CC BY
42
УДК 611.018;591.8
Ключевые слова: крыса, нижний сегмент матки, шейка матки, миометрий, гладкие миоциты
Key words: rat, lower uterus segment, cervix uteri, myometrium, smooth muscle cells
Григорьева Ю. В., Ямщиков Н. В., Кулакова О. В., Бормотов А. В.
ПОЛИМОРФИЗМ МИОЦИТОВ МИОМЕТРИЯ МАТКИ У КРЫС
ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ
POLYMORPHISM OF MYOMETRIUM MYOCYTES IN RATS ACROSS PREGNANCY
ТБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Адрес: 443099, Россия, г. Самара, ул. Чапаевская, 89
'Samara State Medical University of the Ministry of Health Care of the Russian Federation Address: 443099, Russia, Samara, Chapaevskaya street, 89
2МУЗ КБ № 5 г. о. Тольятти Адрес: 445846, Россия, г. Тольятти, бульвар Здоровья, 25 2Municipal Health Care Institution Clinical Hospital No. 5 of Togliatti district Address: 445846, Russia, Togliatti, Zdorov'ya boulevard, 25
Григорьева Юлия Владимировна, к. м. н., доцент каф. гистологии, цитологии и эмбриологии1
Grigorieva Yulia V., Ph.D. in Medical Science, Associate Professor of the Dept. of Histology, Cytology and Embryology' Ямщиков Николай Васильевич, д. м. н., проф., зав. каф. гистологии, цитологии и эмбриологии1 Yamshchikov Nikolai V., Doctor of Medical Science, Professor, Head of the Dept. of Histology,
Cytology and Embryology1 Кулакова Олеся Викторовна, к. м. н., ст. преподаватель каф. гистологии, цитологии и эмбриологии1 Kulakova Olesya V., Ph.D. in Medical Science, Senior Lecturer of the Dept. of Histology, Cytology and Embryology1 Бормотов Александр Васильевич, зав. патологоанатомическим отделением2 Bormotov Alexander V., Head of the Anatomic Pathology Dept.2
Аннотация. Общегистологическое и иммуногистохимическое исследование миометрия в нижнем сегменте матки в разные фазы эстрального цикла и при беременности позволило выявить полиморфизм гладких миоцитов, который становится заметным к 20 суткам беременности. Установлено, что в наружном слое миометрия тела и шейки матки и в участке слияния медиальных стенок рогов в тело матки к концу беременности визуализируются миоциты, отличающиеся крупными размерами, которые интегрируются в волокна с просветленной цитоплазмой, содержащей небольшое количество миофибрилл. Такое строение мышечной ткани напоминает по строению незрелые скелетные мышечные волокна или функциональные сердечные мышечные волокна. Полученные данные могут быть интересны для акушеров-гинекологов для понимания сути родовой деятельности. Summary. General histological and immune histochemical studies of myometrium in the lower uterus segment in rats during different phases of the estrous cycle and across pregnancy revealed polymorphism of smooth muscle cells which became noticeable by the 20th day of pregnancy. It is established that myocytes become visualisable in the external layer of myometrium of the corpus uteri and the cervix uteri as well as at the junction of medial walls of uterine horns to the corpus uteri by the end ofpregnancy. These myocytes are of large size and settle into fibers with clear cytoplasm which contains a small number of myofibrils. Such a structure of the muscle tissue is similar to one of immature skeletal muscle fibers or functional cardiac muscle fibers. The data obtained may be of interest to obstetrician-gynecologists for better understanding of the essence of labor.
Введение
Знание основ строения лабораторных животных является непременным условием квалифицированной подготовки специалистов в области биологии, медицины и ветеринарии [4]. Крыса уже полтора столетия используется в различных экспериментах. Она служит биологической моделью для познания общих закономерностей эмбриональ-
ного развития, механизмов дифференциров-ки клеток, гистогенеза, морфогенеза и др. Кроме того, только сравнительное изучение строения половых органов различных представителей млекопитающих может позволить проследить гомологию их строения, раскрыть особенности их эволюционного развития и выделить основные аспекты механизмов функционирования.
Согласно общепринятой классификации типов маток у млекопитающих матку крыс считается двураздельной [1, 4]. Ранее нами было установлено, что стенки правого и левого маточных рогов срастаются, формируя тело и шейку, их полости остаются отделенными друг от друга тонкой перегородкой и открываются во влагалище двумя отдельными отверстиями, следовательно, матку крыс следует отнести к двойной [2].
