, потерей слуха - 20,0 %, зрения - 10,0 %, однако статистически значимых различий по сравнению с группой ГИЭ 2 выявлено не было. Детский церебральный паралич диагностирован у 3 (30,0 %) детей с ГИЭ 3 ст. и у одного пациента (3,6 %) с ГИЭ 2 ст.
При сравнении аллельных и генотипических частот TLR2 в зависимости от степени тяжести ГИЭ выявлено увеличение риска развития ГИЭ 3 ст. у резидентов мажорного аллеля 2258G (OR=2,17; 95 % CI:0,26-18,2, p=0,46) и носителей генотипа G2258G (OR=1,64; 95 % CI: 0,18-14,9, p=0,66). Однако связь была статистически незначимой (табл. 1).
MEDiCAL NEWS OF NORTH CAUCASUS
2021. Vоl. 16. 155. 4
Примечание: р - значимость различий между группами (критерий х2), OR - отношение шансов, С1 - 95 % доверительный интервал.
Таблица 1
Распределение частот аллелей и генотипов для полиморфных локусов генов TLR2 (^5743708) и TLR6 (^5743810) в зависимости от степени тяжести гипоксически-ишемической энцефалопатии
Аллели/ генотип ГИЭ 2 ст. п = 32 (I) ГИЭ 3ст. п = 13 (II) Контрольная группа п = 50 (III) х2 ОЯ (95 % а)
в2258Л
26/32 (81,2 %) 12/13 (92,3 %) 44/50 (88 %) Рьи =0,35 PI-ш =0,40 Рп-ш =0,66 0,49 (0,15-1,61) 1,64 (0,18-14,9)"
вА 6/32 (18,8 %) 1/13 (7,7 %) 4/50 (8 %) PI-П =0,35 PI-ш =0,15 Рп-ш =0,97 2,65 (0,69-10,27)' 0,96 (0,09-9,38)''
АА 0/32 (0 %) 0/13 (0 %) 2/50 (4 %) РI—II =0,10 PI-ш =0,25 Рн-ш =0,46 0,000' 0,000''
в 58/64 (90,6 %) 25/26 (96,2 %) 92/100 (92 %) PI-п =0,38 Рмп =0,76 Pн-ш =0,46 0,84 (0,28-2,55)' 2,17 (0,26-18,2)''
А 6/64 (9,4 %) 1/26 (3,8 %) 8/100 (8 %) PI-П =0,38 PI-ш =0,76 Рн-ш =0,46 1,19 (0,39-3,66)' 0,46 (0,06-3,85)''
TLR6 С745Т
СС 1/32 (3,1 %) 1/13 (7,7 %) 4/50 (8 %) Рьп =0,50 PI-ш =0,37 Рн-ш =0,97 0,37 (0,04-3,48)' 0,96 (0,098-9,38)''
СТ 11/32 (34,4 %) 1/13 (7,7 %) 19/50 (38 %) Рьп =0,06 PI-ш =0,82 Рп-ш =0,037 0,89 (0,35-2,28)' 0,136 (0,016-1,13)''
ТТ 20/32 (62,5 %) 11/13 (84,6 %) 27/50 (54 %) Рь„ =0,147 PI-ш =0,448 Рп-ш =0,045 1,42 (0,57-3,51)' 4,69 (0,94-23,35)''
С 13/64 (20,3 %) 3/26 (11,5 %) 27/100 (27 %) Рь„ =0,324 Рьш =0,331 РП-Ш =0,100 0,69 (0,33-1,46)' 0,35 (0,09-1,27)''
Т 51/64 (79,7 %) 23/26 (88,5 %) 73/100 (73 %) PI-П =0,323 PI-ш =0,331 РП-Ш =0,100 1,51 (0,71-3,18)' 2,84 (0,78-10,21)''
При анализе аллелей и генотипов в зависимости от неврологических исходов установлена высокая распространенность мажорного аллеля 22580 (97,5 % и 85,7 %, р=0,049), низкая - минорного 2258А (2,5 % и 14,3 %, р=0,049) у детей с неблагоприятными неврологическими последствиями ГИЭ (табл. 2). Показатель отношения шансов для обладателей дикого аллеля составил 0я=6,50, С1: 0,746-56,64. Установлено преобладание гомозиготного генотипа по дикому аллелю 00 (92,3 % и 71,4 %, р=0,045), с увеличе-
нием риска развития неблагоприятного исхода более чем в 7 раз (0я=7,60, С1: 0,82-70,16). Носительство мутантного аллеля 2258А и гетерозиготного генотипа 0А, напротив, ассоциировалось с низким риском неблагоприятного исхода. При сравнении показателей интерлейкинов в зависимости от генотипов выявлено увеличение М-р и М6 у пациентов с гомозиготным генотипом по доминантному аллелю 022580 по сравнению с генотипами 02258А+ А2258А (рис. а, Ь).
