CC BY
161
[гиена и санитария 3/2014
естественной освещенности.
Таким образом, выявлены социально-гигиенические факторы, способные влиять на здоровье и нервнопсихический статус обследуемых: низкий уровень материального обеспечения, недостаток или расстройство сна более чем у 60% опрошенных (до 20% работающих спят менее 5 ч), наличие вредных привычек. Анализ различных видов отдыха для снятия утомления показал, что ночной сон считают восстанавливающим только 36% работающих, выходные дни - 68%, что может способствовать снижению работоспособности и развитию заболеваний.
Выводы. 1. Работники основных подразделений кондитерской фабрики подвергаются воздействию комплекса неблагоприятных производственных факторов. Ведущими факторами являются повышенные уровни шума, превышение ПДУ содержания пыли растительного происхождения в воздушной среде. Кроме того, женщины работают в условиях некомфортного освещения, в вынужденной рабочей позе, в состоянии постоянного психоэмоционального напряжения.
2. Условия трудовой деятельности лиц основных профессий вафельного и карамельного цехов соответствуют вредным условиям труда I, II и III степени (класс 3.1-3.3).
3. Ведущее место в формировании здоровья рабочих современного предприятия пищевой промышленности (кондитерской фабрики) занимают условия труда, второе место - социально-экономические факторы, третье - образ жизни.
Литер атур а
1. Онищенко Г.Г. Влияние состояния окружающей среды на здоровье населения. Нерешенные проблемы и задачи. Гигиена и санитария. 2003; 1: 3-7.
2. Истомин A.B., Мишкич И.А., Махотин Г.И., Рыжков М.Г. Современные проблемы гигиены на пищевых предприятиях. Монография. 2-е изд. М.: Компания «Алекс»; 2002. 284 с.
3. Мишкич И.А. Гигиенические основы охраны здоровья женщин, занятых на предприятиях по производству и реализации продуктов питания: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. СПб.; 2001. 44 с.
4. Моцкус A.B. Гигиеническая оценка условий труда на предприятиях продовольственной торговли. В кн.: Региональные проблемы окружающей среды и здоровья населения: Науч. труды. вып. 7. Ростов н/Д.; 2002: 36-9.
5. Куковякин С.А. Относительные величины, показатели динамического ряда, оценка достоверности результатов исследования: Учебное пособие. Киров: Кировская гос. мед. акад.; 2006. 10 с.
Reference s
1. Onishchenko G.G. Influence of the environment on human health . Unsolved problems. Gigiena i sanitariya. 2003; 1: 3-7.
2. Istomin A.B., Mishkich I.A. Makhotin G.I. Ryzhkov M.G. Contemporary problems of hygiene in food businesses. 2nd ed. Moscow: Company “Alex”; 2002. 284 p.
3. Mishkich I.A. Hygienic bases of the health of women employed in enterprises in the production and sale of food products: Dis. St. Petersburg; 2001. 44.
4. Motskus A.B. Hygienic evaluation of working conditions in the food trade . In: Regional problems of environmental protection and public health: Scientific works. [Regional’nye problemy okruzhayushchey sredy i zdorov’ya naseleniya: Nauch. trudy]. Issue 7 . Rostov-na-Donu, 2002: 36-9.
5 . Kukovyakin S .A . Relative values, indicators of dynamic-series evaluation of the reliability of the results: Textbook. [Otnositel’nye velichiny, pokazateli dinamichesko-go ryada, otsenka dostovernosti rezul’tatov issledovaniya. Kirov: Kirov State. Med. Acad.; 2006. 10.