Следует отметить, что в учебных изданиях по биологии, гистологии и ветеринарии, выпущенных в последнее десятилетие и тем более ранее, отсутствуют сведения о гистологическом строении нижнего сегмента матки. Имеющиеся данные касаются преимущественно строения рогов матки, а гладкая мышечная ткань миометрия в нижнем ее сегменте остается практически неизученной [3, 5-7].
Целью данного исследования явилось исследование гладкой мышечной ткани миометрия в нижнем сегменте матки в разные фазы эстрального цикла и при беременности.
Материалы и методы
Объектом исследования служили матки половозрелых крыс в разные стадии эстрального цикла и с датированным сроком беременности. Работа выполнена на 21 крысе половозрелого возраста в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Забор материала производился на 15, 17, 19, 20 сутки беременности и в период родов. Контролем служили крысы в разные фазы эстрального цикла. Фазу эстрального цикла определяли по вагинальному мазку, окрашенному мети-леновой синью. В работе использованы методы световой микроскопии с окраской срезов гематоксилином и эозином и по методу Массона. Также проведено имму-ногистохимическое исследование тканей шейки матки с применением набора моно-клональных антител к гладкомышечному актину и антигену пролиферации Кь67. Типирование проводили с использованием антител фирмы DACO.
Результаты и обсуждение
При гистологическом исследовании нижнего сегмента матки установлено, что в различных ее отделах, а именно в рогах, теле и шейке миометрий, состоит из трех слоев: внутреннего (подслизистого), образованного циркулярно ориентированными миоцитами; среднего (сосудистого) с небольшим количеством гладких миоцитов, косопоперечного направления; наружного (надсосудистого) с мышечными клетками косопродольного направления.
В нижнем сегменте определяется срединная перегородка, разделяющая две полости нечетко выраженного тела и шейки матки. Участок слияния характеризуется объединением наружной оболочки - периметрия и части миометрия, а именно его надсосудистого и сосудистого слоев. Таким образом, срединная перегородка имеет в своем строении под-слизистые слои миометрия, тонкую полоску сосудистого слоя и эндометрий, окружающий ее с обеих сторон. Ближе к наружному отверстию шейки матки толщина миометрия срединной перегородки увеличивается в три раза по сравнению с ее толщиной на уровне тела. Сосудистый слой более выражен в теле.
Миоциты миометрия нижнего сегмента матки преимущественно имеют верете-новидную форму с палочковидным ядром (рис. 1). Соединительная ткань окружает каждую мышечную клетку матки. Миоци-ты объединяются в мышечные пучки, которые переплетаются в разных направлениях и также окружены соединительной тканью. В различные фазы эстрального цикла достоверных отличий между миоцитами не выявлено (рис. 1).
Однако при беременности, и особенно в последние дни беременности, а именно на 20 сутки, отмечается выраженный полиморфизм миоцитов.
В наружном слое миометрия в месте расположения медиальных стенок и их слияния в тело становятся заметными группы миоцитов, отличающиеся крупными размерами. Миоциты интегрируются в волокна с просветленной цитоплазмой, содержащей небольшое количество миофибрилл. В центре клеток видны округлые ядра (рис. 2).
Рис. 1. Стенка тела матки на 20 сутки беременности. Окраска: по Массону. Увел. 200*. Веретеновидные лейомиоциты в стенке миометрия, между которыми видны волокна соединительной ткани.
Рис. 2. Стенка тела матки на 20 сутки беременности. Окраска: гематоксилин и эозин. Увел. 40*. В наружном слое миометрия видны мышечные пучки, разделенные прослойками соединительной ткани, образованные крупными и более светлыми клетками.
Рис. 3. Стенка тела матки во время родов. Окраска: по Массону. Увел. 200*. Мышечные волокна с небольшим количеством миофибрилл, окруженные разрыхленной соединительной тканью.
Рис. 4. Положительная экспрессия гладкомышечного актина в стенке тела матки крысы на 20 сутки беременности. ИГХ. Увел. 100*.
Миоциты сходного строения определяются в наружном слое миометрия тела и шейки
Рис. 5. Экспрессия антигена Ki-67 в стенке тела матки крысы на 20 сутки беременности. ИГХ. Увел. 100*. Экспрессия антигена пролиферации в эндотелии стенки сосудов тела матки на 20 сутки беременности.
матки по ходу латеральных стенок в каудаль-ном направлении к наружному отверстию цервикального канала.
Такое строение мышечной ткани в наружном слое миометрия напоминает по структурной организации незрелые скелетные мышечные волокна или функциональные сердечные мышечные волокна (рис. 3).
При иммуногистохимическом окрашивании срезов мышечные волокна миометрия дают выраженную экспрессию на гладкомы-шечный актин (рис. 4).