Аллели/ генотип Благоприятный исход п = 21 (I) Неблагоприятный исход п= 20 (II) х2 ОЯ (95 % а)
в2258Л
15/21 (71,4 %) 19/20 (92,3 %) Р =0,045 7,60 (0,82-70,16)
вД 6/32 (18,8 %) 1/20 (7,7 %) р = 0,045 0,132 (0,01-1,22)
ДА 0/32 (0 %) 0/20 (0 %) PI =1,00 0,000
в 36/42 (85,7 %) 39/40 (97,5 %) Р =0,049 6,50 (0,746-56,64)
А 6/42 (14,3 %) 1/40 (2,5 %) Р =0,049 0,154 (0,018-1,341)
TLR6 С745Т
СС 1/21 (4,8 %) 1/20 (5,0 %) Р =0,097 1,05 (0,06-18,05)
СТ 8/21 (38,1 %) 2/20 (10,0 %) р = 0,037 0,181 (0,947-19,07)
ТТ 12/21 (57,1 %) 17/20 (85,0 %) pI =0,049 4,250 (0,947-19,07)
С 10/42 (23,8 %) 4/40 (10,0 %) Р =0,097 0,356 (0,102-1,245)
Т 32/42 (76,2 %) 1/40 (90,0 %) Р =0,097 2,813 (0,803-9,851)
Примечание: р - значимость различий между группами (критерий х2 ), OR - отношение шансов, С1 - 95 % доверительный интервал.
Таблица 2
Распределение частот аллелей и генотипов для полиморфных локусов генов TLR2 (^5743708) и TLR6 (^5743810) в зависимости от исходов гипоксически-ишемической энцефалопатии
oRiGiNAL research
^^^^^^^^ Pediatrics
GG ÖA
a) Генотипы TLR2 и содержание IL1- ß
b) Генотипы TLR2 и содержание IL-6
22,7
■5.25
ТА
с) Генотипы TLR6 и содержание IL1-ß
140-12СГ 10ír во-60" 4020-о-
4 3,6
25.35
-1-
TT
d) Генотипы TLR6 и содержание IL-6
та
Рис. Содержание провоспалительных интерлейкинов у детей с гипоксически-ишемической энцефалопатией
в зависимости от полиморфизма генов ^Я. Примечание: р - различия между группами (критерий Манна - Уитни)
Гипоксически-ишемическое воспаление нередко связывают с активацией рецепторов врожденного иммунитета [6, 7]. Стимуляция TLR2 в результате гибели нейронов и образования эндогенных лиган-дов (фибриноген, ядерные и цитозольные белки, белки теплового шока, митохондриальная РНК) приводит к активации сигнальных путей с последующей индукцией мРНК и высвобождением провоспалительных цитокинов [10-12], способных привлекать в очаг повреждения клетки врожденного и адаптивного иммунитета - нейтрофилы, макрофаги, дендритные клетки, Т- и В-лимфоциты. В клинических и экспериментальных исследованиях ранее показана роль провоспалительных интерлейкинов в повреждении головного мозга новорожденных [4, 5, 13-15].