Поступила 19.04.12 Received 19.04.12
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 575:599.9
Кочетова О.В.1, ГайнуллинаМ.К.2, Викторова Т.В.1,3
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ DIO2, TPO, CYP1A1 И CYP1A2 У ЖЕНЩИН
с заболеваниями Щитовидной железы
1ФГБУН «Институт биохимии и генетики» Уфимского научного центра РАН, 460054, Уфа; 2ФГБУН «Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека» Роспотребнадзора, 450106, Уфа; 3ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет», 450000, Уфа
Проведен анализ полиморфных локусов генов CYP1A1 (2454A>G, -3798T>C); CYP1A2 (-163C>A, -2467delT); ТРО (2173A>C, 769G>T); DIO2 (274A>G) у женщин нефтеорганического синтеза и контрольной группы с заболеваниями щитовидной железы (аутоиммунным тиреоидитом и узловым зобом). Молекулярногенетическими маркерами предрасположенности к развитию заболеваний щитовидной железы являются: генотип GG и аллель G гена DlO2(274A>G), генотипы СТ и СС гена CYP1A1(-3798T>C), ассоциированные с развитием узлового зоба, генотипы TD и DD гена CYP1A2(-2467delT), ассоциированные с развитием аутоиммунного тиреоидита. Была показана ассоциация полиморфных вариантов гена DIO2(274A>G) с повышенным уровнем антител к ТРО и гена ТРО (2173A>C) с повышенным уровнем свободного Т4.
Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит; узловой зоб; ген-средовые взаимодействия; тиреоидная перокси-даза; дейодиназа.
O. V Kochetova1, M. K. Gaynullina2, T. V Viktorova1 3 - DIO2, TPO, CYP1A1 AND CYP1A2 GENE POLYMORPHISM IN WOMEN WITH THYROID DISEASE
для корреспонденции: Кочетова О.В, Olga_MK78@mail.ru
52
1Institute of Biochemistry and Genetics of Ufa Scientific Centre of Russian Academy of Sciences, Ufa, Russian Federation, 450054; 2Ufa Scientific Research Institute of Occupational Health and Human Ecology, Ufa, Russian Federation, 450106; 3Bashkir State Medical University, Ufa, Russian Federation, 450000
The analysis of polymorphisms of genes CYP1A1 (2454A> G,-3798T> C); CYP1A2 (-163C> A,-2467delT); TPO (2173A> C, 769G> T); DIO2 (274A > G) in women from the oil organic synthesis plant and the control group with thyroid disease (autoimmune thyroiditis and nodular goiter) has been performed. Molecular genetic markers of predisposition to the development of thyroid disease are: GG genotype and allele G gene DIO2 (274A> G), CT and CC genotypes of the gene CYP1A1 (-3798T> C), associated with the development of nodular goiter, and DD genotypes TD CYP1A2 gene (-2467delT), associated with the development of autoimmune thyroiditis. There was shown an association ofpolymorphic variants of the gene DIO2 (274A> G) with elevated levels of antibodies to TPO and TPO gene (2173A> C) with elevated levels of free T4.
Key words: autoimmune thyroiditis, nodular goiter, gene - environment interactions, thyroid peroxidase, deiodinase.
В структуре неинфекционных заболеваний тиреоидная патология, обусловленная недостаточностью йода в биосфере, занимает первое место по территориальной распространенности [1]. Механизмы воздействия зобогенных веществ на формирование тиреоидной патологии на сегодняшний день мало изучены, но эта проблема актуальная [2]. Известно, что «поллютанты» промышленного происхождения блокируют функцию щитовидной железы и вызывают ее рост. Эти вещества, блокируя окислительные ферменты, нарушают процесс синтеза тиреоидных гормонов, что приводит к компенсаторной гиперплазии щитовидной железы, а в дальнейшем - к формированию зоба [2].
Молекулярные основы генетической предрасположенности к действию токсичных веществ обусловлены полиморфизмом генов, участвующих в биотрансформации ксенобиотиков [3]. Однако подавляющее большинство генетических и средовых факторов, оказывающих влияние на формирование патологии щитовидной железы, остается неизвестным [2, 3]. Учитывая немаловажную роль системы биотрансформации в обезвреживании вредных веществ, поступающих в организм работниц в процессе производственной деятельности, поиск генетических маркеров индивидуальной чувствительности среди генов биотранформации ксенобиотиков представляется актуальным.
В исследованиях, проведенных у близнецов, было показано, что уровень ТТГ и соотношение ТТГ и Т4 на 65% определяются генетическими факторами [4, 5]. Показана зависимость уровня тиреоидных гормонов от полиморфных вариантов генов дейодиназы II типа (DIO2) и тиреоидной пероксидазы (ТРО). Однонуклеотидные замены ДНК этих генов являются одной из основных причин нарушения органификации йода и метаболизма тиреоидных гормонов [4, 5].