В миометрии беременных крыс отмечено, что экспрессия антигена Ki-67 не определяется в миоцитах тела и шейки матки и сохраняется лишь в эндометрии стенок сосудов и в клетках соединительной ткани (рис. 5).
Выводы
Таким образом, мы имеем дело с изменениями адаптационно-приспособительного характера, проявляющимися в гипертрофии клеток - процессе увеличения их в размерах и растяжения в длину, а не усилении пролиферации. Также следует отметить, что первыми в реактивном преобразовании реагируют клетки наружного слоя миометрия.
Второй вариант увеличения объема органа при беременности, такой как гиперплазия, возможен за счет пролиферации клеток соединительной ткани, а именно фибробластов, которые характеризуются миобластическим фенотипом, а именно приобретением специализированной сократительной функции.
Проведенное морфологическое исследование свидетельствует о полиморфизме ми-оцитов в нижнем сегменте матки. Функци-
ональное значение таких морфологических преобразований миоцитов, вероятно, отражает готовность матки к изгнанию плода, что может представлять интерес для акушеров-гинекологов для понимания сути родовой деятельности.
Список литературы
1. Акаевский, И. А. Анатомия домашних животных / И. А. Акаевский [и др.] / Под ред. лауреата Гос. премии СССР, заслуженного деятеля науки РСФСР, профессора И. А. Акаевского. - 4-е изд., испр. и допол. - М. : Колос, 1984. - С. 543.
2. Григорьева, Ю. В. Особенности строения мио-метрия нижнего сегмента матки лабораторных крыс / Ю. В. Григорьева, Н. В. Ямщиков, А. В. Бормотов, К. Ф. Гарифуллина // Фундаментальные исследования. - № 12 (ч. 1), 2012 - С. 48-51.
3. Дубинин, Е. В. Морфологические преобразования в миометрии крыс во время беременности и
в раннем послеродовом периоде : дис. ... канд. мед. наук. / Е. В. Дубинин. - Новосибирск, 2005. - С. 28.
4. Ноздрачев, А. Д. Анатомия крысы (лабораторные животные) / А. Д. Ноздрачев, Е. Л. Поляков ; под ред. проф. А. Д. Ноздрачева. - СПб. : Лань, 2001. - 464 с.
5. Созыкин, А. А. Морфологические аспекты нормального гистогенеза и реактивных изменений гладкой мышечной ткани миометрия крыс : дис. ... канд. мед. наук / А. А. Созыкин. - 2004. - С. 32.
6. Darios E. S. Smooth muscle pharmacology in the isolated virgin and pregnant rat uterus and cervix / E. S. Darios, B. Seitz, S. W. Watts // J. Pharmacol Exp Ther. - 2012. Jun; - 341 (3) : 587-96. doi: 10.1124/ jpet.111.191031. Epub 2012 Feb 24. PubMed PMID : 22366660.
7. Dolgikh, O. V. Adaptive transformation of rat myometrium with the progression of pregnancy and after parturition / O. V. Dolgikh, Iu. V. Agafonov, A. L..Zashikhin - Morfologiia. - 2012; 142 (5) : 5963. Russian. PubMed PMID: 23330440.
НОУ ДО «Институт Ветеринарной Биологии» представляет курс обучения
«основы нетрадиционных методов терапии мелких домашних животных»
1 день. Что такое гомеопатия. История, принцип подобия. Здоровье и болезнь с точки зрения гомеопатии. Материя медика и реперторий. 2 день. Принципы подбора гомеопатических препаратов. Комплексные препараты, тканевые препараты, нозоды. 3 день. Акупунктура. Теоретические основы. История возникновения чжень-цзю терапии. Учение о жизненной энергии чи. Учение о каналах и точках. Современные методы исследования. 4 день. Рефлексотерапия. Магнитотерапия, дэнастерапия, КВЧ-терапия, биорезонансная терапия. 5 день. Гирудотера-пия. История возникновения, механизм воздействия пиявки. Постановка пиявки. Принципы акупунктурной диагностики. Подбор точек в рецепты. Практическое занятие по акупунктуре.
График проведения: 27-31 января, 24-28 марта, 19-23 мая 2014 года
место проведения: СПб, ул. Ораниенбаумская, д. 3-Б, Институт Ветеринарной Биологии
стоимость участия: 21 000 р. (НДС не облагается)
Подробная информация, заявка на участие, видео- и письменные отзывы о семинаре: www.invetbio.spb.ru/seminar_netrad_metody.htm
Будем рады видеть вас среди наших слушателей!
Предварительная запись обязательна: т. +7 921 095-89-27, e-mail: [email protected]