Важно отметить, что микроглия имеет широкий репертуар TLR, при этом TLR2 экспрессируется наиболее интенсивно. Внутриклеточный цитозольный фрагмент ответственен за включение адаптер-ного белка MyD88 и ядерного фактора транскрипции NF-kB, что приводит к увеличению синтеза ^-1, ^-2, ^-6, ^-8, ^-10, TNFa и движению иммунных клеток
в очаг повреждения [10-12]. При однонуклеотид-ном полиморфизме гена TLR2 в локусе rs5743708 в положении 2257 наблюдается замена G ^ A (гуанин^аденин) и конформационные изменения ци-топлазматической части TLR2 рецептора вследствие замещения Arg ^ Gln (аргинин^глутамин) [16]. Известно, что мутация сопровождается нарушением активации клеток и снижением продукции интерлейкинов [16]. Принято считать, что дикий аллель ассоциируется с более высокой продукцией интерлейкинов по сравнению с мутантным [17, 18], а блокирование TLR2 может предотвращать спонтанное высвобождение цитокинов [10, 11].
Исследования полиморфизма TLR2 rs5743708 убедительно показали, что гомозиготный генотип TLR2 по мажорному аллелю G2258G способствует выработке высоких уровней провоспалительных цитокинов и формированию неблагоприятных исходов, в то время как мутантный генотип имеет противоположный эффект. Известно, что провоспалительные цитокины имеют большое значение в иммунопатологии ГИЭ, и уменьшение их производства при гомозиготных мутациях может играть защитную роль при
medical news of north caucasus
2021. Vоl. 16. Iss. 4
гипоксически-ишемическом поражении ЦНС [13-15, 19].
Вероятность тяжелой формы ГИЭ возрастала у резидентов гомозиготного генотипа по минорному ал-лелю Т745Т (OR=4,60, CI: 0,82-70,16), частота встречаемости которого была существенно выше у детей с ГИЭ 3 ст. по сравнению со здоровыми детьми (84,6 % и 54 %, p=0,045) (табл. 1). У младенцев с инвалиди-зирующими неврологическими последствиями ГИЭ редким оказался гетерозиготный генотип TLR6 C745T (10 % и 38,7 %, p=0,037). При этом частота гомозиготного варианта по рецессивному генотипу Т745Т была существенно выше (85 % и 57,1 %, p=0,049), что сопровождалось увеличением риска неблагоприятных исходов (OR=4,25; CI: 0,947-19,07) (табл. 2).
Таким образом, наличие гомозиготного генотипа по мутантному аллелю Т745Т можно рассматривать в качестве одного из факторов, предрасполагающих к развитию тяжелой формы заболевания и инвали-дизирующих неврологических последствий. Кроме того, нами установлено, что пациенты с генотипом Т745Т имеют более высокие концентрации интерлей-кинов IL1-P и IL-6 по сравнению c генотипами С745С+ С745Т.
Известно, что ген TLR6 локализован на 4-й хромосоме (4р13), определяет формирование рецептора TLR6 (79б аминокислот), образующего гетеродимер с TLR2 и участвующего в активации ядерного фактора транскрипции NF-kB после взаимодействия с PAMP и DAMP [20]. При олигонуклеотидной мутации гена TLR6 745C/T в локусе 5743810 формируется замена нуклеиновой кислоты C ^ T (цитозин^тимин), что влечет за собой изменение аминокислотной последовательности рецептора с замещением серина (Ser) на пролин (Pro) в позиции 249 с трансформацией сигнальной активности ядерного фактора активации NF-кВ [21]. В ряде исследований продемонстрировано, что SNP TL6249 Ser/Pro (rs5743810) стимулирует высвобождение провоспалительных цитокинов, в том числе IL-2, IL-13, IL-6 и IF-r [18, 21].