Цель работы - молекулярно-генетический анализ генов CYP1А1, CYP1A2, тРо, DIO2 в развитии аутоиммунного тиреоидита (АИТ) и узлового зоба (УЗ) у женщин, работающих в условиях вредных производств, и определение зависимости полиморфных вариантов исследуемых генов от уровня антител к ТРО и гормонов: ТТГ и св. Т4.
Материалы и методы
В работе использованы образцы ДНК 410 женщин, проживающих на территории Республики Башкортостан. Диагнозы АИТ и УЗ были верифицированы на основании комплексного клинико-инструментального исследования лечащими врачами и сотрудниками отдела ФБУН «Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека» Роспотребнадзора в соответствии с МКБ-10. 1-ю группу (основную) составили 296 женщин лаборантов производств органического синтеза «Газпром
нефтехим Салават»; 2-ю группу (контроля) составили 114 женщин, проживающих в данном регионе, не контактирующих с токсичными веществами (табл. 1). От всех участников было получено информированное добровольное согласие на использование биологического материала в планируемых исследованиях.
Для оценки функционального состояния гипофизарно-тиреоидной системы определяли сывороточный уровень свободного тироксина (св. Т4, границы нормы для базального уровня 10-23,2 пмоль/л), тиреотропно-го гормона (ТТГ, границы нормы для базального уровня 0,23-3,4 мкМЕ/мл), содержание антител к тиреоидной пероксидазе (АТ-ТПО, границы нормы для базального уровня 0-30 Ед/мл) методом твердофазного иммуноферментного анализа. Исследование проводилось в МСЧ «Газпром нефтехим Салават».
Проведение ПЦР. ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови с использованием фенольнохлороформной экстракции. Полиморфные локусы генов CYPU1 (2454A>G, -3798T>C); CYP1A2 (-163C>A, -2467delT); ТРО (2173A>C, 769G>T); DIO2 (274A>G) анализировали методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим расщеплением ферментами HindII, MspI, FauNDI, Bsp120I, BsaJI, RsaI соответственно производства «СибЭнзим» и «Fermentas». Геноти-пирование локуса ТРО (769G>T) было проведено с использованием метода аллель-специфической тетра-
Таблица 1
Характеристика групп
Показатель Группа, подверженная воздействию химического фактора Группа, не подверженная воздействию химического фактора
АИТ (n = 100) 79 21
Средний возраст, годы 43,10 ± 6,96 47,12 ± 6,59
Стаж, лет 20,49 ± 7,94 18,13 ± 10,31
ИМТ 26,26 ± 8,38 29,71 ± 5,96
УЗ (n = 160) 122 38
Средний возраст, годы 42,68 ± 6,31 46,59 ± 6,95
Стаж, лет 20,97 ± 7,43 20,9 ± 8,77
ИМТ 26,40 ± 8,89 25,92 ± 7,16
Здоровые (n =150) 95 55
Средний возраст , годы 41,10 ± 5,09 43,05 ± 6,56
Стаж, лет 15,86 ± 7,97 16,19 ± 8,03
ИМТ 23,04 ± 6,04 23,57 ± 5,48
53
гиена и санитария
З/2014
праймерной ПЦР (ARMS-PCR) [6]. Методы идентификации полиморфных аллелей и олигонуклеотидные праймеры изученных локусов описаны ранее [7-11].
Статистическая обработка результатов. Для количественных показателей вычислялись медиана (Ме) и интерквартильный размах (25%; 75%), для возраста и стажа работы высчитывали среднее (M) и стандартное отклонение (SD). Сравнение проводили с помощью непараметрических методов (Манна-Уитни и Краскела-Уоллиса) [12].
При сравнении частот качественных признаков использовался критерий с2 Пирсона [13]. Соответствие распределения частот генотипов равновесию Харди-Вайнберга проводили в Haploview 4.2 [14]. Логистическая регрессия использовалась для выявления ассоциации полиморфных локусов с учетом количественных (стаж работы) и бинарных признаков (наличие профессиональной вредности, индекс массы тела до 25 и более 25), вводимых в уравнение регрессии в качестве независимых переменных. Расчеты проводились в программе SNPStats (http:// bioinfo.iconcologia.net/).