Установлено, что TLR6 участвует в усилении воспалительного ответа, связанного с повреждением ткани [20, 21]. Генотип Ser/Ser уменьшает активацию фактора транскрипции NF-kB и синтез IL-6 [18, 21]. На моделях цереброваскулярных заболеваний установлено, что TLR6 может способствовать воспалению и нейродегенерации с помощью лиганда CD36, образуя димер c TLR4, что связано с окислительным повреждением и геморрагическими расстройствами.
В клинических исследованиях показано, что носи-тельство генотипа Pro/Pro выполняет предиктивную функцию при ишемическом инсульте у взрослых, а аллеля Ser и генотипов Ser/Ser - протективную [18, 21]. Показано, что другие полиморфизмы гена TLR6
также могут вносить свой вклад в продукцию IL1-P, IL-6, IL-8, IL-12, TNF-a при ишемическом инсульте у взрослых [22]. Молекулярный механизм, связывающий ассоциацию Ser/249 TLR6 с низким синтезом провоспалительных цитокинов не до конца понятен. Существует мнение, что мутантный аллель увеличивает количество функциональных участков в LRR-фрагменте TLR6, обеспечивая взаимодействие с большим числом лигандов и более высокую продукцию провоспалительных интерлейкинов [21, 23].
Таким образом, TLR2 и TLR6 являются клеточными «сенсорами», способными активироваться под действием продуктов распада, а их генетические вариации могут заметно влиять на продукцию провоспалительных цитокинов, а следовательно - на тяжесть и исход гипоксии-ишемии. Чрезмерная активация TLR с помощью DAMP вызывает хроническое воспаление и необратимое повреждение тканей, что рассматривается сегодня в рамках «гомеостатического воспаления» [19, 20, 24]. Нами было показано, что гомозиготные генотипы дикого типа TLR2 G2258G и TLR6 T745T определяют выработку высоких концентраций провоспалительных цитокинов и неблагоприятные неврологические исходы, в то время как мутантные генотипы обусловливают противоположный эффект. Полученные данные имеют предварительный характер, необходимы дальнейшие исследования в различных этнических группах для подтверждения роли данных SNP в развитии гипоксически-ишемического поражения ЦНС.
Заключение. Полиморфизмы гена TLR2 G2258A (rs5743708) не влияют на развитие тяжелой формы гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных чеченской национальности. Фактором риска развития ГИЭ 3 ст. является гомозиготный по мутантному аллелю генотип TLR6 T745Т. Молекуляр-но-генетическими маркерами неблагоприятных неврологических исходов у детей с ГИЭ являются дикий аллель TLR2 2258G и гомозиготные по дикому (TLR2 G2258G) и мутантному (TLR6 7745Т) аллелям генотипы. К протективным маркерам относятся рецессивный аллель TLR2 2258А и гетерозиготный генотип TLR2 G2258A.
Высокие показатели сывороточных интерлейкинов IL1-p, IL-6 у детей с гипоксически-ишемической энцефалопатией 2 и 3 степени ассоциированы с генотипами G2258G и T745Т.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Авторы выражают благодарность директору Ставропольского научно-исследовательского противочумного института чл.-кор. РАН, доктору медицинских наук, профессору А. Н. Куличенко за помощь в организации исследования.
Литература/References
1. Каркашадзе Г. А., Аникин А. В., Зимина Е. П., Давыдова И. В., Каримова Х. М. [и др.]. Современные данные о патогенезе и лечении гипоксически-ишемических поражений головного мозга у новорожденных. Педиатрическая фармакология. 2016;13(5):452-467. [Karkashadze G. A., Anikin A. V., Zimina E. P., Davydo-va I. V., Karimova Kh. M. [et al.]. Recent Information on the Pathogenesis and Treatment of Hypoxic-Ischemic Brain Lesions in Newborns. Pediatricheskaya farmakologiya. -Pediatric pharmacology. 2016;13(5):452-467. (In Russ.)]. https://doi.org/10.15690/pf.v13i5.1641
2. Boskabadi H., Moradi A., Zakerihamidi M. Interleukins in diagnosis of perinatal asphyxia: A systematic review. Int. J. Reprod. Biomed. (Yazd). 2018;17(5):303-314. https://doi.org/10.18502/ijrm.v17i5.4598
3. Jiang L. J., Xu Z. X., Wu M. F., Dong G. Q., Zhang L. L. [et al.]. Resatorvid protects against hypoxic-ische-mic brain damage in neonatal rats. Neural Regen. Res. 2020;15(7):1316-1325. https://doi.org/10.4103/1673-5374.272615
4. Xiong L. L., Xue L. L., Al-Hawwas M., Huang J., Niu R. Z. [et al.]. Single-nucleotide polymorphism screening and RNA sequencing of key messenger RNAs associated with neonatal hypoxic-ischemia brain damage. Neural Regen. Res. 2020;15:86-95. Availabie at: https://www.nrronline. org/text.asp?2020/15/1/86/264469
5. Chang Y., Kong R. Ganoderic acid A alleviates hypo-xia-induced apoptosis, autophagy, and inflammation in rat neural stem cells through the PI3K/AKT/mTOR pathways. Phytother. Res. 2019;33:1448-1456. https://doi.org/10.1002/ptr.6336
ORiGiNAL RESEARCH
^^^^^^^^ Pediatrics
6. Mottahedin A., Svedin P., Nair S., Mohn C. J., Wang X. [et al.]. Systemic activation of Toll-like receptor 2 suppresses mitochondrial respiration and exacerbates hypoxic-is-chemic injury in the developing brain. J. Cereb. Blood Flow Metab. 2017;37(4):1192-1198. https://doi.org/10.1177/0271678X17691292
7. Dallas M. L., Widera D. TLR2 and TLR4-mediated inflammation in Alzheimer's disease: self-defense or sabotage? Neural Regen. Res. 2021;16:1552-1553. Availabie at: http://www.nrronline.org/text.asp?2021/16/8/1552/303016
8. Федеральное руководство по детской неврологии. Под редакцией Гузевой В. И. М.: ООО "МК", 2016. [Fede-ral'noe rukovodstvo po detskoy nevrologii. Pod redaktsiey Guzevoy V. I. M.: OOO "MK", 2016. (In Russ.)].
9. Sarnat H. B., Sarnat M. S. Neonatal encephalopathy following fetal distress. A clinical and electroencephalogra-phic study. Arch. Neurol. 1976;33(10):696-705.
10. El-Zayat S. R., Sibaii H., Mannaa F. A. Toll-like receptors activation, signaling, and targeting: an overview. Bull. Natl. Res. Cent. 2019;43:187. https://doi.org/10.1186/s42269-019-0227-2
11. Grassin-Delyle S., Abrial C., Salvator H., Brollo M., Na-line E., Devillier P. The Role of Toll-Like Receptors in the Production of Cytokines by Human Lung Macrophages. J. Innate. Immun. 2020;12(1):63-73.
https://doi.org/ 10.1159/000494463
12. Zhang Y., Liu J., Wang C., Liu J., Lu W. Toll-Like Receptors Gene Polymorphisms in Autoimmune Disease. Front. Immunol. 2021;12:672346. https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.672346
13. Orrock J. E., Panchapakesan K., Vezina G., Chang T., Harris K. [et al.]. Association of brain injury and neonatal cytokine response during therapeutic hypothermia in new-borns with hypoxic-ischemic encephalopathy. Pediatr Res. 2016;79:742-747.