Результаты и обсуждение
Показано отсутствие равновесия Харди-Вайнберга полиморфных локусов как для выборок больных, так и для контроля за исключением локуса -163C>A гена CYP1A2 у женщин с УЗ.
Анализ ассоциации изученных локусов с развитием тиреоидной патологии. Сравнение частот аллелей и генотипов выявило ассоциацию генотипа DD локуса -2467delT гена CYP1A2 с риском развития АИТ (показатель OR составил 4,5 (1,39-14,5; p =
0,009)) и аллеля D (OR = 1,8 (1,17-2,71; p = 0,008)).
Ассоциация с развитием АИТ была показана для генотипа GG локуса 274A>G гена DIO2 OR = 2,9 (1,41-5,96; p = 0,011) и аллеля G OR = 1,6 (1,12-2,35; p = 0,013). Характеристика частот приведена в табл. 2.
Методом логистического регрессионного анализа была установлена ассоциация с риском развития АИТ в аддитивной модели OR = 1,59 (1,08-2,23; p = 0,016) для полиморфного локуса 274A>G гена DIO2 и локуса -2467delT гена CYP1A2 OR=1,83 (1,20-2,77; p = 0,0042).
Анализ частоты генотипов и аллелей генов цитохрома Р450 у женщин установил ассоциацию генотипов ТС и СС полиморфного локуса -3798T>C гена CYP1A1 с риском развития УЗ OR = 1,8 (1,02-3,1; p = 0,037) и аллеля С OR = 1,8 (1,12-3,09; p = 0,025) (см. табл. 2). Логистический регрессионный анализ также определил ассоциацию локуса -3798T>C гена CYP1A1 с развитием УЗ у женщин. Данные представлены для аддитивной модели OR = 1,79 (1,05-3,04; p = 0,028).
Сравнение частоты аллелей и генотипов женщин с УЗ с группой здоровых показало, что из трех изученных локусов генов метаболизма тиреоидных гормонов только для гена DIO2 (274A>G) показана связь с риском
Таблица 2
Распределение генотипов и аллелей полиморфных локусов генов TPO, DIO2, CYP1A1 и CYP1A2 у женщин с Аит и Уз
Ген, локус Генотип, аллель АИТ (n = 100) УЗ (n = 160) Здоровые (n = 150) Л р2
CYP1A1 AA 95 95,00 148 92,50 142 94,67 0,86 0,53
2454A>G rs1048943 AG 5 5,00 11 6,88 8 5,33
GG 0 1 0,63 0
A 195 97,50 307 95,94 292 97,33 0,86 0,46
G 5 2,50 13 4,06 8 2,67
CYP1A1 TT 82 82,00 118 73,75 125 83,33 0,91 0,037
-3798T>C rs4646903 TC 18 18,00 38 23,75 25 16,67
CC 0 4 2,50 0
T 182 91,00 274 85,63 275 91,67 0,92 0,025
C 18 9,00 46 14,38 25 8,33
CYP1A2 - AA 55 55,00 79 49,38 70 46,67 0,34 0,074
163C>A rs762551 AC 36 36,00 57 35,63 68 45,33
CC 9 9,00 24 15,00 12 8,00
A 146 73,00 215 67,19 208 69,33 0,43 0,62
C 54 27,00 105 32,81 92 30,67
CYP1A2 T TT 51 51,00 87 54,38 96 64,00 0,01 0,18
-2467delT rs35694136 TD 38 38,00 65 40,63 50 33,33
DD 11 11,00 8 5,00 4 2,67
T 140 70,00 239 74,69 242 80,67 0,008 0,091
D 60 30,00 81 25,31 58 19,33
ТРО AA 38 38,00 70 43,75 64 42,67 0,75 0,92
2173A>C rs732609 AC 49 49,00 72 45,00 67 44,67
CC 13 13,00 18 11,25 19 12,67
A 125 62,50 212 66,25 195 65,00 0,63 0,808
C 75 37,50 108 33,75 105 35,00
ТРО GG 45 45,00 82 51,25 66 44,00 0,83 0,403
769G>T rs4927611 GT 43 43,00 62 38,75 69 46,00
TT 12 12,00 16 10,00 15 10,00
G 133 66,50 226 70,63 201 67,00 0,16 0,37
T 67 33,50 94 29,38 99 33,00
DIO2 TT 37 37,00 59 36,88 69 46,00 0,011 0,009
274A>G rs225014 TC 40 40,00 66 41,25 67 44,67
CC 23 23,00 35 21,88 14 9,33
T 114 57,00 184 57,50 205 68,33 0,013 0,023
C 86 43,00 136 42,50 95 31,67
развития заболевания. Ассоциация была выявлена для генотипа GG гена DIO2 OR=2,7 (1,39-5,29; p = 0,009) и для аллеля G OR = 1,6 (1,14-2,21; p = 0,023). Логистический регрессионный анализ показал ассоциацию этого локуса с развитием УЗ в аддитивной модели OR = 1,55 (1,12-2,13; p = 0,0071).