14. Numis A. L., Foster-Barber A., Deng, X., Rogers E. E., Barkovich A. J. [et al]. Early changes in pro-inflammatory cytokine levels in neonates with encephalopathy are associated with remote epilepsy. Pediatr. Res. 2019;86:616-621. https://doi.org/10.1038/s41390-019-0473-x
15. Барычева Л. Ю., Идрисова А. С., Кузьмина Е. С., Агранович О. В. Клиническое значение провоспалительных интерлейкинов у новорожденных с гипоксически-ише-мическим поражением ЦНС. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2021;16(3):310-312. [Barycheva L. Yu., Idrisova A. S., Kuzmina E. S., Agranovich O. V. Clinical significance of proinflammatory interleukins in newborns
with hypoxic-ischemic CNS damage. Meditsinskii vestnik Severnogo Kavkaza. - Medical News of North Caucasus. 2021;16(3):310-312. (In Russ.)]. https://doi.org/10.14300/mnnc.2021.16074
16. Mukherjee S., Karmakar S., Prasad S., Babu S. TLR2 and TLR4 mediated host immune responses in major infectious diseases: a review. Braz. J. Infect. Dis. 2016;20(2):193-204. https://doi.org/10.1016/j.bjid.2015.10.011
17. Christodoulides A., Boyadjian A., Kelesidis T. Spirochetal Lipoproteins and Immune Evasion. Front. Immunol. 2017;29(8):364. https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00364
18. Крохалева Ю. А., Страмбовская Н. Н., Алферова А. Е. Генетический полиморфизм toll-рецепторов у больных ишемическим инсультом в Забайкальском крае. Забайкальский медицинский вестник 2014;4:62-67. [Krokhaleva Yu. A., Strambovskaya N. N., Alferova A. E. Genetic polymorphism of toll-receptors at patients with ischemic stroke in Zabaykalsky krai. Zabaykal'skiy meditsin-skiy vestnik. - Transbaikalian Medical Bulletin. 2014;4:62-67. (In Russ.)].
19. Goulopoulou S., McCarthy C. G., Webb R. C. Toll-like Receptors in the Vascular System: Sensing the Dangers Within. Pharmacol. Rev. 2016;68(1):142-167. https://doi.org/10.1124/pr.114.010090
20. Fukui R., Murakami Y., Miyake K. New application of an-ti-TLR monoclonal antibodies: detection, inhibition and protection. Inflamm. Regener. 2018;38:11. https://doi.org/10.1186/s41232-018-0068-7
21. Hamann L., Koch A., Sur S., Hoefer N., Glaeser C. [et al.]. Association of a common TLR-6 polymorphism with coronary artery disease - implications for healthy ageing? Immun. Ageing. 2013;10(1):43. https://doi.org/10.1186/1742-4933-10-43
22. Frazao J. B., Errante P. R., Condino-Neto A. Toll-like receptors' pathway disturbances are associated with increased susceptibility to infections in humans. Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz) 2013;61(6):427-443. https://doi.org/10.1007/s00005-013-0243-0
23. Semlali A., Almutairi M., Rouabhia M., Reddy Parine N., Al Amri A. [et al.]. Novel sequence variants in the TLR6 gene associated with advanced breast cancer risk in the Saudi Arabian population. PLoS One. 2018;13(11):e0203376. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0203376
24. Langan D., Rose N. R., Moudgil K. D. Common innate pathways to autoimmune disease. Clin. Immunol. 2020;212:108361.
https://doi.org/10.1016/j.clim.2020.108361
Сведения об авторах:
Идрисова Аминат Султановна, заместитель главного врача по лечебной работе;
тел.: 89205411111; е-mail: aminat.idrisova.78@mail.ru; https://orcid.org/0000-0001-5161-3470
Барычева Людмила Юрьевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой иммунологии; тел.: 89187405484; е-mail: for_ludmila@inbox.ru; https://orcid.org/0000-0002-4069-0566
Кузьмина Екатерина Сергеевна, врач-невролог; тел.: 89620104810; е-mail: aminat.idrisova.78@mail.ru
Межидов Казбек Султанович, кандидат медицинских наук, главный врач;
тел.: 89280214343; kmezhidov@mail.ru; https://orcid.org/my-orcid?orcid = 0000-0002-6032-6286
Агранович Олег Виленович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой неврологии и нейрореабилитации,
тел.: 89624548452; е-mail: oagranovich@yandex.ru; https://orcid.org/0000-0002-0261-612X
Голубева Марина Викторовна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой детских инфекционных болезней; тел.: (8652)264312; e-mail: mmvg@rambler.ru