Анализ зависимости патогенетически значимых количественных показателей от полиморфных вариантов изученных генов. Установлено, что содержание антител к тиреоидной пероксидазе (АТ-ТПО) у работниц основной и контрольной групп составило соответственно 215 ± 32 и 127 ± 32 МЕ/мл, p < 0,05. Анализ среднего уровня содер-
54
Т аблица 3
Зависимость уровня гормонов от генотипов полиморфных локусов генов DIO2 и ТРО у женщин
Показатель Гены/генотипы, Ме (25%; 75%)
DIO2 (274A>G)
AA AG GG p
ТТГ (0,23-3,4), мкМЕ/мл 1,37 (0,9-2,60) 1,96 (0,96-2,20) 1,10 (0,90-1,70) 0,630
Св.Т4 (8-23), пмоль/л 13,0 (11,42-17,40) 14,60 (12,30-17,0) 13,70 (12,20-16,2) 0,630
АТ к ТПО, МЕ/мл (до 30) 0 (0-20,00) 0 (0-109,0) 74,4 (0-420,0) 0,005
ТРО (769G>T)
GG GT TT
ТТГ (0,23-3,4), мкМЕ/мл 1,31 (0,90-2,25) 1,40 (0,90-2,30) 1,42 (0,69-3,16) 0,983
Св.Т4 (8-23), пмоль/л 14,0 (12,10-17,0) 13,9 (12,20-16,30) 15,05 (13,0-18,0) 0,237
АТ к ТПО, МЕ/мл (до 30) 0 (0-379,0) 0 (0-278,0) 0 (0-354,0) 0,640
ТРО (2173A>C)
АА АС СС
ТТГ (0,23-3,4), мкМЕ/мл 1,21 (0,80-1,90) 1,30 (0,80-2,30) 1,56 (1,00-2,39) 0,389
Св.Т4 (8-23), пмоль/л 13,30 (11,8-15,00) 15,00 (12,60-18,00) 15,10 (13,00-19,00) 0,089
АТ к ТПО, Е/мл (до 30) 0 (0-226) 38 (0-354,0) 115,5 (11,5-564,0) 0,103
Примечание. ТТГ - тиреотропный гормон; св.Т4 - свободный Т4; АТ к ТРО - антитела к тиреоидной пероксидазе.
жания аутоантител в сыворотке крови показал проявление аутоиммунного процесса в щитовидной железе у женщин-работниц, имеющих контакт с токсичными веществами, по сравнению с женщинами контрольной группы.
Установлена ассоциация генотипа GG полиморфного локуса 274A>G гена DIO2 с повышенным уровнем антител к ТРО (табл. 3). Различий в распределении ге-
нотипов гена DIO2 в зависимости от уровня гормонов ТТГ и св.Т4 показано не было. Выявлена тенденция к увеличению уровня св.Т4 у носителей генотипов АС и СС полиморфного локуса 2173A>C гена ТРО. Для подтверждения ассоциации аллеля С с изменением метаболизма тиреоидных гормонов мы объединили всех носителей аллеля С в одну группу. Установлена ассоциация генотипов АС и СС с повышенным уровнем св.Т4 (р = 0,027), медиана для гомозигот АА составила 13.00 пмоль/л (11,0-15,00), для объединенных гомозигот СС и гетерозигот АС медиана св.Т4 составила 15,00 пмоль/л (12,55-18,00). Была показана ассоциация генотипов АС и СС с повышенным уровнем антител к ТРО (р = 0,029), медиана для гомозигот АА составила 30 МЕ/мл (0,00-224) и для генотипов АС и СС -
74,40 МЕ/мл (0,00-500).
Анализ частот аллелей и генотипов полиморфных локусов 2454A>G, -3798T>C гена CYP1A1; -163C>A, -2467delT гена CYP1A2 в зависимости от уровня гормонов и антител статистически значимых ассоциаций не выявил.
Анализ ассоциации полиморфных локусов с учетом внешних факторов. Нами были изучены ген-средовые
Ассоциация полиморфных вариантов генов-кандидатов с развитием тиреоидной патологии
Таблица 4
Локус АИТ (n = 250) с учетом ИМТ, вредности и стажа АИТ (n = 250) с учетом ИМТ АИТ (n=250) с учетом профессиональной вредности АИТ (n = 250) с учетом стажа
P«i OR^ (CI95%) P.* OR.* (CI95%) ORi(1j (CI95%) padj OR.* (CI95%)
DIO2 274A>G 0,05 1,53 (2,03-2,55) 0,047 1,23 (1,1-3,11) 0,047 0,84 (0,39-1,06) 0,06 1,5 (1,01-3,07)
TPO 2173A>C 0,85 1,05 (0,63-1,74) 0,5 1,18 (0,73-1,92) 0,81 1,06 (0,65-1m72) 0,76 1,08 (0,67-1,75)
TPO 769G>T 0,38 0,80 (0,48-1,32) 0,46 0,83 (0,51-1,36) 0,35 0,79 (0,48-1,29) 0,38 0,80 (0,49-1,31)
CYP1A1 2454A>G 0,34 0,31 (0,07-1,66) 0,087 0,30 (0,06-1,40) 0,12 0,32 (0,07-1,54) 0,1 0,31 (0,06-1,47)
CYP1A1 - Т3801С 0,66 1,22 (0,51-2,93) 0,76 1,14 (0,49-2,66) 0,77 1,14 (0,48-2,68) 0,72 1,17 (0,50-2,76)
CYP1A2 -163C>A 0,33 0,77 (0,45-1,31) 0,35 0,78 (0,47-1,31) 0,48 0,83 (0,49-1,39) 0,35 0,78 (0,47-1,31)
CYP1A2 T -2467delT 0,11 1,58 (0,89-2,79) 0,08 1,61 (0,93-2,80) 0,04 1,66 (1,05-2,91) 0,12 1,56 (0,89-2,72)
УЗ (n = 310) с учетом ИМТ, вредности и стажа УЗ (n = 310)с учетом ИМТ УЗ (n = 310) с учетом профессиональной вредности УЗ (n = 310) с учетом стажа
DIO2 274A>G 0,031 1,55 (1,04-2,33) 0,045 1,51 (1,01-2,27) 0,024 1,58 (1,06-2,36) 0,022 1,58 (1,06-2,34)
ТРО 2173A>C 0,65 0,91 (0,60-1,38) 0,91 0,98 (0,66-1,45) 0,77 0,94 (0,62-1,42) 0,81 0,95 (0,63-1,44)
ТРО 769G>T 0,54 0,88 (0,57-1,34) 0,49 0,87 (0,58-1,30) 0,42 0,84 (0,55-1,28) 0,51 0,87 (0,57-1,31)
CYP1A1 2454A>G 0,048 2,96 (1,00-8,74) 0,36 1,60 (0,58-4,38) 0,79 0,88 (0,35-2,21) 0,36 1,62 (0,56-4,69)
CYP1A1 - Т3801С 0,025 2,13 (1,07-4,22) 0,021 2,03 (1,09-3,78) 0,032 2,00 (1,04-3,83) 0,048 1,87 (0,99-3,54)
CYP1A2 -163C>A 0,92 0,98 (0,65-1,48) 0,88 1,03 (0,70-1,53) 0,61 1,11 (0,74-1,68) 0,58 1,12 (0,75-1,68)
CYP1A2 T -2467delT 0,068 1,58 (0.96-2,61) 0,041 1,62 (1,02-2,60) 0,14 1,46 (0,88-2,43) 0,14 1,45 (0,88-2,38)
Примечание. Здесь и в тексте: P.* - значимость для теста отношения правдоподобия лог-регрессионной модели с учетом соответствующих поправок. OR.*. - отношение шансов с учетом соответствующих факторов. В таблице представлена аддитивная модель на дозу редкого аллеля. n - количество индивидов (больные - здоровые), включенных в анализ ассоциации.
55
[гиена и санитария 3/2014
взаимодействия профессиональной вредности, стажа работы и ИМТ с полиморфными вариантами генов-кандидатов при развитии тиреоидной патологии (табл. 4). Полиморфный локус -2467delT гена CYP1A2 определен как маркер развития АИТ только при действии профессионального фактора P = 0,041, OR = 1,62 (1,62, 1,02-2,60). aJ aJ
Ассоциации, выявленные при анализе полиморфных локусов 274A>G гена DIO2 и гена CYP1A1 у больных УЗ после коррекции на ИМТ, наличие профессиональной вредности, длительного стажа работы, сохраняются на уровне статистической значимости (см. табл. 3). Определена ассоциация с развитием УЗ для локуса -2467delT гена CYP1A2 с учетом поправки на ИМТ.
Главной функцией фермента дейодиназы II типа (DIO2) является метаболизм тиреоидных гормонов. Полиморфизм 274A>G гена DIO2 приводит к замене аминокислоты Thr на Ala в 92-м положении белковой молекулы. Данная замена имеет функциональное значение и обусловливает изменение активности фермента DIO2 [15]. Показано, что активность DIO2 в образцах ткани щитовидной железы была значительно ниже у носителей аллеля G [15]. Ранее описана ассоциация генотипа GG с формированием базедовой болезни [16], что соотносится с результатами, полученными в нашем исследовании. В исследованиях [17-19] определена ассоциация полиморфного локуса rs732608 гена ТРО с высоким уровнем антител к ТРО, что соответствует полученным нами результатам. Присутствие антител к ТРО также связывают с определенной генетической конституцией [19].
Исследование роли генов цитохрома Р450 в развитии заболеваний щитовидной железы ранее проводилось в единичных случаях, в этих исследованиях было показано, что курение в сочетании с редкими аллелями гена CYP1A1 способствует развитию диффузного токсического зоба [20]. Нами была установлена ассоциация полиморфных вариантов гена CYP1A1 (-3798T>C) с развитием УЗ и гена CYP1A2 (-2467delT) с формированием АИТ. Показана ассоциация полиморфных вариантов гена DIO2 с риском развития УЗ и АИТ у женщин и с изменением уровня антител к ТРО, определена ассоциация полиморфного локуса 2173A>C гена ТРО с повышенным уровнем св.Т4.
Работа получила частичную финансовую поддержку Российского фонда фундаментальных исследований №10-04-0161140-а.
Литература (пп. 3-11, 14-20 - см. References)
1. Дедов И. И., Мельниченко Г. А., Фадеев В. Ф. Эндокринология. М.; 2007.
2. Абрамова Н. А., Фадеев В. В., Герасимов Г. А., Мельниченко Г. А. Зобогенные вещества и факторы. Клиническая и экспериментальная тиреоидология. 2006; 1: 21-32.
12. Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: Медиа Сфера; 2000.
13. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика; 1999.
References
1. Dedov I. I., Mel’nichenko G. A., Fadeev V F. Endokrinologiya. М.; 2007.
2. Abramova N. A., Fadeev V V., Gerasimov G. A., Mel’nichenko G . A . Goitrogenic substances and factors. Klinicheskaya i eksperimental’naya tireoidologiya. 2006; 1: 21-32.
3. Bufalo N. E., Santos R. B., Cury A. N. et al. Genetic polymorphisms associated with cigarette smoking and the risk of Graves’ disease . Clin. Endocrinol. 2008; 68(6): 982-7.
4. Hansen P. S., Brix T.H., Iachine I. et al. Genetic and environmental interrelations between measurements of thyroid function in a healthy Danish twin population . Am. J. Phys. Endocr. Metab. 2007; 292(3): 765-70.
5 . Czarnocka B . Thyroid peroxidase - enzyme and antigen . Thyroid Int. 2006; 3: 3-13.
6. Ye S., Dhillon S., Ke X., Collins A. R., Day I.N. An efficient procedure for genotyping single nucleotide polymorphisms . Nucl. Acids Res. 2001; 29(17): E88-8.
7 . Oyama T. , Mitsudomi T. , Kawamoto T. , Ogami A . , Osaki T. , Ko-dama Y., Yasumoto K. Detection of CYP1A1 gene polymorphism using designed RFLP and distributions of CYP1A1 genotypes in Japanese. Int. Arch. Occup. Environ Health. 1995; 67(4): 253-6.
8. Krajinovic M., Labuda D., Richer C. et al. Susceptibility to childhood acute lymphoblastic leukemia: influence of CYP1A1, CYP2D6, GSTM1, and GSTT1 genetic polymorphisms. Blood. 1999; 93(5): 1496-501.
9. Pavanello S., Pulliero A., Lupi S. et al. Influence of the genetic polymorphism in the 5’-noncoding region of the CYP1A2 gene on CYP1A2 phenotype and urinary mutagenicity in smokers. Mutat. Res. 2005; 587(1-2): 59-66.
10. Sachse C., Bhambra U., Smith G. et al. Polymorphisms in the cytochrome P450 CYP1A2 gene in colorectal cancer patients and controls: allele frequencies, linkage disequilibrium and influence on caffeine metabolism Br. J. Clin. Pharmacol. 2003; 55(1): 68-76.
11. He B., Li J., Wang G., Ju W., Lu Y, Shi Y et al. Association of genetic polymorphisms in the type II deiodinase gene with bipolar disorder in a subset of Chinese population. Prog. Neuropsy-chopharmacol . Biol. Psychiatry. 2009; 33(6): 986-90.
12. Rebrova O. Yu. Statistical analysis of medical data. Application software package STATISTICA. М.: Media Sfera; 2000. (in Russian)
13. Glants S. Biomedical statistics. М.: Praktika; 1999. (in Russian)
14. Barrett J. C., Fry B., Maller J., Daly M. J. Haploview: analysis and visualization of LD and haplotype maps. Bioinformatics. 2005; 21(2): 263-5.
15. Butler P. W., Smith S. M., Linderman J. D. et al. The Thr92Ala 5’ type 2 deiodinase gene polymorphism is associated with a delayed triiodothyronine secretion in response to the thyrotropinreleasing hormone-stimulation test: a pharmacogenomic study. Thyroid. 2010; 20(12): 1407-12.
16. Chistiakov D., Savostanov K., Turakulov R. Screening of SNPs at 18 positional candidate genes, located within the GD-1 locus on chromosome 14q23-q32, for susceptibility to Graves’ disease: a TDT study. Mol. Genet. Metab. 2004; 83(3): 264-70.
17. Hedayati M., Jahromi M., Hoghoughi L. et al. Association of polymorphisms G1193/C exon 8 and C2145/T exon 12 with An-ti-TPO titer in Iranian population J. Endocrinol. Metab. 2010; 8(2): 64-7.
18. Faam B., Daneshpour M. S., Azizi F. et al. Association between TPO gene polymorphisms and Anti-TPO level in Tehranian population: TLGS. Gene. 2012; 498(1): 116-9.
19. Gutierrez-Achury J., Balthazar-Gonzalez V, Bedoya-Bemo G. et al Association of the TPO gene in Colombian families with type 1 diabetes. Iatreia. 2009 ; 22(4): 323-9.
20. Bufalo N. E., Leite J. L., Guilhen A. C. et al. Smoking and susceptibility to thyroid cancer: an inverse association with CYP1A1 allelic variants. Endocr. Rel. Cancer. 2006; 4: 1185-93.
Поступила 15.02.13 Received 15.02.13
56
